NAC转录因子:参与植物诸多生命过程的调控因子

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作者 张兆冉 王利娜 +1 位作者 朱博艺 李朝炜 《安徽农业科学》 CAS 2024年第15期22-29,共8页

NAC(NAM、ATAF1/2、CUC2)转录因子家族是植物中最大的蛋白家族之一,在多种植物中均发现其家族成员。NAC转录因子(NAC transcription factors,NAC TFs)一般由保守的N端特殊的DNA结合域以及多样的C端调控结构域组成,其数量十分庞大且功能... NAC(NAM、ATAF1/2、CUC2)转录因子家族是植物中最大的蛋白家族之一,在多种植物中均发现其家族成员。NAC转录因子(NAC transcription factors,NAC TFs)一般由保守的N端特殊的DNA结合域以及多样的C端调控结构域组成,其数量十分庞大且功能多种多样,主要通过调控靶基因的表达水平参与调控诸多生命过程,进而调控植物的次生代谢产物合成、生长发育和应激反应,探究其生物学功能及分子调控机制,对改良植物农艺性状具有重要意义。系统综述了NAC TFs的研究现状、结构特点、作用模式和进化历程,及其对植物生命活动的调控包括次生生长、生物合成、生物/非生物胁迫响应、器官衰老等,旨在为改良植物农艺性状提供理论基础。 展开更多

关键词 NAC 功能 生长 胁迫 激素响应

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LncRNA:参与植物多种生物进程的调节剂 被引量：1

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作者 栗丽慧 李朝炜 《江苏农业科学》 北大核心 2023年第10期11-19,共9页

曾被认为是“暗物质”和“转录噪声”的非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)目前已经成为表观遗传学领域的研究热点。NcRNA包含小RNA(small RNA)和非编码长RNA(long non-coding RNA,lncRNA),通常不具有蛋白质编码能力,但有特定的功能性。其... 曾被认为是“暗物质”和“转录噪声”的非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)目前已经成为表观遗传学领域的研究热点。NcRNA包含小RNA(small RNA)和非编码长RNA(long non-coding RNA,lncRNA),通常不具有蛋白质编码能力,但有特定的功能性。其中lncRNA是一类保守性差的转录本,长度大于200 bp,可通过介导遗传信息的传递和表达参与植物生长发育和应激反应过程。本文系统介绍了lncRNA的定义、分类、来源;概述了其调控机制,如可作为信号分子、诱饵、支架、向导、参与mRNA的可变剪切等;总结了目前植物lncRNA研究领域的相关数据库,数据库中不仅包含大量已被鉴定的lncRNA信息,还可预测lncRNA是否具有编码肽段的潜能,以及lncRNA与多种大分子之间是否有相互作用;综述了lncRNA在植物花期调控、生长发育、非生物胁迫中的作用;探讨了lncRNA为何不遵循经典进化模式,以及其与物种生物学差异、新物种的生成、生物体复杂程度之间的关系。综合分析可知,lncRNA无普遍功能,且不独立发挥作用,需结合具体案例分析,研究较为繁琐,且其分类仍然模糊。不过随着生物技术的快速发展,关于lncRNA的研究终会日益明朗。本文可为植物中lncRNA的研究提供理论支持和新的思路。 展开更多

关键词 lncRNA 表观遗传 研究进展 调控机制 数据库

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农杆菌介导的旱稻遗传转化主要影响因素 被引量：6

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作者 李朝炜 冯丹 +2 位作者 翟会青 刘梅 魏景芳 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第15期3482-3487,共6页

以旱稻品种鲲旱1号为材料,对农杆菌介导的遗传转化中愈伤组织的诱导、筛选、分化等的影响因素进行了研究.将PPA抗虫基因和bar抗性基因成功导入旱稻愈伤组织,经过筛选和分化最终获得了抗性植株.结果表明,改良的NB培养基适合于旱稻愈伤组... 以旱稻品种鲲旱1号为材料,对农杆菌介导的遗传转化中愈伤组织的诱导、筛选、分化等的影响因素进行了研究.将PPA抗虫基因和bar抗性基因成功导入旱稻愈伤组织,经过筛选和分化最终获得了抗性植株.结果表明,改良的NB培养基适合于旱稻愈伤组织的诱导;当农杆菌浓度在OD600nm为0.2～0.3,侵染时间为20 min时,转化效果最好;用40 mg/L的PPT筛选30d后,可以获得抗性愈伤组织;将已筛选的抗性愈伤组织在预分化培养基上培养5～7 d能有效提高分化率. 展开更多

关键词 旱稻 农杆菌 遗传转化

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旱稻成熟胚愈伤组织诱导的影响因素 被引量：3

4

作者 李朝炜 刘颖 +2 位作者 朱昀 刘青 贾慧敏 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第2期52-54,共3页

以旱稻品种鲲旱1号的种子为材料,研究了不同培养基成分及不同浓度的激素对愈伤组织诱导效率的影响。结果表明,NB培养基较MS培养基更加有利于旱稻愈伤组织的诱导和继代培养;当2,4-D浓度为2 mg/L时的愈伤组织出愈率最高;添加脯氨酸不利于... 以旱稻品种鲲旱1号的种子为材料,研究了不同培养基成分及不同浓度的激素对愈伤组织诱导效率的影响。结果表明,NB培养基较MS培养基更加有利于旱稻愈伤组织的诱导和继代培养;当2,4-D浓度为2 mg/L时的愈伤组织出愈率最高;添加脯氨酸不利于鲲旱1号愈伤组织的形成和生长;选用麦芽糖作为碳源可明显提高愈伤组织的诱导率。 展开更多

关键词 旱稻 愈伤组织 成熟胚 诱导

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农杆菌介导小麦成熟胚遗传转化的几个影响因素研究 被引量：3

5

作者 李朝炜 刘颖 +2 位作者 王丹娜 阳秦婧 魏景芳 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第12期45-47,共3页

为研究农杆菌介导的小麦成熟胚转化的影响因素,以2个小麦品种石4185、科麦一号的成熟胚为转化受体材料,分别以GV3101、EHA105、LBA4404等3种农杆菌菌株(含有p CAMBIA1380双元载体)为供体材料进行转化,主要检测成熟胚愈伤组织β-葡萄糖... 为研究农杆菌介导的小麦成熟胚转化的影响因素,以2个小麦品种石4185、科麦一号的成熟胚为转化受体材料,分别以GV3101、EHA105、LBA4404等3种农杆菌菌株(含有p CAMBIA1380双元载体)为供体材料进行转化,主要检测成熟胚愈伤组织β-葡萄糖苷酸酶(GUS)报告基因的表达情况。结果表明,不同小麦品种对转化体系的反应各不相同,菌株、受体的基因型以及外植体的继代时间和生理状态等均对转化效率有很大的影响。GV3101的侵染转化效果优于另外2个菌株,石4185成熟胚愈伤对农杆菌侵染的敏感性比科麦一号要高。继代培养时间的延长会不同程度地影响小麦成熟胚愈伤的转化效果。通过对转化体系几个影响因素的研究,有助于提高农杆菌介导成熟胚转化体系的效率。 展开更多

关键词 小麦 成熟胚 农杆菌 GUS表达率

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不同品种小麦成熟胚愈伤组织的诱导与分化 被引量：4

6

作者 李朝炜 姚彬 +2 位作者 苗苗 邢文岳 潘家祥 《湖北农业科学》 2015年第13期3279-3282,共4页

以4种不同基因型小麦(Triticum aestivum)品种成熟胚作为外植体进行培养,研究不同培养条件对愈伤组织诱导及植株分化再生的影响。结果显示不同小麦品种对培养条件的反应各不相同。各品种小麦成熟胚的最高愈伤诱导率所需的2,4-D浓度不同,... 以4种不同基因型小麦(Triticum aestivum)品种成熟胚作为外植体进行培养,研究不同培养条件对愈伤组织诱导及植株分化再生的影响。结果显示不同小麦品种对培养条件的反应各不相同。各品种小麦成熟胚的最高愈伤诱导率所需的2,4-D浓度不同,石4185和科麦一号的最适浓度为2.0 mg/L;扬麦12和Bobwhite的最适浓度为4.0 mg/L。4种小麦品种成熟胚愈伤组织再分化的最适条件也有所差别,在MS培养基中添加2.0 mg/L KT和0.1 mg/L NAA利于石4185和Bobwhite成熟胚的愈伤组织分化;科麦一号成熟胚的分化最适条件为1.0 mg/L KT和0.5 mg/L NAA;扬麦12成熟胚的分化则采用1.0 mg/L KT和0.1 mg/L NAA效果最佳。此外,继代培养时间的延长会不同程度地影响小麦成熟胚愈伤的分化。 展开更多

关键词 小麦(Triticum aestivum) 成熟胚 愈伤组织 诱导 分化

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薯蓣不同外植体愈伤组织培养的研究 被引量：1

7

作者 李朝炜 姚彬 +1 位作者 王琳珊 黄亚辉 《安徽农业科学》 CAS 2012年第25期12343-12344,12350,共3页

该研究通过对比薯蓣不同外植体愈伤组织的培养效果,为建立薯蓣高效植株再生体系,及进一步利用基因转化进行品种改良和新品种的选育提供了一条可能的途径。试验结果显示,不同外植体在同一种培养基上的诱导率存在差异,其排列顺序是:零余子... 该研究通过对比薯蓣不同外植体愈伤组织的培养效果,为建立薯蓣高效植株再生体系,及进一步利用基因转化进行品种改良和新品种的选育提供了一条可能的途径。试验结果显示,不同外植体在同一种培养基上的诱导率存在差异,其排列顺序是:零余子>茎尖>叶片、茎段>块茎;同一外植体在不同植物激素浓度配比的培养基中,诱导率也不同,其中零余子最佳愈伤诱导培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA。 展开更多

关键词 薯蓣 外植体 愈伤组织 植物激素

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植物开花调控机理研究进展 被引量：2

8

作者 李朝炜 朱昀 《生物学教学》 北大核心 2011年第6期6-7,共2页

高等植物开花是其从营养生长过渡到生殖生长的重要转折点,是一个由遗传因子和环境因素协同调控的复杂过程。对模式生物拟南芥的分子遗传学研究表明,至少存在4条调控开花的信号途径：光周期途径、春化途径、自主途径和赤霉素途径。本文... 高等植物开花是其从营养生长过渡到生殖生长的重要转折点,是一个由遗传因子和环境因素协同调控的复杂过程。对模式生物拟南芥的分子遗传学研究表明,至少存在4条调控开花的信号途径：光周期途径、春化途径、自主途径和赤霉素途径。本文简要综述近年来开花调控领域研究的最新进展。 展开更多

关键词 开花调控 拟南芥 水稻 开花素

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绿化植物叶面特征对滞尘效应的影响 被引量：16

9

作者 刘颖 李冬杰 +2 位作者 李朝炜 朱昀 魏景芳 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第8期454-457,共4页

选取河北省石家庄市18种常见绿化植物为对象,研究绿化植物叶片表面特征对滞尘效应的影响。结果表明,在同一尘源条件下,不同绿化植物的滞尘能力存在极显著差异,迎春花的滞尘能力相对最强,平均累积滞尘量为4.572 g/m^2,色木槭滞尘能力相... 选取河北省石家庄市18种常见绿化植物为对象,研究绿化植物叶片表面特征对滞尘效应的影响。结果表明,在同一尘源条件下,不同绿化植物的滞尘能力存在极显著差异,迎春花的滞尘能力相对最强,平均累积滞尘量为4.572 g/m^2,色木槭滞尘能力相对最弱,平均累积滞尘量为0.515 g/m^2,两者平均累积滞尘量相差9倍;相同植物不同垂直部位的叶片滞尘能力也存在显著差异,18种植物不同部位的叶片累积滞尘量均表现为:下部>中部>上部;利用显微镜观察叶片表面发现,叶片表面具被毛、叶面粗糙度大、气孔密度大且开度、大的植物产生的滞尘效果较好,叶表平滑无毛、气孔密度小的植物产生的滞尘效果较差。 展开更多

关键词 绿化植物 滞尘能力 叶面特征 气孔密度 迎春花

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拟南芥钙调素结合蛋白AtIQD26的分离鉴定 被引量：6

10

作者 韦慧彦 郭振清 +3 位作者 王振杰 李朝炜 王志娟 崔素娟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第6期703-711,共9页

钙调素结合蛋白的研究有助于探明钙调素介导的信号转导途径.以拟南芥钙调素亚型2(ACaM2)为钓饵,重组共转化法构建并筛选了酵母双杂交文库.复筛后得到一个阳性克隆.序列测定及分析表明,分离的阳性克隆中包含一个编码钙调素结合蛋白AtIQD2... 钙调素结合蛋白的研究有助于探明钙调素介导的信号转导途径.以拟南芥钙调素亚型2(ACaM2)为钓饵,重组共转化法构建并筛选了酵母双杂交文库.复筛后得到一个阳性克隆.序列测定及分析表明,分离的阳性克隆中包含一个编码钙调素结合蛋白AtIQD26的cDNA片段.凝胶覆盖实验进一步表明,AtIQD26在1mmol/LCa2+或1mmol/LEGTA条件下都能与钙调素结合,说明其存在不依赖于Ca2+的CaM结合特性.GUS染色分析表明,AtIQD26具有普遍的组织表达特性,尤其是在新生的组织中表达量较大;融合荧光蛋白定位显示,AtIQD26在细胞核与质膜附近有分布.AtIQD26与钙调素空间分布的相似性,预示着它们在植物生长发育过程中可能共同发挥作用. 展开更多

关键词 钙调素结合蛋白 酵母双杂交 拟南芥 凝胶覆盖分析 组织表达 亚细胞定位

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城市交通道路绿化植物滞尘效应研究 被引量：26

11

作者 刘颖 李朝炜 +2 位作者 邢文岳 朱昀 魏景芳 《北方园艺》 CAS 北大核心 2015年第3期77-81,共5页

以石家庄市7条主要交通干路,11种常见绿化植物为研究对象,研究比较了不同绿化植物的滞尘量,构建了绿化植物单位叶片面积累积滞尘量与滞尘时间的对数曲线方程,并通过滞尘时间、叶表微形态结构、叶片性状、叶面距地高度及交通道路环境等... 以石家庄市7条主要交通干路,11种常见绿化植物为研究对象,研究比较了不同绿化植物的滞尘量,构建了绿化植物单位叶片面积累积滞尘量与滞尘时间的对数曲线方程,并通过滞尘时间、叶表微形态结构、叶片性状、叶面距地高度及交通道路环境等因素分析了绿化植物综合滞尘能力的差异。结果表明：金叶女贞、大叶黄杨综合滞尘能力最强,平均累积滞尘量达到4.0g/m^2以上;棣棠、海棠、迎春、紫叶李的滞尘能力居中,单位面积累积滞尘量介于2.0-4.0g/m^2之间;毛白杨、大叶女贞、白丁香滞尘能力一般,单位面积累积滞尘量介于1.0-1.5g/m^2之间;七叶树、月季滞尘能力相对较弱,单位面积累积滞尘量分别为0.996g/m^2和0.730g/m^2。通过2个独立样本T检验分析表明,城市交通道路车流量及周边环境的差异对植物的滞尘效果产生了显著的影响。 展开更多

关键词 石家庄 城市交通道路 绿化植物 单位面积累积滞尘量

原文传递

聚乙二醇诱导鸡红细胞融合条件的优化 被引量：14

12

作者 仇燕 李朝炜 苗芳 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期50-53,共4页

目的:探讨聚乙二醇诱导鸡红细胞融合最适条件。方法:以鸡红细胞为材料,聚乙二醇为诱导剂,从细胞密度、融合温度、聚乙二醇浓度及反应时间进行单因素实验,并设计3因素3水平的正交实验计算细胞融合率。结果:鸡红细胞融合的最佳条件是:细... 目的:探讨聚乙二醇诱导鸡红细胞融合最适条件。方法:以鸡红细胞为材料,聚乙二醇为诱导剂,从细胞密度、融合温度、聚乙二醇浓度及反应时间进行单因素实验,并设计3因素3水平的正交实验计算细胞融合率。结果:鸡红细胞融合的最佳条件是:细胞密度为2×106个/ml,聚乙二醇浓度为35%,反应温度为35℃,反应时间40min。结论:在该条件下,细胞融合率最高达33.06%。 展开更多

关键词 细胞融合 鸡红细胞 聚乙二醇

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NAC类转录因子在玉米未成熟雌穂发育中的作用 被引量：3

13

作者 朱昀 付俊杰 +1 位作者 李朝炜 王国英 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第7期21-25,共5页

为了研究转录因子在玉米雌穗早期发育阶段的差异表达情况,探讨其生物学功能,利用Arizona大学的玉米芯片对未成熟玉米雌穂的早期关键发育阶段进行全基因组表达谱分析。数据标准化之后对差异基因中的转录因子家族进行超几何分析,挑选并分... 为了研究转录因子在玉米雌穗早期发育阶段的差异表达情况,探讨其生物学功能,利用Arizona大学的玉米芯片对未成熟玉米雌穂的早期关键发育阶段进行全基因组表达谱分析。数据标准化之后对差异基因中的转录因子家族进行超几何分析,挑选并分析差异明显的转录因子家族。结果表明,在玉米雌穗发育早期,有1 844个基因差异表达,有7个转录因子家族基因变化达到显著性差异,其中NAC类转录因子家族的变化最为显著,P值为5.6E-05。从生长锥伸长期到小穗分化期,该家族有9个基因上调表达,有6个成员下调表达。说明NAC类转录因子家族对玉米雌穗早期发育起到一定作用。 展开更多

关键词 玉米 雌穂 发育 芯片 NAC类转录因子

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抗逆转基因旱稻转化体系的优化 被引量：3

14

作者 刘青 李朝炜 +3 位作者 朱昀 苗苗 邢文岳 魏景芳 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第11期42-45,共4页

以粳糯型常规旱稻品种"冀旱糯3号"为受体材料,利用农杆菌转化法将bar基因和lea-1基因转入旱稻细胞,建立了适用于旱稻的高效转化体系,最终获得转基因植株,并对转基因植株进行PCR检测。结果表明:当农杆菌浓度(以D_(600 nm)表示)... 以粳糯型常规旱稻品种"冀旱糯3号"为受体材料,利用农杆菌转化法将bar基因和lea-1基因转入旱稻细胞,建立了适用于旱稻的高效转化体系,最终获得转基因植株,并对转基因植株进行PCR检测。结果表明:当农杆菌浓度(以D_(600 nm)表示)为0.2时,转化效果最好。在筛选抗性愈伤时,除草剂的最佳浓度为40 mg/L,对抗性愈伤组织进行预分化能提高其分化率,对转基因植株进行分子检测,优化后的转化率提高到37.5%。 展开更多

关键词 旱稻 除草剂 农杆菌 PCR LEA基因

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植物液泡膜质子转运焦磷酸酶研究进展 被引量：4

15

作者 朱昀 李朝炜 魏景芳 《河北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2013年第6期639-643,共5页

液泡膜质子转运焦磷酸酶是一种区别于H+-ATPase的质子泵,广泛存在于植物和少数藻类、原生动物以及细菌中.综述了植物液泡膜质子转运焦磷酸酶在结构特性以及功能方面的研究进展,并展望了该基因在植物抗旱耐盐基因工程中的应用前景.

关键词 液泡膜质子转运焦磷酸酶 抗盐性 耐旱性

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小麦VP基因的克隆、生物信息学分析及功能初探 被引量：2

16

作者 朱昀 李朝炜 +1 位作者 刘颖 魏景芳 《河南农业科学》 北大核心 2019年第2期8-16,共9页

为研究小麦液泡膜H^+转运无机焦磷酸酶基因VP在植物中的作用,根据大麦、水稻等植物VP基因序列设计简并引物,用RACE法扩增小麦VP基因全长,对VP蛋白进行生物信息学分析,构建VP基因植物表达载体,转化拟南芥,对阳性转基因纯合体株系进行筛... 为研究小麦液泡膜H^+转运无机焦磷酸酶基因VP在植物中的作用,根据大麦、水稻等植物VP基因序列设计简并引物,用RACE法扩增小麦VP基因全长,对VP蛋白进行生物信息学分析,构建VP基因植物表达载体,转化拟南芥,对阳性转基因纯合体株系进行筛选和耐盐性鉴定。结果表明,小麦VP基因编码区序列全长2 286 bp,共编码761个氨基酸,等电点为5.17。VP蛋白为无信号肽的疏水性蛋白,主要含α螺旋。转VP基因拟南芥在NaCl胁迫下的萌发率、绿苗率均高于野生型拟南芥,成苗生长状态优于野生型拟南芥,说明小麦VP基因提高了转基因拟南芥的耐盐性。 展开更多

关键词 小麦 VP基因 生物信息学 耐盐性 拟南芥

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怀牛膝组织培养和快速繁殖体系的优化 被引量：1

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作者 刘颖 李冬杰 +3 位作者 王沛沛 朱昀 李朝炜 魏景芳 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第7期83-86,共4页

为优化怀牛膝(Achyranthes bidentata BL.)组织培养和快速繁殖体系,以怀牛膝茎段作为外植体,选择MS为基本培养基,研究不同激素配比对组培快繁的影响。结果表明,3种激素对于外植体芽诱导中影响顺序依次为6-BA>IBA>KT,最佳芽诱导优... 为优化怀牛膝(Achyranthes bidentata BL.)组织培养和快速繁殖体系,以怀牛膝茎段作为外植体,选择MS为基本培养基,研究不同激素配比对组培快繁的影响。结果表明,3种激素对于外植体芽诱导中影响顺序依次为6-BA>IBA>KT,最佳芽诱导优化培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA+0.2 mg/L KT。诱导丛生芽增殖的培养基以MS+1.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA+0.2 mg/L KT为最优,增殖系数达6.03。优化生根培养以1/2 MS+0.5 mg/L IBA效果最佳,生根率最高,达95.1%。组培苗移栽至炭灰∶营养土∶蛭石(体积比1∶2∶1)的基质中,成活率达到100%,且植株生长健壮。 展开更多

关键词 怀牛膝 组织培养 快速繁殖 优化

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绿色荧光蛋白 被引量：5

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作者 朱昀 李朝炜 《生物学教学》 北大核心 2010年第6期62-62,共1页

本文简单介绍了绿色荧光蛋白的发现、发展历程和应用价值。

关键词 绿色荧光蛋白 发现 应用

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旱稻Tail-PCR技术主要影响因素的优化和验证

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作者 朱昀 李朝炜 +2 位作者 刘嗣凡 刘颖 魏景芳 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第1期7-11,共5页

以转基因旱稻为材料,对Tail-PCR方法进行了分析优化,包括DNA样品质量、扩增产物稀释程度、酶的种类、简并引物组合方式、引物结合偏好性等。结果表明,DNA样品质量的高低是影响试验成功的重要因素,样品纯度不高导致扩增无法正常进行;扩... 以转基因旱稻为材料,对Tail-PCR方法进行了分析优化,包括DNA样品质量、扩增产物稀释程度、酶的种类、简并引物组合方式、引物结合偏好性等。结果表明,DNA样品质量的高低是影响试验成功的重要因素,样品纯度不高导致扩增无法正常进行;扩增后对产物稀释不充分会影响下轮扩增效果,适当增大产物稀释倍数可在下轮扩增中增大出带可能;LA Taq酶与普通Taq酶相比扩增效果没有明显不同,使用普通Taq酶即可进行Tail-PCR扩增;混合简并引物在旱稻中并没有获得更好的扩增效果。此外,发现简并引物对于不同物种存在偏好性,常规4种简并引物与旱稻基因组均可高效结合。优化后的Tail-PCR技术结果稳定,重复性好,可以准确地获得转基因旱稻插入位点的旁侧序列。 展开更多

关键词 旱稻 Tail-PCR技术 优化 影响因素

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地高辛标记对旱稻进行southern杂交分析主要影响因素的优化和验证 被引量：1

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作者 邢文岳 苏乐乐 +2 位作者 李朝炜 魏景芳 朱昀 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第8期41-43,共3页

以转基因旱稻和野生型旱稻为材料,对通过地高辛随机引物标记法进行的旱稻基因组Southern杂交条件进行了优化分析,包括探针制备效率、DNA样品量、酶切体系及转膜时间等。结果表明:影响探针制备效率的首要因素是温度而不是时间;DNA上样量... 以转基因旱稻和野生型旱稻为材料,对通过地高辛随机引物标记法进行的旱稻基因组Southern杂交条件进行了优化分析,包括探针制备效率、DNA样品量、酶切体系及转膜时间等。结果表明:影响探针制备效率的首要因素是温度而不是时间;DNA上样量在10~30μg均可以获得高质量的杂交图;60μL体系15 h即可酶切彻底并获得良好的杂交效果;转膜时间6 h即可。本研究所优化的地高辛标记的旱稻杂交分析结果稳定重复性好,具有较高的灵敏度和信噪比。 展开更多

关键词 旱稻 地高辛 Southern杂交方法 优化 验证

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