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体细胞核移植胚胎核重编程的研究进展 被引量：7
1
作者 杨正田 沈伟 邓继先 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第6期641-646,共6页
尽管在多种哺乳动物种系中成功制备了体细胞克隆后代 ,但当前的克隆技术仍有许多亟待解决的问题。体细胞核移植胚胎大多存在许多发育异常 ,造成了妊娠早期高流产率和出生后高死亡率。有研究认为 ,克隆胚胎发育障碍的一个重要的原因是供... 尽管在多种哺乳动物种系中成功制备了体细胞克隆后代 ,但当前的克隆技术仍有许多亟待解决的问题。体细胞核移植胚胎大多存在许多发育异常 ,造成了妊娠早期高流产率和出生后高死亡率。有研究认为 ,克隆胚胎发育障碍的一个重要的原因是供体细胞的遗传重编程不完全。哺乳动物种系中 ,DNA甲基化是胚胎发育期转录调节的必需步骤 ,除了单拷贝基因序列外 ,在基因组很多的区域都可以观测到克隆胚胎的异常甲基化。此外 ,克隆胚胎的基因印迹也存在异常。 展开更多
关键词 体细胞核移植 重编程 印迹 甲基化
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t-PA突变体山羊乳腺表达载体构建及转染细胞的核移植试验 被引量：2
2
作者 杨正田 兰国成 +4 位作者 沈伟 吴晓洁 徐秀英 谭景和 邓继先 《生物技术通讯》 CAS 2004年第5期433-436,共4页
构建了t-PA突变体山羊乳腺特异表达载体pGBCt-PAm,包括长4.1kb的山羊β-酪蛋白启动子以及启动子前2.4kb的鸡β-珠蛋白绝缘子序列;并检测了表达载体在家兔乳腺的瞬间表达,验证了载体的有效性。通过电击和脂质体2种转染方式转染了山羊胎... 构建了t-PA突变体山羊乳腺特异表达载体pGBCt-PAm,包括长4.1kb的山羊β-酪蛋白启动子以及启动子前2.4kb的鸡β-珠蛋白绝缘子序列;并检测了表达载体在家兔乳腺的瞬间表达,验证了载体的有效性。通过电击和脂质体2种转染方式转染了山羊胎儿成纤维细胞(GFFC),经过筛选检测,得到了7株能大量扩增的PCR阳性细胞株。其中的2株(M9,M10)已经进行了首次细胞核移植和胚胎移植试验,2只受体羊2个情期未见返情。 展开更多
关键词 t-PA 乳腺表达 转染细胞 首次 羊胎 阳性细胞 脂质体 Β-酪蛋白 核移植 突变体
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ht-PAm基因在山羊β-酪蛋白基因座定位整合的研究 被引量：6
3
作者 沈伟 杨正田 +4 位作者 田利源 吴晓洁 陈宏 黄培堂 邓继先 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期361-365,共5页
利用体细胞基因打靶与核移植技术制备动物乳腺生物反应器是当今转基因定位整合表达的一种新技术。分别克隆山羊的 β_酪蛋白基因 5′调控区的 6 3kb片段 ,外显子 7、外显子 8和 9三个基因片段 ,并与克隆的人tPA突变体cDNA一起构建了含... 利用体细胞基因打靶与核移植技术制备动物乳腺生物反应器是当今转基因定位整合表达的一种新技术。分别克隆山羊的 β_酪蛋白基因 5′调控区的 6 3kb片段 ,外显子 7、外显子 8和 9三个基因片段 ,并与克隆的人tPA突变体cDNA一起构建了含有neo和tk正负筛选标记基因的 β_酪蛋白基因打靶载体PGBC4tPA,并验证了neo基因、tk基因以及Cre_LoxP系统的有效性。将线性化的PGBC4tPA通过电转染整合到山羊胎儿成纤维细胞基因组中 ,利用G4 18和GANC进行抗性细胞克隆的药物筛选 ,初步获得抗性细胞克隆 2 4 4个 ,PCR检测后获得阳性细胞克隆 31个 ,其中初步验证 2个细胞克隆转植基因整合位点重组后的基因序列正确 ,并且该细胞克隆能够有效扩增。这为下一步基因打靶体细胞核移植制备山羊乳腺生物反应器奠定了基础。 展开更多
关键词 山羊 基因打靶 乳腺生物反应器 Β-酪蛋白基因 ht-PAm基因
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低等级道路升级改造的设计方法及实例分析 被引量：2
4
作者 杨正田 《冶金丛刊》 2017年第5期199-200,共2页
结合威信县XC45线四级公路升级改造实例,通过分析我国低等级道路的运营现状和存在问题,提出进行低等级道路升级改造的设计原则和方法。从道路线形、横断面改造和重要节点工程三方面分析了改造设计的关键要点,解析如何进行低等级道路的... 结合威信县XC45线四级公路升级改造实例,通过分析我国低等级道路的运营现状和存在问题,提出进行低等级道路升级改造的设计原则和方法。从道路线形、横断面改造和重要节点工程三方面分析了改造设计的关键要点,解析如何进行低等级道路的升级改造设计。 展开更多
关键词 低等级道路 升级改造 路堤拓宽 线形改造
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构建高效的初中体育课堂合作学习策略 被引量：1
5
作者 杨正田 《东西南北（教育）》 2020年第7期15-15,共1页
随着新课改的不断实施与深入,传统的教学模式得到了非常大的冲击。作为一名老师来说一定要积极转变自己的教学观念,利用多样化的教学模把学生们的学习积极性激发出来,使学生更加积极主动地参与进教学活动中。本文小组合作在初中体育教... 随着新课改的不断实施与深入,传统的教学模式得到了非常大的冲击。作为一名老师来说一定要积极转变自己的教学观念,利用多样化的教学模把学生们的学习积极性激发出来,使学生更加积极主动地参与进教学活动中。本文小组合作在初中体育教学过程中所存在的问题进行了分析,并提出了小组合作构建初中体育高效课堂的策略,目的就是为了更好的提升教学质量,为学生以后体育方面的发展打下坚实的基础。 展开更多
关键词 小组合作 初中体育 高效课堂
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茵陈蒿汤并龙胆泻肝汤对立泛霉素所致急性黄疸型肝炎辨治一得
6
作者 杨正田 沈哲民 +1 位作者 郑文显 黄升腾 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2003年第3期188-188,共1页
临床上常用于治疗肺结核的药物大多有损害肝脏的副作用,立泛霉素(Rifampicin)为其中常用的一种,大约十分之一的患者服此药的最初几周内血清转氨酶会有升高的现象,这是因为药物的有毒代谢物对肝脏产生直接的毒性反应所致。但无论是否继... 临床上常用于治疗肺结核的药物大多有损害肝脏的副作用,立泛霉素(Rifampicin)为其中常用的一种,大约十分之一的患者服此药的最初几周内血清转氨酶会有升高的现象,这是因为药物的有毒代谢物对肝脏产生直接的毒性反应所致。但无论是否继续服药,多数患者几周后血清转氨酶通常会降至200U以下,并逐渐恢复正常。不过,其中也有大约10％的患者会产生与病毒性肝炎难以区分的临床或病理表现,其病检(Liver biopsy)和病毒性肝炎相似,多半会有肝组织桥状坏死(Bridging hepatic necrosis)。 展开更多
关键词 茵陈蒿汤 龙胆泻肝汤 立泛霍素 急性黄疸型肝炎 中医药治疗
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医院债务债权重组的账务处理
7
作者 杨正田 《中国工会财会》 2006年第4期37-37,共1页
关键词 企业债务重组 医院 账务处理 债权重组 企业会计准则 社会主义市场经济 会计业务处理 会计处理 经营过程 债权问题
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