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Graves病患者应用甲巯咪唑导致反应性浆细胞增多症1例报告及文献复习
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作者 李时孟 齐新 +3 位作者 林思彤 伞湘雯 金玲 张斯童 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1414-1419,共6页
目的:探讨Graves病(GD)患者应用甲巯咪唑(MMI)治疗后出现粒细胞缺乏症和反应性浆细胞增多症(RP)的临床表现和实验室检查结果,为临床医生鉴别诊断RP和多发性骨髓瘤(MM)提供依据。方法:分析1例GD粒细胞缺乏症并发RP患者的临床表现、实验... 目的:探讨Graves病(GD)患者应用甲巯咪唑(MMI)治疗后出现粒细胞缺乏症和反应性浆细胞增多症(RP)的临床表现和实验室检查结果,为临床医生鉴别诊断RP和多发性骨髓瘤(MM)提供依据。方法:分析1例GD粒细胞缺乏症并发RP患者的临床表现、实验室检查和诊治过程,并进行文献复习。结果:患者有GD和腹腔感染病史,入院查血常规白细胞计数明显降低且伴有中性粒细胞缺乏,涂片复检见可疑浆细胞。骨髓细胞学检查,骨髓浆细胞百分率为33%,外周血浆细胞百分率为4%;血清免疫球蛋白多克隆性增生;血清免疫固定电泳阴性;流式细胞学分析,浆细胞免疫表型正常。结合病史和实验室检验结果,基本排除MM可能,符合RP的诊断。考虑中性粒细胞缺乏与用药有关,暂停MMI,给予粒细胞集落刺激因子升高白细胞数,控制腹腔感染后进行GD专科治疗。患者预后良好,6个月后随访复查血常规正常。结论:GD患者出现粒细胞缺乏症并发RP在临床上较为罕见,血清免疫固定电泳、血细胞形态学和细胞免疫表型分析有助于明确诊断。积极治疗RP原发疾病后,患者预后良好。 展开更多
关键词 甲巯咪唑 GRAVES病 浆细胞 粒细胞缺乏症 诊断
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ATP5B在结直肠癌组织中的表达及意义
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作者 林英 李时孟 +1 位作者 岳斯琦 杨琦 《中国实验诊断学》 2023年第11期1317-1319,共3页
结直肠癌是全球第三大癌症死因,每年有超过185万病例被发现,85万人死亡[1]。结直肠癌初期起病隐匿,发展缓慢,多数病例是在癌症晚期才被确诊,有效的诊断及发病机制的研究对肿瘤的预后有重要意义[2]。本研究通过二维色谱质谱联用技术、免... 结直肠癌是全球第三大癌症死因,每年有超过185万病例被发现,85万人死亡[1]。结直肠癌初期起病隐匿,发展缓慢,多数病例是在癌症晚期才被确诊,有效的诊断及发病机制的研究对肿瘤的预后有重要意义[2]。本研究通过二维色谱质谱联用技术、免疫印迹实验、免疫组化实验来探究ATP5B蛋白在结直肠癌组织与癌旁组织的表达及意义,为结直肠癌的临床诊断及发病机制的研究提供新的方向。 展开更多
关键词 癌症晚期 免疫印迹实验 表达及意义 结直肠癌 色谱质谱联用技术 免疫组化实验 临床诊断 发病机制
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结直肠癌组织中泛素化修饰蛋白的蛋白质组学分析 被引量:5
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作者 杨照微 王晶莹 +3 位作者 李时孟 李晓鸥 谢风 何成彦 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第3期355-362,共8页
蛋白质泛素化修饰在结直肠癌的发生、发展和转移等过程中,发挥着重要作用。本研究提取结直肠癌组织中总蛋白,经胰酶水解得到多肽混合物,利用免疫沉淀技术对其中含-GG标签的肽段富集纯化,最后利用液相色谱-质谱联用技术对富集肽段进行分... 蛋白质泛素化修饰在结直肠癌的发生、发展和转移等过程中,发挥着重要作用。本研究提取结直肠癌组织中总蛋白,经胰酶水解得到多肽混合物,利用免疫沉淀技术对其中含-GG标签的肽段富集纯化,最后利用液相色谱-质谱联用技术对富集肽段进行分析,经数据库检索鉴定蛋白。结果表明,在结直肠癌组织中,鉴定得到归属为328种蛋白的2036个肽段。其中,含-GG标签的修饰肽段数为1497个,归属287种蛋白。在鉴定得到的含有-GG标签的肽段中,除了大部分含有1个-GG标签的肽段外,还包括31个含有2个-GG标签的肽段以及3个含有3个-GG标签的肽段。在鉴定得到的泛素化修饰的蛋白中,发现许多与结直肠癌密切相关的蛋白,包括胸腺素α原(Prothymosin alpha)、转化酸性含卷曲螺旋蛋白3(Transforming acidic coiled-coil-containing protein 3)、中性氨基酸转运蛋白B(0)(Neutral amino acid transporter B(0))等。对所鉴定的泛素化修饰蛋白的生物信息学分析表明,结直肠癌组织中泛素化修饰蛋白涵盖了多种基本的生物学过程和分子功能,在细胞内的各个亚细胞器及胞外基质成分中均有分布。本研究对结直肠癌组织中的泛素修饰蛋白的种类、分布等情况提供了一种特异、有效的研究方法,研究结果为深入研究结直肠癌中泛素化修饰调控分子机制提供了基础数据。 展开更多
关键词 结直肠癌 泛素化修饰 蛋白质组
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肿瘤标志物分子生物学检测技术研究的新进展 被引量:5
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作者 李时孟 潘宝香 +1 位作者 刘春迎 谢风 《中国实验诊断学》 2015年第12期2148-2149,共2页
肿瘤标志物(tumor marker,TM)是指在恶性肿瘤发生和生长过程中,由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的或因肿瘤细胞反应而异常产生和(或)升高的,提示肿瘤存在和生长的一类物质[1]。近年来,随着分子生物学技术的迅猛发展,检测手段不断提... 肿瘤标志物(tumor marker,TM)是指在恶性肿瘤发生和生长过程中,由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的或因肿瘤细胞反应而异常产生和(或)升高的,提示肿瘤存在和生长的一类物质[1]。近年来,随着分子生物学技术的迅猛发展,检测手段不断提高,已有多种检测技术,现针对肿瘤标记物相关分子生物学检测技术及其发展作一综述。 展开更多
关键词 肿瘤标志物 检测技术研究 生物芯片技术 细胞反应 分子生物学检测 分子诊断技术 基因表达 单克隆抗体 蛋白芯片 标记免疫技术
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人布鲁菌病的实验室诊断 被引量:3
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作者 李时孟 李威 +1 位作者 何成彦 谢风 《中国实验诊断学》 2017年第11期2033-2036,共4页
布鲁菌病作为最常见的人畜共患疾病之一,在该病高发地区感染率可达到1‰,其主要的传染源为感染的动物及未经消毒的奶制品,此外,饮食习惯、气候因素以及卫生条件等也会影响疾病的传播。布鲁氏菌侵入人体后,起初表现为发热、盗汗、头痛、... 布鲁菌病作为最常见的人畜共患疾病之一,在该病高发地区感染率可达到1‰,其主要的传染源为感染的动物及未经消毒的奶制品,此外,饮食习惯、气候因素以及卫生条件等也会影响疾病的传播。布鲁氏菌侵入人体后,起初表现为发热、盗汗、头痛、厌食等非典型症状,随着病程进展,出现菌血症、毒血症而引发多器官感染。近些年我国布鲁菌病发病率逐年上升,越来越重视预防及早期诊断。 展开更多
关键词 布鲁菌病 实验室诊断 人畜共患疾病 非典型症状 多器官感染 高发地区 饮食习惯 卫生条件
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程序死亡性因子配体1蛋白表达与肺癌预后关联性的Meta分析
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作者 李时孟 潘宝香 +2 位作者 李佟 谢风 王海 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期969-973,共5页
目的:采用Meta分析方法评价程序死亡性因子配体1(PD-L1)蛋白表达在肺癌预后评估中的价值,为肺癌预后评估提供依据。方法:计算机检索PubMed、EMbase、CNKI、中国期刊全文数据库和万方数据库中PD-L1与肺癌预后关联性的回顾性队列研究... 目的:采用Meta分析方法评价程序死亡性因子配体1(PD-L1)蛋白表达在肺癌预后评估中的价值,为肺癌预后评估提供依据。方法:计算机检索PubMed、EMbase、CNKI、中国期刊全文数据库和万方数据库中PD-L1与肺癌预后关联性的回顾性队列研究,采用文献追溯方法查找相关文献。检索时间从建库至2014年11月。由2名评价者按纳入和排除标准独立选择文献、提取资料和评价质量。采用Stata 11.0统计软件进行Meta分析,采用Begg’s漏斗图和Egger’s法评估文献的发表偏倚。结果:最终纳入9个队列研究、共1 306例肺癌患者进行Meta分析,PD-L1蛋白表达水平与肺癌预后无明显关联(HR=1.28,95%CI:0.78-2.09)。亚组分析,中国患者中PD-L1蛋白高表达者的死亡风险更高(HR=2.31,95%CI:1.73-3.10)。结论:中国肺癌患者中PD-L1蛋白高表达是肺癌预后的危险因素。 展开更多
关键词 肺肿瘤 程序死亡性因子配体1 预后 生存率 META分析
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ATP5B原核表达和单克隆抗体的制备及其鉴定
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作者 李时孟 赵丽纯 +2 位作者 乔璐 何成彦 刘卓 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期184-189,220,共7页
目的:制备高纯度ATP合酶β亚基(ATP5B)单克隆抗体并进行鉴定,为其后续研究奠定基础。方法:应用PCR法扩增ATP5B基因,克隆入pET28a载体中并转入大肠杆菌BL21 (DE3)。异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达并用镍亲和层析柱纯化... 目的:制备高纯度ATP合酶β亚基(ATP5B)单克隆抗体并进行鉴定,为其后续研究奠定基础。方法:应用PCR法扩增ATP5B基因,克隆入pET28a载体中并转入大肠杆菌BL21 (DE3)。异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达并用镍亲和层析柱纯化融合蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测蛋白纯度。用纯化的融合蛋白免疫3只雌性Balb/C小鼠,取小鼠尾静脉血,间接酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清中ATP5B抗体效价。取血清效价最高的免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞混合培养建立杂交瘤细胞,采用间接ELISA法筛选融合细胞并行单克隆化培养,对阳性细胞进行核型分析。取12周龄Balb/C小鼠,腹腔注射杂交瘤细胞制备腹水模型,收集腹水,间接ELISA法检测效价,SDS-PAGE检测抗体纯度,应用ELISA法检测抗体亚型。结果:PCR扩增后得到1 455bp的特异性条带,连接pET28a空载体获得重组pET28a/ATP5B载体。IPTG诱导转化的菌液表达目的蛋白,SDS-PAGE检测,在相对分子质量为51 000处出现明显的诱导蛋白条带。间接ELISA法检测免疫小鼠静脉血,血清效价最高达1∶64 000。杂交瘤细胞染色体核型分析,染色体总数约为骨髓瘤细胞与正常小鼠脾细胞之和。采用杂交瘤细胞株制备小鼠腹水,抗体最高效价为1∶240 000,杂交瘤细胞产生的单克隆抗体的亚型为IgG1。结论:通过克隆、表达和纯化重组蛋白,成功制备出抗ATP5B蛋白单克隆抗体。 展开更多
关键词 ATP合酶β亚基 单克隆抗体 原核表达 蛋白纯化
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HFE基因C282Y与H63D突变型与肝癌相关性的Meta分析
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作者 李佟 李时孟 +2 位作者 刘硕 谢风 丁军 《中国实验诊断学》 2016年第12期2020-2024,共5页
目的采用Meta分析方法评价HFE基因C28Y与H63D突变型与肝癌发生的相关性。方法计算机检索PubMed、CNKI、中国知网和万方数据库HFE基因型与肝癌发生相关的病例对照研究,相关文献的查找采用文献追溯方法。检索时限是从建库至2016年1月。按... 目的采用Meta分析方法评价HFE基因C28Y与H63D突变型与肝癌发生的相关性。方法计算机检索PubMed、CNKI、中国知网和万方数据库HFE基因型与肝癌发生相关的病例对照研究,相关文献的查找采用文献追溯方法。检索时限是从建库至2016年1月。按照纳入和排除标准选择文献,并进行提取资料和评价质量,用RevMan 5.0软件进行Meta分析及评估文献的发表偏倚。结果最终纳入14篇文章,C282Y研究组共纳入病例组2418人,对照组9022人;H63D研究组病例组2208人,对照组6170人。Meta分析结果显示,C282Y研究组等位基因(C vs Y)Y基因的表达为肝癌发生的危险因素[OR=1.58,95%CI(1.06,2.33)],对基因分型进行的分层研究,结果表明与携带CC基因型人群相比,携带YY基因型(YY vs CC)患肿瘤风险增高[OR=5.71,95%CI(2.81,11.62)]。携带隐性基因型YY与另外两种基因型(YY vs CC+CY)同样增高患肿瘤的风险[OR=5.71,95%CI(2.81,11.38)]。结论HFE基因型C282Y突变基因的表达是肝癌发生的危险因素。 展开更多
关键词 肝癌 HFE基因 病例对照 META分析
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CKB在大肠癌中的表达及意义
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作者 李时孟 何成彦 +4 位作者 谢风 高申 杨照微 郭宏华 黄丽红 《中国实验诊断学》 2016年第10期1646-1648,共3页
目的探讨脑肌酸激酶(Creatine kinase B-type,CKB)在大肠癌组织中的表达水平及临床意义。方法应用二维色谱及质谱联用技术分析18例大肠癌患者肿瘤标本,筛选出在大肠癌肿瘤组织和癌旁组织差异表达的蛋白CKB,免疫印迹技术加以印证。结果... 目的探讨脑肌酸激酶(Creatine kinase B-type,CKB)在大肠癌组织中的表达水平及临床意义。方法应用二维色谱及质谱联用技术分析18例大肠癌患者肿瘤标本,筛选出在大肠癌肿瘤组织和癌旁组织差异表达的蛋白CKB,免疫印迹技术加以印证。结果质谱鉴定显示CKB在肿瘤组织中较癌旁组织低表达,免疫印迹印证了其准确性。结论 CKB的低表达在调节肿瘤的发生、发展中起到一定作用。 展开更多
关键词 脑肌酸激酶 大肠癌 液质联用
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小鼠抗人亲环蛋白A(CypA)单克隆抗体的制备和应用 被引量:1
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作者 乔璐 洪欣 +3 位作者 李时孟 何成彦 高申 王海 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期746-751,共6页
目的原核表达人亲环蛋白A (CypA)、制备抗人亲环蛋白A (CypA)单克隆抗体(mAb)并初步探索其在结肠癌发生发展中的作用。方法根据CypA基因序列,以原核表达系统表达CypA重组蛋白,经镍亲和层析柱纯化,免疫小鼠,杂交瘤法制备mAb;采用免疫组... 目的原核表达人亲环蛋白A (CypA)、制备抗人亲环蛋白A (CypA)单克隆抗体(mAb)并初步探索其在结肠癌发生发展中的作用。方法根据CypA基因序列,以原核表达系统表达CypA重组蛋白,经镍亲和层析柱纯化,免疫小鼠,杂交瘤法制备mAb;采用免疫组织化学染色法检测CypA在结直肠癌与癌旁组织中的差异表达,并分析与临床病理参数的相关性。结果成功构建了CypA原核表达载体,获得纯化的目的蛋白;获得1株稳定分泌抗人CypA mAb的杂交瘤细胞株;研究表明,结直肠癌组织CypA阳性染色率显著增高并与肿瘤分化程度及淋巴结转移相关。结论成功制备了小鼠抗人CypA mAb,并发现CypA在结直肠癌组织中高表达,与低分化和淋巴结转移呈正相关。 展开更多
关键词 亲环蛋白A 结直肠癌 单克隆抗体(mAb)
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黏蛋白2异常表达与黏液性癌发生发展的研究进展
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作者 王晓晖 朱彦 +1 位作者 阚宁 李时孟 《中国实验诊断学》 2019年第5期922-924,共3页
肿瘤在全球的发病率和死亡率呈逐年上升趋势。2012年约820万患者死于肿瘤[1],2015年世界卫生组织的统计数据显示肿瘤致死人数已增加至880万。由于肿瘤患者预后不良,肿瘤的治疗方法也在不断改进。目前在肿瘤的治疗中越来越提倡个体化治疗... 肿瘤在全球的发病率和死亡率呈逐年上升趋势。2012年约820万患者死于肿瘤[1],2015年世界卫生组织的统计数据显示肿瘤致死人数已增加至880万。由于肿瘤患者预后不良,肿瘤的治疗方法也在不断改进。目前在肿瘤的治疗中越来越提倡个体化治疗,这也使得肿瘤的亚型分类更加受到关注。黏液性腺癌是腺癌的一种亚型,其肿瘤组织中至少有一半体积是由细胞外黏蛋白构成。黏液性腺癌的发生主要与黏蛋白的异常表达、染色体的不稳定性、微卫星结构的不稳定性以及CpG岛的超甲基化相关联。 展开更多
关键词 黏液性 MUC 异常表达 乳头状 黏蛋白 黏液癌
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