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水稻端粒酶RNA模板基因序列鉴定体系的建立 被引量：1
1
作者 杨力媛 郑洁 +2 位作者 马登旭 马国兴 刘小川 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2013年第4期590-594,共5页
利用水稻端粒酶对端粒序列的合成作用,对模板基因序列进行定点突变,构建了pCambia1301-T突变型、pCambia1301-Y野生型载体。经农杆菌介导,选用水稻不同品种和组织,探索候选序列的鉴定体系。结果显示,不同水稻品种诱导愈伤,差异显著,其... 利用水稻端粒酶对端粒序列的合成作用,对模板基因序列进行定点突变,构建了pCambia1301-T突变型、pCambia1301-Y野生型载体。经农杆菌介导,选用水稻不同品种和组织,探索候选序列的鉴定体系。结果显示,不同水稻品种诱导愈伤,差异显著,其中中花11号可快速诱导愈伤,比广陆矮4诱导时间缩短一半,用成熟胚和幼胚分别诱导愈伤,无明显差异;对突变型、野生型、正常组织进行基因组DNA端粒鉴定和端粒酶活性分析,发现突变型端粒酶活性明显高于对照。这些均表明该鉴定体系完整、可靠,为端粒酶RNA模板基因序列的鉴定建立了有效的方法。 展开更多
关键词 水稻 端粒酶RNA 模板序列鉴定技术 定点突变
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邢台地区正常人群血清PSA参考范围的建立
2
作者 杨力媛 郭素鹏 +2 位作者 张洁莉 李妤蓉 马国兴 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2023年第7期5-8,共4页
观察河北邢台地区正常男性血清PSA随年龄的变化,建立实验室年龄相关特异性参考区间,提高前列腺癌早期筛查的诊断率。方法 以2019年1月至2022年3月到我院健康体检的男性人群作为研究对象,根据排除标准,最终纳入分析样本1070例。以10年为... 观察河北邢台地区正常男性血清PSA随年龄的变化,建立实验室年龄相关特异性参考区间,提高前列腺癌早期筛查的诊断率。方法 以2019年1月至2022年3月到我院健康体检的男性人群作为研究对象,根据排除标准,最终纳入分析样本1070例。以10年为1个亚组,采用SPSS 23.0分别统计各年龄段人群中位数和95%置信区间。结果 PSA数值随年龄升高逐渐增高,参考范围为<2.53 ng/ml(小于50岁),<2.92 ng/ml(50~59岁),<4.88 ng/ml(60~69岁),<5.44 ng/ml(70岁以上)。从2022年4月至9月到我院就诊的表观健康男性血清中随机抽取963份进行参考范围验证,结果符合NCCLS-C28-A2参考范围验证要求,验证通过。结论 本文采用95%百分位点修正试剂说明书给定的参考区间,克服PSA的地域和种族差异,建立了本地区正常人群年龄相关血清PSA参考范围。 展开更多
关键词 前列腺特异性抗原 参考范围 年龄
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水稻单个端粒长度定量测定及分析 被引量：3
3
作者 马国兴 马登旭 +3 位作者 杨力媛 郑洁 韦敬航 刘小川 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2013年第4期585-589,共5页
端粒是真核生物线性染色体末端的特殊结构,一定长度的端粒在维持真核生物遗传信息完整性和染色体结构稳定性中起重要作用。建立一种简单快捷定量测定水稻单个端粒绝对长度的方法对研究水稻各个染色体端粒具有积极的意义。研究将特殊接... 端粒是真核生物线性染色体末端的特殊结构,一定长度的端粒在维持真核生物遗传信息完整性和染色体结构稳定性中起重要作用。建立一种简单快捷定量测定水稻单个端粒绝对长度的方法对研究水稻各个染色体端粒具有积极的意义。研究将特殊接头连接到水稻染色体端粒的G-overhang末端,并利用近端粒区域的特定引物以及下游接头引物,通过PCR技术,获得所需鉴定的端粒,结合DNA凝胶电泳成像分析系统,定量检测水稻单个端粒的长度。结果显示本方法可以通过少量水稻基因组DNA有效测定单个端的粒长度。 展开更多
关键词 水稻 单个端粒 PCR技术 定量测定 端粒长度
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玉米端粒酶RNA模板基因候选序列的转基因鉴定体系研究
4
作者 郑洁 杨力媛 +2 位作者 马国兴 马登旭 刘小川 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2013年第5期762-765,774,共5页
研究采用pCAMBIA 1301穿梭质粒和LBA 4404菌株,侵染不同品种玉米成熟胚诱导的愈伤组织,以构建玉米端粒酶RNA候选序列的转基因鉴定体系。构建了两个含有玉米端粒酶RNA的pCAMBIA 1301穿梭质粒,一个携带模板区正常的玉米端粒酶RNA候选序列... 研究采用pCAMBIA 1301穿梭质粒和LBA 4404菌株,侵染不同品种玉米成熟胚诱导的愈伤组织,以构建玉米端粒酶RNA候选序列的转基因鉴定体系。构建了两个含有玉米端粒酶RNA的pCAMBIA 1301穿梭质粒,一个携带模板区正常的玉米端粒酶RNA候选序列(野生型),另一个携带模板区定点突变处理的端粒酶RNA候选序列(突变型),然后分别侵染甜玉米成熟胚诱导的愈伤组织,也同样分别侵染糯玉米成熟胚诱导的愈伤组织。结果表明:在愈伤组织培养中,甜玉米的愈伤诱导率在40%左右,而糯玉米的愈伤诱导率高达80%;在抗性筛选培养基上已成功获得抗性愈伤组织,经PCR鉴定愈伤组织基因组中分别含有正常和突变的目的片段,这表明成功构建了玉米端粒酶RNA候选序列的转基因鉴定体系,为进一步鉴定相关候选序列提供有效的技术方法。 展开更多
关键词 甜玉米 糯玉米 端粒酶RNA模板基因候选序列 农杆菌介导法 抗性愈伤组织
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西兰花端粒酶分离与活性测定探究 被引量：2
5
作者 刘红彦 马国兴 +2 位作者 杨力媛 郑洁 刘小川 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2012年第4期604-608,共5页
植物端粒酶以自身的RNA亚基为模板,维持着染色体末端端粒的长度,从而使植物细胞可持续分裂。本研究以西兰花花蕾为材料,采用不同分子量、不同浓度的PEG分别提取端粒酶,根据PEG吸附蛋白质的原理,从具有端粒酶活性的组织中分离并富集端粒... 植物端粒酶以自身的RNA亚基为模板,维持着染色体末端端粒的长度,从而使植物细胞可持续分裂。本研究以西兰花花蕾为材料,采用不同分子量、不同浓度的PEG分别提取端粒酶,根据PEG吸附蛋白质的原理,从具有端粒酶活性的组织中分离并富集端粒酶。结果显示:用PEG 6000提取西兰花端粒酶,且用100μg的酶量进行酶促反应时测得的端粒酶活性最高。以此为参数,经改进的TRAP法成功检测到:用0.2g PEG 6000/700μL洗脱液提取出的端粒酶活性很高。这些分离、检测技术为其它植物组织中端粒酶活性的检测和评价提供了新的途径,尤其对低活性的植物端粒酶检测具有重要意义,为深入研究端粒酶RNA的序列及结构奠定了基础。 展开更多
关键词 西兰花 端粒酶分离 端粒酶检测 聚乙二醇(PEG)
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水稻端粒酶RNA候选序列的克隆及特征解析 被引量：2
6
作者 马登旭 杨力媛 +3 位作者 马国兴 郑洁 应畅 刘小川 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2013年第4期579-584,共6页
端粒酶是由端粒酶反转录酶和端粒酶RNA构成,端粒酶RNA中含有端粒合成所需的模板序列。现仅获得了拟南芥的端粒酶RNA序列。为了建立快速有效的富集植物端粒酶的方法并克隆水稻的端粒酶RNA序列,研究中使用不同浓度的PEG6000选择性的沉淀... 端粒酶是由端粒酶反转录酶和端粒酶RNA构成,端粒酶RNA中含有端粒合成所需的模板序列。现仅获得了拟南芥的端粒酶RNA序列。为了建立快速有效的富集植物端粒酶的方法并克隆水稻的端粒酶RNA序列,研究中使用不同浓度的PEG6000选择性的沉淀端粒酶萃取液中的杂蛋白。结果表明当PEG6000浓度为4%时,端粒酶活力最高,并可以有效降低核糖体28SrRNA和18SrRNA的干扰。从端粒酶蛋白液中提取RNA,并在其3′端连接接头,在模板区设计上游引物,PCR扩增获得一条292bp的未知片段,其中含有端粒模板序列5′-AAACCCTAA-3′。将该片段及拟南芥端粒酶RNA的转录调控区进行序列比对分析发现,两者具有类似的转录调控元件。因此,初步判定292bp的目的片段为水稻端粒酶RNA的模板下游序列。 展开更多
关键词 水稻 PEG6000 端粒酶RNA特征解析
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端粒酶RNA模板定点突变对肿瘤细胞Bcap-37的作用研究
7
作者 韦敬航 杨力媛 +3 位作者 郑洁 吕齐 何丹枫 刘小川 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2013年第5期753-757,共5页
端粒酶在正常体细胞中极少表达,而在大多数人类恶性肿瘤和细胞系中高度表达,这暗示着端粒酶活性可能与肿瘤密切相关。本研究以人乳腺癌细胞株Bcap-37接种裸鼠形成的肿瘤组织块为实验材料,通过检测端粒酶活性、端粒长度及细胞凋亡的情况... 端粒酶在正常体细胞中极少表达,而在大多数人类恶性肿瘤和细胞系中高度表达,这暗示着端粒酶活性可能与肿瘤密切相关。本研究以人乳腺癌细胞株Bcap-37接种裸鼠形成的肿瘤组织块为实验材料,通过检测端粒酶活性、端粒长度及细胞凋亡的情况,观察端粒酶RNA模板定点突变的作用。结果显示:MT-hTER组样本的端粒酶活性低于对照组,端粒长度短于对照组,细胞核形态不够稳定,有较多细胞凋亡的现象,而对照组细胞核形态稳定,较少发生细胞凋亡。以上结果提示着端粒酶RNA模板定点突变在一定程度上改变了人乳腺癌细胞株Bcap-37的端粒酶活性、端粒长度及细胞凋亡发生率。 展开更多
关键词 人乳腺癌细胞株Bcap-37 端粒酶活性 端粒长度 细胞凋亡
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血清PSA与前列腺癌病理分级临床分期相关性研究
8
作者 张一冲 杨力媛 +1 位作者 徐立业 许晓丽 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2022年第12期73-75,共3页
探究血清前列腺特异性抗原(PSA)与前列腺癌病理分级临床分期相关性。方法 选取2019.10~2022.10收入的前列腺癌患者总计65例,均开展病理学检查,对切片进行病理分级与临床分期,测定患者血清PSA水平,分析血清PSA与前列腺癌病理分级临床分... 探究血清前列腺特异性抗原(PSA)与前列腺癌病理分级临床分期相关性。方法 选取2019.10~2022.10收入的前列腺癌患者总计65例,均开展病理学检查,对切片进行病理分级与临床分期,测定患者血清PSA水平,分析血清PSA与前列腺癌病理分级临床分期相关性。结果 分期越高,血清PSA水平越高,T4期血清PSA水平显著高于T1期、T2期、T3期,P<0.05;高分化组血清PSA水平低于中分化组、低分化组,P<0.05;Gleason评分与血清PSA、TNM分期呈正相关,P<0.05。结论 前列腺癌临床诊断中,血清PSA在其中发挥着重要作用,可用于前列腺癌病理分级、临床分期,并用于判断前列腺癌患者预后情况的重要指标。 展开更多
关键词 血清前列腺特异性抗原 前列腺癌 病理分期 相关性
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KLF7表达在前列腺癌筛查中的作用及其对预后风险的评估
9
作者 张一冲 杨力媛 +1 位作者 徐立业 许晓丽 《临床泌尿外科杂志》 CAS 2024年第10期871-875,共5页
目的:探究Krüppel样因子7(Krüppel-like factor-7,KLF7)表达在前列腺癌(prostate cancer,PCa)筛查中的相互作用及其对预后风险的评估效能。方法:选取2021年1月—2023年12月于邢台医学高等专科学校第二附属医院就诊的PCa患者68... 目的:探究Krüppel样因子7(Krüppel-like factor-7,KLF7)表达在前列腺癌(prostate cancer,PCa)筛查中的相互作用及其对预后风险的评估效能。方法:选取2021年1月—2023年12月于邢台医学高等专科学校第二附属医院就诊的PCa患者68例(PCa组)及良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)患者52例(BPH组),比较2组患者总前列腺特异性抗原(total prostate-specific antigen,tPSA)、血脂血糖水平、KLF7表达情况,并采用Spearman相关性分析PCa组织中KLF7的表达与tPSA水平相关性、KLF7表达率与PCa预后指标的关系,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线预测tPSA、KLF7在PCa中的诊断价值。结果:PCa组tPSA水平、KLF7的表达水平均显著高于BPH组(P<0.05),Spearman分析显示KLF7表达与tPSA水平呈显著正相关(r=0.329,P<0.001),KLF7表达率与PCa预后指标ISUP分级、临床分期具有显著相关性(P<0.05)。ROC结果显示,tPSA、KLF7预测PCa的曲线下面积分别为0.752、0.921(P<0.05),最佳截断值分别为21.29 ng/mL、1.30,灵敏度分别为77.6%、94.0%,特异度分别为64.2%、84.9%。本研究纳入的PCa患者共有16例灰区患者,KLF7对灰区PCa患者具有良好的诊断效能,灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为85.4%、91.8%、81.2%、93.8%、89.9%。结论:KLF7表达在PCa筛查中具有良好的诊断效能,血清tPSA与KLF7均可作为PCa预后风险因素,其对PCa的诊断和治疗具有重要意义。 展开更多
关键词 前列腺癌 前列腺特异性抗原 Krüppel样因子7
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