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黄芪-莪术-重楼配伍调控巨噬细胞极化对结直肠癌细胞增殖、迁移影响 被引量：1
1
作者 杜利莉 王钢 +5 位作者 梁研 赵凡 应佳辉 尹刚 唐德才 卞勇 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期137-144,共8页
目的探讨黄芪-莪术-重楼配伍对巨噬细胞极化的影响及其抑制结直肠癌细胞增殖、迁移的作用机制。方法使用佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)刺激THP-1细胞建立M2型巨噬细胞极化模型。实验... 目的探讨黄芪-莪术-重楼配伍对巨噬细胞极化的影响及其抑制结直肠癌细胞增殖、迁移的作用机制。方法使用佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)刺激THP-1细胞建立M2型巨噬细胞极化模型。实验分为M0组(PMA处理)、M2组(PMA+IL-4处理)、M2+黄芪-莪术-重楼组(PMA+IL-4+黄芪-莪术-重楼配伍处理)。CCK-8检测黄芪-莪术-重楼配伍冻干粉对巨噬细胞活力影响;qPCR和Western blot检测巨噬细胞极化标志物、谷氨酰胺酶(Glutaminase,GLS)mRNA和蛋白表达;ELISA检测细胞上清白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;CCK-8和Transwell实验检测黄芪-莪术-重楼配伍干预巨噬细胞的培养上清,即条件培养基(Conditioned medium,CM),对结直肠癌细胞HCT116增殖和迁移能力影响。结果与M0组相比,M2组IL-10、甘露糖受体(Mannose receptor,CD206)、精氨酸酶1(Arginase 1,ARG1)、GLS mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.001),巨噬细胞分泌IL-10、TGF-β水平显著升高(P<0.01,P<0.001);与M2组相比,M2+黄芪-莪术-重楼配伍组IL-10、CD206、ARG1、GLS mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)mRNA表达水平显著升高(P<0.01),细胞上清中IL-10、TGF-β水平显著降低(P<0.05,P<0.01),TNF-α水平显著升高(P<0.01)。CCK-8和Transwell结果显示,与M0-CM组相比,M2-CM组促进HCT116细胞增殖和迁移(P<0.01,P<0.001),M2+黄芪-莪术-重楼-CM组较M2-CM组显著抑制HCT116细胞增殖并使细胞迁移数显著减少(P<0.01,P<0.001)。结论黄芪-莪术-重楼配伍可通过调控巨噬细胞极化,抑制结直肠癌细胞增殖、迁移,其机制可能与谷氨酰胺代谢关键酶GLS表达变化有关。 展开更多
关键词 黄芪-莪术-重楼配伍 结直肠癌 迁移 巨噬细胞极化 GLS
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NOVA1在肿瘤发生、发展中作用的研究进展
2
作者 杜利莉 吴刘成 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期311-313,共3页
神经-肿瘤腹侧抗原1(neuro-oncological ventral antigen 1,NOVA1)是神经特异性剪接因子,在神经系统发育、功能维持中具有重要作用。近年,多项研究发现,在肺癌、肝癌、结直肠癌等肿瘤中,NOVA1可促进癌细胞增殖、迁移、侵袭,与预后密切... 神经-肿瘤腹侧抗原1(neuro-oncological ventral antigen 1,NOVA1)是神经特异性剪接因子,在神经系统发育、功能维持中具有重要作用。近年,多项研究发现,在肺癌、肝癌、结直肠癌等肿瘤中,NOVA1可促进癌细胞增殖、迁移、侵袭,与预后密切相关。该文就NOVA1在肿瘤发生、发展中作用的最新研究进展进行综述,探讨其调控机制和临床价值。 展开更多
关键词 肿瘤 NOVA1 剪接 预后 文献综述
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B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞增殖、凋亡及迁移能力实验研究 被引量：1
3
作者 景瑾 张海骏 +2 位作者 杜利莉 姬桂青 邵义祥 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第3期213-219,共7页
目的探讨B6-Co小鼠出生时眼睑闭合不全的形成机制。方法分离、培养并鉴定B6-Co小鼠及其背景品系C57BL/6J(B6)眼睑成纤维细胞,CCK8法检测B6-Co、 B6小鼠眼睑成纤维细胞的增殖水平,Annexin V-FITC法检测B6-Co、B6小鼠眼睑成纤维细胞的凋... 目的探讨B6-Co小鼠出生时眼睑闭合不全的形成机制。方法分离、培养并鉴定B6-Co小鼠及其背景品系C57BL/6J(B6)眼睑成纤维细胞,CCK8法检测B6-Co、 B6小鼠眼睑成纤维细胞的增殖水平,Annexin V-FITC法检测B6-Co、B6小鼠眼睑成纤维细胞的凋亡水平,Transwell检测B6-Co、B6小鼠眼睑成纤维细胞的迁移能力。结果成功培养出B6-Co、B6小鼠眼睑成纤维细胞,B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的增殖能力和迁移能力极显著低于B6小鼠(P<0.01),B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的凋亡水平极显著高于B6小鼠(P<0.01)。结论 B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞的增殖能力、凋亡水平及迁移能力均与B6小鼠有极显著差异。 展开更多
关键词 B6-Co小鼠 成纤维细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移
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SMA小鼠中相关剪接因子表达与SMN2外显子7列入比率关系研究
4
作者 杜利莉 马钰 +2 位作者 柏文清 吴刘成 邵义祥 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第5期54-63,共10页
目的研究SMN2外显子7在SMA小鼠不同组织的列入,筛选与其相关的剪接因子。方法通过RT-PCR和非变性PAGE电泳分析在神经及非神经组织中SMN2外显子7列入比例,通过QPCR筛选分析剪接因子在大脑和脊髓与非神经组织中的mRNA水平。结果SMN2外显子... 目的研究SMN2外显子7在SMA小鼠不同组织的列入,筛选与其相关的剪接因子。方法通过RT-PCR和非变性PAGE电泳分析在神经及非神经组织中SMN2外显子7列入比例,通过QPCR筛选分析剪接因子在大脑和脊髓与非神经组织中的mRNA水平。结果SMN2外显子7在大脑和脊髓组织中列入比例显著高于非神经组织,QPCR筛选显示Nova1/2在大脑和脊髓中的表达显著高于大部分非神经组织。通过差异分析显示,Srsf7/9及Nova2在SMAⅠ型小鼠脊髓中的表达显著高于对照小鼠。结论神经组织中,Srsf7/9和Nova1/2基因高表达与SMN2外显子7列入比例显著提高呈正相关,剪接因子SRSF7/9及NOVA1/2可能参与SMN2基因的剪接调控。 展开更多
关键词 SMA小鼠 剪接因子 表达 SMN2 外显子列入
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鸡肌腱干细胞的分离培养与初步鉴定
5
作者 杨纤纤 吴亚芳 +2 位作者 张海骏 杜利莉 邵义祥 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期17-20,285,286,共6页
为了建立鸡肌腱干细胞的分离培养体系和鉴定方法,试验使用Ⅰ型胶原酶消化20日龄鸡胚肌腱组织,低密度接种得到鸡肌腱干细胞,用结晶紫染色细胞克隆团块,选择50,500,5 000个/cm^2密度接种7~10 d,镜下观察细胞形态,用细胞计数仪测定细胞增... 为了建立鸡肌腱干细胞的分离培养体系和鉴定方法,试验使用Ⅰ型胶原酶消化20日龄鸡胚肌腱组织,低密度接种得到鸡肌腱干细胞,用结晶紫染色细胞克隆团块,选择50,500,5 000个/cm^2密度接种7~10 d,镜下观察细胞形态,用细胞计数仪测定细胞增殖能力,用分化诱导试剂对细胞进行成脂与成骨分化诱导,采用油红O和碱性磷酸酶进行染色鉴定。结果表明:原代细胞及传代细胞为长梭形,接种7~10 d后开始形成克隆团块,细胞生长曲线呈S型。500个/cm^2的细胞密度接种细胞克隆能力与增殖能力最强;将该密度接种细胞消化后,按1×10~4个/cm^2接种,分别对其进行成脂与成骨诱导,可发现成脂分化过程中有脂滴形成,油红O染色呈阳性;成骨分化过程中有钙结节形成,碱性磷酸酯酶染色呈阳性。说明消化20日龄鸡胚肌腱组织可成功分离出鸡肌腱干细胞,克隆增殖能力强,且具有分化多种细胞的潜能。 展开更多
关键词 鸡 肌腱干细胞 分离 分化 诱导 鉴定
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miR-204对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学特性的影响
6
作者 吴刘成 杜利莉 +4 位作者 王静 殷海琳 马超 蒋茂荣 邵义祥 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第14期1881-1884,共4页
目的研究microRNA-204(miR-204)对乳腺癌细胞生物学特性的影响。方法在人乳腺癌细胞MDA-MB-231中转染miR-204模拟物和抑制剂后48h,实时荧光PCR(Real-time PCR)检测细胞中miR-204表达变化。流式细胞仪分析miR-204对MDA-MB-231细胞增殖、... 目的研究microRNA-204(miR-204)对乳腺癌细胞生物学特性的影响。方法在人乳腺癌细胞MDA-MB-231中转染miR-204模拟物和抑制剂后48h,实时荧光PCR(Real-time PCR)检测细胞中miR-204表达变化。流式细胞仪分析miR-204对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡的影响。采用Transwell迁移小室分析法检测miR-204对MDA-MB-231细胞迁移的影响。结果实时荧光PCR分析:miR-204模拟物和抑制剂效果显著,与正常对照比较差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞仪分析:与正常对照相比,miR-204模拟物组G1期细胞数目明显减少(P<0.01),G2/M期细胞数目明显增多(P<0.01),而miR-204抑制剂的作用则相反,G1期细胞数目明显增多(P<0.01),G2/M期细胞数目明显减少(P<0.01);miR-204模拟物组明显促进细胞凋亡(P<0.01),而抑制剂组明显抑制细胞凋亡(P<0.01)。Transwell迁移小室分析:miR-204模拟物组穿过Transwell迁移小室的细胞明显减少(P<0.01),而抑制剂组则相反,细胞数目明显增多(P<0.01)。结论 miR-204对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有负调控作用,能够抑制乳腺癌细胞增殖和迁移,促进癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 细胞凋亡 微RNAS miR-204 MDA-MB-231 细胞生物学特性
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