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6种中成药对SARS-CoV-23CLpro和PLP活性的抑制作用
1
作者 刘衍梁 韩雨秀 +6 位作者 王含雪 杜瑞坤 容蓉 叶冬雪 齐冬梅 刘孝云 杨勇 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1279-1284,共6页
目的研究治疗新型冠状病毒肺炎不同时期的6种中成药对3C样蛋白酶(3CLpro)和木瓜样蛋白酶(PLP)的抑制作用,探讨其干预新型冠状病毒肺炎的机制。方法经镍柱纯化获得原核表达且纯度高的3CLpro和PLP。基于荧光共振能量转移原理,建立3CLpro和... 目的研究治疗新型冠状病毒肺炎不同时期的6种中成药对3C样蛋白酶(3CLpro)和木瓜样蛋白酶(PLP)的抑制作用,探讨其干预新型冠状病毒肺炎的机制。方法经镍柱纯化获得原核表达且纯度高的3CLpro和PLP。基于荧光共振能量转移原理,建立3CLpro和PLP活性检测的药物筛选模型,分别以3CLpro抑制剂依布硒、PLP抑制剂GRL0617验证筛选模型的有效性。在此基础上,开展针对新型冠状病毒肺炎临床不同时期(医学观察期、轻型、普通型、重型、危重型)的代表性6种中成药靶向抑制3CLpro和PLP活性的研究。结果金花清感颗粒、疏风解毒胶囊、热毒宁注射液、血必净注射液、痰热清注射液对3CLpro具有较强的抑制作用(抑制率>80%),同时疏风解毒胶囊、痰热清注射液、热毒宁注射液对PLP也具有较强的抑制作用(抑制率>80%)。结论金花清感颗粒等6种中成药对3CLpro或PLP都有较强的抑制作用,这可能是它们针对新型冠状病毒肺炎临床不同时期发挥抗SARS-CoV-2的内在机制。另外,疏风解毒胶囊、痰热清注射液、热毒宁注射液对新型冠状病毒2个靶蛋白酶活性的抑制作用都较强,可能具有潜在抗病毒活性。 展开更多
关键词 中成药 新型冠状病毒 3CLpro PLP 荧光共振能量转移 抗病毒
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乙型脑炎病毒样颗粒疫苗的制备及其免疫保护效率的初步评价 被引量：5
2
作者 张艳芳 杜瑞坤 +6 位作者 黄少梅 张涛 刘金良 朱碧波 王华林 邓菲 曹胜波 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期150-155,共6页
将乙型脑炎病毒prME及其信号肽基因片段克隆到穿梭载体AcBacmid中,构建重组穿梭载体AcBac-prME。Lipofectine介导其转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒Ac-prME。Western-blotting、间接免疫荧光试验及电镜观察,证实Ac-prME介导prME在Sf9细胞... 将乙型脑炎病毒prME及其信号肽基因片段克隆到穿梭载体AcBacmid中,构建重组穿梭载体AcBac-prME。Lipofectine介导其转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒Ac-prME。Western-blotting、间接免疫荧光试验及电镜观察,证实Ac-prME介导prME在Sf9细胞中高效表达,且形成了病毒样颗粒。小鼠免疫和攻毒试验表明,该病毒样颗粒免疫可以使小鼠获得有效抵抗乙型脑炎病毒强毒株攻击的能力,保护率高达100%,从而为研制基于乙型脑炎病毒样颗粒的亚单位疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 杆状病毒 prME蛋白 病毒样颗粒 亚单位疫苗
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冠状病毒抑制剂研究的药物化学策略 被引量：30
3
作者 李敬 姜向毅 +6 位作者 徐淑静 崔清华 杜瑞坤 康东伟 展鹏 荣立军 刘新泳 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期537-553,共17页
冠状病毒感染所引起的疫情对人类健康造成严重威胁,但目前尚无特异性治疗药物或疫苗。本文从药物化学的视角,精选抗SARS-CoV、MERS-CoV等冠状病毒药物的研究案例,总结了药物发现策略,并分析了新近暴发的SARS-CoV-2感染疫情的药物研究新... 冠状病毒感染所引起的疫情对人类健康造成严重威胁,但目前尚无特异性治疗药物或疫苗。本文从药物化学的视角,精选抗SARS-CoV、MERS-CoV等冠状病毒药物的研究案例,总结了药物发现策略,并分析了新近暴发的SARS-CoV-2感染疫情的药物研究新动向,提出了未来研究的新思路。 展开更多
关键词 冠状病毒 药物设计 抑制剂 药物化学策略
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中医药来源2019新型冠状病毒3CL蛋白酶抑制剂的筛选
4
作者 李萍 陈子诺 +1 位作者 崔清华 杜瑞坤 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期6154-6157,共4页
目的:构建2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL蛋白酶的高通量筛选体系,并利用该体系对180种中药提取物进行筛选。方法:针对SARS-CoV-23CL蛋白酶进行原核表达和纯化,进而建立基于荧光能量共振转移技术的SARS-CoV-23CL抑制剂高通量筛选体系... 目的:构建2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL蛋白酶的高通量筛选体系,并利用该体系对180种中药提取物进行筛选。方法:针对SARS-CoV-23CL蛋白酶进行原核表达和纯化,进而建立基于荧光能量共振转移技术的SARS-CoV-23CL抑制剂高通量筛选体系。利用该体系对180种中药提取物进行筛选,并验证活性组分的量效关系。结果:本研究成功构建了SARS-CoV-23CL蛋白酶的高通量筛选体系,并筛选得到5种中药提取物(半枝莲乙酸乙酯部位、防风石油醚部位、紫苏叶环己烷部位、紫苏梗环己烷部位以及紫苏梗乙酸乙酯部位)具有3CL蛋白酶的抑制活性,其半数抑制浓度分别为30.03、20.00、18.34、25.04、18.48μg/mL。结论:该体系可以应用于3CL蛋白酶抑制剂的筛选,为新药研发提供了有力的工具。同时,5种活性提取物为筛选抗SARS-CoV-2活性成分提供了依据。 展开更多
关键词 2019新型冠状病毒 3CL蛋白酶 高通量筛选体系 中药提取物
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