目的:探讨二甲双胍是否通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)途径诱导乳腺癌细胞自噬,抑制肿瘤生长。方法:通过体外培养MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR-3三种乳腺癌细胞,给予它们不同浓度的二甲双胍作用24~72 h;...目的:探讨二甲双胍是否通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)途径诱导乳腺癌细胞自噬,抑制肿瘤生长。方法:通过体外培养MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR-3三种乳腺癌细胞,给予它们不同浓度的二甲双胍作用24~72 h;通过CCK8、TUNEL、自噬小体实验、电子显微镜、免疫荧光、蛋白印迹分析法等方法检测癌细胞自噬情况。结果:二甲双胍可以抑制MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR-3肿瘤细胞的增殖,并且随着二甲双胍的浓度逐渐升高、作用时间逐渐延长,其抑制癌细胞能力增强。二甲双胍可以促进MCF-7肿瘤细胞自噬小体的产生以及细胞的凋亡。MCF-7细胞在给予二甲双胍之后,相比较于对照组,p-AMPK表达增加,p-PI3K、p-AKT以及p-mTOR表达降低;MCF-7细胞在给予二甲双胍+AMPK抑制剂后,相比较于单纯二甲双胍组,p-AMPK表达降低,p-PI3K以及p-AKT表达不变,p-mTOR表达增加;MCF-7细胞在给予二甲双胍+PI3K激动剂后,相比较于单纯二甲双胍组,p-AMPK表达不变,p-PI3K和p-AKT表达增加,p-mTOR表达增加;MCF-7细胞在给予二甲双胍+AKT激动剂后,相比较于单纯二甲双胍组,p-AMPK和p-PI3K表达不变,p-AKT表达增加,p-mTOR表达增加。结论:二甲双胍可能通过激活AMPK/mTOR和抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,诱导MCF-7乳腺癌细胞自噬,发生凋亡,从而抑制癌细胞的增殖。展开更多
文摘目的:探讨二甲双胍是否通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)途径诱导乳腺癌细胞自噬,抑制肿瘤生长。方法:通过体外培养MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR-3三种乳腺癌细胞,给予它们不同浓度的二甲双胍作用24~72 h;通过CCK8、TUNEL、自噬小体实验、电子显微镜、免疫荧光、蛋白印迹分析法等方法检测癌细胞自噬情况。结果:二甲双胍可以抑制MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR-3肿瘤细胞的增殖,并且随着二甲双胍的浓度逐渐升高、作用时间逐渐延长,其抑制癌细胞能力增强。二甲双胍可以促进MCF-7肿瘤细胞自噬小体的产生以及细胞的凋亡。MCF-7细胞在给予二甲双胍之后,相比较于对照组,p-AMPK表达增加,p-PI3K、p-AKT以及p-mTOR表达降低;MCF-7细胞在给予二甲双胍+AMPK抑制剂后,相比较于单纯二甲双胍组,p-AMPK表达降低,p-PI3K以及p-AKT表达不变,p-mTOR表达增加;MCF-7细胞在给予二甲双胍+PI3K激动剂后,相比较于单纯二甲双胍组,p-AMPK表达不变,p-PI3K和p-AKT表达增加,p-mTOR表达增加;MCF-7细胞在给予二甲双胍+AKT激动剂后,相比较于单纯二甲双胍组,p-AMPK和p-PI3K表达不变,p-AKT表达增加,p-mTOR表达增加。结论:二甲双胍可能通过激活AMPK/mTOR和抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,诱导MCF-7乳腺癌细胞自噬,发生凋亡,从而抑制癌细胞的增殖。
