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猪旋毛虫病快速检测试纸条的研制及特性测定 被引量:13
1
作者 李学伍 张改平 +3 位作者 邓瑞广 肖治军 杨艳艳 李青梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期343-346,共4页
以旋毛虫重组分泌(excretingsecretion,ES)抗原为基础,采用免疫金技术成功研制出旋毛虫病快速检测试纸条,试验结果显示试纸条与猪肺线虫、猪囊尾蚴、猪细颈囊尾蚴、猪米氏住肉孢子虫、猪蛔虫无交叉反应。证明旋毛虫病试纸条具有良好的... 以旋毛虫重组分泌(excretingsecretion,ES)抗原为基础,采用免疫金技术成功研制出旋毛虫病快速检测试纸条,试验结果显示试纸条与猪肺线虫、猪囊尾蚴、猪细颈囊尾蚴、猪米氏住肉孢子虫、猪蛔虫无交叉反应。证明旋毛虫病试纸条具有良好的特异性和敏感性,其敏感性与ELISA相当,与ELISA及消化法的检测结果符合率为100%。5min内肉眼观察获得结果,具有特异、敏感、快速、简单等特点,不需要任何专业技能和其他试剂。本方法的建立对猪旋毛虫病诊断和流行病学调查具有很大的应用价值。 展开更多
关键词 旋毛虫病 快速检测试纸条 研制 免疫金技术 特异性 敏感性 诊断 流行病学调查
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仔猪大肠杆菌病流行菌株的分离与鉴定 被引量:21
2
作者 李学伍 张改平 +5 位作者 邓瑞广 杨艳艳 阎玉河 郭军庆 王爱萍 李青梅 《河南农业科学》 CSCD 2000年第8期28-30,共3页
关键词 仔猪大肠 流行病学 病株 分离 鉴定
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仔猪大肠杆菌病多价卵黄抗体粉的特性及应用 被引量:31
3
作者 李学伍 张改平 +1 位作者 阎玉河 邓瑞广 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2000年第10期56-57,共2页
关键词 仔猪大肠杆菌病 多价卵黄抗体粉 仔猪腹泻
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仔猪大肠杆菌病流行株抗性质粒的研究 被引量:7
4
作者 李学伍 杨艳艳 +5 位作者 阎玉河 张改平 邓瑞广 郭军庆 王爱萍 李青梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第2期100-102,共3页
对分离的27株猪源性大肠杆菌进行抗性试验,选取10株双抗性菌株提取质粒DNA,电泳分析表明各菌株均存在2~4条质粒DNA带。将21.227kb和5.148kb质粒转化大肠杆菌MC1061/P3,使其获得了相应菌株的抗... 对分离的27株猪源性大肠杆菌进行抗性试验,选取10株双抗性菌株提取质粒DNA,电泳分析表明各菌株均存在2~4条质粒DNA带。将21.227kb和5.148kb质粒转化大肠杆菌MC1061/P3,使其获得了相应菌株的抗性,转化菌纤毛蛋白与K88、K99高免血清琼扩试验为阴性,证明21.227kb和5.148kb质粒未携带K88、K99基因。用21.227kb转化菌注射小鼠,则小鼠死亡,说明21.227kb携带毒力基因。 展开更多
关键词 肠毒性大肠杆菌 抗生质粒 仔猪
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ETEC多价定居因子对仔猪大肠杆菌病的预防试验 被引量:4
5
作者 李学伍 张改平 +4 位作者 阎玉河 邓瑞广 杨艳艳 王爱萍 李青梅 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期127-131,共5页
应用分子免疫学理论 ,将定居因子K88,K99,987P ,F4 1与其特异受体结合 ,封闭肠粘膜上皮细胞的受体 ,阻断致病菌的定居因子与肠粘膜上皮细胞特异受体的结合 ,使致病菌无法定居。试验结果显示 ,其仔猪攻毒保护率为 10 0 % ,预防试验保护率... 应用分子免疫学理论 ,将定居因子K88,K99,987P ,F4 1与其特异受体结合 ,封闭肠粘膜上皮细胞的受体 ,阻断致病菌的定居因子与肠粘膜上皮细胞特异受体的结合 ,使致病菌无法定居。试验结果显示 ,其仔猪攻毒保护率为 10 0 % ,预防试验保护率为 10 0 % ,可以有效控制仔猪大肠杆菌的发生 。 展开更多
关键词 仔猪 致病性大肠杆菌 定居因子 预防 攻毒保护率 多价
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鸡传染性法氏囊病疫苗毒株的生物学特性研究 被引量:4
6
作者 李学伍 肖治军 +5 位作者 张改平 邓瑞广 杨艳艳 赵东 柴书军 邢广旭 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2003年第1期40-42,共3页
关键词 变异 传染性法氏囊病 疫苗毒株 生物学特性
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双价工程菌K_(88)K_(99)表达蛋白提取方法的探讨及抗原性分析 被引量:4
7
作者 李学伍 闫玉河 +2 位作者 张改平 杨艳艳 郭军庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第2期140-142,共3页
本研究应用酸脱毛法 ,将供试工程菌培养物进行脱毛、提取制备表达蛋白 ,并对酸脱毛法的最适pH值、最佳温度、最佳时间进行了探讨 ,SDS_PAGE分析结果证明 ,酸脱毛法脱毛pH值为 2、脱毛温度为 6 0℃、脱毛时间为 30分钟时 ,表达蛋白分离... 本研究应用酸脱毛法 ,将供试工程菌培养物进行脱毛、提取制备表达蛋白 ,并对酸脱毛法的最适pH值、最佳温度、最佳时间进行了探讨 ,SDS_PAGE分析结果证明 ,酸脱毛法脱毛pH值为 2、脱毛温度为 6 0℃、脱毛时间为 30分钟时 ,表达蛋白分离提取的效果最佳。对提取蛋白进行琼扩 ,SDS_PAGE、Western_blot分析 ,结果表明所提取蛋白具有较高的抗原活性 ,并能被K88K99单克隆抗体所识别。 展开更多
关键词 K88K99纤毛蛋白 酸脱毛法 抗原性 ETEC
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PCR法对伪狂犬病病猪不同部位的检测及敏感性试验 被引量:17
8
作者 李学伍 陈焕春 +4 位作者 杨艳艳 周复春 方六荣 吴斌 怀济森 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第6期365-368,共4页
应用PCR方法对PRV感染细胞及自然发病猪不同组织样品进行检测,感染细胞毒最低检出量为105个TCID50病料组织样品最低取样为01mg时,仍能得到阳性结果其敏感性显著高于微量血清中和试验。PRV在自然发病猪体内... 应用PCR方法对PRV感染细胞及自然发病猪不同组织样品进行检测,感染细胞毒最低检出量为105个TCID50病料组织样品最低取样为01mg时,仍能得到阳性结果其敏感性显著高于微量血清中和试验。PRV在自然发病猪体内分布很广,脑、三叉神经节(三叉N节)、嗅球、扁桃体、心脏、肝、脾、肺、肾均有PRV的存在,PRV检出率最高的组织为三叉神经节,其检出率为100%。其它对照病毒及传代细胞PCR反应产物电泳结果均为阴性。 展开更多
关键词 多聚酶链反应 检测 伪狂犬病毒
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鸡3种主要DNA病毒多重感染复合PCR检测方法的建立 被引量:2
9
作者 李学伍 刘媛 +4 位作者 王丽 邓瑞广 赵东 杨继飞 柴书军 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第7期101-105,共5页
依据Gen Bank中注册的鸡马立克氏病病毒(MDV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡痘病毒(FPV)基因组核苷酸序列中的保守序列设计引物,3种病毒各设计3对引物,共计9对引物,经生物学软件筛选后,得到3对相互匹配较佳的引物。3对匹配引物经单一... 依据Gen Bank中注册的鸡马立克氏病病毒(MDV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡痘病毒(FPV)基因组核苷酸序列中的保守序列设计引物,3种病毒各设计3对引物,共计9对引物,经生物学软件筛选后,得到3对相互匹配较佳的引物。3对匹配引物经单一PCR验证后,优化复合PCR反应条件,确定最佳的退火温度、引物浓度和Taq DNA聚合酶浓度;经特异性、敏感性试验及简化PCR试验,建立简易复合PCR检测方法。复合PCR扩增出的3条带大小与预期一致,即228 bp(MDV)、400 bp(ILTV)、499 bp(FPV);建立的复合PCR方法能同时检测出100 fg MDV、ILTV、FPV的DNA。同时依据PCR技术原理,将经典的三温热循环改进为二温热循环试验,即将退火和延伸合并为一步(62℃),缩短了反应时间。建立的3种病毒的复合PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,可以用于临床病料的快速诊断。 展开更多
关键词 马立克氏病病毒 传染性喉气管炎病毒 鸡痘病毒 DNA病毒 复合PCR
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IBD试纸条对中强毒力苗毒及分离野毒的检测研究 被引量:2
10
作者 李学伍 张改平 +4 位作者 肖治军 杨艳艳 赵东 邓瑞广 康晓笛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期298-301,共4页
以琼扩为对照 ,应用IBD试纸条分别检测了人工感染鸡、疫苗接种鸡、自然发病鸡 3种不同类型的法氏囊样品以及不同的疫苗。毒株测定结果显示 ,IBD苗毒 2 2 8E、MB、V877、NF8、QC试纸条均为阳性 ,琼扩对照均为阴性 ,分离强毒H4、He3 、Y2... 以琼扩为对照 ,应用IBD试纸条分别检测了人工感染鸡、疫苗接种鸡、自然发病鸡 3种不同类型的法氏囊样品以及不同的疫苗。毒株测定结果显示 ,IBD苗毒 2 2 8E、MB、V877、NF8、QC试纸条均为阳性 ,琼扩对照均为阴性 ,分离强毒H4、He3 、Y2 试纸条及琼扩对照均为阳性。法氏囊样品测定结果显示 ,自然感染病例 ,H4、He3 、Y2 感染鸡 ,2 2 8E、MB、V877、NF8接种鸡两种方法测定均为阳性 ,QC则为阴性。对法氏囊样品的检测结果证明 ,IBD试纸条具有特异、敏感、快速的特点 ,其敏感性高于琼扩的敏感性 ,为IBD诊断提供了新方法。 展开更多
关键词 试纸条 传染性法氏囊病 检测
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猪伪狂犬病的免疫学研究进展 被引量:3
11
作者 李学伍 张改平 闫慎飞 《河南农业科学》 CSCD 1999年第2期33-35,共3页
近年来,我国猪伪狂犬病的发病率逐步升高,某些省、市的发病猪场1~7日龄仔猪整窝发病、整窝死亡,同时导致妊娠母猪流产、死胎、木乃伊,种公猪不育,肥育猪生长受阻。到目前为止,我国已有20多个省市报道发生猪伪狂犬病,给养猪... 近年来,我国猪伪狂犬病的发病率逐步升高,某些省、市的发病猪场1~7日龄仔猪整窝发病、整窝死亡,同时导致妊娠母猪流产、死胎、木乃伊,种公猪不育,肥育猪生长受阻。到目前为止,我国已有20多个省市报道发生猪伪狂犬病,给养猪业带来了严重的经济损失。猪伪狂犬病... 展开更多
关键词 伪狂犬病 免疫学 弱毒疫苗 灭活苗 基因疫苗
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猪瘟病毒生物学特性研究概述 被引量:8
12
作者 李学伍 张改平 郭启祥 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第10期11-15,共5页
阐述了猪瘟病毒与机体免疫系统的相互作用、在哺乳动物细胞中的增殖特点、与毒力相关基因的预测。概括了世界猪瘟病毒的基因分型、不同基因型毒株的分布情况和流行病学,分析了病毒的遗传变异特点与疫苗免疫前景,讨论了消灭猪瘟要面临的... 阐述了猪瘟病毒与机体免疫系统的相互作用、在哺乳动物细胞中的增殖特点、与毒力相关基因的预测。概括了世界猪瘟病毒的基因分型、不同基因型毒株的分布情况和流行病学,分析了病毒的遗传变异特点与疫苗免疫前景,讨论了消灭猪瘟要面临的问题。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 生物学特性 流行病学
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仔猪伪狂犬病链球菌病混合感染的诊断与防制 被引量:2
13
作者 李学伍 郭成留 +2 位作者 邓瑞广 王自振 陈丽颖 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第10期22-23,共2页
1996年9月,我省某地养猪场经产母猪发生死胎、木乃伊、黑胎现象,怀疑为猪细小病毒、乙型脑炎,并加强了对上述疾病的防疫工作。1997年10月该猪场7~15日龄新生仔猪,几乎整窝发病、整窝死亡,发病率和死亡率均很高,在... 1996年9月,我省某地养猪场经产母猪发生死胎、木乃伊、黑胎现象,怀疑为猪细小病毒、乙型脑炎,并加强了对上述疾病的防疫工作。1997年10月该猪场7~15日龄新生仔猪,几乎整窝发病、整窝死亡,发病率和死亡率均很高,在短短1个月内死亡仔猪达176头,断... 展开更多
关键词 猪病 伪狂犬病 链球菌病 混合感染
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新生仔猪伪狂犬病的诊断与防制 被引量:6
14
作者 李学伍 陈焕春 +4 位作者 杨艳艳 方六荣 吴斌 周复春 索绪峰 《中国兽医科技》 CSCD 1997年第4期34-35,共2页
新生仔猪伪狂犬病的诊断与防制李学伍陈焕春1)杨艳艳方六荣1)吴斌1)周复春1)索绪峰1)(河南省农业科学院畜牧兽医研究所郑州450002)1995年3~7月,湖北省某地养猪场的50窝仔猪共511头,整窝发病、死亡,发... 新生仔猪伪狂犬病的诊断与防制李学伍陈焕春1)杨艳艳方六荣1)吴斌1)周复春1)索绪峰1)(河南省农业科学院畜牧兽医研究所郑州450002)1995年3~7月,湖北省某地养猪场的50窝仔猪共511头,整窝发病、死亡,发病率和死亡率均为100%,而产仔母... 展开更多
关键词 仔猪 伪狂犬病 诊断 防治 猪病
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地高辛标记DNA探针检测伪狂犬病的研究 被引量:3
15
作者 李学伍 陈焕春 +2 位作者 周复春 方六荣 吴斌 《中国畜禽传染病》 CSCD 1997年第3期18-20,共3页
利用伪狂犬病病毒特异性扩增产物制成地高辛标记的探针,对闽A株,鄂A株,Bartna株,英国株及临床病料进行检测,其结果与PCR检测结果相符,准确率为100%,灵敏度达到2pgDNA,试验认为该探针具有灵敏、特异。
关键词 地高辛 DNA 伪狂犬病
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K_(88).K_(99)工程菌不同佐剂苗对鸡免疫效果的比较 被引量:1
16
作者 李学伍 杨艳艳 +7 位作者 郭成留 闫玉河 邓瑞广 张改平 郭军庆 李青梅 陈直 袁慧君 《河南农业科学》 CSCD 1997年第11期35-37,共3页
采用白油佐剂、弗氏不完全佐剂、氢氧化铝佐剂,分别同抗原(K88K99工程菌)混合、乳化,制成不同的佐剂苗。以PBS(pH7.2、0.01mol/l)悬浮的细菌培养物为对照,分别对产蛋鸡进行免疫,用琼扩及ELISA检... 采用白油佐剂、弗氏不完全佐剂、氢氧化铝佐剂,分别同抗原(K88K99工程菌)混合、乳化,制成不同的佐剂苗。以PBS(pH7.2、0.01mol/l)悬浮的细菌培养物为对照,分别对产蛋鸡进行免疫,用琼扩及ELISA检测卵黄抗体。结果表明,白油苗能够诱导产生高效价(1∶128)卵黄抗体,而且稳定时间在30天内。 展开更多
关键词 佐剂 抗体 工程菌 免疫效果
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免疫微球凝集试验快速诊断“兔瘟”的研究 被引量:3
17
作者 李学伍 孙春青 郭成留 《中国畜禽传染病》 CSCD 1989年第2期16-17,共2页
采用羧化聚苯乙烯载体(微球)上的活性基因羧基(-COOH)与“兔瘟”抗体——免疫球蛋白的氨基(-NH_2),在水溶性碳化二亚胺(EDC)作用下共价偶联制成“兔瘟”抗体免疫微球。用此免疫微球对11份阳性和29份阴性病料检查结果表明:该法特异性强... 采用羧化聚苯乙烯载体(微球)上的活性基因羧基(-COOH)与“兔瘟”抗体——免疫球蛋白的氨基(-NH_2),在水溶性碳化二亚胺(EDC)作用下共价偶联制成“兔瘟”抗体免疫微球。用此免疫微球对11份阳性和29份阴性病料检查结果表明:该法特异性强、敏感性高、操作方便、确诊快速。血凝价在4log2以上时检出率达90.9%~100%。对“兔瘟”的诊断具有较好的效果。 展开更多
关键词 免疫 微球凝集 兔瘟 凝集 试验
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离子交换树脂法与酚仿法对质粒DNA提取效果的比较 被引量:1
18
作者 李学伍 杨艳艳 +7 位作者 阎玉河 张改平 李青梅 邓瑞广 郭成留 郭军庆 王爱萍 王均 《生物技术》 CAS CSCD 1999年第1期40-42,共3页
通过两种不同方法对质粒DNA提取效果的比较,证实了阴离子交换树脂法能够获得高纯度的质粒DNA,满足分子生物学的试验要求,操作简便、快速,不污染实验室的环境,是一种较理想的制备高纯度质粒DNA的提取方法。
关键词 质粒DNA 提取 高纯度 离子交换树脂法 酚仿法
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河南省猪伪狂犬病的流行动态及防制研究 被引量:1
19
作者 李学伍 阎玉河 +4 位作者 张改平 王自振 陈丽颖 杨艳艳 李春玲 《河南农业科学》 CSCD 2000年第2期34-36,共3页
对河南省19 个猪场发病仔猪的检测发现,许多被检仔猪存在PRV 感染,发病猪场占全省猪场的9 .6 % ,其PRV 阳性检出率平均为34 .5 % ,占被检发病仔猪的35 .8 % ,并呈快速上升趋势。对3 个PRV 污染猪场采取... 对河南省19 个猪场发病仔猪的检测发现,许多被检仔猪存在PRV 感染,发病猪场占全省猪场的9 .6 % ,其PRV 阳性检出率平均为34 .5 % ,占被检发病仔猪的35 .8 % ,并呈快速上升趋势。对3 个PRV 污染猪场采取了综合控制措施,取得了较好的效果,为养猪场控制此病提供了可靠的方法。 展开更多
关键词 仔猪 伪狂犬病 流行病学 诊断 症状 防制措施
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伪狂犬病毒血凝及血凝抑制试验 被引量:1
20
作者 李学伍 陈焕春 +2 位作者 吴斌 金梅林 方六荣 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期354-358,共5页
对两株伪狂犬病毒在4、28、37℃下进行血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)。试验结果表明,伪狂犬病毒能够凝集小白鼠红血球,HA可被抗伪狂犬病毒的高免血清特异性抑制(1:64)。并不受温度的影响。因此,该方法是诊断... 对两株伪狂犬病毒在4、28、37℃下进行血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)。试验结果表明,伪狂犬病毒能够凝集小白鼠红血球,HA可被抗伪狂犬病毒的高免血清特异性抑制(1:64)。并不受温度的影响。因此,该方法是诊断伪犬病的一种快速、简便、易于推广的方法。 展开更多
关键词 血凝试验 血凝抑制试验 伪狂犬病毒
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