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羧甲基茯苓多糖对HPBL分泌IL-2、TNF、IL-6、IFN-γ的调节作用 被引量:30
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作者 杨吉成 盛伟华 +2 位作者 张云 汤建平 李丽娥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期293-295,共3页
用CMP培养外周血淋巴细胞(HPBL)24、36、48、72h采样检测的IL-2、TNF、IL-6、IFN-γ效价分别可达13.6±4.3,41.9±2.0,1837.4±464.3,1037.9±2... 用CMP培养外周血淋巴细胞(HPBL)24、36、48、72h采样检测的IL-2、TNF、IL-6、IFN-γ效价分别可达13.6±4.3,41.9±2.0,1837.4±464.3,1037.9±211.0U/ml,分别比无CMP的细胞培养对照组的效价高0.8,7.4,0.5,10.9倍(P<0.01),说明CMP具有IL-2、TNF、IL-6、IFN-γ的诱生剂功能。由CMP预处理HPBL后经PHA和/或ConA促诱生组的IL-2、TNF、IL-6、IFN-γ效价分别比无CMP的PHA和/或ConA刺激的相应常规诱生组高1.2~2.8,0.5~1.1、0.5~0.8、0.4~0.6倍(P<0.01),尤以CMP+PHA+ConA促诱生细胞因子效果最佳(P<0.01),说明CMP又具有IL-2、TNF、IL-6、IFN-γ促诱生效应。 展开更多
关键词 茯苓多糖 外周血 淋巴细胞 细胞因子
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多糖类及刺五加甙类的干扰素促诱生效应 被引量:29
2
作者 杨吉成 刘静山 盛伟华 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期27-29,共3页
用刺五加多糖及其甙B,D和E,羧甲基茯苓多糖,银耳多糖等对本室自建的Sso1和S7s11白血病细胞系进行了干扰素诱生和促诱生试验,其药物促诱生组的干扰素效价比常规诱生组(3.45±0.173lgu/ml)高10-20倍,可见这些药物是理想的干... 用刺五加多糖及其甙B,D和E,羧甲基茯苓多糖,银耳多糖等对本室自建的Sso1和S7s11白血病细胞系进行了干扰素诱生和促诱生试验,其药物促诱生组的干扰素效价比常规诱生组(3.45±0.173lgu/ml)高10-20倍,可见这些药物是理想的干扰素促诱生剂,这些细胞可用于干扰素生产,药物促诱生干扰动力学试验表明,药物促诱生和常规诱生干扰素的动态曲线均在4-20h逐渐上升,20-24h达高峰,后逐渐下降,但在各相应时期的促诱生干扰素效价均明显高于常规诱生,促诱生效应的最佳时间是在20-24h. 展开更多
关键词 多糖类 刺五加甙类 促诱生剂 干扰素 中药 实验
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抗病毒蛋白MxA的诱导和检测方法的实验研究 被引量:8
3
作者 杨吉成 盛伟华 +2 位作者 李丽娥 贡海蓉 徐仑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期77-79,共3页
目的 研究抗病毒蛋白MxA的表达及其活性。方法用IFNα2b或3型腺病毒(A_3)分别对WI-38细胞或人外周血单个核细胞(PBMCs)作用 12或24 h,并用Westem blot法或FACS法,分别对M蛋白的表达进... 目的 研究抗病毒蛋白MxA的表达及其活性。方法用IFNα2b或3型腺病毒(A_3)分别对WI-38细胞或人外周血单个核细胞(PBMCs)作用 12或24 h,并用Westem blot法或FACS法,分别对M蛋白的表达进行定性和定量检测。采用微量细胞病变抑制法,对重组的MxA和IFNα2b进行抗病毒效应实验。结果 (1)低浓度的 IFNα2b(> 1×10~#IU/L)和Ad_3(>200 TCID_50),均可诱导相应细胞表达 MxA;(2)10μg/L MxA可抵抗20个 TCID_(50)的 HSV-I、Polio. V感染 Vero细胞、Ad_3感染HeLa细胞,抵抗200个TCID_(50)的VSV感染Wish细胞。结论MxA只能由干扰素(INFα2b)或病毒诱导产生,其具有广谱的抗病毒活性。 展开更多
关键词 MXA 基因表达调控 INFα2b 腺病毒 微量细胞病变抑制试验
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骨髓基质细胞的造血支持作用等生物学特性的研究 被引量:6
4
作者 杨吉成 盛伟华 +4 位作者 李丽娥 童宁征 王红卫 郭瑃 王晓东 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期41-45,共5页
目的研究人骨髓基质细胞体外长期培养的生物学特性和造血支持功能。方法①采用静置贴壁细胞培养法,体外长期培养胎儿、儿童和成人的骨髓基质细胞。②采用免疫细胞化学染色法和流式细胞仪检测法,分析细胞的表型。③将不同发育阶段的骨... 目的研究人骨髓基质细胞体外长期培养的生物学特性和造血支持功能。方法①采用静置贴壁细胞培养法,体外长期培养胎儿、儿童和成人的骨髓基质细胞。②采用免疫细胞化学染色法和流式细胞仪检测法,分析细胞的表型。③将不同发育阶段的骨髓基质细胞体外培养,并扩增脐血造血干细胞。结果①建立了成纤维肌样细胞系,可传至10代,维持6个月,同时还培养出内皮细胞和巨噬细胞。②儿童骨髓基质肌样细胞的染色特征为:波形纤维蛋白(viementin)呈阳性,第Ⅷ因子呈阴性;儿童骨髓基质细胞的表型为:CD33-、CD34-、CD38-和CDW90+;成人为:CD33-、CD34-、CD38+和CDW90+。③基质细胞能长期维持脐血中LTC-IC的生存。若加入IL-6、IL-3和SCF扩增体系,基质细胞对长期维持和扩增LTC-IC的效果更为明显(P〈0.01),较无基质细胞的对照组所形成的LTC-IC产率高2-4倍。结论人骨髓基质细胞体外可长期培养,对脐血干细胞具有造血支持功能。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 造血支持功能 生物学特性 细胞培养
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中药有效成分在干扰素生物技术实验与临床研究中的应用 被引量:8
5
作者 杨吉成 刘静山 +2 位作者 盛伟华 张云 蔡苏皖 《生物工程进展》 CSCD 1993年第3期30-34,29,共6页
中草药是我国的宝贵财富,刺五加、茯苓、银耳、云芝等均具有抗菌、抗病毒、免疫调节和抗肿瘤作用。而干扰素(IFN)的三种类型(α、β、γ)也具有这种生物学效应,为了研究上述补气类中药有效成分这一药理效应的物质基础和分子介质,本文用... 中草药是我国的宝贵财富,刺五加、茯苓、银耳、云芝等均具有抗菌、抗病毒、免疫调节和抗肿瘤作用。而干扰素(IFN)的三种类型(α、β、γ)也具有这种生物学效应,为了研究上述补气类中药有效成分这一药理效应的物质基础和分子介质,本文用刺五加甙及其多糖,羧甲基茯苓多糖、银耳多糖。 展开更多
关键词 干扰素 生物技术 中药 临床
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rhIL-6大肠杆菌高效表达的影响因素及其产品中试的研究 被引量:4
6
作者 杨吉成 盛伟华 张云 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1999年第1期23-27,共5页
研究自构建的重组人白细胞介素- 6(rhIL-6)基因工程菌株高效表达的影响因素及其rhIL-6产品中试工艺。方法:①将rhL-6-PBV重组质粒转化至RRI、JM103和 DH5 a不同宿主菌中,在M9CA和 LB培养... 研究自构建的重组人白细胞介素- 6(rhIL-6)基因工程菌株高效表达的影响因素及其rhIL-6产品中试工艺。方法:①将rhL-6-PBV重组质粒转化至RRI、JM103和 DH5 a不同宿主菌中,在M9CA和 LB培养基中,42℃诱导培养不同时间(3~6 h),观测 rhIL-6不同表达效率。②采用 10 L发酵罐诱导培养,经破菌-洗包-溶包初步纯化后,再经三步柱层析纯化,提取rhIL-6。结果:①rhIL-6在DH5 a大肠杆菌中(SDH-945株)表达效率高;可达 39%,用 M9CA培基,42℃诱导培养 5h可使表达效率提高到41%,②SDH-945菌株在5批 10L M9CA发酵诱导培养 5 h,rhIL-6表达效率可达 35. 87±2. 65%。经初步纯化后,rhIL-6的纯度达 74. 87±3. 68%,再经三步柱层析后,纯度可达 95%以上,比活性达 4 × 108 U/mg,总得率稍低可达 23.1%.结论:①SDH-945工程菌株在 M9CA培养基巾,42℃诱导培养 5 h,rhIL-6表达效率最佳。②10 L发酵和纯化工艺可获高效价、高比活性、高纯度的rhIL-6合格生物制品。 展开更多
关键词 hIL-6 大肠杆菌 高效表达 发酵 纯化
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CMP促诱生IL-2、TNF-α、IL-6、IFNγ/α效应和产品中试 被引量:2
7
作者 杨吉成 盛伟华 +2 位作者 李丽娥 董宁征 张云 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期194-197,共4页
用羧甲基茯苓多糖(CMP)预处理人外周血淋巴细胞(HPBL),在以PHA和ConA为主的复合诱生剂诱导培养24、36、48、72h采样检测的促诱生组TNF-α、IL-2、IL-6、IFNγ效价(x±s)分别为45... 用羧甲基茯苓多糖(CMP)预处理人外周血淋巴细胞(HPBL),在以PHA和ConA为主的复合诱生剂诱导培养24、36、48、72h采样检测的促诱生组TNF-α、IL-2、IL-6、IFNγ效价(x±s)分别为456.1±24.2,475.6±185.7,7433±1189.9,5583.0±535.5IU/ml,分别比无CMP的常规诱生组效价高1.5,3.8,1.8,1.4倍;在以NDV-F病毒为诱生剂诱导培养22h采样,并经酸化和中性化后检测的IFN-α效价可达21274.2±5523.0IU/ml,比无CMP的常规诱生组高1.2倍,均有显著差异(P<0.01),说明CMP对上述五种细胞因子均有明显的促诱生效应。此外,还采用CMP促诱生技术,对TNF-α、IL-2、IL-6、IFNγ和IFN-α细胞因子进行了中试,提出了低成本、高效益的中试工艺路线。 展开更多
关键词 羧甲基 茯苓多糖 促诱生 细胞因子 中间体
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基因工程IFNα_(2a)和IFNα_(2b)对肿瘤细胞生长的抑制作用 被引量:5
8
作者 杨吉成 李丽娥 +2 位作者 盛伟华 董宁征 徐伦 《实用癌症杂志》 1999年第3期164-166,共3页
为了研究不同品牌不同亚型基因工程α干扰素的抗肿瘤效应,采用MTT法将不同浓度的α干扰素分别对5种肿瘤细胞进行生长抑制实验。结果表明不同品牌的10000IU/ml,1000IU/ml,100IU/ml的IFNα2a... 为了研究不同品牌不同亚型基因工程α干扰素的抗肿瘤效应,采用MTT法将不同浓度的α干扰素分别对5种肿瘤细胞进行生长抑制实验。结果表明不同品牌的10000IU/ml,1000IU/ml,100IU/ml的IFNα2a或IFNα2b对人脑胶质瘤细胞(SHG44),人骨肉瘤细胞(HOS8603),人白血病细胞(HL60),红白血病细胞(K562)和淋巴瘤细胞(Raji)的生长均有不同程度的抑制作用。其抑制率分别为20%,10%,5%左右。进口和国产的不同品牌IFNα2a和IFNα2b对上述5种肿瘤细胞株均有较明显的生长抑制效应,而且抑制的百分率均相近。 展开更多
关键词 肿瘤细胞 生长抑制率 IFNα2a IFNα2b
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中药有效成分在IFN-α、IL-2促诱生技术中基础及其应用性研究 被引量:2
9
作者 杨吉成 盛伟华 +2 位作者 张云 高跃明 金苏华 《医学研究杂志》 1998年第8期10-11,共2页
中草药是我国传统医药中的宝贵财富,补气类中药有补气、益精,扶正固本的功效,在强身健体中已获得广泛应用,但其药效的分子机理仍有待于进一步研究。本项研究是采用刺五加甙及其多糖,
关键词 促诱生 中药有效成分 传统医药 分子机理 补气 宝贵财富 强身健体 中草药 扶正固本 药效作用
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敦煌空气净洁剂的抗流感病毒效应 被引量:1
10
作者 杨吉成 刘静山 +1 位作者 张云 盛伟华 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第5期30-31,共2页
敦煌空气净洁剂是采用中药及其有效成分进行复方配伍的乳化剂,经体外抗病毒试验及气雾杀病毒试验证明具有抗流感病毒效应,既是理想的空气净化剂型,又是有效的空气杀灭流感病毒气雾剂,可用于预防感冒和流感流行。
关键词 空气净洁剂 中草药 抗流感病毒
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骨髓基质细胞的造血支持作用等生物学特性的研究 被引量:3
11
作者 杨吉成 盛伟华 +5 位作者 李丽娥 董宁征 王红卫 郭瑃 王晓东 杨宗华 《中国血液流变学杂志》 CAS 2000年第2期87-93,共7页
采用静置贴壁细胞培养法,体外长期培养了胎儿、儿童、成人骨髓基质细胞,时间为6个月,可传至10代,并观察了成纤维肌样细胞、内皮细胞和巨噬细胞;通过免疫细胞化学染色法,证明了1~3代的骨髓基质肌样细胞Viementin为... 采用静置贴壁细胞培养法,体外长期培养了胎儿、儿童、成人骨髓基质细胞,时间为6个月,可传至10代,并观察了成纤维肌样细胞、内皮细胞和巨噬细胞;通过免疫细胞化学染色法,证明了1~3代的骨髓基质肌样细胞Viementin为阳性,第Ⅷ因子阴性;采用流式细胞仪检测法,证明了儿童骨髓基质细胞的细胞表型为CD33-和CD34-、CD38-、CD+W90,成人骨髓基质细胞为CD-33、CD-34、CD+38、CD+W90。 采用体外培养和扩增的脐血造血干细胞的半固体集落形成法,证明了基质细胞能长期维持脐血中的LTC-IC的生存,若加入IL-6、IL-3、SCF细胞因子的扩增体系,基质细胞对长期维持和扩增LTC-IC的效果更为明显(P<0.01),比无基质细胞的对照组所形成的LTC-IC产率高于2~4倍。表明骨髓基质细胞具有支持造血功能。 展开更多
关键词 人骨髓基质细胞 造血支持作用 细胞培养
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面向21世纪,尽快开设基因工程高等教育课 被引量:9
12
作者 杨吉成 《生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期36-37,共2页
基因工程一般认为是指体外将核酸分子(目的基因)插入或重组到病毒、细菌质粒或其它载体中,形成DNA重组体,然后再设法导入新的宿主系统内,使目的基因在新宿主内呈现稳定复制和高效表达。这项生物高技术从它诞生那天起,就展现了... 基因工程一般认为是指体外将核酸分子(目的基因)插入或重组到病毒、细菌质粒或其它载体中,形成DNA重组体,然后再设法导入新的宿主系统内,使目的基因在新宿主内呈现稳定复制和高效表达。这项生物高技术从它诞生那天起,就展现了无比强大的生命力。如今基因工程的发... 展开更多
关键词 基因工程 医学教育 课程设置
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人骨髓基质细胞的长期培养及其对病毒的敏感性 被引量:1
13
作者 杨吉成 盛伟华 +3 位作者 李丽娥 董宁征 杨宗华 王晓东 《中国病毒学》 CSCD 2000年第4期336-341,共6页
为了长期培养人骨髓基质细胞和研究其对病毒的敏感性 ,我们采用静置贴壁培养法 ,体外长期培养了胎儿、儿童和成人骨髓基质细胞 ,并将传至 5代以上的肌样骨髓基质细胞采用微量细胞病变 (CPE)法 ,开展了对 5种病毒的敏感性试验。结果表明 ... 为了长期培养人骨髓基质细胞和研究其对病毒的敏感性 ,我们采用静置贴壁培养法 ,体外长期培养了胎儿、儿童和成人骨髓基质细胞 ,并将传至 5代以上的肌样骨髓基质细胞采用微量细胞病变 (CPE)法 ,开展了对 5种病毒的敏感性试验。结果表明 ,人骨髓基质肌样细胞对滤泡性口腔炎病毒 ,脊髓灰质炎病毒、I型和Ⅱ型单纯疱疹病毒均敏感 ,能产生明显的CPE ,其效价 (TCID50 )可达10 - 3~ 10 - 4,其中胎儿骨髓基质肌样细胞对病毒敏感性至少比儿童高 2倍 ,比成人高 4倍 ,即胎儿>儿童 >成人 ,但对B3型柯萨奇病毒均不敏感。我们的研究结果不仅可为人骨髓基质细胞体外长期培养提供了确实可行的简便方法 ,而且为该细胞对病毒的敏感性提供了实验依据 ,并为该细胞的利用开辟了新的应用前景。 展开更多
关键词 人骨髓基质肌样细胞 体外长期培养 病毒 敏感性
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2002年世界十大科学成就之首——siRNA和RNAi 被引量:11
14
作者 杨吉成 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 2003年第3期253-256,共4页
关键词 小分子干扰RNA RNA干扰 RNA 蛋白质 基因表达 SIRNA RNAI 科学成就 2002年
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人脐带血和外周血血清中5种细胞因子水平的测定 被引量:4
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作者 杨吉成 李晓诗 《中国实验临床免疫学杂志》 1996年第5期28-31,共4页
在骨髓细胞半固体琼脂培养体系中研究了人脐带血清(CBs)对骨髓粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)的影响。单纯用CBs培养可使骨髓CFU-GM(x↑-±s,26.0375±10.2327)显著高于正常成人... 在骨髓细胞半固体琼脂培养体系中研究了人脐带血清(CBs)对骨髓粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)的影响。单纯用CBs培养可使骨髓CFU-GM(x↑-±s,26.0375±10.2327)显著高于正常成人外周血清(PBs),(x↑-±s,11.5917±3.6047,P〈0.001)CBs加GM-CSF组的CFU-GM(x↑-±s,119.0792±35.0991)是单纯CBs组的4.57倍, 展开更多
关键词 脐带血清 CFU-GM IL-6
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rhIL-2对人骨髓CFU-GM与CFU-E和BFU-E的影响
16
作者 杨吉成 盛伟华 +2 位作者 金苏华 李丽娥 郝思国 《临床肿瘤学杂志》 CAS 1997年第2期14-16,共3页
目的:为了探索rhIL-2对人骨髓造血干祖细胞体外增殖的影响。方法:本文采用甲基纤维素体外半固体培养法。结果:证明了50~1000U/ml rhIL-2单用时对人骨髓造血祖细胞的CFU-GM、CFU-E及BFU-E无直接刺激增生作用,当与GM-CSF联合应用时,100~... 目的:为了探索rhIL-2对人骨髓造血干祖细胞体外增殖的影响。方法:本文采用甲基纤维素体外半固体培养法。结果:证明了50~1000U/ml rhIL-2单用时对人骨髓造血祖细胞的CFU-GM、CFU-E及BFU-E无直接刺激增生作用,当与GM-CSF联合应用时,100~400U/ml rhIL-2其CFU-GM集落形成率明显高于单用GM-CSF(100U/ml)的对照组(P<0.05),当与EPO(2U/mi)联合应用时其CFU-E,及BFU-E集落形成率也明显高于单用EPO对照组(P<0.05),而1000U/ml rhIL-2其三种集落形成数目呈下降趋势,可能有抑制作用。结论:以上结果说明100~400U/ml rhIL-2可应用于协同GM-CSF及EPO体外扩增骨髓干/祖细胞来进行骨髓移植。 展开更多
关键词 BFU-E CFU-GM 人骨髓 集落形成 GM-CSF EPO 单用 RHIL-2 CFU-E 对照组
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干扰素的分子遗传学和细胞生物学 被引量:1
17
作者 杨吉成 郝蕴兰 《细胞生物学杂志》 CSCD 1989年第1期1-4,共4页
本文着重从基因和分子生物学水平上阐明了干扰素基因结构和调控及基因产物的特性。并详细介绍了干扰素与细胞膜表面受体相互作用后在细胞中所引起的分子变化,它不仅可抑制细胞生长,而且对免疫细胞表面受体特別是MHC的表达以及淋巴因子... 本文着重从基因和分子生物学水平上阐明了干扰素基因结构和调控及基因产物的特性。并详细介绍了干扰素与细胞膜表面受体相互作用后在细胞中所引起的分子变化,它不仅可抑制细胞生长,而且对免疫细胞表面受体特別是MHC的表达以及淋巴因子的产生均有调节作用。并从分子水平上介绍了干扰素抗病毒的作用机理。 展开更多
关键词 干扰素 分子遗传学 细胞生物学
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MxA抗病毒蛋白的研究进展 被引量:5
18
作者 杨吉成 《苏州医学院学报》 2000年第6期499-504,共6页
关键词 抗病毒蛋白 MXA 多肽 生物工程
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中药复方制剂对再障红系造血祖细胞体外增殖的实验研究 被引量:2
19
作者 杨吉成 《中国实验临床免疫学杂志》 1997年第5期59-61,共3页
本文应用造血祖细胞体外甲基纤素半固体培养方法,研究了中药复方制剂-固本生血丸对再障碍骨髓红系造血祖细胞体外集落形成的影响。结果表明:该制剂在有EPO存在的条件,下对再生障碍性贫血病人骨髓红系造血祖细胞的集落形成具有促... 本文应用造血祖细胞体外甲基纤素半固体培养方法,研究了中药复方制剂-固本生血丸对再障碍骨髓红系造血祖细胞体外集落形成的影响。结果表明:该制剂在有EPO存在的条件,下对再生障碍性贫血病人骨髓红系造血祖细胞的集落形成具有促进作用;且在中药浓度为0.01-10μg/ml的浓度范围内,促增殖作用与中药浓度成正相关,作用高峰在10μg/ml的中药浓度上,当浓度超过10μg/ml时,促增殖作用不明显。 展开更多
关键词 中药复方 红系祖细胞 体外增殖 半固体培养
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试论中药刺五加与干扰素的关系及作用
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作者 杨吉成 《中草药》 CAS 1984年第6期38-40,共3页
刺五加是五加科植物,由根提取出的刺五加多糖在干扰素促诱生时,可明显提高细胞诱生干扰素的产量。刺五加所发挥的抗病毒、抗肿瘤及免疫调节的作用,可能与刺五加多糖诱生和促诱生的干扰素所发挥的高活性多功能有关。干扰素可能是该药药... 刺五加是五加科植物,由根提取出的刺五加多糖在干扰素促诱生时,可明显提高细胞诱生干扰素的产量。刺五加所发挥的抗病毒、抗肿瘤及免疫调节的作用,可能与刺五加多糖诱生和促诱生的干扰素所发挥的高活性多功能有关。干扰素可能是该药药理效应的一种重要介质。从而进一步证明刺五加确为古书所记载的'上品'五加,是'扶正固本'的良药。 展开更多
关键词 刺五加注射液 免疫调节 抗病毒 NDV 干扰素基因 诱生干扰素
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