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产肌醇的植物乳杆菌ZJ2868菌粉制备工艺 被引量：16
1
作者 于平 胡淳玉 +4 位作者 黄星星 刘航 杨柳贞 贺敏 马健 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第9期142-149,共8页
为研究产肌醇的植物乳杆菌ZJ2868的菌粉制备工艺,以菌体的存活率为指标,研究植物乳杆菌ZJ2868菌粉制备过程中的离心转速、保护剂配方、菌粉复溶条件和菌粉贮藏稳定性。结果:菌体收集的最佳离心条件:4000 r/min、10 min。最佳冻干保护剂... 为研究产肌醇的植物乳杆菌ZJ2868的菌粉制备工艺,以菌体的存活率为指标,研究植物乳杆菌ZJ2868菌粉制备过程中的离心转速、保护剂配方、菌粉复溶条件和菌粉贮藏稳定性。结果:菌体收集的最佳离心条件:4000 r/min、10 min。最佳冻干保护剂配方:谷氨酸钠11%、脱脂乳14%和海藻糖9.0%。最佳复溶条件:在原保护介质中复溶30 min。最佳贮藏温度:4℃。制得植物乳杆菌ZJ2868冻干菌粉的活菌数为2.90×10^(9) CFU/mL,存活率达85.4%,水分含量3.7%。本研究结果为植物乳杆菌菌粉的制备提供了试验依据。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 肌醇 菌粉制备 存活率
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蜡样芽孢杆菌高产新型中性蛋白酶发酵条件的优化 被引量：7
2
作者 于平 吴赟婷 +4 位作者 杨柳贞 贺敏 胡淳玉 刘航 易明花 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第1期109-117,共9页
目的:优化蜡样芽孢杆菌发酵生产新型中性蛋白酶的培养条件。方法:采用Plackett-Burman试验设计,筛选影响蜡样芽孢杆菌高产新型中性蛋白酶酶活力的关键因子;通过Box-Behnken响应面试验设计获得新型中性蛋白酶发酵的最佳工艺条件。结果:... 目的:优化蜡样芽孢杆菌发酵生产新型中性蛋白酶的培养条件。方法:采用Plackett-Burman试验设计,筛选影响蜡样芽孢杆菌高产新型中性蛋白酶酶活力的关键因子;通过Box-Behnken响应面试验设计获得新型中性蛋白酶发酵的最佳工艺条件。结果:筛选出影响蜡样芽孢杆菌高产新型中性蛋白酶的主要因子为葡萄糖、蛋白胨和pH值。获得的最优化发酵培养基组成和培养条件:葡萄糖35 g/L,蛋白40.38 g/L,氯化钠15 g/L,硫酸镁1.5 g/L,Tween-8010 g/L,装液量50 mL/250 mL,pH 7.15,菌龄12 h,发酵时间36 h。在上述条件下,蜡样芽孢杆菌发酵生产新型中性蛋白酶的酶活力高达696.51 U/mL,是未优化前的1.93倍。结论:研究结果为新型中性蛋白酶的产业化生产和应用提供了良好基础。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 新型中性蛋白酶 Plackett-Burman试验设计 响应面法 发酵条件 优化
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大肠杆菌谷氨酸脱羧酶A的基因克隆与表达及其酶学性质 被引量：4
3
作者 于平 刘航 +4 位作者 朱鹏志 胡淳玉 杨柳贞 贺敏 马健 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第8期35-45,共11页
目的:研究大肠杆菌谷氨酸脱羧酶A的基因克隆与表达及其酶学性质。方法:首先采用PCR技术克隆编码大肠杆菌谷氨酸脱羧酶A的基因gadA,并将该基因克隆至载体pET-28a(+)中,形成重组质粒pET28a-gadA;然后将该重组质粒转化至大肠杆菌BL21,构建... 目的:研究大肠杆菌谷氨酸脱羧酶A的基因克隆与表达及其酶学性质。方法:首先采用PCR技术克隆编码大肠杆菌谷氨酸脱羧酶A的基因gadA,并将该基因克隆至载体pET-28a(+)中,形成重组质粒pET28a-gadA;然后将该重组质粒转化至大肠杆菌BL21,构建重组菌株大肠杆菌BL21/pET28a-gadA。进一步采用Ni2+亲和层析色谱分离纯化谷氨酸脱羧酶A,研究其酶学性质。结果:经PCR和双酶切鉴定,重组质粒pET28a-gadA构建成功。SDS-PAGE分析表明Ni2+亲和层析纯化后得到电泳纯级谷氨酸脱羧酶A,其比活力为19 U/mg,得率为12.8%。在pH 4.5时,谷氨酸脱羧酶A的酶活力最高。该酶的最适温度为50℃,且在40℃时有较高的热稳定性,70℃时热稳定性较差,酶活力仅为初始酶活的17.9%。Cu2+对该酶的酶活力有较强的抑制作用,Ba2+、Co2+和Mg2+对其酶活力影响不大,Ca2+能显著增加该酶的酶活力。结论:研究结果为深入理解谷氨酸脱羧酶A的酶学性质及其γ-氨基丁酸的制备提供了试验基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌 谷氨酸脱羧酶A 基因克隆与表达 酶学性质
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基于葡萄糖激酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的NADPH高效再生
4
作者 于平 杨柳贞 +2 位作者 马健 张琪立 陈庆伟 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第8期163-172,共10页
目的:构建辅酶NADPH高效再生的基因工程菌,获得辅酶NADPH高效再生的最佳工艺条件。方法:利用基因工程技术将辅酶NADPH再生关键酶的基因glk和zwf导入到大肠杆菌BL21中,实现辅酶NADPH循环高效再生,并优化辅酶NADPH再生的工艺条件。结果:... 目的:构建辅酶NADPH高效再生的基因工程菌,获得辅酶NADPH高效再生的最佳工艺条件。方法:利用基因工程技术将辅酶NADPH再生关键酶的基因glk和zwf导入到大肠杆菌BL21中,实现辅酶NADPH循环高效再生,并优化辅酶NADPH再生的工艺条件。结果:成功构建了含有辅酶NADPH再生关键酶两个基因的重组大肠杆菌BL21/pETDuet-1-glk-zwf;通过正交设计优化试验,获得重组工程菌株产辅酶NADPH的最佳工艺条件是:诱导温度20℃、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷浓度0.25 mmol/L、接种量1.5%、装液量100 mL/250 mL。在此条件下进行1 L发酵摇瓶诱导培养48 h,辅酶NADPH产量高达151.79μmol/L。结论:研究结果为辅酶NADPH循环再生提供了良好的理论基础。 展开更多
关键词 葡萄糖激酶 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 辅酶NADPH高效再生 正交试验优化
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响应面法优化羊栖菜多糖提取工艺研究 被引量：4
5
作者 倪顺 李洁 +3 位作者 杨柳贞 郑丹滢 卢颖 许明峰 《杭州师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2018年第4期386-390,共5页
利用响应面法对羊栖菜多糖的提取工艺进行优化.在单因素试验基础上,根据Box-Benhnken设计原理,在三因素三水平上,通过分析来确定各个提取工艺的最佳条件,得出羊栖菜多糖水浸提的最佳工艺条件为:浸提温度87.0℃,浸提时间2.60h,液料比32... 利用响应面法对羊栖菜多糖的提取工艺进行优化.在单因素试验基础上,根据Box-Benhnken设计原理,在三因素三水平上,通过分析来确定各个提取工艺的最佳条件,得出羊栖菜多糖水浸提的最佳工艺条件为:浸提温度87.0℃,浸提时间2.60h,液料比32∶1,提取率为7.92%,与理论预测值7.91%较接近,表明采用响应面法优化羊栖菜多糖的提取工艺可行. 展开更多
关键词 羊栖菜 多糖 提取 响应面法
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响应面法优化重组巴斯德毕赤酵母合成ECH42的培养基组分及其重组酶降解几丁质的研究 被引量：1
6
作者 于平 顾董璐 +5 位作者 杨柳贞 胡淳玉 贺敏 刘航 马健 易明花 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1410-1420,共11页
采用响应面法在摇瓶水平对重组巴斯德毕赤酵母合成内切几丁质酶的培养基组分进行优化,并探讨重组内切几丁质酶降解几丁质的最佳反应条件。首先对培养基中显著影响内切几丁质酶活力的关键组分通过Plackett-Burman试验设计进行筛选;然后通... 采用响应面法在摇瓶水平对重组巴斯德毕赤酵母合成内切几丁质酶的培养基组分进行优化,并探讨重组内切几丁质酶降解几丁质的最佳反应条件。首先对培养基中显著影响内切几丁质酶活力的关键组分通过Plackett-Burman试验设计进行筛选;然后通过Box-Behnken试验设计和响应面法确定关键组分的最佳浓度。结果筛选出3个具有显著效应的关键组分为酵母膏、油酸和吐温-80,最佳浓度分别为:2.45%、0.17%和0.62%。优化后的最佳培养基组成为:2.45%酵母膏、2.00%蛋白胨、0.50%酵母氮碱(YNB)、0.50%甲醇、0.17%油酸、0.62%吐温-80和0.40%PTM1。在该培养基中,重组巴斯德毕赤酵母在摇瓶水平(25m L/250m L)发酵生产内切几丁质酶的活力高达92.26U/m L。重组内切几丁质酶催化几丁质降解的最佳反应条件为:粉末几丁质浓度为4%,p H和温度分别为7.0和30℃,反应时间为10h。研究结果为后期在发酵罐中大规模生产内切几丁质酶和几丁寡糖提供了基础。 展开更多
关键词 重组巴斯德毕赤酵母 内切几丁质酶 培养基组分 响应面优化 几丁质降解
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