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再生基因4(REG4)真核表达载体的构建及其蛋白在HEK293T细胞中的表达、纯化
1
作者 徐杨 杜惠芬 +4 位作者 李克生 柴丹丹 石晓玲 连晓雯 张学良 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第4期35-39,共5页
目的构建再生基因4(regenerating gene 4,REG4)的真核表达载体,转染人胚肾细胞293T(human embryonic kidney 293T cells,HEK 293T),获得重组人再生胰岛衍生蛋白IV(regenerating islet-derived protein IV,Reg IV)。方法根据NCBI数据库R... 目的构建再生基因4(regenerating gene 4,REG4)的真核表达载体,转染人胚肾细胞293T(human embryonic kidney 293T cells,HEK 293T),获得重组人再生胰岛衍生蛋白IV(regenerating islet-derived protein IV,Reg IV)。方法根据NCBI数据库REG4基因序列进行基因优化、合成,将其克隆至pCDNA3.4载体并进行双酶切和测序鉴定,通过转染试剂聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)将pCDNA3.4-REG4质粒瞬时转染至HEK 293T细胞(实验组),同时以pEGFP-C1质粒作为转染对照组,未转染重组质粒的HEK 293T细胞作为空白对照组。荧光显微镜观察转染对照组转染效率,分别收集实验组及空白对照组细胞和细胞培养液上清,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)与免疫印迹试验(Western-Blot,WB)检测Reg IV蛋白表达水平。通过镍柱及丙烯葡聚糖凝胶S-400(Sephacryl S-400)柱进行蛋白纯化,SDS-PAGE及WB对纯化后重组蛋白进行鉴定。结果经测序和双酶切鉴定,重组质粒pCDNA3.4-REG4构建成功。转染对照组(pEGFP-C1质粒)荧光显微镜观察结果显示转染效率约50%,表明转染成功。WB结果显示仅在实验组(pCDNA3.4-REG4质粒)的细胞中检测到RegIV蛋白。镍柱纯化时目的蛋白无法与镍柱填料有效结合,SephacrylS-400凝胶柱层析纯化获得了此重组蛋白。结论成功构建了REG4基因真核表达载体并在HEK 293T细胞中成功表达,为深入研究Reg IV蛋白的作用机理及开发潜在的抗癌靶向药物奠定了基础。 展开更多
关键词 再生基因4 再生胰岛衍生蛋白Ⅳ 真核表达 人胚肾细胞293T 瞬时转染 蛋白纯化
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胰蛋白酶抑制剂体外抑制肿瘤细胞降解细胞外基质的研究 被引量：7
2
作者 杜惠芬 李克生 +1 位作者 郭红云 李雪萍 《中国预防医学杂志》 CAS 2004年第2期138-139,共2页
国内已有文献报道,牛肺胰蛋白酶抑制剂对B16黑色素瘤实验性肺转移及Lewis肺癌有抑制作用.肿瘤侵袭与转移机制较复杂,是一个多环节,多步骤的过程,涉及细胞间,细胞与基质间的作用,以及多种基因改变等过程,其中肿瘤细胞穿透细胞外基质尤为... 国内已有文献报道,牛肺胰蛋白酶抑制剂对B16黑色素瘤实验性肺转移及Lewis肺癌有抑制作用.肿瘤侵袭与转移机制较复杂,是一个多环节,多步骤的过程,涉及细胞间,细胞与基质间的作用,以及多种基因改变等过程,其中肿瘤细胞穿透细胞外基质尤为重要.利用可降解细胞外基质的蛋白酶抑制剂来抑制肿瘤的侵袭与转移已引起人们极大的兴趣,其中纤溶酶抑制剂--胰蛋白酶抑制剂也倍受关注.已有研究证明,尿胰蛋白酶抑制剂对乳腺癌细胞降解细胞外基质有明显地抑制作用[1].本实验对胰蛋白酶抑制剂抗转移机制进行了研究. 展开更多
关键词 胰蛋白酶抑制剂 肿瘤细胞 细胞外基质 肿瘤侵袭 肿瘤抑制
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抗人β_2微球蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：4
3
作者 杜惠芬 李克生 +2 位作者 连晓雯 袁明 叶文华 《中国医药导报》 CAS 2008年第16期36-37,共2页
目的:制备抗人β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)单克隆抗体并对其进行鉴定。方法:用高纯度的β2-MG免疫BALB/C小鼠,按常规技术制备针对β2-MG不同抗原表位的单克隆抗体,并对其进行纯化,测定抗体亚类、抗原表位分析等。结果:筛选... 目的:制备抗人β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)单克隆抗体并对其进行鉴定。方法:用高纯度的β2-MG免疫BALB/C小鼠,按常规技术制备针对β2-MG不同抗原表位的单克隆抗体,并对其进行纯化,测定抗体亚类、抗原表位分析等。结果:筛选出10株抗人β2-MG杂交瘤细胞株,ELISA间接法证实这组单克隆抗体仅与β2微球蛋白反应,而与其他蛋白无交叉反应,IgG亚类鉴定6株为IgG1,2株为IgG2a,1株为IgA,1株为IgM。结论:获得特异性的抗人β2微球蛋白单克隆抗体,为试剂盒的开发研究奠定基础。 展开更多
关键词 Β2微球蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定
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在A股市场使用市销率系列指标的实证分析 被引量：10
4
作者 杜惠芬 平仕涛 《中央财经大学学报》 CSSCI 北大核心 2005年第10期35-38,共4页
市销率指标同市盈率指标一样能够反映中国股票市场的部分特性。但是历史检验结果不稳定,这说明单一利用市销率作为选股指标不完善。本文在分析中国股票市场特征的基础上,运用实证检验方法,证明低市销率和低市盈率相结合的选股指标体系,... 市销率指标同市盈率指标一样能够反映中国股票市场的部分特性。但是历史检验结果不稳定,这说明单一利用市销率作为选股指标不完善。本文在分析中国股票市场特征的基础上,运用实证检验方法,证明低市销率和低市盈率相结合的选股指标体系,可以获得明显的超额收益。这说明中国股票市场的收益-成长特性,因此,双低策略是基于目前中国股市特点的、比较合适的选股指标体系。 展开更多
关键词 股票市场 市销率 选股
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公司理财中的行为金融分析 被引量：6
5
作者 杜惠芬 《生产力研究》 CSSCI 2004年第5期49-50,71,共3页
现代财务理论吸收心理学、行为科学、决策科学等相关成果 ,注重对财务主体决策过程的探索 ,逐步发展成了一门新的学科———行为财务学。行为财务的理论研究和实践给转轨过程中的我国公司理财活动提供了理论指引 ,我国公司的理财活动也... 现代财务理论吸收心理学、行为科学、决策科学等相关成果 ,注重对财务主体决策过程的探索 ,逐步发展成了一门新的学科———行为财务学。行为财务的理论研究和实践给转轨过程中的我国公司理财活动提供了理论指引 ,我国公司的理财活动也为行为金融理论的研究提供了丰富的素材。本文主要针对我国公司理财实践中最典型的“异象” ,借助已有的行为金融理论和心理实验发现 ,解释公司行为的“非理性”必然 ,寻找公司理财决策行为的合理性基点———制度基础和市场依据。 展开更多
关键词 公司 理财行为 中国 行为金融分析 资本结构 股息政策
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市场有效性对公司理财决策的影响 被引量：3
6
作者 杜惠芬 《中央财经大学学报》 CSSCI 北大核心 2004年第9期52-54,共3页
根据市场有效性理论 ,任何人都不可能利用内幕信息和超级信息分析系统对市场进行预测。现实中 ,公司管理者显然拥有关于他们所在公司的内幕信息 ,他们具有预测所在公司股票的能力。市场自身的发育水平和管理决策者对市场的看法 ,将决定... 根据市场有效性理论 ,任何人都不可能利用内幕信息和超级信息分析系统对市场进行预测。现实中 ,公司管理者显然拥有关于他们所在公司的内幕信息 ,他们具有预测所在公司股票的能力。市场自身的发育水平和管理决策者对市场的看法 ,将决定公司理财决策的内容和结果。 展开更多
关键词 市场有效性 盈余管理 积极的公司理财
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中国金融制度变革的地区差异研究 被引量：1
7
作者 杜惠芬 《经济问题》 CSSCI 北大核心 2002年第5期26-28,共3页
由于经济增长与金融成长有极强的内生关联 ,中国东部与中西部经济发展的地带性差异决定了金融体系的分布格局和发展层次。从面上看 ,随着发达地区经济的发展和金融的深化 ,优势要素会由区域内向区域外扩散和辐射 ,在一定程度上改造落后... 由于经济增长与金融成长有极强的内生关联 ,中国东部与中西部经济发展的地带性差异决定了金融体系的分布格局和发展层次。从面上看 ,随着发达地区经济的发展和金融的深化 ,优势要素会由区域内向区域外扩散和辐射 ,在一定程度上改造落后地区的经济 -金融因素 ,区域金融的发展空间得以扩展 ,从而逐步形成统一的金融市场。从点上看 ,民营经济的快速发展和民间金融对民营经济的内生性金融支持 。 展开更多
关键词 中国 金融制度 地区差异 金融变革 金融机构 民间金融 民营经济
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改善股权结构 激活民间资本 被引量：2
8
作者 杜惠芬 《中央财经大学学报》 CSSCI 2000年第2期13-16,共4页
从放权让利、承包、租赁和抓大放小,到破产、兼并、出售和股份化,国有企业必将经历一个从量到质、由表及里的改革深化过程。本文通过对国有企业改革的过程和缺陷的分析和反思,提出在建立健全民间资本利益导向机制的基础上引入民间资本,... 从放权让利、承包、租赁和抓大放小,到破产、兼并、出售和股份化,国有企业必将经历一个从量到质、由表及里的改革深化过程。本文通过对国有企业改革的过程和缺陷的分析和反思,提出在建立健全民间资本利益导向机制的基础上引入民间资本,形成多元化的股权格局,从而,最终确立有效率的社会主义市场经济的微观基础。 展开更多
关键词 股权结构 民间资本 利益导向机制 国有企业
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构建我国个人信用体系保障机制——韩国“坏银行”重整制度考察之思考 被引量：1
9
作者 杜惠芬 《经济问题》 CSSCI 北大核心 2005年第8期61-63,共3页
我国个人消费信贷近几年的发展十分迅速,但是在个人消费信贷的快速发展中,银行由于个人不良信贷所引发的不良债权比重逐年上升,而且信用环境不良有恶化这一问题的趋势。个人信用制度的建设、个人不良信贷资产的处置和我国个人信用安全... 我国个人消费信贷近几年的发展十分迅速,但是在个人消费信贷的快速发展中,银行由于个人不良信贷所引发的不良债权比重逐年上升,而且信用环境不良有恶化这一问题的趋势。个人信用制度的建设、个人不良信贷资产的处置和我国个人信用安全体系的构建,已经成为摆在我们面前的现实问题。韩国资产管理公司在处置信用卡公司不良债权中的“坏银行”重整制度,构成了韩国金融安全网络的重要组成部分,这一制度设计值得我们借鉴。 展开更多
关键词 个人消费信贷 个人信用安全体系 银行不良资产处置
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禽流感检测技术研究进展 被引量：3
10
作者 杜惠芬 李克生 连晓雯 《中国卫生产业》 2011年第9期113-115,共3页
本文对禽流感主要检测诊断技术,包括病毒分离鉴定、免疫学检测技术和分子生物学检测技术及其进展进行了综述,以期待对禽流感的防治工作有所裨益。
关键词 禽流感 检测技术
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韩国和智利融资制度改革对中国融资制度改革的启示 被引量：1
11
作者 杜惠芬 《生产力研究》 CSSCI 2002年第3期81-83,83,共4页
学习和借鉴是成功的捷径。本文通过考察韩国和智利经济金融改革的全过程 ,寻找两国成功的经验和失败的教训 ,对中国金融改革的深化是一种有益的启示。
关键词 韩国 金融改革 中国 金融监管 融资制度 政府干预
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血清和尿液β2-MG检测对肿瘤化疗患者早期肾损伤的诊断意义 被引量：1
12
作者 杜惠芬 徐杨 +4 位作者 李克生 江秀娟 柴丹丹 张瑞君 连晓雯 《甘肃医药》 2018年第1期15-17,共3页
目的:评价β2-MG检测在肿瘤化疗患者早期肾损伤诊断的临床意义。方法:用β2-MG金标检测试剂盒对125份肿瘤化疗患者血清样本、113份肿瘤化疗患者尿液样本,67份非化疗肿瘤患者血清样本和63份非化疗肿瘤患者尿液样本进行检测,同时采用胶乳... 目的:评价β2-MG检测在肿瘤化疗患者早期肾损伤诊断的临床意义。方法:用β2-MG金标检测试剂盒对125份肿瘤化疗患者血清样本、113份肿瘤化疗患者尿液样本,67份非化疗肿瘤患者血清样本和63份非化疗肿瘤患者尿液样本进行检测,同时采用胶乳增加免疫比浊法检测血清Cys C,用酶法检测血清样本Scr和BUN,超正常值参考范围按阳性结果统计。结果:化疗组和非化疗组患者血清β2-MG阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),两组患者血清Cys C、BUN和Scr阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05);化疗组和非化疗组患者尿β2-MG阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01),两组患者血清Cys C、BUN和Scr阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:尿液β2-MG检测对化疗肿瘤患者早期肾损伤有一定诊断价值,且较血清Cys C、BUN和Scr检测敏感。 展开更多
关键词 茁2-微球蛋白 早期肾损伤 诊断
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人胱蛋白酶抑制剂C的原核表达及其免疫反应性研究
13
作者 杜惠芬 付宝权 +4 位作者 李克生 连晓雯 王春芽 徐杨 柴丹丹 《现代检验医学杂志》 CAS 2014年第1期32-34,37,共4页
目的获得具有免疫反应性的人胱蛋白酶抑制剂C（Cysc）重组蛋白。方法从Hela细胞提取总RNA，采用RTPCR扩增获得人CysC基因片段，与质粒pET30a连接构建重组表达载体，转化大肠埃希菌E．coliBL21（DE3）并加入IPTG诱导表达，表达产物经凝... 目的获得具有免疫反应性的人胱蛋白酶抑制剂C（Cysc）重组蛋白。方法从Hela细胞提取总RNA，采用RTPCR扩增获得人CysC基因片段，与质粒pET30a连接构建重组表达载体，转化大肠埃希菌E．coliBL21（DE3）并加入IPTG诱导表达，表达产物经凝胶层析复性和亲和层析纯化后，用间接ELISA检测纯化后的CysC重组蛋白对重组CysC免疫小鼠血清的免疫反应性。结果成功构建了重组表达载体pET30a—CysC，诱导表达出约19ku的重组蛋白，经复性纯化后获得纯度达90％以上的目的蛋白，与重组CysC免疫小鼠血清具有良好的免疫反应性。结论在原核系统成功表达了人CysC重组蛋白，而且具有良好的免疫反应性。 展开更多
关键词 人胱蛋白酶抑制剂C 原核表达 复性 免疫反应性
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中国经济改革与增长中的金融支持
14
作者 杜惠芬 《中央财经大学学报》 CSSCI 北大核心 2002年第6期8-11,共4页
中国的金融制度变迁也服从了渐进改革的“过渡性”逻辑 ,渐进战略较好地支持了中国 2 0年的经济增长。但是 ,由于“双轨”体制的固有矛盾 ,使中国的金融改革在今天聚集到了深层次的金融改革上 ,而这一问题的核心是多元化的金融产权关系... 中国的金融制度变迁也服从了渐进改革的“过渡性”逻辑 ,渐进战略较好地支持了中国 2 0年的经济增长。但是 ,由于“双轨”体制的固有矛盾 ,使中国的金融改革在今天聚集到了深层次的金融改革上 ,而这一问题的核心是多元化的金融产权关系。中国加入WTO成为中国金融深化改革的契机。摆在面前的来自外部世界的竞争 ,成为推进中国金融业“对内开放” 展开更多
关键词 中国 经济改革 金融支持 体制内金融 体制外金融 竞争性市场结构 金融改革 产权关系 融资制度
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高效价抗人血红蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
15
作者 杜惠芬 李克生 +2 位作者 袁明 叶文华 连晓雯 《卫生职业教育》 2007年第22期104-105,共2页
目的制备高效价抗人血红蛋白（Hb）单克隆抗体并对其进行鉴定。方法用纯化人血红蛋白免疫Balb／c小鼠。取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选分泌抗人Hb单克隆抗体的细胞株，将阳性细胞株接种于小鼠腹腔制备单克隆抗体并对腹水抗... 目的制备高效价抗人血红蛋白（Hb）单克隆抗体并对其进行鉴定。方法用纯化人血红蛋白免疫Balb／c小鼠。取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选分泌抗人Hb单克隆抗体的细胞株，将阳性细胞株接种于小鼠腹腔制备单克隆抗体并对腹水抗体进行纯化，测定抗体亚类，分析其敏感性、特异性及纯化抗体的相对亲和力。结果共获得3株单克隆抗体杂交瘤细胞株，均与人Hb有较高的亲和力，其敏感性可达0．5μg/ml，而且与人肌红蛋白（Mb）及各种动物血红蛋白、肌红蛋白均无交叉反应。结论3株单克隆抗体杂交瘤细胞株有较好的特异性，与人Hb有较高的亲和力。 展开更多
关键词 人血红蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定
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鸡传染性喉气管炎病毒的荧光抗体检测
16
作者 杜惠芬 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第10期52-54,共3页
建立了一种鸡传染性喉气管炎 (ILT)的荧光抗体检测技术 ,用荧光素标记ILT兔源超免疫血清抗体 ,对 15份人工感染ILT病鸡、5份ND病鸡和 10份健康鸡的气管分泌物进行了检测 ,并对该技术做了特异性和敏感性测定。结果显示 ,人工感染ILT病鸡... 建立了一种鸡传染性喉气管炎 (ILT)的荧光抗体检测技术 ,用荧光素标记ILT兔源超免疫血清抗体 ,对 15份人工感染ILT病鸡、5份ND病鸡和 10份健康鸡的气管分泌物进行了检测 ,并对该技术做了特异性和敏感性测定。结果显示 ,人工感染ILT病鸡的阳性检出率高达10 0 % ,ND病鸡和健康鸡的阳性检出率均为 0 ;该ILT兔源超免疫血清荧光抗体检测技术特异性强。 展开更多
关键词 鸡 传染性喉气管炎病毒 荧光抗体 检测
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论社会主义市场经济的融合性
17
作者 杜惠芬 《中央财经大学学报》 CSSCI 2000年第8期18-20,共3页
社会主义与市场经济的结合本身带有极强的“融合”性。选择“融合”具有理论支撑 ,也是现实要求。但是“融合”是有条件的 ,围绕企业问题产生的种种矛盾 ,正是“融合”过程中摩擦的具体体现。缓解摩擦的切入点就是多元微观经济主体的构... 社会主义与市场经济的结合本身带有极强的“融合”性。选择“融合”具有理论支撑 ,也是现实要求。但是“融合”是有条件的 ,围绕企业问题产生的种种矛盾 ,正是“融合”过程中摩擦的具体体现。缓解摩擦的切入点就是多元微观经济主体的构建 ,这一微观基础是择优机制、激励约束机制和竞争机制发挥作用的前提 ,也使社会主义市场经济体制不断走向完善。 展开更多
关键词 融合性 社会主义 市场经济 微观基础
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中国经济改革与科学社会主义理论的创新
18
作者 杜惠芬 《山西财经大学学报》 北大核心 2000年第3期15-18,共4页
体制转型是一个庞大的系统工程 ,它不仅需要理论的强有力的支撑 ,而且涉及到诸多相互制约、互为因果的改革环节。渐进式改革的合理内核就是有效利用原有体制的组织资源和信息资源以保持经济的连续运转 ,最大限度地降低改革成本 ,并在不... 体制转型是一个庞大的系统工程 ,它不仅需要理论的强有力的支撑 ,而且涉及到诸多相互制约、互为因果的改革环节。渐进式改革的合理内核就是有效利用原有体制的组织资源和信息资源以保持经济的连续运转 ,最大限度地降低改革成本 ,并在不断的体制校正中完成“过渡”。中国不断探索中的经济改革不仅从实践上而且在理论上丰富并发展了科学社会主义理论。 展开更多
关键词 科学社会主义理论 渐进式改革 创新 中国
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肠出血性大肠杆菌O157∶H7脂多糖抗原的提取鉴定及间接ELISA法的建立 被引量：8
19
作者 刘红亮 陈学忠 +6 位作者 李克生 杜惠芬 陈应泰 连晓雯 鲁学萍 袁明 叶文华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期637-640,644,共5页
目的提取并纯化具有强免疫反应性和高特异性的肠出血性大肠杆菌O157∶H7(E.coliO157∶H7)脂多糖(LPS)抗原,并研究其在E.coliO157∶H7 LPS抗体检测中的应用。方法应用热酚水法提取E.coliO157∶H7 LPS抗原,同时收集水相和酚相LPS,并对其... 目的提取并纯化具有强免疫反应性和高特异性的肠出血性大肠杆菌O157∶H7(E.coliO157∶H7)脂多糖(LPS)抗原,并研究其在E.coliO157∶H7 LPS抗体检测中的应用。方法应用热酚水法提取E.coliO157∶H7 LPS抗原,同时收集水相和酚相LPS,并对其产率、纯度及免疫反应性进行分析比较,用酸解法制备O-特异性多糖(O-SP),并以不同的LPS为包被抗原,建立间接ELISA法检测E.coliO157∶H7 LPS抗体。结果大分子量的E.coliO157∶H7 LPS优先溶于酚相,而水相中含有更多的小分子量LPS,与水相LPS相比酚相LPS具有更高的免疫反应性和纯度,酚相LPS经酸解去脂得到的O-SP具有更高的反应特异性。结论酚相LPS和O-SP都可用于E.coliO157∶H7 LPS抗体的ELISA检测,O-SP具有更高的特异性,是检测E.coliO157∶H7 LPS特异性抗体的理想材料。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157∶H7 热酚水法 脂多糖 O-SP 间接ELISA
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金标法检测尿β_2-MG在肾功能损伤诊断中的临床价值 被引量：11
20
作者 徐杨 杜惠芬 +4 位作者 李克生 李光迪 张瑞君 柴丹丹 连晓雯 《检验医学与临床》 CAS 2019年第3期306-307,311,共3页
目的评价尿液β_2-微球蛋白(β_2-MG)金标检测试剂盒在肾功能早期损伤诊断中的应用价值。方法将临床诊断为肾病综合征患者53例、慢性肾炎综合征患者40例、慢性肾衰竭患者18例、高血压肾病患者33例、糖尿病肾病患者23例作为研究组,体检... 目的评价尿液β_2-微球蛋白(β_2-MG)金标检测试剂盒在肾功能早期损伤诊断中的应用价值。方法将临床诊断为肾病综合征患者53例、慢性肾炎综合征患者40例、慢性肾衰竭患者18例、高血压肾病患者33例、糖尿病肾病患者23例作为研究组,体检健康者157例作为对照组,以β_2-MG金标检测试剂盒检测β_2-MG水平,并与胶乳增强免疫比浊法检测结果进行比较。结果金标法与胶乳增强免疫比浊法检测尿液β_2-MG阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);金标法检测临床确诊肾病的167例患者尿β_2-MG的灵敏度为76.7%,符合度为85.2%,特异度为94.3%。结论尿液β_2-MG金标检测试剂盒对诊断肾功能早期损伤具有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 Β2-微球蛋白 早期肾损伤 金标法
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