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基于FAP基因启动子的心肌纤维化药物筛选系统的建立与验证
1
作者
周驰
阚洪爽
+3 位作者
杨雅元
孟祥雯
欧阳昌汉
杨晓松
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2024年第3期194-199,共6页
目的建立以成纤维细胞激活蛋白(FAP)基因启动子为响应元件的新双荧光素酶报告基因系统建的心肌纤维化防治药物筛选方法。方法体外扩增小鼠FAP基因启动子片段,克隆至psiCHECK2质粒替换HSV-TK启动子,获得新的重组质粒psiCHECK2-FAP。重组...
目的建立以成纤维细胞激活蛋白(FAP)基因启动子为响应元件的新双荧光素酶报告基因系统建的心肌纤维化防治药物筛选方法。方法体外扩增小鼠FAP基因启动子片段,克隆至psiCHECK2质粒替换HSV-TK启动子,获得新的重组质粒psiCHECK2-FAP。重组质粒经限制性内切核酸酶HindⅢ消化后,进行琼脂糖凝胶电泳鉴定并纯化片段测序验证;将psiCHECK2-FAP瞬时转染至小鼠心肌成纤维细胞(MCF)培养24 h后,分别给予转化生长因子β1(TGF-β1)5μg·L^(-1),血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1μmol·L^(-1)或棕榈酸(PA)100μmol·L^(-1)处理0,12,24和48 h,双荧光素酶报告基因实验检测荧光素酶活性。将psiCHECK2-FAP瞬时转染至MCF细胞培养24 h后,达格列净(Dapa)1μmol·L^(-1)预处理1 h,再分别添加TGF-β1(5μg·L^(-1)),AngⅡ(1μmol·L^(-1))或PA(100μmol·L^(-1))处理24 h,双荧光素酶报告基因实验检测荧光素酶活性,Western印迹法检测MCF细胞中Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和ColⅢ的蛋白表达。结果HindⅢ将psiCHECK2-FAP切成2个片段且条带大小符合预期,测序结果与理论序列完全一致。与空白对照组相比,TGF-β1,AngⅡ和PA组均可显著增加MCF细胞中ColⅠ和ColⅢ表达(P<0.05,P<0.01);分别与TGF-β1,AngⅡ或PA组相比,Dapa干预后则显著降低ColⅠ和ColⅢ表达(P<0.05,P<0.01);与空白对照组相比,TGF-β1,AngⅡ或PA均可显著增加荧光素酶活性(P<0.05,P<0.01),24 h达最大值;分别与TGF-β1,AngⅡ或PA相比,Dapa干预后则显著降低荧光素酶活性(P<0.05,P<0.01)。结论以FAP基因启动子为响应元件的新双荧光素酶报告基因系统在MCF细胞中对促心肌纤维化因子表现出较好的敏感性,为心肌纤维化防治药物的研发提供策略。
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关键词
成纤维细胞活化蛋白
启动子
双荧光素酶报告系统
心肌纤维化
药物筛选
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职称材料
长链非编码RNA在心肌纤维化中的研究进展
2
作者
周驰
杨雅元
+2 位作者
阚洪爽
欧阳昌汉
杨晓松
《湖北科技学院学报(医学版)》
2023年第5期443-447,共5页
心肌纤维化是心肌病理性重构的重要过程,引发心脏功能障碍及不良的临床后果。本文回顾了心肌纤维化的调控机制,介绍了长链非编码RNA通过与microRNA、蛋白质相互作用或翻译成小肽等多种方式调控心肌纤维化的最新研究进展,揭示了长链非编...
心肌纤维化是心肌病理性重构的重要过程,引发心脏功能障碍及不良的临床后果。本文回顾了心肌纤维化的调控机制,介绍了长链非编码RNA通过与microRNA、蛋白质相互作用或翻译成小肽等多种方式调控心肌纤维化的最新研究进展,揭示了长链非编码RNA对心肌纤维化的诊断意义与治疗潜能。
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关键词
心肌纤维化
长链非编码RNA
心力衰竭
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职称材料
心肌纤维化的发病及治疗研究进展
被引量:
8
3
作者
周子默
周驰
+2 位作者
杨雅元
胡玲
杨晓松
《湖北科技学院学报(医学版)》
2022年第5期452-456,共5页
心肌纤维化是心肌损伤后的一种反应性重构,主要表现为心肌成纤维细胞过度增殖与分化,心肌胞外基质(ECM)过度累积、排列紊乱、胶原网络重建而引起心肌间质扩张与重构,是心肌病的常见病理改变。心肌纤维化是一种异质性疾病,多细胞、多因...
心肌纤维化是心肌损伤后的一种反应性重构,主要表现为心肌成纤维细胞过度增殖与分化,心肌胞外基质(ECM)过度累积、排列紊乱、胶原网络重建而引起心肌间质扩张与重构,是心肌病的常见病理改变。心肌纤维化是一种异质性疾病,多细胞、多因素参与心肌纤维化的发生、发展,分子机制复杂,其与高血压、心肌梗死、病毒性心肌炎、动脉粥样硬化、糖尿病等密切相关,可导致心衰、心律失常、心源性猝死等严重并发症,严重威胁人类生命健康。临床上用于心肌纤维化治疗的药物疗效有限,长期服用后伴随严重副作用。本文回顾了不同细胞在心肌纤维化过程中的作用研究进展,分析了最新免疫细胞疗法在心肌纤维化治疗中的应用前景,为后续心肌纤维化的理论研究与临床治疗提供新思路。
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关键词
心肌纤维化
心肌病
治疗方法
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职称材料
题名
基于FAP基因启动子的心肌纤维化药物筛选系统的建立与验证
1
作者
周驰
阚洪爽
杨雅元
孟祥雯
欧阳昌汉
杨晓松
机构
湖北科技学院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2024年第3期194-199,共6页
基金
国家自然科学基金(82073852)
湖北省自然科学基金(2021CFB439)
+2 种基金
湖北省教育厅科技计划(B20211228)
湖北科技学院国家级科研项目培育计划(2022-22GP05)
百校联百县——高校服务乡村振兴科技支撑行动计划(BXLBX0820)。
文摘
目的建立以成纤维细胞激活蛋白(FAP)基因启动子为响应元件的新双荧光素酶报告基因系统建的心肌纤维化防治药物筛选方法。方法体外扩增小鼠FAP基因启动子片段,克隆至psiCHECK2质粒替换HSV-TK启动子,获得新的重组质粒psiCHECK2-FAP。重组质粒经限制性内切核酸酶HindⅢ消化后,进行琼脂糖凝胶电泳鉴定并纯化片段测序验证;将psiCHECK2-FAP瞬时转染至小鼠心肌成纤维细胞(MCF)培养24 h后,分别给予转化生长因子β1(TGF-β1)5μg·L^(-1),血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1μmol·L^(-1)或棕榈酸(PA)100μmol·L^(-1)处理0,12,24和48 h,双荧光素酶报告基因实验检测荧光素酶活性。将psiCHECK2-FAP瞬时转染至MCF细胞培养24 h后,达格列净(Dapa)1μmol·L^(-1)预处理1 h,再分别添加TGF-β1(5μg·L^(-1)),AngⅡ(1μmol·L^(-1))或PA(100μmol·L^(-1))处理24 h,双荧光素酶报告基因实验检测荧光素酶活性,Western印迹法检测MCF细胞中Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和ColⅢ的蛋白表达。结果HindⅢ将psiCHECK2-FAP切成2个片段且条带大小符合预期,测序结果与理论序列完全一致。与空白对照组相比,TGF-β1,AngⅡ和PA组均可显著增加MCF细胞中ColⅠ和ColⅢ表达(P<0.05,P<0.01);分别与TGF-β1,AngⅡ或PA组相比,Dapa干预后则显著降低ColⅠ和ColⅢ表达(P<0.05,P<0.01);与空白对照组相比,TGF-β1,AngⅡ或PA均可显著增加荧光素酶活性(P<0.05,P<0.01),24 h达最大值;分别与TGF-β1,AngⅡ或PA相比,Dapa干预后则显著降低荧光素酶活性(P<0.05,P<0.01)。结论以FAP基因启动子为响应元件的新双荧光素酶报告基因系统在MCF细胞中对促心肌纤维化因子表现出较好的敏感性,为心肌纤维化防治药物的研发提供策略。
关键词
成纤维细胞活化蛋白
启动子
双荧光素酶报告系统
心肌纤维化
药物筛选
Keywords
fibroblast activation protein
promoter
dual luciferase reporter system
cardiac fibrosis
drugs screen
分类号
R965 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
长链非编码RNA在心肌纤维化中的研究进展
2
作者
周驰
杨雅元
阚洪爽
欧阳昌汉
杨晓松
机构
湖北科技学院医学部药学院
湖北科技学院医学部糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室
出处
《湖北科技学院学报(医学版)》
2023年第5期443-447,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(编号:82073852)
湖北省自然科学基金面上项目(编号:2021CFB43P)
+1 种基金
湖北省教育厅科技计划项目(编号:B20211228)
湖北科技学院国家级科研项目培育计划项目(编号:2022-22GP05)。
文摘
心肌纤维化是心肌病理性重构的重要过程,引发心脏功能障碍及不良的临床后果。本文回顾了心肌纤维化的调控机制,介绍了长链非编码RNA通过与microRNA、蛋白质相互作用或翻译成小肽等多种方式调控心肌纤维化的最新研究进展,揭示了长链非编码RNA对心肌纤维化的诊断意义与治疗潜能。
关键词
心肌纤维化
长链非编码RNA
心力衰竭
分类号
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
下载PDF
职称材料
题名
心肌纤维化的发病及治疗研究进展
被引量:
8
3
作者
周子默
周驰
杨雅元
胡玲
杨晓松
机构
湖北科技学院医学部药学院
湖北科技学院医学部糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室
南华大学附属长沙中心医院药学部
出处
《湖北科技学院学报(医学版)》
2022年第5期452-456,共5页
基金
湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目(T201921)
湖北省自然科学基金(2021CFB439)
+3 种基金
湖北省教育厅科研计划项目(B2021228)
湖北科技学院医学部口腔与眼视光医学院专项科研基金(2021WG07)
湖北科技学院国家级科研项目培育计划项目(2020-22GP05)
湖北科技学院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室开放基金(2021TNB05)。
文摘
心肌纤维化是心肌损伤后的一种反应性重构,主要表现为心肌成纤维细胞过度增殖与分化,心肌胞外基质(ECM)过度累积、排列紊乱、胶原网络重建而引起心肌间质扩张与重构,是心肌病的常见病理改变。心肌纤维化是一种异质性疾病,多细胞、多因素参与心肌纤维化的发生、发展,分子机制复杂,其与高血压、心肌梗死、病毒性心肌炎、动脉粥样硬化、糖尿病等密切相关,可导致心衰、心律失常、心源性猝死等严重并发症,严重威胁人类生命健康。临床上用于心肌纤维化治疗的药物疗效有限,长期服用后伴随严重副作用。本文回顾了不同细胞在心肌纤维化过程中的作用研究进展,分析了最新免疫细胞疗法在心肌纤维化治疗中的应用前景,为后续心肌纤维化的理论研究与临床治疗提供新思路。
关键词
心肌纤维化
心肌病
治疗方法
分类号
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于FAP基因启动子的心肌纤维化药物筛选系统的建立与验证
周驰
阚洪爽
杨雅元
孟祥雯
欧阳昌汉
杨晓松
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
长链非编码RNA在心肌纤维化中的研究进展
周驰
杨雅元
阚洪爽
欧阳昌汉
杨晓松
《湖北科技学院学报(医学版)》
2023
0
下载PDF
职称材料
3
心肌纤维化的发病及治疗研究进展
周子默
周驰
杨雅元
胡玲
杨晓松
《湖北科技学院学报(医学版)》
2022
8
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职称材料
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