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重组蛋白包涵体的复性研究 被引量:33
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作者 杨晓仪 林键 吴文言 《生命科学研究》 CAS CSCD 2004年第2期100-105,共6页
重组蛋白在大肠杆菌中的高表达往往形成不可溶、无生物活性的包涵体,需经过变性溶解后,在适当条件下复性形成天然的构象,才可恢复其生物活性.变复性实验是建立在对蛋白质体外折叠机制的了解的基础上.根据近年来对蛋白质折叠机制的认识... 重组蛋白在大肠杆菌中的高表达往往形成不可溶、无生物活性的包涵体,需经过变性溶解后,在适当条件下复性形成天然的构象,才可恢复其生物活性.变复性实验是建立在对蛋白质体外折叠机制的了解的基础上.根据近年来对蛋白质折叠机制的认识和重组蛋白包涵体在复性方面的主要进展,论述以下3个方面的内容1)蛋白质在细胞内的折叠机制;2)蛋白质体外折叠机制;3)蛋白质复性的策略和方法. 展开更多
关键词 蛋白质折叠 包涵体 蛋白质复性 二硫键形成
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急性心肌梗死患者急诊PCI术后ST段回落与术前血清NT-proBNP水平的相关性研究 被引量:13
2
作者 杨晓仪 张晓坤 +3 位作者 付玉梅 黎文成 张立建 古雅珏 《检验医学与临床》 CAS 2016年第14期1949-1952,共4页
目的:探讨急性心肌梗死(AMI)患者急诊冠脉介入治疗(PCI)术后ST 段回落与术前血清N末端B型脑钠肽前体(NT‐proBNP)水平的相关性。方法选择120例AMI患者为研究对象。根据术后180 minST段回落情况,分为ST段回落组(A组,n=108)... 目的:探讨急性心肌梗死(AMI)患者急诊冠脉介入治疗(PCI)术后ST 段回落与术前血清N末端B型脑钠肽前体(NT‐proBNP)水平的相关性。方法选择120例AMI患者为研究对象。根据术后180 minST段回落情况,分为ST段回落组(A组,n=108)和ST段未回落组(B组,n=12)。分析PCI术前和术后180 min血清 NT‐proBNP水平,以及术后1年主要不良心脏事件(MACE)发生情况。结果 A组患者NT‐proBNP水平[(854.3±70.2)pg/mL]低于术前[(1064.3±173.2)pg/mL],差异有统计学意义(P=0.031)。A组患者术后 MACE发生率(14.8%)明显低于B组患者(50.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。AMI患者STR程度与MACE发生率呈负相关(r=-0.667,P=0.005)。△NT‐proBNP与MACE呈负相关(r=-0.551,P=0.023),与STR呈正相关(r=0.629,P=0.009)。在 MACE的预测方面,△NT‐proBNP的 AUC 为0.838,95% CI:0.714~0.893,cut‐off为65.4,敏感度88.4%,特异度83.7%;STR的AUC为0.903,95% CI:0.834~0.953,cut‐off值为33.5,敏感度83.4%,特异度80.3%。结论 AMI患者急诊PCI术后180 minSTR与NT‐proBNP水平存在一定的相关性,两者均有助于预测M ACE。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 急诊冠脉介入治疗 ST段回落 N末端B型脑钠肽前体
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hs-cTnT、NT-proBNP和hs-CRP联合检测对急性心肌梗死的诊断价值 被引量:14
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作者 杨晓仪 黎文成 +6 位作者 付玉梅 张晓坤 张立建 秦建勇 古雅珏 梁惠芬 李勰璘 《河北医药》 CAS 2015年第23期3541-3543,共3页
目的探讨高敏心肌肌钙蛋白T(hs-cTnT)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)及高敏C-反应蛋白(hs-CRP)联合检测诊断AMI的临床价值。方法选取收治的AMI患者99例,其中STEMI 76例,NSTEMI 23例,另选无心血管、肺、肾等器质性疾病及急慢性炎症,... 目的探讨高敏心肌肌钙蛋白T(hs-cTnT)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)及高敏C-反应蛋白(hs-CRP)联合检测诊断AMI的临床价值。方法选取收治的AMI患者99例,其中STEMI 76例,NSTEMI 23例,另选无心血管、肺、肾等器质性疾病及急慢性炎症,ECG正常的体检健康者100例为对照组。比较2组人员入院即刻血清hs-cTnT、NT-proBNP及hs-CRP水平,通过绘制ROC曲线比较检测的准确度,并运用统计学方法探讨临床适用的hscTnT诊断临界值。结果AMI患者hs-cTnT水平为0.027-4.019 mg/L,均高于健康人群第99百分位值(0.014 mg/L),提示hs-cTnT阴性可排除AMI诊断;AMI患者hs-cTnT、NT-proBNP及hs-CRP水平均显著高于对照组(P〈0.01)且STEMI患者相关指标水平显著高于NSTEMI患者(P〈0.01);当以0.035 mg/L为临界值时诊断AMI灵敏度为94.7%,而特异度有较大提升,高至66.3%,此时反映试验真实性的Youden值最大,为0.610,提示以此为最佳临界值早期诊断AMI的临床价值最好;ROC曲线表明联合检测的曲线下面积为0.911,大于单纯hs-cTnT检测的曲线下面积0.887(P〈0.05)及POCT检测的曲线下面积0.828(P〈0.05)。结论 hs-cTnT作为心肌损伤特异性蛋白,对于AMI早期诊断具有良好的敏感性和特异性,联合NT-proBNP、hs-CRP等指标对于早期诊断AMI具有重要临床价值,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 高敏心肌肌钙蛋白 N末端脑钠肽前体 高敏C-反应蛋白 急性心肌梗死
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肌钙蛋白I、脑钠肽和CRP水平与急性心肌梗死关系的临床研究 被引量:6
4
作者 杨晓仪 黎文成 +6 位作者 付玉梅 张晓坤 张立建 秦建勇 古雅珏 梁惠芬 李勰璘 《现代医院》 2015年第9期20-21,24,共3页
目的探讨研究肌钙蛋白I(cTnI)、脑钠肽(BNP)和C反应蛋白(CRP)水平与急性心肌梗死的关系。方法选取2012年2月~2014年8月我院心血管病区收入治疗的心梗患者99例,将其列为观察组,同时选取同期健康志愿者60例作为对照组,比较两组... 目的探讨研究肌钙蛋白I(cTnI)、脑钠肽(BNP)和C反应蛋白(CRP)水平与急性心肌梗死的关系。方法选取2012年2月~2014年8月我院心血管病区收入治疗的心梗患者99例,将其列为观察组,同时选取同期健康志愿者60例作为对照组,比较两组的cTnI、BNP和CRP水平差异,同时统计随访患者半年,统计观察组患者中发生心血管事件患者的cTnI、BNP和CRP水平情况。结果观察组crrnI、BNP和CRP水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P〈0.05);观察组患者随访半年中发生心血管事件共27例,发生心血管事件患者的cTnI、BNP和CRP水平显著高于其余观察组患者,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论cTnI、BNP和CRP在急性心肌梗死患者中明显增高,在发生心血管事件患者中更为显著,这3项指标对诊断急性心肌梗死,预测心血管事件发生具有重要意义。 展开更多
关键词 肌钙蛋白I 脑钠肽 C-反应蛋白 急性心肌梗死
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血清纤维化指标联合肝功能指标检测用于诊断慢性肝脏疾病的临床观察 被引量:9
5
作者 杨晓仪 黎文成 +5 位作者 付玉梅 张晓坤 古雅珏 梁惠芬 曾颖 李勰璘 《临床医学工程》 2014年第6期757-758,共2页
目的研究血清纤维化指标联合肝功能指标检测用于诊断慢性肝脏疾病的临床价值。方法病例选取2011年6月至2013年6月我院接诊的80例慢性肝脏疾病患者进行研究,并选择40例正常人作为正常组进行对照研究。检测分析血清纤维化指标和肝功能指标... 目的研究血清纤维化指标联合肝功能指标检测用于诊断慢性肝脏疾病的临床价值。方法病例选取2011年6月至2013年6月我院接诊的80例慢性肝脏疾病患者进行研究,并选择40例正常人作为正常组进行对照研究。检测分析血清纤维化指标和肝功能指标,并评定慢性肝脏疾病的阳性检出率。结果联合检测的阳性检出率(93.75%)明显高于纤维化指标检测(67.50%)和肝功能指标检测的阳性检出率(75.00%),比较有显著性差异(χ2=17.479 0,P=0.000 2)。慢性肝脏疾病患者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)均明显升高(P<0.01);肝硬化和肝癌患者的甲胎蛋白(AFP)均出现明显升高(P<0.01);透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)及型前胶原(PCⅢNP)均出现明显升高(P<0.01)。结论血清纤维化指标联合肝功能指标检测用于诊断慢性肝脏疾病的临床价值较高,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 慢性肝脏疾病 血清纤维化指标 肝功能指标
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HC2-HPV-DNA联合TCT筛查宫颈癌早期及癌前病变的临床分析 被引量:54
6
作者 付玉梅 张晓坤 +1 位作者 梁惠芬 杨晓仪 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第11期1823-1825,共3页
目的:探究采用二代杂交捕获法检测高危人乳头瘤病毒DNA(hybrid capture2-human papillomavirus-DNA,HC2-HPV-DNA)方法联合薄层液基细胞学(thinprep cytology test,TCT)检查在宫颈癌早期及癌前病变筛查中的应用价值。方法:采用两种方法... 目的:探究采用二代杂交捕获法检测高危人乳头瘤病毒DNA(hybrid capture2-human papillomavirus-DNA,HC2-HPV-DNA)方法联合薄层液基细胞学(thinprep cytology test,TCT)检查在宫颈癌早期及癌前病变筛查中的应用价值。方法:采用两种方法对本院妇科门诊377例发现宫颈病变的患者进行筛查,同时做病理组织学活检。结果:HC2-HPV-DNA的阳性率随着宫颈病变严重程度的增加而升高,差异有统计学义意(P<0.05),HC2-HPV-DNA与TCT联合检测时,对于CINⅠ及以上病变诊断的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别为93.2%、87.1%、90.2%、88.1%和92.6%,均较单独应用时显著提高。结论:HC2-HPV-DNA与TCT方法联合运用可提高宫颈癌早期及癌前病变诊断的准确性。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒 宫颈上皮内瘤变 宫颈癌
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肾功能指标联合分析对老年高血压病早期肾损害的诊断价值 被引量:11
7
作者 黎文成 刘国科 +2 位作者 张晓坤 杨晓仪 付玉梅 《国际检验医学杂志》 CAS 2008年第6期512-514,共3页
目的观察老年高血压病患者尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、β2-微球蛋白(β2-MG)和胱抑素C(CysC)5项肾功能指标对检出早期肾损害的价值。方法使用全自动生化分析仪对152例老年高血压病患者和50例正常人血清中5项肾功能指标进行检测,... 目的观察老年高血压病患者尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、β2-微球蛋白(β2-MG)和胱抑素C(CysC)5项肾功能指标对检出早期肾损害的价值。方法使用全自动生化分析仪对152例老年高血压病患者和50例正常人血清中5项肾功能指标进行检测,并对检测结果进行统计学分析。结果尿蛋白阴性的老年高血压病组血Urea和Cr浓度与健康对照组比较差异无统计学意义,而UA、β2-MG和CysC浓度与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),其曲线下面积分别为0.727、0.907、0.817,在各最佳截断点的灵敏度分别为52.7%、78.2%、72.7%,特异度分别为98.4%、94.7%、78.9%。在诊断老年高血压病患者早期肾损害中联合检测较单项指标阳性率高,以联合检测UA、β2-MG和CysC这3项肾功能指标组阳性率最高,达86.8%。结论检测血UA、β2-MG和CysC是诊断老年高血压病早期肾损害的敏感指标,联合检测有较高的检出率,对高血压性肾病的早期诊断有重要意义,适合在临床推广使用。 展开更多
关键词 肾功能试验 高血压 诊断 老年人
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单纯疱疹病毒抗体检测在生殖器疱疹断中的应用 被引量:11
8
作者 付玉梅 张晓坤 +1 位作者 杨晓仪 梁惠芬 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第22期2970-2971,共2页
目的探讨单纯疱疹病毒(HSV)抗体检测对生殖器疱疹的诊断意义,了解疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒感染情况。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)对140例疑似生殖器疱疹患者(观察组)进行HSV抗体检测。另选100例健康体检人员血清作为对照组。... 目的探讨单纯疱疹病毒(HSV)抗体检测对生殖器疱疹的诊断意义,了解疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒感染情况。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)对140例疑似生殖器疱疹患者(观察组)进行HSV抗体检测。另选100例健康体检人员血清作为对照组。结果 140例疑似生殖器疱疹患者HSV-ⅠIgM、HSV-ⅠIgG的检出率分别为6.43%、37.86%,HSV-ⅠIgM、HSV-ⅠIgG检出率分别为14.29%、47.14%;对照组HSV-ⅠIgM、HSV-ⅡIgG的检出率分别为1.00%、18.00%,HSV-ⅡIgM、HSV-ⅡIgG检出率分别为5.00%、16.00%,两组间检出率差异有统计学意义(P<0.05),观察组和对照组IgG阳性率均明显高于IgM(P<0.05);男性HSV-ⅠIgM、HSV-ⅠIgG、HSV-ⅡIgM、HSV-ⅡIgG检出率分别为6.78%、30.51%、8.47%、28.81%,女性分别为6.17%、43.21%、18.52%、60.49%。不同性别仅HSV-ⅡIgG阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒抗体检出率高,以HSV-Ⅱ感染为主,女性HSV-ⅡIgG感染率高于男性。 展开更多
关键词 生殖器疱疹 单纯疱疹病毒 酶联免疫吸附试验
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社区感染耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属酶的筛选及基因分析 被引量:5
9
作者 付玉梅 杨晓仪 +2 位作者 梁惠芬 李秋馨 朱寿萍 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1880-1882,共3页
目的了解社区感染产金属酶铜绿假单胞菌主要基因型,为临床抗感染治疗提供依据。方法收集医院感染和社区感染耐亚胺培南铜绿假单胞菌分别为106株和38株,采用改良三维实验分析社区感染亚胺培南耐药铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶(MBL)表型... 目的了解社区感染产金属酶铜绿假单胞菌主要基因型,为临床抗感染治疗提供依据。方法收集医院感染和社区感染耐亚胺培南铜绿假单胞菌分别为106株和38株,采用改良三维实验分析社区感染亚胺培南耐药铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶(MBL)表型;聚合酶链反应(PCR)检测IMP-1和VIM-2耐药基因。结果社区感染铜绿假单胞菌检出395例,亚胺培南耐药38例(9.6%),医院感染铜绿假单胞菌检出482例,亚胺培南耐药106例(22.0%),社区感染IRPA明显低于医院感染(P<0.05)。改良三维试验检测社区感染亚胺培南耐药铜绿假单胞菌产金属酶情况,38株IRPA检出7株MBL阳性,检出率为18.4%。对7株产金属酶表型阳性铜绿假单胞菌用IMP-1和VIM-2引物进行PCR扩增检测,凝胶电泳显示3株为VIM-2型金属酶。结论社区感染耐亚胺培南铜绿假单胞菌产MBL率较高,携带基因型主要是VIM-2。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 金属酶 聚合酶链式反应 基因
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广州市某社区60岁以上老年人健康状况调查研究 被引量:5
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作者 古雅珏 杨晓仪 钟惠娟 《检验医学与临床》 CAS 2016年第18期2631-2633,共3页
目的了解广州市荔湾区彩虹、逢源社区60岁以上老年人的健康现状,为进一步防治老年人慢性病提供科学依据。方法 2015年对社区内3 183名60岁以上老年人进行健康体检,测定体质量指数(BMI)、血压、心电图、血糖、血脂、尿酸。结果 BMI超标... 目的了解广州市荔湾区彩虹、逢源社区60岁以上老年人的健康现状,为进一步防治老年人慢性病提供科学依据。方法 2015年对社区内3 183名60岁以上老年人进行健康体检,测定体质量指数(BMI)、血压、心电图、血糖、血脂、尿酸。结果 BMI超标、高血压、心电图异常、高血糖、高血脂、高尿酸的男性分别检出率为57.62%、34.93%、22.62%、34.52%、25.63%、17.84%;而女性检出率分别为57.44%、24.71%、16.8%、35.81%、38.9%、22.21%。结论该社区老年人高血压、高血糖、高血脂、高尿酸的检出率较高,应采取有效的行为干预措施,做到早发现、早治疗,改善社区老年人的健康状况。 展开更多
关键词 老年人 社区 健康状况
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酶转换法检测血清同型半胱氨酸在常规生化检验中的评价 被引量:6
11
作者 张晓坤 黎文成 +1 位作者 古雅珏 杨晓仪 《中国医药指南》 2011年第19期5-7,共3页
目的评价酶转换法在生化分析仪上检测血清同型半胱氨酸(HCY)的方法学特性,探讨适合常规和自动化检测血清同型半胱氨酸的方法。方法采用自动生化分析仪测定血清HCY浓度,通过精密度、回收试验、线性试验、干扰试验、参考范围并与FPIA法及H... 目的评价酶转换法在生化分析仪上检测血清同型半胱氨酸(HCY)的方法学特性,探讨适合常规和自动化检测血清同型半胱氨酸的方法。方法采用自动生化分析仪测定血清HCY浓度,通过精密度、回收试验、线性试验、干扰试验、参考范围并与FPIA法及HPLC法对比等方法进行方法学评价。结果批内CV分别为2.5%、2.9%;日间CV分别为3.9%、4.5%,总CV分别为5.2%、5.6%;回收率为104.2%;线性范围2.0~40.0μmol/L;本法和荧光偏振免疫法(FPIA)比较:Y=0.97X=0.22,R2=0.93,t=2.01,P>0.05;与高效液相色谱法(HPLC)比较:Y=0.91X+1.87,R2=0.97,t=1.95,P>0.05,差异均无显著性;不同浓度的干扰物显示对结果无明显干扰;参考值范围分别为男性(11.74±4.08)μmol/L,女性参考值:(8.96±3.11)μmol/L;血清与血浆结果差异无显著意义(t=0.23,P>0.05)。结论本方法操作简便,精密度较好,灵敏度高,线性范围宽,抗干扰因素强,结果准确,可以满足大批量标本的常规与自动化分析,是一种值得推广的常规方法。 展开更多
关键词 酶转换法 血清 半胱氨酸
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胆舒胶囊对非酒精性脂肪肝患者的疗效分析 被引量:2
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作者 梁惠芬 莫洁庭 +2 位作者 连炬飞 付玉梅 杨晓仪 《检验医学与临床》 CAS 2017年第5期610-612,共3页
目的观察胆舒胶囊对非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者的疗效。方法选取90例NAFLD患者(进行胆舒胶囊治疗)纳入治疗组,同期90例NAFLD患者(进行维生素C治疗)纳入对照组。检测其治疗前、治疗3个月和治疗6个月的体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张... 目的观察胆舒胶囊对非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者的疗效。方法选取90例NAFLD患者(进行胆舒胶囊治疗)纳入治疗组,同期90例NAFLD患者(进行维生素C治疗)纳入对照组。检测其治疗前、治疗3个月和治疗6个月的体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、腰围、腰臀比、总胆红素(TBIL)、胆汁酸(TBA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TCH)、游离脂肪酸(FFAS)和空腹胰岛素(FINS)水平并行统计学分析。结果治疗组治疗6个月和治疗前比较,BMI、SBP、DBP、腰围、腰臀比、TBIL、TBA、ALT、AST、GGT、FBG、TG、TCH、FFAS和FINS差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗6个月和对照组治疗6个月比较,BMI、SBP、腰围、TBIL、TBA、ALT、AST、GGT、FBG、TG、TCH、FFAS和FINS差异有统计学意义(P<0.05)。结论胆舒胶囊对NAFLD患者疗效显著,能有效减轻患者的临床症状,改善其肝功能,对拓展中医药在NAFLD治疗的新领域具有积极的临床意义。 展开更多
关键词 胆舒胶囊 非酒精性脂肪肝病 肝功能
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肉桂酸锗不同剂量组诱导小鼠子宫颈癌(U_(14))细胞凋亡的实验研究 被引量:2
13
作者 张燕 杨晓仪 +1 位作者 匡忠生 肖纯 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期467-470,共4页
目的探讨肉桂酸锗不同剂量组(1.5mg/ml、3mg/ml、6mg/ml)对小鼠子宫颈癌(U14)细胞的抑制效应及其作用机制。方法抗肿瘤活性实验采用以下方法:(1)药理试验;(2)HE染色观察;(3)免疫组化检测;(4)特殊染色观察;(5)流式细胞仪检测。结果 (1)... 目的探讨肉桂酸锗不同剂量组(1.5mg/ml、3mg/ml、6mg/ml)对小鼠子宫颈癌(U14)细胞的抑制效应及其作用机制。方法抗肿瘤活性实验采用以下方法:(1)药理试验;(2)HE染色观察;(3)免疫组化检测;(4)特殊染色观察;(5)流式细胞仪检测。结果 (1)肉桂酸锗组(3mg/ml)及环磷酰胺阳性对照组瘤重明显减轻,其抑瘤率分别为46.65%和54.27%;(2)流式细胞仪证实有凋亡细胞,并检测到肉桂酸锗组(3mg/ml)及环磷酰胺阳性对照组诱导U14细胞的凋亡率分别为22.65%和20.61%;(3)在DNA直方图上可见肉桂酸锗组(3mg/ml)在G0-G1期细胞前出现"亚G1"峰(凋亡峰),生理盐水阴性对照组无明显凋亡峰;另外,肉桂酸锗组(3mg/ml)对瘤细胞周期有明显影响,它使瘤细胞G2-M期减少、细胞周期延长、对瘤细胞增殖的抑制作用增强。结论肉桂酸锗组(3mg/ml)对小鼠子宫颈癌(U14)细胞的生长有一定抑制作用,诱导瘤细胞凋亡可能是其抑制U14细胞生长的主要作用方式。 展开更多
关键词 肉桂酸锗 抗肿瘤活性 细胞凋亡
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基因技术与中药现代化 被引量:1
14
作者 吴文言 杨晓仪 徐安龙 《世界科学技术-中医药现代化》 2003年第1期6-9,共4页
目前,基因技术在中药领域应用较多的是基因指纹图谱,主要针对药材鉴定,而在药靶基因、毒副反应基因以及药用基因与活性蛋白/肽类等方面的研究则较少涉及。本文介绍了基因技术在上述中药研究与开发应用领域的作用。同时提出了一些新见解。
关键词 药物筛选 药用基因 活性肽 基因技术 中药现代化
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电化学发光法和酶联免疫吸附法对HBSAg和HBSAb测试结果的评价 被引量:3
15
作者 梁惠芬 付玉梅 杨晓仪 《广州医科大学学报》 2014年第5期70-72,共3页
目的:探讨电化学发光法(ECLIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)在乙型肝炎病毒血清标志物检测中的差异。方法:分别使用ECLIA和ELISA法对2013年1-12月广州医学院荔湾医院收集的标本进行HBV-M检测,分析两种检测方法的差异及临床应用价值。结果:... 目的:探讨电化学发光法(ECLIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)在乙型肝炎病毒血清标志物检测中的差异。方法:分别使用ECLIA和ELISA法对2013年1-12月广州医学院荔湾医院收集的标本进行HBV-M检测,分析两种检测方法的差异及临床应用价值。结果:两种检测方法测定HBs Ag的阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05),有较好的一致性(Ka Pp=0.96)。ELISA法测定HBs Ab的S/CO比值>11.0者156例,其中152例ECLIA法测定值>100 mlU/mL,一致性达97.4%。结论:ELISA法测定HBs Ag与ECllA法测定结果一致;与ECLIA相比,ELISA测定的HBs Ab具有肯定的免疫保护作用的S/CO比值>11.0;不具有免疫保护作用的S/CO比值<5。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 酶联免疫吸附试验 电化学发光免疫分析 血清学标志物
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从噬菌体抗体库中筛选D二聚体特异的Fab抗体 被引量:1
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作者 田朝伟 杨晓仪 +3 位作者 贾宗剑 吴文言 黄少华 陈敏生 《广州医学院学报》 2005年第1期19-22,共4页
目的:从人源性噬菌体抗体库中筛选抗人D二聚体单克隆抗体并进行可溶性表达。方法:以人D二聚体标准品为抗原对所构建的噬菌体抗体库进行两轮“吸附-洗脱-扩增”筛选,从中筛选出抗人D二聚体的噬菌体Fab抗体,并在大肠杆菌细胞中进行可溶性... 目的:从人源性噬菌体抗体库中筛选抗人D二聚体单克隆抗体并进行可溶性表达。方法:以人D二聚体标准品为抗原对所构建的噬菌体抗体库进行两轮“吸附-洗脱-扩增”筛选,从中筛选出抗人D二聚体的噬菌体Fab抗体,并在大肠杆菌细胞中进行可溶性表达。结果:经4次电转化构建了库容为2. 8×108cfu的抗体库,滴度为4. 1×1014PFU/mL,Fab基因重组率为46%。经过淘筛后携带抗人D二聚体抗体的特异性噬菌体得到了明显的富集。用试剂盒以ELISA法检测对人D二聚体的结合活性,得到抗人D二聚体单克隆抗体。筛选出的阳性克隆成功在大肠杆菌细胞中可溶性表达筛选出的阳性克隆在大肠杆菌细胞中可溶性表达。结论:人D二聚体标准品对抗体库的淘筛,富集了表面呈现抗人D二聚体的单克隆抗体的噬菌体,成功构建了人源性抗D二聚体噬菌体抗体,并成功在大肠杆菌细胞中可溶性表达。 展开更多
关键词 噬菌体展示 抗体组合文库 D二聚体 PCR
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五项诊断指标联合检测对糖尿病肾病患者应用的价值 被引量:1
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作者 张晓坤 曾华 +2 位作者 李勰璘 古雅珏 杨晓仪 《广州医学院学报》 2011年第1期51-54,共4页
目的:研究糖尿病肾病(DN)患者血清同型半胱氨酸(HCY)、胱抑素C(Cys-C)、α1-微球蛋白(α1-MG)、可溶性血栓调节蛋白(sTM)及C反应蛋白(CRP)等5项诊断指标的变化及其诊断价值。方法:将292例糖尿病患者(DM组)分为单纯性糖尿病组(SDM组)95例... 目的:研究糖尿病肾病(DN)患者血清同型半胱氨酸(HCY)、胱抑素C(Cys-C)、α1-微球蛋白(α1-MG)、可溶性血栓调节蛋白(sTM)及C反应蛋白(CRP)等5项诊断指标的变化及其诊断价值。方法:将292例糖尿病患者(DM组)分为单纯性糖尿病组(SDM组)95例,早期糖尿病肾病组(EDN组)98例,临床糖尿病肾病组(CDN组)99例,与健康对照组(102例)平行检测上述5项指标。结果:DM组各项指标水平明显高于健康对照组(P<0.01)。糖尿病肾病组(DN)血清5项指标水平组间存在显著差异(P<0.01)。并且随着DN病情进展,各项指标随着24 h尿蛋白排泄率(UAER)的增加逐渐增高(P<0.01),且互相之间关系密切,表明其升高与DN的发生、发展密切相关。在DM患者的病情发展过程中,HCY、Cys-C、α1-MG、STM、CRP最早出现,可为疾病的早期诊断提供数据。结论:血清HCY、CYS-C、α1-MG水平可作为DN早期肾损伤的反应肾小球滤过功能的敏感指标;STM反映高HCY水平的DN患者的微血管损伤程度;CRP与DN患者病情正相关,可作为DN患者病情检测新指标,5项联合检测可提高检出敏感性及阳性率,全面协助DN肾损伤的早期诊断。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 同型半胱氨酸 Α1-微球蛋白 血栓调节蛋白
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人源性肺癌噬菌体展示抗体库的构建 被引量:2
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作者 古雅珏 杨晓仪 张晓坤 《中国医药指南》 2012年第19期22-24,共3页
目的 应用噬菌体展示技术,构建天然人源抗肺癌噬菌体抗体组合文库,筛选能与肺癌细胞特异结合的抗体.方法 用RNA 提取试剂盒提取淋巴细胞RNA,以Oligo DT 为引物反转录合成cDNA,以半套式PCR 扩增轻链和重链可变区抗体基因并重组到原核表... 目的 应用噬菌体展示技术,构建天然人源抗肺癌噬菌体抗体组合文库,筛选能与肺癌细胞特异结合的抗体.方法 用RNA 提取试剂盒提取淋巴细胞RNA,以Oligo DT 为引物反转录合成cDNA,以半套式PCR 扩增轻链和重链可变区抗体基因并重组到原核表达载体中,通过噬菌体外壳蛋白形成融合蛋白,形成噬菌体抗体组合文库.结果 电泳显示扩增的mRNA 有清晰的28s、18s 和5.8s 的条带,600~700bp 片段者为重组克隆;噬菌体展示抗体库大小在108~107 之间;优化电转化条件,最终得到库容为1.2×108cfu,双链重组率为41% 的抗体库.结论 成功构建人源抗肺癌噬菌体展示文库,为下一步筛选具有肺癌细胞特异亲和力的人源性单克隆抗体奠定了基础. 展开更多
关键词 噬菌体展示 肺癌 抗体
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人源抗D-二聚体抗体的构建和分析 被引量:1
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作者 田朝伟 陈颖 +4 位作者 杨晓仪 贾宗剑 吴文言 黄少华 陈敏生 《岭南急诊医学杂志》 2006年第3期180-181,共2页
目的:从人源性噬菌体抗体库中筛选抗人D-二聚体单克隆抗体,构建一种导向溶栓抗体。方法:应用噬菌体展示技术构建血栓病人的抗体库,从中淘选出能与血栓主要成份纤维蛋白的降解产物D-二聚体有特异结合作用的抗体。将抗体在XL1-Blu中可溶... 目的:从人源性噬菌体抗体库中筛选抗人D-二聚体单克隆抗体,构建一种导向溶栓抗体。方法:应用噬菌体展示技术构建血栓病人的抗体库,从中淘选出能与血栓主要成份纤维蛋白的降解产物D-二聚体有特异结合作用的抗体。将抗体在XL1-Blu中可溶性表达。再利用抗D-二聚体鼠源抗体进行竞争ELISA检验,证实抗体与D-二聚体结合的活性。结果:获得抗人D-二聚体单克隆抗体D13株。并成功在大肠杆菌细胞中可溶性表达,在ELISA检测中显示与D-二聚体结合的优势。结论:该抗体株D13可供进一步开展导向溶栓剂的研究。 展开更多
关键词 人源抗D-二聚体抗体 噬菌体展示 导向溶栓
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咖啡酸锗诱导小鼠宫颈癌(U_(14))细胞凋亡的实验研究
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作者 张燕 杨晓仪 +2 位作者 邢德刚 付玉梅 匡忠生 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第11期1912-1914,共3页
目的:从分子水平探讨咖啡酸锗对小鼠宫颈癌(U14)细胞的抑制效应及作用机制。方法:抗肿瘤活性实验采用:(1)药理试验;(2)普通染色光镜观察;(3)免疫组化观察PCNA、p53、bcl-2、ER、PR的表达;(4)甲基绿-派诺宁染色法;(5)流式细胞仪(FCM)测定... 目的:从分子水平探讨咖啡酸锗对小鼠宫颈癌(U14)细胞的抑制效应及作用机制。方法:抗肿瘤活性实验采用:(1)药理试验;(2)普通染色光镜观察;(3)免疫组化观察PCNA、p53、bcl-2、ER、PR的表达;(4)甲基绿-派诺宁染色法;(5)流式细胞仪(FCM)测定DNA含量。结果:(1)咖啡酸锗及环磷酰胺组瘤重明显减轻,抑瘤率分别为47.28%和54.27%;(2)咖啡酸锗及环磷酰胺组的凋亡率分别为23.32%和20.61%;(3)咖啡酸锗组在DNA直方图上出现"亚G1"峰(即凋亡峰),生理盐水组无明显"亚G1"峰;咖啡酸锗对U14细胞周期有明显影响,使U14细胞G2~M期减少、细胞周期延长、对细胞增殖的抑制作用增强。结论:咖啡酸锗对小鼠宫颈癌(U14)细胞生长有一定的抑制作用,诱导瘤细胞凋亡可能是其抑制U14细胞生长的机制之一。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 咖啡酸锗 抗肿瘤活性 宫颈癌U14细胞 凋亡
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