藤黄酸对肾癌786-O细胞活力和对HUVEC细胞血管形成能力的抑制作用及其分子机制

1

作者 李舒珏 吴文正 +2 位作者 欧莉莉 梁叶萍 曾国华 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2014年第9期602-609,共8页

目的观察藤黄酸(GA)对肾癌786-O细胞活力和对HUVEC细胞血管形成能力的影响及其分子机制。方法不同浓度的GA处理786-O细胞一定时间后,分别采用Alamar blue法、流式细胞术和免疫印迹,检测GA对786-O细胞活力、周期分布、凋亡率及凋亡标志物... 目的观察藤黄酸(GA)对肾癌786-O细胞活力和对HUVEC细胞血管形成能力的影响及其分子机制。方法不同浓度的GA处理786-O细胞一定时间后,分别采用Alamar blue法、流式细胞术和免疫印迹,检测GA对786-O细胞活力、周期分布、凋亡率及凋亡标志物聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)降解片段的影响;GA对HUVEC细胞的作用除进行上述检测外,还利用划痕实验法和Transwell小室法检测细胞横向及纵向迁移能力变化,反映GA对HUVEC细胞血管形成能力的影响;免疫印迹检测P21Waf1/Cip1、Bax、缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和泛素化蛋白;特异性荧光蛋白酶体底物肽降解法检测细胞内糜蛋白酶样蛋白酶体活性。结果 GA能够剂量依赖性抑制786-O和HUVEC细胞的活力、诱导细胞G2-M期阻滞和凋亡,同时增加P21Waf1/Cip1、Bax和泛素化蛋白水平;能够减弱HUVEC细胞横向和纵向迁移能力,伴随HIF-1α的稳定性增加和VEGF表达下调;能够抑制细胞内糜蛋白酶样蛋白酶体活性。结论 GA通过诱导细胞G2-M周期阻滞和凋亡而显著抑制786-O和HUVEC细胞活力,并能有效抑制HUVEC细胞血管形成能力,其机制可能与蛋白酶体活性抑制所导致的底物蛋白P21Waf1/Cip1、Bax和HIF-1α的稳定性改变,及HIF-1α调控的下游蛋白VEGF表达水平的变化有关。 展开更多

关键词 藤黄酸 肾癌 细胞活力 血管形成能力 蛋白酶体活性

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PARP-1抑制剂5-AIQ联合依托泊苷对PC3细胞增殖的影响 被引量：2

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作者 朱寒亮 吴文起 +3 位作者 段小鹿 孔珍珍 李舒珏 梁叶萍 《海南医学》 CAS 2013年第7期937-939,共3页

目的研究多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-AIQ)联合化疗药物依托泊苷(VP16)对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞株增殖的影响。方法 MTS比色法观察不同浓度5-AIQ联合VP16对PC3细胞的增殖抑制作用,并应用WesternB... 目的研究多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-AIQ)联合化疗药物依托泊苷(VP16)对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞株增殖的影响。方法 MTS比色法观察不同浓度5-AIQ联合VP16对PC3细胞的增殖抑制作用,并应用WesternBlot法检测应用5-AIQ或VP16及二者联合应用对PC3细胞内PARP-1蛋白表达的影响。结果 MTS结果显示,与单独应用VP16(5μmol/L、25μmol/L或125μmol/L)比较,联合应用5-AIQ(125μmol/L或500μmol/L)可以明显增强VP16对PC3细胞的增殖抑制作用,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。而且当5-AIQ与低剂量VP16(5μmol/L)联合应用时可以达到与高剂量VP16(25μmol/L或125μmol/L)类似甚至更强的增殖抑制作用。WesternBlot结果显示,与对照组比较,5-AIQ(250μmol/L)或VP16(50μmol/L或100μmol/L)均可以明显下调PC3细胞内源性PARP-1的表达(P<0.05)。与二者单一处理组(5-AIQ,250μmol/L)或(VP16,50μmol/L)相比,二者联合应用可进一步下调PARP-1的表达水平。结论 PARP-1抑制剂5-AIQ可以明显增强VP16对PC3细胞的增殖抑制作用,该作用可能与PARP-1蛋白的表达抑制有关。 展开更多

关键词 前列腺癌 多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1 5-氨基异喹啉酮 依托泊苷 增殖

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高效液相色谱—质谱法测定泌尿系结石中的三聚氰胺 被引量：1

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作者 吴文起 王露萍 +6 位作者 欧莉莉 梁叶萍 麦赞林 李舒珏 单炽昌 袁坚 曾国华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期125-127,共3页

目的建立应用高效液相色谱—质谱法(LC/MS)检测泌尿系结石中三聚氰胺含量的方法。方法应用高效液相色谱—质谱法对17例因怀疑食用三聚氰胺污染奶粉在婴幼儿形成的泌尿系结石以及4例既往保存的成人尿酸结石进行三聚氰胺含量分析。采用正... 目的建立应用高效液相色谱—质谱法(LC/MS)检测泌尿系结石中三聚氰胺含量的方法。方法应用高效液相色谱—质谱法对17例因怀疑食用三聚氰胺污染奶粉在婴幼儿形成的泌尿系结石以及4例既往保存的成人尿酸结石进行三聚氰胺含量分析。采用正离子模式的电喷雾质谱检测。三聚氰胺最低检出限为0.1 mg/kg。结果 4例已知成人尿酸结石标本中均未检测到三聚氰胺,17例疑似标本中应用液相色谱—质谱联用仪分析后共4例标本中检测出三聚氰胺,含量浓度分别为0.8、0.5、1.2和64 mg/kg。结论高效液相色谱—质谱法准确度高、稳定性好,可以有效检测泌尿系结石中三聚氰胺含量,为进一步治疗和随访提供了帮助,但含三聚氰胺奶粉对患儿的长期影响还需进一步随访研究。 展开更多

关键词 三聚氰胺 泌尿系结石 儿童 高效液相色谱—质谱法

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PARP-1及其活性产物PAR在人前列腺癌组织中的表达及意义 被引量：1

4

作者 吴文起 朱寒亮 +4 位作者 梁叶萍 李舒珏 段小鹿 孔珍珍 曾国华 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2012年第6期348-349,354,共3页

目的探讨多聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerases,PARP]亚型PARP-1及其活性产物聚腺苷二磷酸核糖[Poly(ADP-ribose),PAR]在前列腺增生和前列腺癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测并比较PARP-1和PAR... 目的探讨多聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerases,PARP]亚型PARP-1及其活性产物聚腺苷二磷酸核糖[Poly(ADP-ribose),PAR]在前列腺增生和前列腺癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测并比较PARP-1和PAR在19例前列腺增生和38例前列腺癌组织中的表达,及其在高分化前列腺癌(Gleason评分≤6分)和低分化前列腺癌(Gleason评分≥9分)组织中的表达差异。结果与前列腺增生相比,PARP-1和PAR在前列腺癌组织中的表达阳性率均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);虽然在高分化与低分化前列腺癌组织中的表达阳性率无明显差异(P>0.05),但在低分化前列腺癌组织中的表达强阳性率明显低于高分化前列腺癌(P<0.05)。结论 PARP-1和PAR在前列腺癌组织的表达明显增加,为前列腺癌的诊断提供了参考,其与前列腺癌进展的相关性有待进一步研究。 展开更多

关键词 前列腺增生 前列腺肿瘤 多聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶 聚腺苷二磷酸核糖

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不同尿液保存方法对24h尿钙的影响 被引量：1

5

作者 欧莉莉 吴文起 +3 位作者 李舒珏 梁叶萍 杨东 曾国华 《临床医学工程》 2014年第4期425-427,共3页

目的探讨临床上对于24 h尿钙检测时尿液标本的最佳保存方法。方法收集22名志愿者的随机即时尿,标本分别进行不同处理方法:不加保存剂、加6 mol/L盐酸、加99%甲苯、加0.01 g麝香草酚,再分为常温与4℃两种保存温度,然后分3个时间段进行检... 目的探讨临床上对于24 h尿钙检测时尿液标本的最佳保存方法。方法收集22名志愿者的随机即时尿,标本分别进行不同处理方法:不加保存剂、加6 mol/L盐酸、加99%甲苯、加0.01 g麝香草酚,再分为常温与4℃两种保存温度,然后分3个时间段进行检测(即时、保存24 h及48 h),初步比较不同温度、不同的保存时间及不同保存剂对24 h尿钙的影响。结果在常温和4℃条件下,各种保存剂对尿钙离子的测定均无显著性差异。结论虽然各种保存尿液方法无显著性差异,但考虑患者需多次打开容器盖子留尿,我们建议使用甲苯常温保存24 h尿。 展开更多

关键词 24H尿 保存剂 尿钙

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过表达人SLC2A9基因的慢病毒载体对HK-2细胞尿酸转运功能的影响

6

作者 吴文正 段小鹿 +4 位作者 杨璧铖 李舒珏 梁叶萍 欧莉莉 曾国华 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2014年第8期531-535,共5页

目的构建含人SLC2A9基因的过表达慢病毒载体,探讨其对人肾脏近曲小管上皮细胞株HK-2尿酸转运功能的影响。方法 PCR反应扩增目的基因后连入慢病毒表达载体中构建重组载体pLEX-SLC2A9,使用PCR及测序的方法对其进行鉴定,并与辅助包装质粒... 目的构建含人SLC2A9基因的过表达慢病毒载体,探讨其对人肾脏近曲小管上皮细胞株HK-2尿酸转运功能的影响。方法 PCR反应扩增目的基因后连入慢病毒表达载体中构建重组载体pLEX-SLC2A9,使用PCR及测序的方法对其进行鉴定,并与辅助包装质粒共感染293T细胞。慢病毒颗粒感染HK-2细胞后,用PCR和Western blot检测SLC2A9基因的过表达效率,并检测SLC2A9过表达对其尿酸转运功能的影响。结果 PCR及测序结果表明重组慢病毒载体pLEX-SLC2A9的插入序列完全正确,重组慢病毒载体感染HK-2细胞后,细胞内的mRNA及蛋白水平增高,并且可以增强HK-2细胞对尿酸的转运。结论过表达SLC2A9基因后能显著增强HK-2细胞对尿酸的转运。 展开更多

关键词 SLC2A9 慢病毒 过表达 尿酸结石 HK-2细胞 尿酸转运

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PARP抑制剂5-AIQ对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC3的作用 被引量：3

7

作者 曾少华 曾国华 +3 位作者 李舒珏 梁叶萍 欧莉莉 吴文起 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1720-1722,共3页

目的探讨多聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerases,PARP]抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-Aminoisoquinolinone.HCl,5-AIQ),对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC3凋亡和增殖的作用。方法将PC3细胞株分组培养并应用PARP抑制剂5-AIQ... 目的探讨多聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerases,PARP]抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-Aminoisoquinolinone.HCl,5-AIQ),对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC3凋亡和增殖的作用。方法将PC3细胞株分组培养并应用PARP抑制剂5-AIQ处理后,流式细胞仪检测5-AIQ对PC3细胞株凋亡的影响;应用蛋白印迹法检测5-AIQ对PC3细胞内PARP表达的影响;用MTS法检测5-AIQ对PC3细胞增殖的影响,同时采用流式细胞仪观察5-AIQ处理PC3细胞后细胞凋亡的变化。结果与未经5-AIQ处理的前列腺癌细胞比较,5-AIQ能明显抑制前列腺癌细胞内PARP的蛋白表达;对前列腺癌细胞的增殖具有明显的抑制作用,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪分析显示,5-AIQ可引起细胞凋亡。结论 5-AIQ可以通过抑制细胞内PARP的表达,从而对细胞的增殖有明显抑制作用,并诱导细胞的凋亡。期望为雄激素非依赖性前列腺基因治疗提供一个新的方向。 展开更多

关键词 PARP 5-AIQ 前列腺癌 蛋白表达 细胞增殖与凋亡

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前列腺特异抗原对人前列腺癌细胞LNCaP生长的调节作用

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作者 徐建明 李逊 +2 位作者 何永忠 李舒珏 吴文起 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期690-692,共3页

目的通过降低人前列腺癌细胞系LNCaP细胞前列腺特异抗原(PSA)表达,探讨PSA与LNCaP细胞生长、增殖及迁移能力的关系。方法将针对PSA基因的特异性干扰RNA转入雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP(转染组),同时设有相应的阴性对照组。Western b... 目的通过降低人前列腺癌细胞系LNCaP细胞前列腺特异抗原(PSA)表达,探讨PSA与LNCaP细胞生长、增殖及迁移能力的关系。方法将针对PSA基因的特异性干扰RNA转入雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP(转染组),同时设有相应的阴性对照组。Western blot法检测PSA及雄激素受体(AR)蛋白的表达;AlamarBlue法和流式细胞术分别检测细胞的增殖和凋亡;划痕实验检测细胞迁移能力。结果 Western blot结果显示,与阴性对照组相比,转染组的PSA和AR表达明显下降,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);Alarmar Blue法和流式细胞术结果分别显示,转染组的细胞生长受到明显抑制,且观察到更强的细胞凋亡;划痕实验结果显示转染组细胞迁移能力明显减弱。结论 PSA可能通过调节AR表达而调节雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP的生长、增殖、凋亡及迁移能力。 展开更多

关键词 前列腺特异抗原 雄激素受体 细胞凋亡 细胞增殖

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RNAi沉默PSA基因对人前列腺癌细胞系LNCaP生长的影响

9

作者 徐建明 何永忠 +9 位作者 雷鸣 吴文起 李逊 黄锦昆 杨后猛 桂志明 钟文 李天 曾国华 李舒珏 《海南医学》 CAS 2012年第1期1-3,共3页

目的研究运用RNA干扰技术沉默PSA基因后对人前列腺癌细胞系LNCaP细胞产生的影响。方法构建针对PSA基因的小分子干扰RNA(PSA-siRNA),将前列腺癌LNCaP系进行分组,设PSA-siRNA转染组、阴性对照组、转染液组(只由转染试剂进行转染实验)和对... 目的研究运用RNA干扰技术沉默PSA基因后对人前列腺癌细胞系LNCaP细胞产生的影响。方法构建针对PSA基因的小分子干扰RNA(PSA-siRNA),将前列腺癌LNCaP系进行分组,设PSA-siRNA转染组、阴性对照组、转染液组(只由转染试剂进行转染实验)和对照组(不添加任何转染试剂)进行实验。应用蛋白印迹法检测PSA的变化,并通过MTT法和流式细胞技术检测LNCaP细胞的调亡和细胞增殖方面的变化。结果蛋白印迹法检测结果显示,与阴性对照组、转染液和对照组比较,应用PSA-siRNA处理48h后的LNCaP细胞株,PSA的表达明显降低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法和流式细胞仪检测示,转染组的细胞生长抑制率为27.5%,且观察到更强的细胞调亡(19.3%)。结论运用RNA干扰技术沉默PSA基因可以有效抑制LNCaP细胞中PSA基因的表达,进而抑制LNCaP细胞的生长与增殖,并可有效诱导细胞调亡。 展开更多

关键词 PSA RNA干扰 LNCAP细胞 细胞调亡 细胞增殖

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多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶在前列腺癌LNCaP细胞株中的表达及意义 被引量：3

10

作者 吴文起 曾少华 +3 位作者 李舒珏 梁叶萍 欧莉莉 曾国华 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期839-842,共4页

目的探讨多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[Poly（ADP—ribose）polymease，PARP]对雄激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞株增殖和凋亡的影响。方法将LNCaP细胞株分组培养并应用PARP抑制剂5一氨基异喹啉酮（5-AIQ）处理，蛋白印迹法检测LNCaP细胞内P... 目的探讨多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[Poly（ADP—ribose）polymease，PARP]对雄激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞株增殖和凋亡的影响。方法将LNCaP细胞株分组培养并应用PARP抑制剂5一氨基异喹啉酮（5-AIQ）处理，蛋白印迹法检测LNCaP细胞内PARP表达的变化，四甲基偶氮唑盐法检测PARP表达抑制后对LNCaP细胞增殖的影响及其时间效应和剂量效应的关系，流式细胞仪检测5-AIQ对LNCaP细胞凋亡的影响。结果与空白组相比，浓度为500及1000μmol／L的5-AIQ处理48h后LNCaP细胞内PARP的表达分别降低至65．3％和22．4％，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。PARP表达抑制后，LNCaP细胞增殖也受到明显抑制。随着药物浓度依次增加，细胞增殖抑制率逐渐增加，处理24h后细胞增殖抑制率从（2．85±2．03）％升至（41．23±5．42）％，处理48h后细胞增殖抑制率从（19．80±4．34）％升至（55．67±1．47）％，处理72h后细胞增殖抑制率从（25．67±0．63）％升至（65．81±1．62）％，组间抑制率差异均有统计学意义（P〈0．05）；同样，当药物浓度维持不变时，随着作用时间延长，细胞增殖抑制率也明显升高，细胞增殖的抑制作用与5-AIQ剂量增加和作用时间延长呈正相关关系。浓度为500及1000μmoL／L的5-AIQ处理48h所诱导的LNCaP细胞的早期、晚期和总凋亡率分别为23．6％、4．6％、28．2％和31．8％、6．3％、38．1％，与空白组相比差异均有统计学意义（P〈0．05），且随着剂量增加，诱导细胞凋亡的作用增强。结论抑制PARP的表达可以明显抑制LNCaP细胞增殖，并诱导LNCaP细胞的凋亡。PARP有望成为前列腺癌治疗的一个新靶点。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 癌 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶 抑制 增殖

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Regucalcin在大鼠肾草酸钙结石形成过程中的表达 被引量：1

11

作者 杨东 蓝创歆 +5 位作者 陈康 陈东 曾滔 李舒珏 段小鹿 吴文起 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期1640-1642,共3页

目的观察Regucalcin（RGN）在草酸钙结石大鼠肾脏和肾小管上皮细胞中的表达特点，探讨其在草酸钙结石形成过程中的作用及机制。方法采用1%乙二醇＋1%氯化铵自由饮用的传统方法构建大鼠肾草酸钙结石模型，通过偏光显微镜观察大鼠肾组织... 目的观察Regucalcin（RGN）在草酸钙结石大鼠肾脏和肾小管上皮细胞中的表达特点，探讨其在草酸钙结石形成过程中的作用及机制。方法采用1%乙二醇＋1%氯化铵自由饮用的传统方法构建大鼠肾草酸钙结石模型，通过偏光显微镜观察大鼠肾组织的晶体，并使用Western blot、实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）、免疫组织化学（IHC）法检测RGN在草酸钙结石模型大鼠中的表达变化。使用不同浓度的一水草酸钙晶体（COM）刺激大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E，通过Western blot和FQ-PCR方法检测RGN的表达。结果偏光显微镜观察显示：造模组全部大鼠肾组织切片肾小管内均有草酸钙晶体沉积，而对照组大鼠肾脏未发现晶体。Western blot法检测大鼠肾皮质RGN的表达发现，造模组大鼠肾组织RGN表达明显低于正常对照组，其mRNA的相对表达量为6%（t＝21.459，P＝0.000）；IHC法也同样显示造模组大鼠肾皮质RGN的表达降低，而且以晶体黏附处的肾小管上皮细胞降低尤为明显。使用COM处理大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E后，检测RGN的表达发现，在不同浓度（0、25、50、100 μg/cm2）COM晶体处理后，RGN的表达均明显降低。COM 100 μg/cm2组mRNA的相对表达量为47.4%（t＝4.285，P＝0.013）。结论RGN有可能参与了大鼠肾草酸钙结石的形成和进展的调控。 展开更多

关键词 草酸钙结石 REGUCALCIN 肾小管上皮细胞 损伤与黏附

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不同时间单肺通气对兔肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α、白介素-8和肺组织表面活性蛋白-A表达的影响 被引量：1

12

作者 蓝岚 古妙宁 +3 位作者 叶靖 李舒珏 吴文起 岑燕遗 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2012年第9期593-596,602,共5页

目的观察不同时间单肺通气（onelungventilation，OLV）对兔支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子电tumornecrosisfactor-a，TNF咄）和白介素-8（interleukin-8，IL-8），以及肺组织表面活性蛋白-A（surfactantprotein-A，SP-A）表达的影响... 目的观察不同时间单肺通气（onelungventilation，OLV）对兔支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子电tumornecrosisfactor-a，TNF咄）和白介素-8（interleukin-8，IL-8），以及肺组织表面活性蛋白-A（surfactantprotein-A，SP-A）表达的影响。方法选择新西兰大白兔60只。按完全随机分组方法随机均分为C组和01、02、03、04、05组（每组10只）。01～05组建立右肺OLV，分别给予OLVl、2、3、4、5h。各组中5只兔子完成OLV后立即处死，另5只兔子拔除各种管道自然养活24h，分别测定左右肺灌洗液中细胞数、TNF诎、IL-8浓度和肺组织SP-A。结果OLV时，与C组比较，03～05组左右肺细胞数均大于4．64±0．79（P〈O．01）；04和05组二氧化碳分压（PaC02）高于43．6±5．7（P〈0．01）；03～05组左肺TNF值均升高大于101．90±18．65（P〈0．01），04～05组左肺IL-8值升高大于256．16±30.32（P〈0．01），05组右肺TNF-a、IL-8值升高（P〈0．01）。24h后，04～05组左肺细胞数仍高于7．5±1．9（P〈0．01）；左肺IL-8值在05组为214．60±76．74（P〈0．01）。左肺与右肺间的TNF-a和IL-8值在OLV时与24h后各时点比较均无统计学差异（乃0．05）。与c组比较，01～03组左肺SP-A表达均大于13．84＋3．47（P〈0．01）、01～05组右肺SP-A表达均大于5．51±1．48（P〈0．01），04～05组SP-A表达减少；24h后01-05组左右肺SP-A表达均大于12．17±4．75（P〈0．01）。结论随着OLV时间延长，肺炎症反应明显及肺SP-A表达减少；在OLV超过3h，即使恢复双肺通气24h后，肺损伤仍难以完全修复，应避免OLV时间过长。 展开更多

关键词 单肺通气 炎症因子 支气管肺泡灌洗 表面活性蛋白-A

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PARPl特异性siRNA对前列腺癌PC3细胞增殖的影响及其机制研究

13

作者 吴文起 孔珍珍 +2 位作者 朱寒亮 段小鹿 李舒珏 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期130-134,共5页

目的研究多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1（PARPl）特异性小分子干扰RNA（siRNA）对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞株增殖的影响并初步探讨其作用机制。方法设计合成3条PARPl特异性siRNA序列，进行脂质体转染后，通过RT—PCR、蛋白质印迹法... 目的研究多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1（PARPl）特异性小分子干扰RNA（siRNA）对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞株增殖的影响并初步探讨其作用机制。方法设计合成3条PARPl特异性siRNA序列，进行脂质体转染后，通过RT—PCR、蛋白质印迹法检测其对PARPl的干扰效果，筛选出最佳干扰效果的2条siRNA序列；通过单溶液细胞增殖检测法检测干扰PC3细胞内源性PARPl表达对细胞增殖的影响，并检测细胞内Akt及其下游GSK3B活化水平的变化。结果与空白对照组相比，转染阴性对照序列对PARPl的mRNA和蛋白表达水平无明显影响，而转染RNA干扰序列1706、2003和2907均可以明显干扰PARPl的表达，其中mRNA抑制率分别为（52．07±4．65）％、（44．38±9．15）％和（22．05±6．65）％，蛋白抑制率分别为（86．86±4．94）％、（83．30±7．18）％和（63．05±10．19）％。RNA干扰序列1706和2003对PC3细胞的增殖抑制率分别为（38．93±3．87）％和（34．93±1．21）％，并可以下调细胞内Akt、GSK3B的磷酸化水平。结论PARPl特异性siRNA可以明显干扰PC3细胞内源性PARPl的表达并抑制细胞增殖，该抑制作用与Akt的活化抑制以及其下游GSK3B的激活有关。 展开更多

关键词 聚ADP核糖聚合酶类 RNA干扰 前列腺肿瘤 细胞增殖

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体外诱导可分解草酸成人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的研究

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作者 朱玮 袁坚 +2 位作者 雷鸣 李舒珏 刘向崇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1203-1206,共4页

目的体外培养并转染了产甲酸草酸杆菌（Ox-F）草酸分解基因h℃和oxe的成人骨髓间充质干细胞（hMSCs—fre—oxe），并诱导其向肝细胞分化。方法体外培养转染了草酸分解基因的P4代hMSCs，并通过含40μg/L肝细胞生长因子（HGF）＋10μg／L... 目的体外培养并转染了产甲酸草酸杆菌（Ox-F）草酸分解基因h℃和oxe的成人骨髓间充质干细胞（hMSCs—fre—oxe），并诱导其向肝细胞分化。方法体外培养转染了草酸分解基因的P4代hMSCs，并通过含40μg/L肝细胞生长因子（HGF）＋10μg／L胰岛素样生长因子（FGF）-4所组成的培养液诱导其向肝细胞分化。在分化过程中通过显微镜观察分化细胞形态变化。以实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）、Westernblot技术和免疫细胞化学技术检测细胞内肝细胞特异标志物甲胎蛋白（AFP）、白蛋白（ALB）、细胞角蛋白-18（CK-18）和目的基因frc、OXC及其产物融合蛋白mye—FCOAT、flag—OCOAD的表达。成熟肝细胞L-02和转染了空病毒载体的hMSCs（hMSCs．vector）分别作为阳性对照组和阴性对照组。结果可分解草酸的hMSCs—frc—OXC在体外可成功培养，细胞经上述培养液诱导后，细胞形态逐渐变短，变成多角形。Real—timePCR可检测在诱导组细胞中AFP、ALB、CK—18和草酸分解基因frc、OXe表达，而未经诱导细胞组AFP、ALB、CK-18则未表达，未转染目的基因的细胞组fre、oxe未见表达。免疫细胞化学检测诱导28d后细胞可表达ALB，未经诱导细胞组ALB表达呈阴性。Westernblot技术检测诱导第14、28天细胞中AFP、CK-18表达较未诱导组明显增加（P〈0．05），与成熟肝细胞相似，并表达myc-FCOAT、flag—OCOAD，而未转染目的基因细胞组表达呈阴性。结论含有草酸分解基因的hMSCs—frc—OXC体外通过一定条件诱导可以向肝细胞方向分化，经诱导分化后细胞仍可成功表达frc和oxe基因及其产物。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 细胞分化 肝细胞 frc基因 oxc基因

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荧光原位杂交在尿路上皮癌诊断中的临床应用价值

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作者 吴文起 赵振华 +3 位作者 梁叶萍 欧莉莉 李舒珏 曾国华 《中国医师进修杂志》 2012年第29期3-5,共3页

目的探讨荧光原位杂交（FISH）在诊断尿路上皮癌中的临床价值。方法对27例疑似尿路上皮癌患者尿液中的脱落细胞进行FISH检查，并同期进行经内窥镜活组织病理学检查。将FISH检查结果和经内窥镜活组织病理学检查结果进行比较，分析FISH检... 目的探讨荧光原位杂交（FISH）在诊断尿路上皮癌中的临床价值。方法对27例疑似尿路上皮癌患者尿液中的脱落细胞进行FISH检查，并同期进行经内窥镜活组织病理学检查。将FISH检查结果和经内窥镜活组织病理学检查结果进行比较，分析FISH检查尿路上皮癌的敏感度、特异度，并综合检查费用评价FISH检查用于诊断尿路上皮癌的临床价值。结果27例患者中，经内窥镜活组织病理学检查结果阳性11例，FISH检查结果阳性9例，其中7例包括在经内窥镜活组织病理学检查结果阳性患者中，FISH检查敏感度为63．6％（7／11），特异度为87．5％（14／16），而FISH检查费用（3100元）为经内窥镜活组织病理学检查费用（1000元）的3．1倍。结论与经内窥镜活组织病理学检查结果相比，FISH检查诊断尿路上皮癌的敏感度及特异度均较低，且检查成本高，故其在临床中的应用价值尚需进一步证实。 展开更多

关键词 原位杂交 荧光 泌尿系肿瘤 内窥镜 活组织检查

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肠道菌群在肠-肾轴中对草酸钙结石形成影响的研究进展 被引量：3

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作者 陈思豪 雷敏 +6 位作者 李南曦 黄欣果 陈诗琪 黄文昊 安凌悦 李舒珏 吴文起 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期713-716,共4页

草酸钙结石是肾结石的主要类型,其形成与草酸和钙的代谢密切相关。肠道菌群是定居在人类肠道内的正常菌群,对机体内多种代谢具有重要的调节作用。既往认为肠道菌群中产甲酸草酸杆菌是草酸钙结石形成的保护因素,但近年来发现,调节机体草... 草酸钙结石是肾结石的主要类型,其形成与草酸和钙的代谢密切相关。肠道菌群是定居在人类肠道内的正常菌群,对机体内多种代谢具有重要的调节作用。既往认为肠道菌群中产甲酸草酸杆菌是草酸钙结石形成的保护因素,但近年来发现,调节机体草酸代谢的细菌不仅限于产甲酸草酸杆菌。草酸钙结石患者具有与健康人群不同的肠道菌群,其通过肠-肾轴调节草酸在机体内的代谢,影响草酸钙肾结石的形成。本文阐述草酸钙结石患者肠道菌群特点,总结肠道菌群在草酸钙结石形成中的潜在功能及未来可能的临床应用。 展开更多

关键词 肾结石 草酸钙 肠道菌群 肠-肾轴 治疗

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感染性结石患者尿液细菌的菌谱及耐药性特征 被引量：1

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作者 林俊颜 张穗仙 +6 位作者 欧旭东 邹志宏 曾滔 李舒珏 范钧泓 曾国华 吴文起 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期739-743,共5页

目的分析感染性结石患者中段尿细菌谱特点及耐药性情况。方法回顾性分析广州医科大学附属第一医院2016年9月至2018年9月收治的254例感染性结石患者的临床资料。男101例,女153例。年龄(51.5±12.3)岁。合并高血压病58例(22.8%),糖尿... 目的分析感染性结石患者中段尿细菌谱特点及耐药性情况。方法回顾性分析广州医科大学附属第一医院2016年9月至2018年9月收治的254例感染性结石患者的临床资料。男101例,女153例。年龄(51.5±12.3)岁。合并高血压病58例(22.8%),糖尿病17例(6.7%),肾积水195例(76.8%)。结石负荷1443.5(660.8,2837.5)mm2。收集中段尿行细菌培养鉴定和药敏试验。所有患者均行经皮肾镜取石术。结果本研究254例,中段尿细菌培养阳性89例(35.0%),阴性165例(65.0%)。阳性组和阴性组的尿白细胞阳性例数分别为77例(86.5%)和83例(50.3%),尿亚硝酸盐阳性例数分别为57例(64.0%)和24例(14.5%),术后发热分别为23例(25.8%)和24例(14.5%),差异均有统计学意义(P<0.05)。中段尿细菌培养检出14种细菌,检出率最高的3种细菌依次为大肠埃希菌[38.2%(34/89)]、奇异变形杆菌[15.7%(14/89)]和铜绿假单胞菌[11.2%(10/89)]。药敏试验结果显示,上述3种细菌对头孢唑啉、头孢呋辛钠、头孢呋辛酯、氨苄西林和复方新诺明的耐药率均>40.0%;大肠埃希菌和铜绿假单胞菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率≥40.0%;大肠埃希菌和奇异变形杆菌对美罗培南、亚胺培南、厄他培南、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星等的耐药率均<10.0%;大肠埃希菌对呋喃妥因和替加环素的耐药率,以及奇异变形杆菌对妥布霉素、氨曲南和头孢西丁的耐药率均<10%;铜绿假单胞菌对头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素和氨曲南等药物的耐药率均<10%。结论感染性结石患者中段尿细菌培养检出率最高的细菌依次是大肠埃希菌、奇异变形杆菌和铜绿假单胞菌,均对氨苄西林、复方新诺明和部分头孢菌素类药物的耐药率较高,对部分β-内酰胺酶抑制剂复合制剂和碳青霉烯类等抗菌药物的耐药率较低;大肠埃希菌和铜绿假单胞菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率较高。 展开更多

关键词 肾结石 感染性结石 中段尿培养 尿路细菌 耐药性

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