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FSH、LH对体外培养的牦牛卵泡颗粒细胞凋亡及E_2、P分泌功能的影响 被引量:14
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作者 徐庚全 樊江峰 +3 位作者 杨世华 李谷月 赵华山 余四九 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期932-939,共8页
为了探明促卵泡素(Follicle stimulating hormone,FSH)和促黄体素(Luteinizing hormone,LH)对体外培养的牦牛卵泡颗粒细胞凋亡及甾体激素分泌的影响,揭示促性腺激素调控卵泡发育的机理,采用细胞培养和显微观察技术,建立了牦牛卵泡颗粒... 为了探明促卵泡素(Follicle stimulating hormone,FSH)和促黄体素(Luteinizing hormone,LH)对体外培养的牦牛卵泡颗粒细胞凋亡及甾体激素分泌的影响,揭示促性腺激素调控卵泡发育的机理,采用细胞培养和显微观察技术,建立了牦牛卵泡颗粒细胞体外培养体系,观察分析牦牛卵泡颗粒细胞体外培养的生长特征和凋亡的形态特征;采用流式细胞技术(Flow cytometry,FCM)和放射免疫测定技术(Radioimmunoassay,RIA),分析了添加不同浓度的FSH和LH对牦牛卵泡颗粒细胞凋亡和雌二醇(Estradiol,E2)、孕酮(Progesterone,P)分泌的影响。结果显示,体外培养的牦牛卵泡颗粒细胞呈现出典型的上皮样细胞生长特性,具有典型的'S'形生长曲线,体外培养的牦牛颗粒细胞偶尔可见细胞核浓缩、边集化、染色质固缩、内质网疏松等凋亡的形态特征。在添加0.050~5.000IU·mL-1FSH,随着浓度的增加,凋亡细胞比例逐渐降低,E2和P水平呈上升趋势;在添加浓度达到5.000IU·mL-1时,凋亡细胞比例最低降到7.3%,与对照组差异极显著(P<0.01)。低浓度的LH(0.050~0.500IU·mL-1),可以抑制颗粒细胞凋亡,促使E2和P分泌增加;高浓度的LH(5.000IU·mL-1)则促使颗粒细胞凋亡,对颗粒细胞分泌E2和P的影响不明显。这一结果表明,FSH和LH可通过调节牦牛颗粒细胞的凋亡及分泌功能,在调控卵泡发育及排卵的过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 牦牛 促性腺激素 颗粒细胞 细胞凋亡 激素分泌
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Oct 4在牦牛卵母细胞及早期胚胎发育过程中的表达 被引量:11
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作者 赵天 李谷月 +5 位作者 潘阳阳 李月琴 陈平 温泽星 崔燕 余四九 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期577-584,共8页
旨在通过检测转录因子Oct 4(Octamer-binding transcription factor 4)在牦牛(Bos grunneins)卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中的表达,分析Oct 4在卵母细胞与体外受精胚胎发育过程中的作用。本研究收集牦牛卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus... 旨在通过检测转录因子Oct 4(Octamer-binding transcription factor 4)在牦牛(Bos grunneins)卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中的表达,分析Oct 4在卵母细胞与体外受精胚胎发育过程中的作用。本研究收集牦牛卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complexes,COCs)对其进行体外成熟培养,生产体外受精(In vitro fertilization,IVF)胚胎,评估各时期胚胎发育能力。采用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和间接免疫荧光染色方法从基因和蛋白水平检测COCs和胚胎各时期Oct 4的表达与分布。结果表明,1)2~4-细胞胚胎、5~8-细胞胚胎、9~16-细胞胚胎和囊胚的发育率分别为(64.66±1.76)%、(43.33±1.76)%、(24.66±2.40)%和(9.33±0.67)%。2)COCs和胚胎各发育时期均可检测到Oct 4基因,其中9~16-细胞胚胎表达最高,依次为囊胚、2~4-细胞胚胎和5~8-细胞胚胎,未成熟COCs和成熟COCs中表达最低。3)免疫荧光染色结果显示,OCT 4蛋白主要分布在COCs和体外受精胚胎的细胞质中,在细胞核中表达较弱。免疫荧光IOD值分析可得,9~16-细胞胚胎IOD值最高,依次为囊胚、2~4-细胞胚胎,5~8-细胞胚胎最低。综上表明,Oct 4在牦牛卵母细胞和早期胚胎发育过程中的各个时期均有表达,且不同时期该基因的表达量存在差异。由此说明Oct 4在9~16-细胞胚胎时期可能参与胚胎合子型基因转录激活的调控过程,在囊胚时期可能参与维持内细胞团全能性的过程。 展开更多
关键词 OCT 4 牦牛 体外受精 胚胎发育
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温和冷应激及复温对牦牛卵巢颗粒细胞的影响 被引量:4
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作者 杨琨 张倩 +4 位作者 李谷月 潘阳阳 余四九 何俊峰 崔燕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期738-745,共8页
细胞冷应激反应是一个复杂的过程,它包括低温本身的应激阶段和复温后的应激阶段。本研究以牦牛卵巢颗粒细胞为研究对象,利用实时荧光定量PCR、Western blot技术,分析温和冷处理1、5d及复温1、2、4、8及24h条件下,细胞内CIRBP、HSP70及P5... 细胞冷应激反应是一个复杂的过程,它包括低温本身的应激阶段和复温后的应激阶段。本研究以牦牛卵巢颗粒细胞为研究对象,利用实时荧光定量PCR、Western blot技术,分析温和冷处理1、5d及复温1、2、4、8及24h条件下,细胞内CIRBP、HSP70及P53变化规律。结果显示,细胞在25℃培养5d,然后通过复温至37℃,会影响细胞生理状态以及诱导细胞应激反应。CIRBP的表达量在25℃温和冷处理第1天开始上升,并且在复温后24h左右恢复到正常水平。HSP70的表达量在37℃复温培养后逐步上升,复温8h出现峰值,随后下降。P53mRNA表达水平在复温培养4h出现峰值,随后下降,并且其在CIRBP及HSP70mRNA高表达时,均有明显的下降。结果表明,低温会诱导细胞CIRBP mRNA和蛋白表达水平的上升;HSP70能够被冷应激后的复温诱导;CIRBP和HSP70都具有抗应激损害和细胞凋亡的作用。这些数据将为亚低温和复温在各种研究和治疗领域的应用提供参考。 展开更多
关键词 牦牛 卵巢颗粒细胞 温和冷应激 复温 CIRBP HSP70 P53
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黄体生成素受体基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达模式 被引量:3
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作者 胡威 崔燕 +4 位作者 潘阳阳 李谷月 何翃闳 熊力 余四九 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期232-237,共6页
旨在检测黄体生成素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达。实验选取青海健康的处于卵泡期和黄体期的2岁龄雌性牦牛各3头,根据黄牛LHR基因序列5'端和3'端的保守序列设计特异性引... 旨在检测黄体生成素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达。实验选取青海健康的处于卵泡期和黄体期的2岁龄雌性牦牛各3头,根据黄牛LHR基因序列5'端和3'端的保守序列设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法分析牦牛发情周期不同阶段,生殖系统中LHR基因的相对表达量。结果显示,LHR基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达量存在差异,卵巢和输卵管中卵泡期LHR基因的表达量高于黄体期,黄体期子宫中LHR基因的表达量高于卵泡期。研究表明牦牛在发情周期不同阶段生殖系统中LHR基因的表达量存在差异,提示LHR在牦牛的繁殖过程中对生殖系统具有重要的调节作用。 展开更多
关键词 牦牛 黄体生成素受体 生殖系统 实时荧光定量PCR 基因表达
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多元文化音乐教育在高校音乐教育中的应用 被引量:5
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作者 李谷月 《黑龙江科学》 2017年第22期100-101,共2页
多元文化音乐教育对进一步提高学生们的音乐素养,陶冶学生们的艺术情操有着十分重要的现实意义。近年来,越来越多的高校将关注的重点放在了多元文化音乐教育模式的研究上。结合个人从事音乐教育的实践工作经验与相关文献,就多元文化音... 多元文化音乐教育对进一步提高学生们的音乐素养,陶冶学生们的艺术情操有着十分重要的现实意义。近年来,越来越多的高校将关注的重点放在了多元文化音乐教育模式的研究上。结合个人从事音乐教育的实践工作经验与相关文献,就多元文化音乐教育在高校音乐教育中的应用展开粗浅探讨。 展开更多
关键词 多元文化 音乐教育 现状 应用
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牦牛Cyclin D1基因的克隆及IGF-I对其在睾丸支持细胞表达的影响 被引量:4
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作者 王亚营 潘阳阳 +6 位作者 叶小琳 李谷月 何翃闳 王萌 樊江峰 崔燕 余四九 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期310-317,共8页
本研究旨在克隆牦牛(Bos grunniens)Cyclin D1基因的CDS序列,分析其生物学特性,研究胰岛素样生长因子-I(Insulin-like growth factor-I,IGF-I)对Cyclin D1mRNA和蛋白在睾丸支持细胞(Sertoli cell,SC)中表达的影响。采集5~8月龄健康牦牛... 本研究旨在克隆牦牛(Bos grunniens)Cyclin D1基因的CDS序列,分析其生物学特性,研究胰岛素样生长因子-I(Insulin-like growth factor-I,IGF-I)对Cyclin D1mRNA和蛋白在睾丸支持细胞(Sertoli cell,SC)中表达的影响。采集5~8月龄健康牦牛的睾丸样品进行SC的分离培养,用RT-PCR技术克隆牦牛Cyclin D1基因,用ORF Finder、MEGA7.0和DNAMAN对其进行生物信息学分析,并采用免疫荧光染色技术对Cyclin D1蛋白在SC中的表达进行定位分析。向体外培养的SC中加入不同浓度(0(对照组)、25、50、100、150ng·mL^(-1))的IGF-I,采用实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法检测Cyclin D1基因和蛋白的表达。结果表明:1)牦牛Cyclin D1基因(GenBank登录号:KY 420723)与其他物种的同源性均较高。2)Cyclin D1蛋白在SC胞核中高表达,为核蛋白。3)浓度为25和150ng·mL^(-1)IGF-I,Cyclin D1mRNA表达量与对照组差异不显著(P>0.05),浓度为50和100ng·mL^(-1)IGF-I时,Cyclin D1mRNA表达量显著高于其他各组(P<0.05);IGF-I浓度为100ng·mL^(-1),Cyclin D1蛋白表达量与对照组差异不显著(P>0.05),25、50和150ng·mL^(-1) IGF-I组Cyclin D1蛋白表达量显著高于对照组(P<0.05);IGF-I浓度为50ng·mL^(-1)时,Cyclin D1mRNA和蛋白表达量均为最高,分别为对照组的1.65和1.20倍。综上表明,Cyclin D1基因在进化过程中高度保守;IGF-I可调控SC中Cyclin D1的表达,其最佳作用浓度为50ng·mL^(-1)。 展开更多
关键词 牦牛 睾丸支持细胞 细胞周期蛋白D1 胰岛素样生长因子-I
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广西某奶牛场乳房炎病原菌的流行调查 被引量:4
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作者 王玲 郭小权 +9 位作者 胡国良 刘佩 黄橙 李麟 李谷月 程素芳 阮业召 李庆庆 陈盈盈 刘平 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期307-313,共7页
【目的】探索奶牛乳房炎的流行情况,分析病原菌的分布、变化及其规律,进一步阐明其引发病因,为本病的防治提供参考。【方法】通过临床诊断、加州乳房炎测试法(CMT)、革兰氏染色、菌液PCR、基因测序等方法,对某奶牛场奶牛乳房炎的发病率... 【目的】探索奶牛乳房炎的流行情况,分析病原菌的分布、变化及其规律,进一步阐明其引发病因,为本病的防治提供参考。【方法】通过临床诊断、加州乳房炎测试法(CMT)、革兰氏染色、菌液PCR、基因测序等方法,对某奶牛场奶牛乳房炎的发病率、及病原菌种类况以药物治疗情进行分析。【结果】临床型奶牛乳房炎的年平均发病率为8.3%,其隐性乳房炎乳占总乳区的40%。奶牛场长期使用头孢噻呋钠,林可霉素,庆大霉素,青霉素,链霉素等抗生素进行治疗,治疗效果不明显。乳房炎中分离得到的假丝酵母菌和毕赤酵母菌分别占真菌中的73.1%和25%,其中热带念珠菌占38.5%;大肠杆菌和链球菌分别占细菌中的22.7%和9.1%。【结论】该奶牛场的奶牛乳房炎的年发病率及隐性乳房炎乳较高,真菌比细菌感染率要显著,这可能与长期使用抗生素治疗、气候和牛场环境等因素密切有关。 展开更多
关键词 广西 奶牛 乳房炎 细菌 真菌
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类维生素A和β-胡萝卜素类添加剂对杜洛克公猪精液品质的影响 被引量:4
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作者 阮业召 程素芳 +3 位作者 邹振兴 李麟 李谷月 刘平 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第10期39-42,共4页
为了研究类维生素A和β-胡萝卜素类添加剂对杜洛克种公猪精液品质的影响,试验选择无明显差异的杜洛克公猪45头,随机分为3组,对照组饲喂基础日粮,M组、N组分别在基础日粮中添加类维生素A 2 000 IU/kg、β-胡萝卜素3 g/(头·d),试验期... 为了研究类维生素A和β-胡萝卜素类添加剂对杜洛克种公猪精液品质的影响,试验选择无明显差异的杜洛克公猪45头,随机分为3组,对照组饲喂基础日粮,M组、N组分别在基础日粮中添加类维生素A 2 000 IU/kg、β-胡萝卜素3 g/(头·d),试验期为3个月,每月采精1次,进行精液品质检测分析。结果表明:M组、N组种公猪的采精量、精子密度、精子畸形率显著提高(P<0.05); M组种公猪的精子密度、原精活力、稀释后精液活力显著提高(P<0.05),而N组种公猪的采精量、持续射精时间显著提高(P<0.05)。 展开更多
关键词 类维生素A Β-胡萝卜素 添加剂 杜洛克公猪 精液品质
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不同浓度补铁剂对母仔猪补铁效果的影响 被引量:3
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作者 程素芳 李谷月 +2 位作者 阮业召 刘鑫 刘平 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期324-331,共8页
为比较两种不同浓度补铁剂对妊娠后期母猪、哺乳仔猪和断奶仔猪生长性能及血液中血红蛋白(Hb)等的影响,选取江西某种猪场胎龄、膘情相近及体质健康妊娠85日龄的母猪30头,按每组10头份分为对照组(C组)、高浓度补铁(M组)、普通复合铁制剂(... 为比较两种不同浓度补铁剂对妊娠后期母猪、哺乳仔猪和断奶仔猪生长性能及血液中血红蛋白(Hb)等的影响,选取江西某种猪场胎龄、膘情相近及体质健康妊娠85日龄的母猪30头,按每组10头份分为对照组(C组)、高浓度补铁(M组)、普通复合铁制剂(N组)三组,试验约51 d,观察妊娠后期的母猪、哺乳仔猪、断奶仔猪的生长性能等性状。结果显示:M组和N组妊娠后期的母猪和仔猪毛色和肤色、Hb含量、仔猪健康程度、初生仔猪头均质量及断奶仔猪窝质量极显著高于C组(P?0.01),结果表现为:M组>N组?C组。试验结果表明M补铁剂在母仔猪补铁效果有较强的优越性,可为母仔猪补铁剂的选择及使用提供一定的参考。 展开更多
关键词 高浓度补铁 复合铁 母猪 哺乳仔猪 断奶仔猪
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虚拟仿真技术在兽医产科实验教学中的实践与探索 被引量:5
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作者 陈卫 刘佩 +7 位作者 李谷月 李麟 庄煜 幸程鸿 黄橙 郭小权 胡国良 刘平 《江西畜牧兽医杂志》 2020年第4期5-8,共4页
兽医产科实验教学是畜牧兽医学专业学生的一门入门课程,也是学习和运用其它课程的基础。为改善高校兽医产科实验教学条件,探索实验教学方法、更新实验教学内容、提高实验教学水平,把虚拟仿真技术引入兽医产科实验教学已成为一种发展趋... 兽医产科实验教学是畜牧兽医学专业学生的一门入门课程,也是学习和运用其它课程的基础。为改善高校兽医产科实验教学条件,探索实验教学方法、更新实验教学内容、提高实验教学水平,把虚拟仿真技术引入兽医产科实验教学已成为一种发展趋势。本文介绍了兽医产科新的教学现状,阐明了虚拟仿真技术在兽医产科实验教学中的应用。 展开更多
关键词 兽医产科 虚拟仿真 实验教学
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高校音乐教育对大学生能力培养的影响
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作者 李谷月 《黑龙江科学》 2017年第19期106-107,共2页
音乐是一门艺术课程,它对于培养学生的高尚情操有着一定的作用。音乐教育可以影响大学生的道德情感,是与学生沟通的桥梁。然而,我国各大高校对音乐教育不够重视,分析高校音乐教育对大学生能力培养的影响,为培养综合型人才贡献力量。
关键词 高校音乐教育 大学生 能力培养 鉴赏美 创造美 情感品质
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TNF-α对牦牛卵母细胞HIF-1α和HSP70的表达及后续胚胎发育能力的影响 被引量:2
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作者 许涛 潘阳阳 +5 位作者 何翃闳 李谷月 张慧珠 赵凌 崔燕 余四九 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1198-1207,共10页
旨在研究肿瘤坏死因子(TNF-α)对牦牛卵母细胞体外成熟和对低氧诱导因子1α(HIF-1α)、热休克蛋白70(HSP70)的表达以及后续胚胎发育能力的影响。在牦牛卵母细胞体外成熟培养液中添加不同浓度的TNF-α(最终浓度分别为0、10、25、50 ng... 旨在研究肿瘤坏死因子(TNF-α)对牦牛卵母细胞体外成熟和对低氧诱导因子1α(HIF-1α)、热休克蛋白70(HSP70)的表达以及后续胚胎发育能力的影响。在牦牛卵母细胞体外成熟培养液中添加不同浓度的TNF-α(最终浓度分别为0、10、25、50 ng·mL^-1),牦牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)培养成熟后,统计其卵母细胞成熟率及体外受精后早期胚胎的发育率,采用RT-PCR扩增牦牛 HIF-1α、 HSP 70基因,采用实时荧光定量PCR(qRT-RCR)、蛋白免疫印迹法(Western blotting)和免疫荧光染色技术检测HIF-1α、HSP70在基因和蛋白水平的表达情况。结果发现:1)成熟液中加入TNF-α,卵母细胞的成熟率提高,且随着TNF-α浓度的升高,卵母细胞的成熟率、卵裂率和囊胚率逐渐升高,当TNF-α浓度为 25 ng·mL^-1 时,卵母细胞的成熟率和卵裂率达到最高,分别为84.98%和66.85%,而囊胚率也达到了21.48%,均显著高于对照组( P <0.05);2)随着TNF-α浓度的升高, HIF-1α的表达量逐渐降低,对照组 HIF-1α的表达量极显著高于其他组(P <0.01),50 ng·mL^-1 TNF-α组 HIF-1α的表达量极显著低于其他组(P <0.01),HIF-1α在卵丘细胞和卵母细胞上均有表达;3)25 ng·mL^-1 TNF-α组的HSP 70表达量最高,极显著高于其他组(P <0.01),而当TNF-α达到50 ng·mL^-1 时,HSP 70的表达量最低。综上表明,在牦牛卵母细胞体外成熟过程中,TNF-α明显提高了卵母细胞的发育能力,同时还诱导了HSP 70的表达,抑制了HIF-1α的表达,为今后探讨TNF-α、 HIF-1α和HSP70在牦牛生殖过程中发挥的作用以及对胚胎发育的影响提供理论依据。 展开更多
关键词 牦牛 卵母细胞 肿瘤坏死因子(TNF-α) 低氧诱导因子1α(HIF-1α) 热休克蛋白70(HSP70) 表达
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内窥镜诊疗技术在兽医中应用
13
作者 刘佩 李庆庆 +6 位作者 郭凤萍 方玮乐 李谷月 李麟 刘平 郭小权 胡国良 《江西畜牧兽医杂志》 2021年第5期1-2,共2页
内窥镜技术是一门新兴的微创方法,具有创伤小、疼痛轻、恢复快及对外观影响小等优点,其包括宫腔镜、腹腔镜、胃镜、肠镜等。自问世以来在医学界得到了广泛而普遍的应用,在动物呼吸道、消化道、骨盆腔器官、关节等兽医领域的诊断和治疗... 内窥镜技术是一门新兴的微创方法,具有创伤小、疼痛轻、恢复快及对外观影响小等优点,其包括宫腔镜、腹腔镜、胃镜、肠镜等。自问世以来在医学界得到了广泛而普遍的应用,在动物呼吸道、消化道、骨盆腔器官、关节等兽医领域的诊断和治疗方面取得了满意的效果。本文针对内窥镜技术在兽医临床实践中的应用进行综述,为动物疾病的临床诊断提供参考。 展开更多
关键词 内窥镜 动物 检查
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翻转课堂在兽医产科学中实践教学探讨 被引量:2
14
作者 郭凤萍 刘佩 +6 位作者 黄橙 李麟 李谷月 胡睿铭 郭小权 胡国良 刘平 《江西畜牧兽医杂志》 2021年第3期8-10,共3页
兽医产科学是一门研究动物繁殖生理、繁殖技术和繁殖疾病的临床学科,是动物医学专业的必修专业课之一。近年来,我国的畜牧生产结构发生了显著变化,因此,为了与现代动物的养殖生产结构相适应,其课程教学方式改革也成为了目前亟待解决之... 兽医产科学是一门研究动物繁殖生理、繁殖技术和繁殖疾病的临床学科,是动物医学专业的必修专业课之一。近年来,我国的畜牧生产结构发生了显著变化,因此,为了与现代动物的养殖生产结构相适应,其课程教学方式改革也成为了目前亟待解决之需。翻转课堂是一种新型的教学方式,提倡以学生为主体,强调开放性、多样性的现代教学理念。本文结合兽医产科学课程的自身特点,探讨翻转课堂引入兽医产科学教学的实践策略。 展开更多
关键词 翻转课堂 兽医产科学 实践教学
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一例重度昏迷犬难产病例分析 被引量:1
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作者 赵玉兰 刘平 +2 位作者 李谷月 黄露佳 黄爱民 《现代畜牧兽医》 2019年第9期47-49,共3页
笔者在南昌联合宠物医院实习时,接诊一难产病例,病犬出现深度昏迷。在对其进行问诊、触诊血气以及血常规检查后,诊断该犬在生产时出现难产并致其昏迷,还出现严重的离子失调和酸碱失衡的情况。该犬通过合理手术治疗和悉心的术后护理后,... 笔者在南昌联合宠物医院实习时,接诊一难产病例,病犬出现深度昏迷。在对其进行问诊、触诊血气以及血常规检查后,诊断该犬在生产时出现难产并致其昏迷,还出现严重的离子失调和酸碱失衡的情况。该犬通过合理手术治疗和悉心的术后护理后,预后良好出院。 展开更多
关键词 难产 剖腹产
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牛Bcl-2基因生物信息学功能预测分析
16
作者 丁嘉怡 郭慧玲 +3 位作者 罗一鸣 康文林 李康 李谷月 《黑龙江动物繁殖》 2021年第3期1-8,共8页
为了预测Bcl-2基因生物学功能在细胞凋亡和自噬交叉性调节中发挥的作用,试验采用BioEdit软件、NCBI、ExPASy-ProtParam tool、TMHMM Server v.2.0、SPLIT 4.0、SignalP 4.1 Server、PSORTⅡ、PSIpred-MEMSAT 3、SWISS–MODEL生物信息学... 为了预测Bcl-2基因生物学功能在细胞凋亡和自噬交叉性调节中发挥的作用,试验采用BioEdit软件、NCBI、ExPASy-ProtParam tool、TMHMM Server v.2.0、SPLIT 4.0、SignalP 4.1 Server、PSORTⅡ、PSIpred-MEMSAT 3、SWISS–MODEL生物信息学分析手段,对牛Bcl-2基因及编码蛋白质的结构和特征进行预测分析。结果表明:牛Bcl-2基因可编码229个氨基酸残基,构成可溶酸性亲水性蛋白质,蛋白质公式为C_(1132)H_(1717)N_(311)O_(316)S_(9),原子总数为3485,理论等电点为6.65;半衰期为30 h;不稳定性指数为58.20;分类为不稳定蛋白;脂肪指数为76.77;亲水性的平均值(GRAVY)为-0.133,预测Bcl-2蛋白为亲水蛋白;含有跨膜区且不存在信号肽,为非分泌跨膜蛋白;分布于细胞质、核、内质网、高尔基体、线粒体、分泌系统的囊泡、细胞骨架及液泡中;主要由51.53%的α-螺旋、6.99%的β-转角、6.55%的延伸链与34.93%的无规卷曲组成,其三级结构预测结果与二级结构预测结果基本一致。说明牛的Bcl-2基因在哺乳动物中具有高度保守性,Bcl-2蛋白主要分布在细胞膜结构上,为酸性亲水跨膜结构蛋白,C端具有疏水结构区,与调节细胞凋亡功能有重要关联。 展开更多
关键词 BCL-2基因 BCL-2蛋白 蛋白质分析 生物信息学
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“新农科”背景下虚实结合的兽医产科学教学创新
17
作者 方玮乐 刘佩 +7 位作者 蒋晨晰 李谷月 侯小露 高晓娜 李麟 陈书鹏 郭小权 刘平 《当代畜牧》 2024年第3期53-56,共4页
在“新农科”背景下,运用虚实结合、线上线下混合的兽医产科学教学模式,帮助教师更直观地呈现教学内容,为学生提供操作简易的学习平台,降低了恶劣环境、异常天气、疫情管制等不可抗力因素对教学效果产生的负面影响。对学生自主学习习惯... 在“新农科”背景下,运用虚实结合、线上线下混合的兽医产科学教学模式,帮助教师更直观地呈现教学内容,为学生提供操作简易的学习平台,降低了恶劣环境、异常天气、疫情管制等不可抗力因素对教学效果产生的负面影响。对学生自主学习习惯和实践操作能力的培养具有重要意义,为实践类课程开展数字化教学提供参考。 展开更多
关键词 新农科 兽医产科学 虚实结合 教学创新
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HSPA9B在牦牛体外受精胚胎中的表达
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作者 吕鹏 潘阳阳 +6 位作者 崔燕 李秦 何翃闳 张译夫 李谷月 樊江峰 余四九 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1529-1534,共6页
本试验旨在研究热休克蛋白70-9B(heat shock 70 000protein-9B,HSPA9B)在牦牛早期体外受精胚胎中的表达差异及其与体外受精胚胎发育的关系。在正常生理条件下,采集青海高原牦牛卵巢,捡取质量良好的卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyt... 本试验旨在研究热休克蛋白70-9B(heat shock 70 000protein-9B,HSPA9B)在牦牛早期体外受精胚胎中的表达差异及其与体外受精胚胎发育的关系。在正常生理条件下,采集青海高原牦牛卵巢,捡取质量良好的卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs),进行体外受精和体外培养,采取实时荧光定量(RT-qPCR)和间接免疫荧光技术,检测HSPA9B在不同时期体外受精胚胎中的表达差异及其蛋白分布。实时荧光定量结果表明,HSPA9B在2~4细胞期胚胎中的相对表达量,分别是在桑椹胚和囊胚中的6.693 4、5.227 4倍,HSPA9B在4~8细胞期胚胎中的相对表达量分别是在2~4细胞期胚胎、桑椹胚和囊胚中的1.136 8、9.089 7和5.937 2倍。间接免疫荧光染色结果表明,在2~4细胞期胚胎、4~8细胞期胚胎和桑椹胚中,胞核HSPA9B的相对表达量较胞质弱,在囊胚中胞核HSPA9B的相对表达量较胞质强。由此得出结论:通过基因水平研究,发现HSPA9B在牦牛早期各时期的体外受精胚胎中存在表达差异,HSPA9B在2~4、4~8细胞期胚胎中的相对表达量与其在桑椹胚和囊胚中的相对表达量差异性极显著(P〈0.01),提示:可能是HSPA9B在胚胎早期发育中发挥重要作用;通过蛋白水平研究,发现HSPA9B在2~4细胞期胚胎、4~8细胞期胚胎和桑椹胚中,胞核HSPA9B的表达量较胞质的表达弱,在囊胚中胞核HSPA9B的表达量较胞质的表达强,结果表明,在体外培养的环境应激条件下,牦牛体外受精胚胎发育至囊胚时,HSPA9B蛋白的分布可能发生了移位。 展开更多
关键词 牦牛 HSPA9B 体外受精胚胎 实时荧光定量 间接免疫荧光
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HSP27在黄体期牦牛主要生殖器官中表达差异的研究 被引量:6
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作者 何翃闳 潘阳阳 +7 位作者 杨雪 崔燕 吕鹏 樊江峰 陈平 温泽星 李谷月 余四九 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期861-866,共6页
为了探讨正常生理条件下牦牛热休克蛋白27(HSP27)在黄体期牦牛主要生殖器官中的表达差异,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测了HSP27基因在黄体期牦牛卵巢、输卵管和子宫中的相对表达量,用Western-blot和免疫组织化学SP法研究了HSP27蛋... 为了探讨正常生理条件下牦牛热休克蛋白27(HSP27)在黄体期牦牛主要生殖器官中的表达差异,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测了HSP27基因在黄体期牦牛卵巢、输卵管和子宫中的相对表达量,用Western-blot和免疫组织化学SP法研究了HSP27蛋白在黄体期牦牛卵巢、输卵管和子宫中的表达量和组织内分布。RT-qPCR分析表明,HSP27基因在黄体期牦牛卵巢、输卵管和子宫中均有表达,其中卵巢中的表达量分别是输卵管和子宫组织的1.03倍和4.63倍。免疫组织化学结果表明,牦牛卵泡膜内层、颗粒层、输卵管黏膜上皮、子宫内膜上皮和子宫腺中均有HSP27阳性表达。Western-blot和免疫组织化学结果表明,HSP27蛋白在黄体期牦牛各主要生殖器官组织中表达差异极显著(P<0.01),其中在卵巢中表达量最高,在子宫中表达量最低。本试验结果表明,HSP27在黄体期牦牛的各个主要生殖器官中存在表达差异,这为进一步研究HSP27在哺乳动物生殖过程中发挥的作用提供了理论依据。 展开更多
关键词 热休克蛋白27 牦牛 免疫组织化学 实时荧光定量PCR
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肉鸡肺动脉组织中MEOX2基因克隆与生物信息学分析 被引量:1
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作者 黄橙 邵珊 +9 位作者 郭小权 刘佩 王玲 邹振兴 李谷月 李麟 阮业召 程素芳 陈佳玲 刘平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1528-1535,1570,共9页
克隆构建肉鸡间充质同源盒蛋白2(mesenchyme homeobox,MEOX2)重组质粒pUCm-T-MEOX2,并对其进行生物信息学分析。通过提取肉鸡肺动脉组织基因组RNA,并反转录为cDNA,利用PCR方法扩增MEOX2基因片段,并将目的片段通过TA克隆到pUCm-T载体上... 克隆构建肉鸡间充质同源盒蛋白2(mesenchyme homeobox,MEOX2)重组质粒pUCm-T-MEOX2,并对其进行生物信息学分析。通过提取肉鸡肺动脉组织基因组RNA,并反转录为cDNA,利用PCR方法扩增MEOX2基因片段,并将目的片段通过TA克隆到pUCm-T载体上获得重组质粒,测序后对其进行生物信息学分析。结果显示,成功获得pUCm-T-MEOX2重组质粒,目的基因片段为819 bp,可编码273个氨基酸,其序列同源性与原鸡无差异;其存在45个磷酸化位点和1个N-糖基化修饰位点;经预测MEOX2蛋白亚细胞定位于细胞核,无信号肽;MEOX2蛋白为亲水性蛋白且无跨膜结构;二级结构预测为α-螺旋、延伸链、β-转角和无规卷曲,分别占22.79%,9.93%,3.68%,63.60%;三级结构主要由无规卷曲和α-螺旋组成;其有11个B细胞抗原表位。本试验结果可为MEOX2基因抗体制备奠定良好的基础,进而为肉鸡腹水综合征的肺动脉血管重构病理检测及基因药物治疗提供有力的依据。 展开更多
关键词 肉鸡腹水综合征 肺动脉高压 MEOX2基因 分子克隆 生物信息学分析
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