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日本沼虾核糖体蛋白S3a基因cDNA的克隆、表达及其在卵巢发育中的功能初探 被引量:1
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作者 李屹铮 张帅帅 +7 位作者 刘雪巍 张冉 林鑫辉 张猛 王磊 于淼 乔志刚 江红霞 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2023年第1期57-68,共12页
为了探究日本沼虾(Macrobrachium nipponense)核糖体蛋白S3a(MnRPS3a)在其卵巢发育中的功能,利用cDNA末端快速扩增(RACE)-PCR技术获得了MnRPS3a基因的全长cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫荧光(IF)技术分别进行了该基因... 为了探究日本沼虾(Macrobrachium nipponense)核糖体蛋白S3a(MnRPS3a)在其卵巢发育中的功能,利用cDNA末端快速扩增(RACE)-PCR技术获得了MnRPS3a基因的全长cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫荧光(IF)技术分别进行了该基因的表达模式和蛋白定位分析。结果显示,MnRPS3a基因cDNA全长902 bp,共编码266个氨基酸;MnRPS3a与墨吉对虾(Fenneropenaeus merguiensis)RPS3a氨基酸序列相似性最高,进化上的亲缘关系也最近;在不同组织中,MnRPS3a基因在肌肉中的表达量最高;在不同发育阶段卵巢中,MnRPS3a基因在Ⅰ期卵巢中的表达量最高;注射5-羟色胺(5-HT)能诱导日本沼虾卵巢MnRPS3a和卵黄蛋白原(Vg)基因表达升高,而注射多巴胺(DA)则抑制这2个基因表达。MnRPS3a蛋白主要定位于日本沼虾Ⅰ期和Ⅱ期卵巢的滤泡细胞、Ⅲ期和Ⅳ期卵巢卵母细胞的细胞质中。结果表明MnRPS3a可能在日本沼虾卵巢发育调控中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 日本沼虾(Macrobrachium nipponense) 核糖体蛋白S3a 基因表达 蛋白定位 卵巢发育
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克氏原螯虾前列腺素E_(2)受体EP4基因的序列特征及表达分析
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作者 江红霞 张冉 +7 位作者 李屹铮 刘雪巍 张帅帅 于淼 王磊 张猛 乔志刚 李学军 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期585-593,共9页
前列腺素E_(2)(PGE_(2))受体EP4在动物体的卵巢发育、排卵和生殖调控方面具有重要的作用。利用转录组测序的方法从克氏原螯虾卵巢中获得了PGE_(2)受体EP4(PcEP4)基因的具有完整开放阅读框的cDNA序列。为阐明该基因的序列特征及其在克氏... 前列腺素E_(2)(PGE_(2))受体EP4在动物体的卵巢发育、排卵和生殖调控方面具有重要的作用。利用转录组测序的方法从克氏原螯虾卵巢中获得了PGE_(2)受体EP4(PcEP4)基因的具有完整开放阅读框的cDNA序列。为阐明该基因的序列特征及其在克氏原螯虾卵巢中的作用,对该基因的序列进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR方法对该基因的表达模式进行检测。生物信息学分析结果显示:PcEP4基因开放阅读框长2505 bp,编码835个氨基酸;PcEP4是一个典型的具有7个跨膜α-螺旋结构的G蛋白偶联受体蛋白;克氏原螯虾EP4氨基酸序列与凡纳滨对虾的相似性最高,亲缘关系最近。基因表达结果显示:PcEP4基因表达量在克氏原螯虾成熟卵巢中的表达量最高;在Ⅰ~Ⅵ期的卵巢中,PcEP4基因在Ⅴ期卵巢中的表达量最高;PGE_(2)注射后36、48、60 h,克氏原螯虾卵巢中PcEP4基因表达量与对照组相比显著升高(P<0.05),注射72 h后克氏原螯虾的抱卵率与对照组相比也升高。试验结果表明,EP4作为PGE_(2)的受体与PGE_(2)一起在克氏原螯虾的卵巢中具有促进卵子成熟和排卵的重要作用。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 前列腺素E_(2)受体 EP4 基因表达 卵巢
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克氏原螯虾核糖体蛋白S24(RPS24)基因的克隆与表达分析 被引量:1
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作者 江红霞 李屹铮 +5 位作者 张冉 王磊 张猛 于淼 乔志刚 李学军 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2021年第6期97-105,共9页
为了阐明克氏原螯虾(Proambaus clarkii)核糖体蛋白S24(ribosomal protein S24,RPS24)基因序列特征及其在卵巢发育中的作用,本研究利用RACE方法克隆获得了克氏原螯虾RPS24(PcRPS24)基因全长cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR(QPCR)方法对... 为了阐明克氏原螯虾(Proambaus clarkii)核糖体蛋白S24(ribosomal protein S24,RPS24)基因序列特征及其在卵巢发育中的作用,本研究利用RACE方法克隆获得了克氏原螯虾RPS24(PcRPS24)基因全长cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR(QPCR)方法对该基因的表达模式进行了分析。结果显示:PcRPS24 cDNA序列全长438 bp,编码136个氨基酸,并具有11个磷酸化位点和1个RPS24e标志序列;克氏原螯虾与八棘多刺鱼的RPS24氨基酸序列相似性最高,与昆虫纲动物在进化上的亲缘关系最近;PcRPS24基因表达量在克氏原螯虾发育过程中逐渐升高,在卵巢发育至Ⅰ期的成虾中达到最大值;在成虾的不同组织中,PcRPS24基因在肝胰腺和卵巢中的表达量较高;在Ⅰ-Ⅵ期的卵巢中,PcRPS24基因在Ⅰ期卵巢中的表达量最高。结果表明PcRPS24可能在克氏原螯虾早期卵巢发育中起重要作用。 展开更多
关键词 克氏原螯虾(Proambaus clarkii) 核糖体蛋白S24 基因克隆 基因表达 卵巢发育
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