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一株高产纤维素酶真菌的分离与鉴定 被引量:7
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作者 尹守亮 杨镒婴 +3 位作者 李秋园 何宝 郭世奇 周志江 《纤维素科学与技术》 CAS 2022年第2期9-18,共10页
纤维素类生物质是地球上分布最为广泛的可再生资源,筛选高效的纤维素降解菌株对于纤维素生物质资源的开发和利用具有重要的意义。采用微晶纤维素作为唯一碳源的筛选方法,从曹妃甸湿地土壤样品中分离到一株高产纤维素酶的真菌,通过对菌... 纤维素类生物质是地球上分布最为广泛的可再生资源,筛选高效的纤维素降解菌株对于纤维素生物质资源的开发和利用具有重要的意义。采用微晶纤维素作为唯一碳源的筛选方法,从曹妃甸湿地土壤样品中分离到一株高产纤维素酶的真菌,通过对菌株形态学特征观察和18SrDNA序列比对分析,鉴定其为土曲霉种属。发酵检测该菌株粗酶液中含有较高活性的外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶,活力大小分别为110.7、167.7U/mL;其内切葡聚糖酶和滤纸酶酶活力分别为27.8、51.5U/mL,土曲霉CB10可作为潜在的开发菌种用于纤维素生物降解的研究。 展开更多
关键词 纤维素 唯一碳源 纤维素酶 形态特征 18S rDNA 土曲霉 酶学活性
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β-葡萄糖苷酶检测方法及其应用进展 被引量:3
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作者 尹守亮 杨镒婴 +4 位作者 徐文 张颖超 王雯雯 李秋园 周志江 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第13期336-344,共9页
β-葡萄糖苷酶在食品、生物燃料、农业饲料等领域具有重要的商业用途,同时在环境监测、医学疾病诊断等方面也有着广泛的应用价值。根据β-葡萄糖苷酶作用底物的种类、酶解产物的结构类型及特征综述了近年来β-葡萄糖苷酶常用的检测方法... β-葡萄糖苷酶在食品、生物燃料、农业饲料等领域具有重要的商业用途,同时在环境监测、医学疾病诊断等方面也有着广泛的应用价值。根据β-葡萄糖苷酶作用底物的种类、酶解产物的结构类型及特征综述了近年来β-葡萄糖苷酶常用的检测方法,主要从分光光度法、荧光法、电化学及试剂盒等方法的原理、优缺点等方面进行了详细概述,并重点介绍了活体细胞中测定β-葡萄糖苷酶活性的新方法及筛选β-葡萄糖苷酶抑制剂的最新研究进展,以期为推动β-葡萄糖苷酶的进一步应用提供方法和依据。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖苷酶 活体细胞 抑制剂
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一株高活性纤维二糖酶真菌的筛选与鉴定 被引量:3
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作者 尹守亮 杨镒婴 +4 位作者 徐黛云 刘瑶 储鑫越 李秋园 周志江 《华北理工大学学报(自然科学版)》 CAS 2022年第3期119-125,共7页
纤维二糖酶在食品、农业、医疗和生物能源等领域有着广泛的应用,尤其在木质纤维素的降解反应中能够显著提高纤维素转化为葡萄糖的效率。利用纤维二糖作为唯一营养碳源的筛选方法,从唐山曹妃甸湿地土壤样品中筛选到一株高产纤维二糖酶的... 纤维二糖酶在食品、农业、医疗和生物能源等领域有着广泛的应用,尤其在木质纤维素的降解反应中能够显著提高纤维素转化为葡萄糖的效率。利用纤维二糖作为唯一营养碳源的筛选方法,从唐山曹妃甸湿地土壤样品中筛选到一株高产纤维二糖酶的真菌,编号为CB21,通过观察其形态学特征和基于18S rDNA的系统发育进化分析,鉴定菌株CB21为桔青霉。检测该菌株发酵液中纤维二糖酶活力最高为342.5 U/ml,在中性pH 6~7的条件下表现出较好的催化活性,最适反应温度为60℃,且在50~80℃的高温范围内仍然能够保持80%以上的活性。桔青霉菌株CB21在研究纤维二糖酶的生化特性及木质纤维素的高效降解等方面具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 纤维二糖酶 纤维素 18S rDNA 桔青霉
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反选标记法在微生物基因敲除中的应用 被引量:1
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作者 杨镒婴 李晓乐 +3 位作者 李子龙 李秋园 陈伟 尹守亮 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期101-111,共11页
随着后基因组时代的到来,简单高效的基因编辑工具和方法在研究微生物的基因表达调控、工程菌株的遗传改造等方面发挥了巨大作用。反选标记法是基于同源重组原理进行基因敲除的一种便捷高效的方法,该方法通过选择性的遗传标记的丢失和回... 随着后基因组时代的到来,简单高效的基因编辑工具和方法在研究微生物的基因表达调控、工程菌株的遗传改造等方面发挥了巨大作用。反选标记法是基于同源重组原理进行基因敲除的一种便捷高效的方法,该方法通过选择性的遗传标记的丢失和回补,实现对靶基因的敲除或目的基因的插入等分子遗传操作。这种选择性的遗传标记一般不依赖于传统的抗生素筛选标签,且同一反选标记能够反复使用,可连续进行多轮遗传操作,实现对多个基因靶位点的分子编辑。对近年来反选标记基因的种类、作用原理及在微生物基因敲除实验中的应用进行综述,以期为高效、可靠的分子编辑方法的研究提供参考。 展开更多
关键词 基因编辑 反选标记法 基因敲除 筛选标签 分子遗传
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