目的研究养阴润目丸对干眼兔结膜上皮细胞焦亡的调控作用。方法将40只雌雄各半的健康普通级新西兰兔采用随机数字表法,取8只作为空白组,剩余32只均采用双眼局部滴注0.1%苯扎氯铵溶液制备干眼模型,模型成功后随机分为空白组,模型组,养阴...目的研究养阴润目丸对干眼兔结膜上皮细胞焦亡的调控作用。方法将40只雌雄各半的健康普通级新西兰兔采用随机数字表法,取8只作为空白组,剩余32只均采用双眼局部滴注0.1%苯扎氯铵溶液制备干眼模型,模型成功后随机分为空白组,模型组,养阴润目丸低、中、高剂量组,每组8只。养阴润目丸低、中、高剂量组分别按剂量0.435、0.869、1.738 g·(kg·d)^(-1)给予养阴润目丸水溶液灌胃。连续灌胃2周后,分别进行泪液分泌试验(Schirmer's test,SIT)、泪膜破裂时间(break up time,BUT)和角膜荧光素染色评分;取兔结膜上皮细胞,透射电镜下观察结膜上皮的细胞形态;Western blot检测结膜中NOD样受体家族核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteine aspartate-specific proteinase-1,Caspase-1)、消化道皮肤素D(Gasdermin D,GSDMD)蛋白表达;ELISA法检测兔血清中炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)含量。结果与空白组相比,模型组实验兔SIT明显减少、泪膜BUT明显缩短、角膜荧光素染色评分明显升高(P<0.01,P<0.05);兔结膜上皮细胞超微结构可见明显肿胀、变形、破裂、皱缩等细胞损伤;兔结膜上皮细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD的蛋白表达明显升高(P<0.05);兔血清中IL-1β、IL-18含量明显增多(P<0.05)。与模型组相比,养阴润目丸各剂量组SIT明显增多、泪膜BUT明显延长、角膜荧光素染色评分明显降低(P<0.05);兔结膜上皮细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD的蛋白表达明显降低(P<0.05);兔血清中IL-1β、IL-18含量明显减少(P<0.05)。结论养阴润目丸可以通过降低干眼兔结膜上皮细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达,抑制结膜上皮细胞发生焦亡,减少炎症细胞因子IL-1β、IL-18分泌,从而阻断相关级联反应,起到增加泪液分泌量、延长泪膜BUT等作用,最终治疗苯扎氯铵诱导的干眼。展开更多
文摘目的研究养阴润目丸对干眼兔结膜上皮细胞焦亡的调控作用。方法将40只雌雄各半的健康普通级新西兰兔采用随机数字表法,取8只作为空白组,剩余32只均采用双眼局部滴注0.1%苯扎氯铵溶液制备干眼模型,模型成功后随机分为空白组,模型组,养阴润目丸低、中、高剂量组,每组8只。养阴润目丸低、中、高剂量组分别按剂量0.435、0.869、1.738 g·(kg·d)^(-1)给予养阴润目丸水溶液灌胃。连续灌胃2周后,分别进行泪液分泌试验(Schirmer's test,SIT)、泪膜破裂时间(break up time,BUT)和角膜荧光素染色评分;取兔结膜上皮细胞,透射电镜下观察结膜上皮的细胞形态;Western blot检测结膜中NOD样受体家族核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteine aspartate-specific proteinase-1,Caspase-1)、消化道皮肤素D(Gasdermin D,GSDMD)蛋白表达;ELISA法检测兔血清中炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)含量。结果与空白组相比,模型组实验兔SIT明显减少、泪膜BUT明显缩短、角膜荧光素染色评分明显升高(P<0.01,P<0.05);兔结膜上皮细胞超微结构可见明显肿胀、变形、破裂、皱缩等细胞损伤;兔结膜上皮细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD的蛋白表达明显升高(P<0.05);兔血清中IL-1β、IL-18含量明显增多(P<0.05)。与模型组相比,养阴润目丸各剂量组SIT明显增多、泪膜BUT明显延长、角膜荧光素染色评分明显降低(P<0.05);兔结膜上皮细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD的蛋白表达明显降低(P<0.05);兔血清中IL-1β、IL-18含量明显减少(P<0.05)。结论养阴润目丸可以通过降低干眼兔结膜上皮细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达,抑制结膜上皮细胞发生焦亡,减少炎症细胞因子IL-1β、IL-18分泌,从而阻断相关级联反应,起到增加泪液分泌量、延长泪膜BUT等作用,最终治疗苯扎氯铵诱导的干眼。
