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小儿清炎合剂(716合剂)治疗呼吸道合胞病毒所致呼吸道感染疗效观察及血清学研究
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作者 胡晓璐 李剑 +3 位作者 杜云 杨细媚 杨长存 杨青青 《药品评价》 CAS 2024年第4期443-446,共4页
目的探究小儿清炎合剂(716合剂)治疗呼吸道合胞病毒所致呼吸道感染疗效观察及血清学研究。方法将2023年1月至2023年9月江西省儿童医院收治的呼吸道合胞病毒所致呼吸道感染的80例患儿作为研究对象,根据随机对照表法将其分为观察组40例,... 目的探究小儿清炎合剂(716合剂)治疗呼吸道合胞病毒所致呼吸道感染疗效观察及血清学研究。方法将2023年1月至2023年9月江西省儿童医院收治的呼吸道合胞病毒所致呼吸道感染的80例患儿作为研究对象,根据随机对照表法将其分为观察组40例,对照组40例。对照组采用雾化吸入联合静脉输液进行治疗,观察组在对照组的基础上口服小儿清炎合剂(716合剂)。比较两组的临床疗效,治疗前后炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、C反应蛋白(CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)],免疫功能水平(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)),恢复情况和不良反应。结果观察组治疗有效率为95.00%,高于对照组的80.00%(P<0.05)。治疗后,两组IL-6、IL-10、CRP、SAA、TNF-α水平均下降且观察组低于对照组(P<0.05);观察组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均高于对照组,而观察组CD8^(+)水平低于对照组(P<0.05)。观察组退热、止咳、平喘以及住院时间均小于对照组(P<0.05)。两组在治疗过程中均未出现任何不良反应。结论小儿清炎合剂(716合剂)能够缓解呼吸道合胞病毒感染患儿的炎性症状,增强患儿免疫功能,促进患儿恢复,安全性良好。 展开更多
关键词 小儿清炎合剂 呼吸道感染 呼吸道合胞病毒 疗效观察 儿童
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天蚕素A截短肽在大肠埃希菌中的高效表达及活性分析 被引量:4
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作者 杨细媚 文阳安 +3 位作者 万祥辉 李朴 刘靳波 涂植光 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期20-23,共4页
将构建好的含抗菌肽天蚕素A(cecropin A,CA)截短肽CA19(36、210)1~5倍串连体的pET-31b(+)载体进行诱导表达,其表达量比单体表达明显提高。将融合蛋白用亲和层析法将其纯化,其纯度达到90%以上。纯化融合蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了其特... 将构建好的含抗菌肽天蚕素A(cecropin A,CA)截短肽CA19(36、210)1~5倍串连体的pET-31b(+)载体进行诱导表达,其表达量比单体表达明显提高。将融合蛋白用亲和层析法将其纯化,其纯度达到90%以上。纯化融合蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了其特异的多克隆抗体。纯化串连融合蛋白用溴化氰切割成单体检测其活性,发现均具有抑菌活性。本研究为抗菌肽的基因工程制备提供了新途径。 展开更多
关键词 抗菌肽 天蚕素A 串连表达 抑菌活性 多克隆抗体
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基于序列分析的天蚕素A串连融合表达载体的构建 被引量:3
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作者 杨细媚 文阳安 +1 位作者 万祥辉 涂植光 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期76-79,共4页
天蚕素A(Cecropin A,CA)是来源于惜古比天蚕(Hyalophoracecropia)的含有37个氨基酸的抗菌肽,在非极性环境中形成α螺旋型结构,具有抗菌活性强、抗菌谱广等特点。为降低天蚕素A对宿主的毒性及提高其表达丰度和稳定性,在序列分析的基础上... 天蚕素A(Cecropin A,CA)是来源于惜古比天蚕(Hyalophoracecropia)的含有37个氨基酸的抗菌肽,在非极性环境中形成α螺旋型结构,具有抗菌活性强、抗菌谱广等特点。为降低天蚕素A对宿主的毒性及提高其表达丰度和稳定性,在序列分析的基础上设计了3条天蚕素A氨基酸序列,分别为CA19、CA36和CA210。根据大肠杆菌密码子的偏爱性分别合成相应的3对寡核苷酸链,并通过重叠PCR方法合成成熟肽CA。将含有CA19、CA36、CA210和CA1~5个拷贝基因的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)和BLR(DE3)PlysS,成功构建了串连融合表达载体,为下一步的抗菌活性及免疫表位的分析打下基础。 展开更多
关键词 抗菌肽 CA 重叠PCR 串连表达 序列分析
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抗菌肽的研究进展 被引量:3
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作者 杨细媚 万祥辉 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第20期2803-2805,共3页
关键词 抗菌肽 耐药性 基因工程
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EBV-IgM、EBV-DNA在传染性单核细胞增多症急性期的诊断意义研究 被引量:2
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作者 杨细媚 万祥辉 +1 位作者 段荣 柯江维 《实用检验医师杂志》 2013年第4期233-235,共3页
目的分析EB病毒(epstein-barrvirus,EBV)抗体IgM和EBV-DNA水平在传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)急性期不同时间段的分布规律,探讨其在IM诊断中的价值。方法收集2011年1月-2012年12月于我院就诊的163例IM患儿血清标... 目的分析EB病毒(epstein-barrvirus,EBV)抗体IgM和EBV-DNA水平在传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)急性期不同时间段的分布规律,探讨其在IM诊断中的价值。方法收集2011年1月-2012年12月于我院就诊的163例IM患儿血清标本,采用酶联免疫法检测EBV-IgM,荧光定量PCR法检测EBV-DNA载量。对感染后第1、2、3、4周的EBV-IgM、EBV-DNA检测结果进行统计学分析。结果 EBV-IgM在第1、2、3、4周的阳性率分别为80.5%(70/87),89.6%(43/48),72.1%(31/43)和48.7%(19/39)。EBV-DNA在第1、2、3、4周的阳性率分别为64.4%(47/73),38.0%(19/50),25.7%(9/35)和0%(0/27)。EBV-IgM与EBV-DNA联合检测第1、2、3、4周的阳性率分别为93.2%(109/117)、97.8%(45/46)、75.0%(36/48)和48.7%(19/39),与单独用EBV-IgM检测的阳性率比较,除第1周差异有统计学意义(P<0.05)外,其他时间检测阳性率差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 EBV-IgM在第1、2、3、4周的阳性率均高于EBV-DNA,联合检测两指标在第1周时可显著提高敏感性,有利于IM的早期诊断,但第2-4周时联合检测意义不大。 展开更多
关键词 EBV-IgM抗体 EBV-DNA 传染性单核细胞增多症
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间接免疫荧光法检测血小板相关抗体新判读标准的建立和评价
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作者 杨细媚 万祥辉 +3 位作者 黄超 付晶晶 刘志强 柯江维 《实验与检验医学》 CAS 2021年第6期1421-1423,共3页
目的通过建立新的判读标准来提高间接免疫荧光法(IIF)检测血小板相关抗体(PAIg)的诊断效能。方法收集2020年全年确诊为免疫性血小板减少症(ITP)患儿261例和红斑狼疮(SLE)患儿50例作为实验组,50例再生障碍性贫血(AA)作为病例对照组,50例... 目的通过建立新的判读标准来提高间接免疫荧光法(IIF)检测血小板相关抗体(PAIg)的诊断效能。方法收集2020年全年确诊为免疫性血小板减少症(ITP)患儿261例和红斑狼疮(SLE)患儿50例作为实验组,50例再生障碍性贫血(AA)作为病例对照组,50例健康体检儿童作为正常对照组进行PAIg检测。分析新旧两个判读标准的结果,并与流式细胞仪(FCM)法进行比对,分析两种方法的符合率。结果IIF法使用新的判读标准后,ITP组患儿阳性率从19.54%上升到62.07%,诊断效率从45.01%上升为67.64%。SLE组患儿阳性率从16.00%上升到38.00%。IIF法与FCM法在诊断ITP和SLE中结果具有一致性,kappa值分别为0.680和0.653。结论新的IIF法判读标准提高了对临床疾病的诊断效能,更适合作为ITP患儿PAIg检测的筛查实验。 展开更多
关键词 间接免疫荧光法 血小板相关抗体 判读标准 评价
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丙型肝炎病毒基因分型及core蛋白区的分子演化分析 被引量:6
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作者 万祥辉 曾照芳 杨细媚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第8期964-968,共5页
目前有多种方法对丙型肝炎病毒进行基因分型,但尚无一个"金标准".为确定丙型肝炎病毒基因分型的最佳区域,从GenBank中筛选出15条对各成熟肽区域有注释,来源于不同国家地区的丙型肝炎病毒全基因组序列,分别对5′UTR区、core区... 目前有多种方法对丙型肝炎病毒进行基因分型,但尚无一个"金标准".为确定丙型肝炎病毒基因分型的最佳区域,从GenBank中筛选出15条对各成熟肽区域有注释,来源于不同国家地区的丙型肝炎病毒全基因组序列,分别对5′UTR区、core区、E1区、E2区及NS5B区建系统进化树.结果发现,以5′UTR区建树基因分型不完全正确,而以core区、E1区、E2区及NS5B区建树,基因分型均完全正确,但同一基因型间的核苷酸演化距离存在差异.计算5条1a型序列的core区、E1区、E2区、NS5B区的核苷酸演化距离并和全基因组序列核苷酸演化距离比较,结果发现,NS5B蛋白区基因分型最能反映病毒株间的演化关系.同时分析各序列的core区的分子演化,为发明针对core区的新的PCR-RFLP基因分型方法提供新思路. 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 基因型 分子演化 核心蛋白
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携抗菌肽PR39基因重组腺病毒的构建及抗胞内伤寒菌研究 被引量:3
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作者 文阳安 杨细媚 +1 位作者 李朴 涂植光 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期131-134,共4页
目的构建抗菌肽PR39基因腺病毒表达载体,观察其在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达及抗菌活性。方法PCR扩增抗菌肽PR39成熟肽基因,插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,经PmeI线性化后与腺病毒骨架(pAdEasy-1)共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌... 目的构建抗菌肽PR39基因腺病毒表达载体,观察其在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达及抗菌活性。方法PCR扩增抗菌肽PR39成熟肽基因,插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,经PmeI线性化后与腺病毒骨架(pAdEasy-1)共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组产生重组腺病毒载体(pAd-PR39)。重组腺病毒载体经PacI线性化后转染293细胞,包装出重组腺病毒(Ad-PR39)。利用重组腺病毒感染体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用RT-PCR和免疫细胞化学检测目的基因的表达,并对其抗菌活性进行初步检测。结果先后构建了携抗菌肽PR39基因的穿梭载体和重组病毒载体,包装出重组腺病毒,并成功感染小鼠巨噬细胞RAW264.7。感染重组腺病毒的小鼠巨噬细胞RAW264.7能有效表达抗菌肽PR39。与对照(10.8±2.1CFU/cell)相比,感染重组腺病毒的小鼠巨噬细胞RAW264.7具有更强的杀灭胞内伤寒菌的能力(7.2±1.8CFU/cell)。结论构建的重组腺病毒能够感染小鼠巨噬细胞RAW264.7并发挥抗菌作用,为抗菌肽PR39在胞内菌感染基因治疗中的应用奠定了实验基础。 展开更多
关键词 抗菌肽 PR39 腺病毒载体 胞内菌 巨噬细胞
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CBC联合LDH对白血病、淋巴瘤骨髓侵犯诊断价值的ROC分析研究 被引量:5
9
作者 万祥辉 杨细媚 邹学森 《实验与检验医学》 CAS 2015年第2期140-143,共4页
目的探讨血细胞计数(CBC)联合乳酸脱氢酶(LDH)对白血病、淋巴瘤骨髓侵犯早期筛查的临床诊断价值,建立筛查规则。方法收集我院260例白血病、淋巴瘤骨髓侵犯患者初诊或复发时初次CBC、LDH结果,运用受试者工作曲线(ROC)分析白细胞总数(WBC... 目的探讨血细胞计数(CBC)联合乳酸脱氢酶(LDH)对白血病、淋巴瘤骨髓侵犯早期筛查的临床诊断价值,建立筛查规则。方法收集我院260例白血病、淋巴瘤骨髓侵犯患者初诊或复发时初次CBC、LDH结果,运用受试者工作曲线(ROC)分析白细胞总数(WBC)、血红蛋白(HB)、血小板(PLT)、淋巴细胞绝对值(L#)、淋巴细胞百分比(L%)、中性粒细胞绝对值(N#)、中性粒细胞百分比(N%)、单核细胞绝对值(M#)、单核细胞百分比(M%)及LDH对白血病、淋巴瘤骨髓侵犯诊断的曲线下面积(AUC),筛选出具有诊断价值的指标。分析这些指标联合诊断的灵敏度(SE)、特异性(SP)、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV),建立筛查规则。结果增高有诊断价值的指标有WBC、L#、L%、LDH、M#;减低有诊断价值的指标有N%、HB、PLT、N#。建立的CBC+LDH筛查规则如下:WBC≥20×109/L或≤2.7×109/L;HB≤60 g/L;PLT≤55×109/L或≥355×109/L;L#≥3.5×109/L;L%≥52%;M#≥0.7×109/L;LDH≥400U/L;WBC不能分类或分类不全;当WBC≥20×109/L,HB、PLT不减低,L#、L%、PLT不增高,不存在WBC不能分类或分类不全情况,则可排除白血病及淋巴瘤骨髓侵犯的可能性。该筛查规则对白血病、淋巴瘤骨髓侵犯的诊断灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为95.4%、62.5%、80.5%、89.3%。结论 CBC+LDH法优于CBC法,可作为白血病、淋巴瘤细胞骨髓侵犯的有效筛查手段。 展开更多
关键词 CBC LDH ROC 白血病 淋巴瘤
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血液病细胞形态学诊断数据库的设计与应用 被引量:4
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作者 万祥辉 杨细媚 +1 位作者 邹学森 金国兵 《实验与检验医学》 CAS 2015年第4期405-406,417,共3页
目的设计、开发基于血细胞形态的血液病诊断数据库。方法 Delphi2007为软件开发平台,SQL2008为数据库开发平台。用相机拍摄已确诊的血液病外周血和骨髓细胞图像,将血细胞图像及相应的血细胞计数(CBC)、乳酸脱氢酶(LDH)数据上传到数据库... 目的设计、开发基于血细胞形态的血液病诊断数据库。方法 Delphi2007为软件开发平台,SQL2008为数据库开发平台。用相机拍摄已确诊的血液病外周血和骨髓细胞图像,将血细胞图像及相应的血细胞计数(CBC)、乳酸脱氢酶(LDH)数据上传到数据库。结果数据库实现了上传更新及"按血液病分类查询"、"按细胞查询"、"按细胞结构查询"、"综合查询"四种专业化的查询功能。结论数据库具有很强的实用性,适用于储存临床工作中有价值的血细胞图像以及血细胞形态学的教学科研。 展开更多
关键词 血细胞 形态学 数据库 血液病
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幽门螺杆菌蛋白芯片检测CagA、VacA在儿童相关疾病中的临床价值 被引量:2
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作者 胡晓璐 杨细媚 柯江维 《江西医药》 CAS 2021年第3期393-396,共4页
目的探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)细胞毒素相关蛋白A(Cytotoxinassociated A,CagA)、空泡毒素A(Vac lating cytotoxin A,VacA)在儿童上消化道疾病(Gastrointestinal disorders,GD)和免疫性血小板减少性紫癜(Idiopathic... 目的探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)细胞毒素相关蛋白A(Cytotoxinassociated A,CagA)、空泡毒素A(Vac lating cytotoxin A,VacA)在儿童上消化道疾病(Gastrointestinal disorders,GD)和免疫性血小板减少性紫癜(Idiopathic Thrombocytopenic Purpura,ITP)中的临床价值。方法选择2019年1月至2019年12月就诊于江西省儿童医院GD患儿436例,其中44例消化性溃疡(Gastroduodenal ulcer,GU),98例胃炎(Chronic superficial gastritis,CSG),294例功能性消化不良组(functional dyspepsia,FD),ITP患儿138例和健康体检儿童104例,采用蛋白芯片检测各组H.pylori CagA、VacA及实验室检测指标。结果GD组H.pylori检出率为59.86%,GD组Ⅰ型H.pylori感染率53.64%高于Ⅱ型H.pylori感染率43.29%(χ^(2)=5.592,P=0.018)。ITP组H.pylori检出率为52.89%,ITP组Ⅱ型H.pylori感染率为54.79%与Ⅰ型H.pylori菌株感染率42.47%差异无统计学意义(χ^(2)=2.221,P=0.136)。GU组CagA^(+)高于CSG组(χ^(2)=4.219,P=0.041)和FD组(χ^(2)=48.723,P=0.000);CSG组CagA^(+)显著高于FD组(χ^(2)=36.233,P=0.000)和NC组(χ^(2)=68.866,P=0.000);FD组CagA^(+)高于NC组(χ^(2)=22.387,P=0.000)。GU组和CSG组以Ⅰ型菌株为主。FD组以Ⅱ型菌株为主,高于Ⅰ型菌株感染率(P<0.05)。Ⅰ型H.pylori感染ITP患儿CD4^(+T)(%)、CD4^(+T)/CD8^(+T)低于Ⅱ型ITP患儿CD4^(+T)(%)、CD4^(+T)/CD8^(+T),差异具有统计学意义(P均<0.05),Ⅰ型H.pylori感染ITP患儿CD8^(+T)(%)显著高于Ⅱ型ITP患儿CD8^(+T)(%)(P<0.05)。Ⅰ型H.pylori感染ITP患儿血清炎症指标IL-6水平显著高于Ⅱ型(t=2.167,P=0.034)。结论Ⅰ型H.pylori菌株比Ⅱ型H.pylori菌株毒力更强,可导致更为严重的上消化道疾病;ITP与H.pylori感染具有相关性,Ⅰ型H.pylori感染ITP患儿免疫细胞功能受损更严重,体内炎症反应更剧烈。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 消化性溃疡 胃炎 免疫性血小板减少性紫癜 细胞毒素相关蛋白A 空泡毒素A
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用生物信息学方法确定丙型肝炎病毒基因分型的最佳区域 被引量:1
12
作者 万祥辉 曾照芳 杨细媚 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第3期81-83,共3页
从Genbank中筛选出15条对各成熟肽区域有注释来源于不同国家地区的丙型肝炎病毒全基因组序列,分别对5′UTR区,core区,E1区,E2区及NS5B区建系统进化树。结果发现以5′UTR区建树,基因分型不完全正确而以core区、E1区、E2区及NS5B区建树,... 从Genbank中筛选出15条对各成熟肽区域有注释来源于不同国家地区的丙型肝炎病毒全基因组序列,分别对5′UTR区,core区,E1区,E2区及NS5B区建系统进化树。结果发现以5′UTR区建树,基因分型不完全正确而以core区、E1区、E2区及NS5B区建树,基因分型均完全正确,但同一基因型间的核苷酸演化距离存在差异。计算5条1a型序列的core区、E1区、E2区、NS5B区的核苷酸演化距离并和全基因组序列核苷酸演化距离比较。结果发现NS5B蛋白区基因分型最能反映病毒株的演化关系。用生物信息学方法,比较丙型肝炎病毒的5个常用的基因分型区域,确定NS5B区为丙型肝炎病毒基因分型的最佳区域。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 基因型 NS5B蛋白 生物信息学
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淋巴瘤侵犯骨髓患者初次血常规综合指标分析 被引量:6
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作者 万祥辉 杨细媚 邹学森 《实用检验医师杂志》 2013年第4期241-242,共2页
恶性淋巴瘤晚期易侵犯骨髓或外周血,即恶性淋巴瘤的白血病期,该期疗效差、预后不良,严重影响患者健康。因此,本文研究收集2010—2012年我院淋巴瘤侵犯骨髓(lymphoma bone marrow involvement.LBMI)患者的初次血常规结果,分析白... 恶性淋巴瘤晚期易侵犯骨髓或外周血,即恶性淋巴瘤的白血病期,该期疗效差、预后不良,严重影响患者健康。因此,本文研究收集2010—2012年我院淋巴瘤侵犯骨髓(lymphoma bone marrow involvement.LBMI)患者的初次血常规结果,分析白细胞(white blood cell,WBC)、 展开更多
关键词 恶性淋巴瘤 血常规 综合指标 患者 骨髓 侵犯 初次 预后不良
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PLR、NLR、SAA和PTX3在川崎病合并冠脉损伤中的临床诊断价值 被引量:1
14
作者 胡晓璐 赖雨田 +1 位作者 杨细媚 柯江维 《江西医药》 CAS 2022年第6期641-645,648,共6页
目的探讨血小板—淋巴细胞比值(PLR)、中性粒细胞—淋巴细胞比值(NLR)、淀粉样蛋白A(SAA)、正五聚蛋白-3(PTX3)在川崎病(KD)合并冠状动脉病变(CAL)中的临床诊断价值。方法选择2018年6月至2021年6月江西省儿童医院住院KD患儿102例(CAL组3... 目的探讨血小板—淋巴细胞比值(PLR)、中性粒细胞—淋巴细胞比值(NLR)、淀粉样蛋白A(SAA)、正五聚蛋白-3(PTX3)在川崎病(KD)合并冠状动脉病变(CAL)中的临床诊断价值。方法选择2018年6月至2021年6月江西省儿童医院住院KD患儿102例(CAL组31例、NCAL组71例),同期选取60例健康体检儿童作为健康对照组。采用电阻抗法得到NLR、PLR,免疫比浊法检测SAA,ELISA法检测PTX3。比较各指标对KD合并CAL诊断价值。结果KD组NLR、PLR、SAA和PTX3均显著高于健康对照组(P均<0.01);CAL组NLR、PLR、SAA及PTX3均显著高于NCAL组(P均<0.01);NLR、SAA和PTX3诊断CAL的AUC分别为0.835、0.855和0.907,最佳临界值分别为2.14、100和8.66;PTX3+NLR联合、PTX3+SAA联合检测诊断效能优于单独检测。NLR、PTX3和SAA是KD合并CAL的独立危险因素。结论NLR、SAA和PTX3可作为诊断KD合并CAL的良好实验室诊断指标,具有诊断效能高、敏感性好、特异性高等特点,且指标联合检测对CAL诊断意义更大。 展开更多
关键词 川崎病 中性粒细胞绝对值与淋巴细胞绝对值比值 淀粉样蛋白A 正五聚蛋白3
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我国HCV主要基因型优势抗原表位的筛选 被引量:4
15
作者 万祥辉 杨细媚 邹学森 《实用检验医师杂志》 2015年第4期236-240,共5页
目的针对我国丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)主要基因型筛选出能有效诱导体液免疫和细胞免疫的抗原多肽。方法利用生物信息学方法预测评估我国HCV主要基因型1b、2a、6a型的优势B、CTL和Th抗原表位。以HCV-CTL、HCV-B+HCV-Th、HCV-... 目的针对我国丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)主要基因型筛选出能有效诱导体液免疫和细胞免疫的抗原多肽。方法利用生物信息学方法预测评估我国HCV主要基因型1b、2a、6a型的优势B、CTL和Th抗原表位。以HCV-CTL、HCV-B+HCV-Th、HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th组合肽作为免疫原免疫BALB/C小鼠,经乳酸脱氢酶释放法检测CTL杀伤活性、ELISPOT法检测分泌IFN-γ能力、ELISA法检测抗体滴度,对检测结果进行统计学分析。结果 SP2/0对照细胞未产生特异性免疫应答,而SP2/0-NS3实验细胞HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th和HCV-CTL均诱导了特异性的CTL应答,且当效靶比为25∶1和50∶1时,三组间差异均有统计学意义(F=2045,F=6338,P均<0.05),且HCVCTL+HCV-B+HCV-Th联合免疫激活的CTL活性高于HCV-CTL单独免疫,HCV-CTL单独免疫高于PBS空白对照,差异均有统计学意义(P均<0.05)。细胞体液联合免疫、单独体液免疫、单独细胞免疫刺激的分泌IFN-γ的细胞数量差异有统计学意义(F=5308,P<0.05)。单独体液免疫、单独细胞免疫刺激的分泌IFN-γ的细胞数量均低于细胞、体液联合免疫,单独体液免疫刺激的分泌IFN-γ的细胞数量高于单独细胞免疫,且差异均有统计学意义(P均<0.05)。不同时间点不同免疫原所诱导的特异性的Ig G抗体滴度差异均有统计学意义(P均<0.01)。不同时间点用HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th联合免疫和HCV-B+HCV-Th免疫所诱导的特异性Ig G抗体滴度均显著高于PBS空白对照,且差异均有统计学意义(P均<0.05),而细胞体液联合免疫与单独体液免疫之间特异性Ig G抗体滴度经比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HCV-CTL+HCV-B+HCV-Th联合免疫诱导了高效的体液免疫和细胞免疫应答,有望进一步开发为有效的重组HCV疫苗。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 多价疫苗 基因型 联合免疫
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Cyclopamine对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制的研究
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作者 刘靳波 余晓林 +4 位作者 文阳安 姜习新 李朴 杨细媚 涂植光 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期113-117,共5页
目的:探讨sonic hedgehog(Shh)信号通路的特异性抑制剂环杷明(cyclopamine)对血清饥饿的人肝癌Hep3B细胞增殖、早期凋亡和白蛋白(albumin,ALB)、甲胎球蛋白(α-fetoprotein,AFP)表达的影响。方法:采用WST-8法、激光共聚焦扫描显微术、FC... 目的:探讨sonic hedgehog(Shh)信号通路的特异性抑制剂环杷明(cyclopamine)对血清饥饿的人肝癌Hep3B细胞增殖、早期凋亡和白蛋白(albumin,ALB)、甲胎球蛋白(α-fetoprotein,AFP)表达的影响。方法:采用WST-8法、激光共聚焦扫描显微术、FCM法、RT-PCR和电化学发光免疫法,检测血清饥饿状态下cyclopamine引起的Hep3B细胞增殖抑制、线粒体膜电位改变,以及对细胞分泌ALB和AFP的影响。结果:血清饥饿状态下cyclopamine可明显抑制Hep3B细胞的增殖。半定量测量结果显示,Hep3B细胞平均红绿荧光吸光度比值有所降低;FCM法检测结果显示,6h后线粒体膜电位较0h时明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。AFP mRNA及蛋白分泌水平均明显降低,但对ALB mRNA及蛋白分泌影响不明显。结论:Cyclopamine对Hep3B细胞增殖以及AFP mRNA和蛋白的分泌有明显抑制作用,同时促进线粒体膜电位的降低,提示cyclopamine具有抑制肿瘤细胞生长和促进早期凋亡发生的作用。 展开更多
关键词 肝肿瘤 实验性 细胞凋亡 CYCLOPAMINE
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WS/T403-2012在自建生化检测系统室内质控中的应用研究
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作者 万祥辉 杨细媚 +4 位作者 刘国芳 银天娇 文灿 王春阳 邹学森 《实验与检验医学》 CAS 2020年第5期882-885,891,共5页
目的探讨优化自建生化检测系统室内质控(IQC)效果,以达到IQC同时监测检测系统精密度和正确度的目的。方法利用卫生部室间质评(EQA)控制品验证和评价本室室内质控项目靶值的合格性,以20次不同浓度水平的EQA控制品测定结果在WS/T403-2012... 目的探讨优化自建生化检测系统室内质控(IQC)效果,以达到IQC同时监测检测系统精密度和正确度的目的。方法利用卫生部室间质评(EQA)控制品验证和评价本室室内质控项目靶值的合格性,以20次不同浓度水平的EQA控制品测定结果在WS/T403-2012规定的B%范围内且与靶值差异无统计学意义的状态下建立的室内质控靶值为合格。在建立了合格室内质控靶值的基础上,通过规范IQC检测流程、优化试剂添加方案、合理修正校准品赋值,将各项目CV控制在WS/T403-2012规定的室内质控变异系数(CV)范围内。再利用EQA和6西格玛(σ)质量管理来评价IQC运行效果。结果2017年至2018年卫生部室间质评WS/T403-2012规定的常规生化项目全部合格,并且项目的CV值和西格玛值得到了显著改善;WS/T403-2012中未规定的项目,按照此方法执行也获得了较好的CV值。结论本研究建立的室内质控方法和策略能够将项目的CV值和总误差(TE)控制在WS/T403-2012要求的范围内,实现利用室内质控同时监测自建生化检测系统精密度和正确度的目的,并且对于WS/T403-2012没有规定的项目同样适用。 展开更多
关键词 WS/T403-2012 室内质控 正确度 自建生化检测系统
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丙型肝炎病毒B细胞表位评估模型的构建
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作者 万祥辉 曾照芳 杨细媚 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期74-75,77,共3页
根据研究的需要构建了丙型肝炎病毒(HCV)B细胞表位评估模型,主要用于B细胞抗原表位的预测计估。本系统可以根据预测获得的表位区间提取表位氨基酸残基和对应的蛋白质二级结构并计算出表位的平均抗原指数得分(AI),可以保存、查询、分析... 根据研究的需要构建了丙型肝炎病毒(HCV)B细胞表位评估模型,主要用于B细胞抗原表位的预测计估。本系统可以根据预测获得的表位区间提取表位氨基酸残基和对应的蛋白质二级结构并计算出表位的平均抗原指数得分(AI),可以保存、查询、分析预测的表位,用于多表位疫苗的设计。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 表位评估模型 平均抗原指数得分 构建
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α-羟丁酸脱氢酶与乳酸脱氢酶比值在发现α-羟丁酸脱氢酶和转氨酶底物耗尽中的应用研究
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作者 万祥辉 杨细媚 +1 位作者 银天娇 文灿 《实验与检验医学》 CAS 2017年第6期854-856,共3页
目的寻找能够发现α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)和转氨酶底物耗尽的筛查指标。方法分析HBDH与乳酸脱氢酶(LDH)在参考人群中的比值(HBDH/LDH),根据比值的升高或降低来推断HBDH和转氨酶是否存在底物耗尽的可能性,并通过查看反应曲线加以确认。结... 目的寻找能够发现α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)和转氨酶底物耗尽的筛查指标。方法分析HBDH与乳酸脱氢酶(LDH)在参考人群中的比值(HBDH/LDH),根据比值的升高或降低来推断HBDH和转氨酶是否存在底物耗尽的可能性,并通过查看反应曲线加以确认。结果 29例HBDH、ALT、AST底物耗尽案例均可通过HBDH/LDH比值关系推断发现,敏感性达100%。结论 HBDH/LDH的比值可以用于发现HBDH和转氨酶的底物耗尽,尤其是有利于发现容易被忽略的转氨酶底物耗尽情况。 展开更多
关键词 HBDH/LDH 底物耗尽 转氨酶
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江西地区儿童幽门螺杆菌感染的诊断及分型研究 被引量:6
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作者 应蕾 乐萍 +1 位作者 杨细媚 柯江维 《实验与检验医学》 CAS 2019年第6期1162-1164,共3页
目的检测和分析儿童及青少年慢性胃炎、消化性溃疡、血小板减少性紫癜和其他消化道外相关疾病患者血清中幽门螺旋杆菌(Hp)抗体的阳性情况;探讨不同类型Hp感染与儿童及青少年胃肠疾病发病的相关性以及蛋白芯片技术在儿童及青少年幽门螺... 目的检测和分析儿童及青少年慢性胃炎、消化性溃疡、血小板减少性紫癜和其他消化道外相关疾病患者血清中幽门螺旋杆菌(Hp)抗体的阳性情况;探讨不同类型Hp感染与儿童及青少年胃肠疾病发病的相关性以及蛋白芯片技术在儿童及青少年幽门螺杆菌感染诊断中的应用价值。方法应用蛋白芯片法检测2588例儿童及青少年血清标本中细胞毒素相关基因蛋白(CagA)、空泡毒素(VacA)、尿素酶(Ure)抗体的携带情况,用统计学方法分析比较各组之间阳性率的差异。结果在一定年龄范围内(5~15岁)Hp感染阳性率随年龄的增长有升高趋势(P<0.01);胃炎组、溃疡组三种抗体的阳性率明显高于对照组(P<0.01)。而消化道出血组抗体阳性率与对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论运用蛋白芯片技术检测Hp抗体及分型,有助于临床明确诊断、判断预后和疗效跟踪。Hp根除率与血清学分型有关,可用于判断是否对Hp进行根除治疗。方法简单易行,特异性强,对临床Hp治疗有一定指导作用。 展开更多
关键词 幽门螺旋杆菌 细胞毒素相关基因蛋白 空泡毒素蛋白 尿素酶抗体
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