广东省烟区烟草花叶病主要病原鉴定 被引量：2

1

作者 杨雷亮 陈泽鹏 +2 位作者 邓海滨 陈伟明 李华平 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2010年第6期72-76,共5页

为明确广东省烟草病毒病种类及其主要侵染病原,对广东2个主要烟区(韶关地区和梅州地区)进行了病毒病害调查,并对采自田间的62个花叶病样本,通过鉴别寄主、ELISA和RT-PCR法进行了病原种类鉴定。结果表明:在上述2个主要烟区,主要是花叶病... 为明确广东省烟草病毒病种类及其主要侵染病原,对广东2个主要烟区(韶关地区和梅州地区)进行了病毒病害调查,并对采自田间的62个花叶病样本,通过鉴别寄主、ELISA和RT-PCR法进行了病原种类鉴定。结果表明:在上述2个主要烟区,主要是花叶病危害,很少发现其他病毒种类;病原鉴定方面,在62个花叶病样本中,61.29%为单TMV侵染,20.97%为单CMV侵染,17.74%为TMV和CMV复合侵染。 展开更多

关键词 烟草花叶病 病原 鉴定

下载PDF 职称材料

应用多重RT-PCR检测烟草上的TMV和CMV 被引量：9

2

作者 宋婷婷 陈荣溢 杨雷亮 《辽宁农业科学》 2007年第1期53-54,共2页

根据烟草花叶病毒(TMV)复制酶蛋白和黄瓜花叶病毒(CMV)的外壳蛋白基因序列设计、合成引物,以感病组织和健康组织总RNA为模板,进行多重PCR反应。可以扩增出1.44 kb带和735 bp带,与预期结果完全一致。而健康对照则无任何扩增条带出现。对2... 根据烟草花叶病毒(TMV)复制酶蛋白和黄瓜花叶病毒(CMV)的外壳蛋白基因序列设计、合成引物,以感病组织和健康组织总RNA为模板,进行多重PCR反应。可以扩增出1.44 kb带和735 bp带,与预期结果完全一致。而健康对照则无任何扩增条带出现。对2005年从广东采集的18份检测样品进行检测,检测出TMV、CMV复合侵染的样本占总样品的44.44%。 展开更多

关键词 多重RT—PCR TMV CMV检测

下载PDF 职称材料

广东省烟草主栽品种病毒病抗性评价 被引量：1

3

作者 孙丽霞 杨雷亮 +5 位作者 吴颖儿 李华平 管维 邱德义 陈定虎 王章根 《广东农业科学》 CAS 2016年第7期18-24,共7页

为测定广东省7个烟草主栽品种对TMV和CMV的抗性情况,采用TMV侵染的普通烟叶系列稀释液(CK、1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000、1∶100000)作浓度梯度,选用K326作中感品种对照,机械摩擦接种法接种7个烟草品种(K326、云烟87、RG17、9601... 为测定广东省7个烟草主栽品种对TMV和CMV的抗性情况,采用TMV侵染的普通烟叶系列稀释液(CK、1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000、1∶100000)作浓度梯度,选用K326作中感品种对照,机械摩擦接种法接种7个烟草品种(K326、云烟87、RG17、9601、9032、MSK326、MS96-7)。同时,对不同烟草品种选用评价浓度1∶40稀释度进行CMV接种,对接种后20d的病情指数和9d的发病率进行分析。结果表明:从各项自然及接种TMV后的农艺产量性状来看,云烟87、RG17和9601表现相对较好。其中以1∶10000稀释度作为评价浓度进行攻毒接种,接种70d后的病情指数:MS96-7最低为81.06,9032最高为95.46;接种30d后统计发病率:MS96-7最低为71.21%,RG17最高为100.00%。其中MS96-7表现为中抗,云烟87、RG17、9601、9032、K326和MSK326表现为中感;云烟87抗CMV扩展特性最强,9601抗CMV扩展特性最弱;RG17为CMV高感品种,其余5个(含新育成的品种MS96-7、MSK326)为CMV中感至高感间的品种。总体上,没有一个品种表现对TMV免疫或高抗水平,同时,也没有一个品种表现对CMV免疫、高抗或中抗水平。 展开更多

关键词 广东省 烟草 品种 病毒病 抗性 评价

下载PDF 职称材料

抗病毒转基因番木瓜的实时PCR检测 被引量：9

4

作者 韩建勋 陈红运 +3 位作者 邓婷婷 杨雷亮 黄文胜 陈颖 《检验检疫科学》 2010年第1期15-20,共6页

番木瓜是世界上第一种大规模种植的转基因水果,多个国家和地区开展了转基因番木瓜的研究和田间试验。针对市场上可能遇到的转基因番木瓜种类,本文分析了这些转基因木瓜的外源基因结构,在外源基因的NOS启动子与植物基因组之间的侧翼序列... 番木瓜是世界上第一种大规模种植的转基因水果,多个国家和地区开展了转基因番木瓜的研究和田间试验。针对市场上可能遇到的转基因番木瓜种类,本文分析了这些转基因木瓜的外源基因结构,在外源基因的NOS启动子与植物基因组之间的侧翼序列中设计了3类转基因木瓜的4个品系(Event)的特异性实时PCR的引物/探针,建立了4种抗病毒转基因番木瓜的品系特异性实时PCR检测方法,优化了番木瓜果肉和种籽的DNA纯化方法。实验表明这些品系检测方法的特异性和灵敏度符合出入境检验检疫的要求,应用这些方法从市售的番木瓜中检出了台湾中兴大学研发的两个转基因品系。 展开更多

关键词 转基因产品 转基因番木瓜 实时PCR方法 品系特异性

下载PDF 职称材料

香蕉细菌性枯萎病菌荧光LAMP检测体系的建立 被引量：5

5

作者 杨雷亮 管维 +4 位作者 孙丽霞 吴颖儿 单振菊 王章根 陈定虎 《广东农业科学》 CAS 2020年第5期66-73,共8页

【目的】基于香蕉细菌性枯萎病病原(Ralstonia solanacearum)2号生理小种的特异保守引物和LAMP技术建立一种实时荧光定性检测方法,解决常规PCR定性检测特异性低、灵敏度低、耗时长等问题,实现在1 h内能进行准确高效的定性检测,为加强该... 【目的】基于香蕉细菌性枯萎病病原(Ralstonia solanacearum)2号生理小种的特异保守引物和LAMP技术建立一种实时荧光定性检测方法,解决常规PCR定性检测特异性低、灵敏度低、耗时长等问题,实现在1 h内能进行准确高效的定性检测,为加强该病害防控检测和检疫工作提供技术支持。【方法】确定被测基因靶序列,利用Primer软件设计两对内外引物。由两对引物、具有链置换特性的DNA聚合酶、模板DNA、甜菜碱、Mg2SO4、反应缓冲液、荧光染料等组成LAMP反应体系,采用不必在反应完开管盖检测的实时荧光LAMP方法,针对该方法对于样品DNA定性检测的灵敏度、特异性及可重复性进行试验。【结果】设计的引物能顺利扩增目标基因,实时荧光LAMP检测体系对于香蕉细菌性枯萎病病原生理2号小种有良好的灵敏度、特异性,该方法可重复性强,灵敏度比普通PCR高10倍以上。【结论】香蕉细菌性枯萎病菌荧光LAMP检测体系检测特异性强、灵敏度高、耗时短、不易污染,效果较好。 展开更多

关键词 香蕉枯萎病 细菌 青枯菌 检测 环介导等温扩增(LAMP) 实时荧光

下载PDF 职称材料

核酸环介导等温扩增技术及其在植物检疫中的应用 被引量：7

6

作者 杨雷亮 邱德义 +2 位作者 管维 王章根 陈定虎 《植物检疫》 北大核心 2009年第4期42-44,共3页

介绍核酸环介导等温扩增技术的基本原理、特点及应用前景。环介导等温扩增技术具有简单、快速、特异性强和扩增效率高等特点,目前可部分替代普通PCR,日后伴随着不断改进、完善和标准化,必将在植物检疫上有广阔的应用前景。

关键词 环介导等温扩增 引物设计 植物检疫

下载PDF 职称材料

李痘病毒及其2个主要流行株系的分子鉴定 被引量：6

7

作者 杨雷亮 王章根 +2 位作者 管维 周灼标 陈定虎 《植物检疫》 2008年第1期15-17,共3页

通过分析李痘病毒及其2个不同株系核酸的保守序列,设计出3对引物,即1对通用引物和2对株系特异性引物对李痘病毒进行RT-PCR检测,结果显示通用引物可以同时检测该病毒的2个最主要的流行株系,即D株系和M株系,而D株系引物只能检测出D株系病... 通过分析李痘病毒及其2个不同株系核酸的保守序列,设计出3对引物,即1对通用引物和2对株系特异性引物对李痘病毒进行RT-PCR检测,结果显示通用引物可以同时检测该病毒的2个最主要的流行株系,即D株系和M株系,而D株系引物只能检测出D株系病毒,M株系只能检测出M株系病毒,为口岸对进境种子、苗木及果实等中的李痘病毒准确快速的检测提供了一个有效的方法。 展开更多

关键词 李痘病毒 株系 分子鉴定

下载PDF 职称材料

进境东盟水果货物携带细菌病害截获疫情分析 被引量：1

8

作者 杨雷亮 管维 +5 位作者 孙丽霞 吕文刚 王卫芳 单振菊 吴颖儿 林长钦 《安徽农业科学》 CAS 2020年第22期144-147,共4页

2011—2015年,全国各检验检疫口岸累计从东盟截获细菌745种次,其中包含货检336种次,旅检406种次,邮检3种次。分析了其中的货检货物携带细菌病害截获疫情,结果表明,疫情较为严重的年份为2015、2012和2011年,分别占36.61%、34.22%、16.07... 2011—2015年,全国各检验检疫口岸累计从东盟截获细菌745种次,其中包含货检336种次,旅检406种次,邮检3种次。分析了其中的货检货物携带细菌病害截获疫情,结果表明,疫情较为严重的年份为2015、2012和2011年,分别占36.61%、34.22%、16.07%。深圳口岸截获的细菌占全国总检出种次的95.83%;截获较多的种类有肠杆菌属((Enterobacter sp.),占50.89%)、芽孢杆菌属((Bacillus sp.),占27.68%)和金黄杆菌属((Chryseobacterium sp.),占11.31%),截获的检疫性细菌仅有1种次(芒果黑斑病菌(Xanthomonas campestris pv.mangiferaeindicae))。从来源国来看,来源于泰国和越南的水果截获种次居前位,其中以泰国榴莲和越南火龙果检出的细菌种次最多,均占总检出种次的40%。从水果种类来看,细菌疫情较为严重的水果有火龙果、榴莲和龙眼等;芒果中检出的细菌最少,仅占总检出种次的0.29%。总体各口岸细菌检出率较低,特别是检疫性的细菌病害截获仅有一次,相关口岸的细菌检测能力亟待加强。 展开更多

关键词 东盟 进口水果 病原细菌

下载PDF 职称材料

运用纳米磁珠技术结合RT-PCR方法检测李痘病毒 被引量：11

9

作者 陈定虎 邓丛良 +1 位作者 李明福 杨雷亮 《植物检疫》 北大核心 2010年第3期17-19,共3页

以李痘病毒为对象,研究探索采用RT-PCR方法结合纳米磁珠技术来提高植物病毒的检出率。结果表明该技术不仅能够检测到极低浓度的病毒,而且操作简单快速,非常适合口岸一线对病毒的检测要求。

关键词 纳米磁珠 RT-PCR 李痘病毒

下载PDF 职称材料

香石竹斑驳病毒属和潜隐病毒属的PCR检测方法研究 被引量：4

10

作者 杨雷亮 陈定虎 +1 位作者 李明福 陈洪俊 《检验检疫科学》 2009年第2期1-3,共3页

根据香石竹斑驳病毒属和香石竹潜隐病毒属主要确定种的外壳蛋白(Coat protein,CP)氨基酸的保守序列分别设计出它们的简并引物,然后对8个香石竹斑驳病毒属的病毒和9个香石竹潜隐病毒属的病毒进行PCR检测验证,结果与预期值相符。

关键词 香石竹斑驳病毒属 香石竹潜隐病毒属 PCR

下载PDF 职称材料

砂糖橘果实大小及产量规律的研究 被引量：5

11

作者 孙丽霞 杨雷亮 樊小林 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期63-66,共4页

根据砂糖橘果实生长发育、产量与品质形成规律,建立砂糖橘的养分综合管理体系,以四会优质砂糖橘试产树(4年生)和盛产树(8年生)为供试对象,研究了整个果实生长发育期果实大小(纵径、横径)变化、单果产量(质量)变化的规律。结果表明,在果... 根据砂糖橘果实生长发育、产量与品质形成规律,建立砂糖橘的养分综合管理体系,以四会优质砂糖橘试产树(4年生)和盛产树(8年生)为供试对象,研究了整个果实生长发育期果实大小(纵径、横径)变化、单果产量(质量)变化的规律。结果表明,在果实整个生长发育期,4年生树和8年生树单果纵径、横径、质量变化趋势一致,随着生长期的延长不断增大,并且横径逐渐大于纵径,成熟期时单果纵径为3.5～3.7 cm,横径为4.5～4.8 cm,单果质量为42～45 g。在果实生长发育的前2/3时期,果实的纵、横径已经达到收获期的85%、74%,而单果的质量仅为收获期的47%。而后1/3时期,果实要累积50%以上的质量。也就是说,果实生长发育的前2/3时期应通过肥水主要促进果实的膨大生长,而后1/3时期应通过肥水促进光合产物向果实的运输,促进果实累积干物质。 展开更多

关键词 砂糖橘 果实生长发育 纵、横径 单果质量

下载PDF 职称材料

应用AllGlo探针检测对虾白斑综合征病毒研究 被引量：1

12

作者 陈定虎 杨雷亮 +3 位作者 冯云 张建威 潘星 徐守振 《中国动物检疫》 CAS 2010年第11期31-33,共3页

用AllGlo探针检测对虾白斑综合征病毒,阳性反应呈典型的S曲线,说明本检测探针和引物设计合理。经灵敏度测定,当样品DNA浓度低至100拷贝/μL时,仍可以有效扩增,但在103/μL之上时结果最佳。同时,经过与传统探针检测对比试验得出:用Taqma... 用AllGlo探针检测对虾白斑综合征病毒,阳性反应呈典型的S曲线,说明本检测探针和引物设计合理。经灵敏度测定,当样品DNA浓度低至100拷贝/μL时,仍可以有效扩增,但在103/μL之上时结果最佳。同时,经过与传统探针检测对比试验得出:用Taqman标记的探针检测相同量的样品时,AllGlo MAR标记的探针(FAM通道)CT值与FAM标记的探针的CT值没有明显区别,但是MAR标记的探针的荧光信号强度要比FAM标记的探针约高40%,更适合于对虾白斑综合征病毒的检测。 展开更多

关键词 AllGlo探针 对虾白斑综合征病毒 检测

下载PDF 职称材料

砂糖橘果实品质变化规律研究 被引量：4

13

作者 孙丽霞 杨雷亮 孔婷 《安徽农业科学》 CAS 2022年第12期54-56,96,共4页

为了解砂糖橘果实生长发育期品质的变化规律,在高产果园选取4年和8年2种树龄的砂糖橘树,对2种树龄果实中的可溶性固形物、总糖、总酸和维生素C的含量进行了研究。结果表明,在果实生长发育期,随着生长期的延长,果实中可溶性固形物、总糖... 为了解砂糖橘果实生长发育期品质的变化规律,在高产果园选取4年和8年2种树龄的砂糖橘树,对2种树龄果实中的可溶性固形物、总糖、总酸和维生素C的含量进行了研究。结果表明,在果实生长发育期,随着生长期的延长,果实中可溶性固形物、总糖和糖/酸不断增加,而总酸和V_(C)含量不断减少。果实成熟期时,4年树和8年树果实中可溶性固形物含量分别为13.15%、12.58%,总糖含量分别为12.02%、11.45%,糖/酸分别为27.72、23.10,总酸含量分别为0.43%、0.50%,维生素C含量分别为164.9、171.3 mg/kg。该研究为探讨砂糖橘优质的原因奠定基础。 展开更多

关键词 砂糖橘 可溶性固形物 总糖 总酸 维生素C

下载PDF 职称材料

用一步PCR法同时检测香蕉束顶病毒和香蕉花叶心腐病毒 被引量：4

14

作者 管维 杨雷亮 +3 位作者 邱德义 王章根 周灼标 陈定虎 《植物检疫》 2008年第4期213-215,共3页

采用改进的CTAB方法同时提取BBTV和CMV侵染的香蕉叶片的总核酸,然后同时加入BBTV和CMV的特异性引物进行扩增来检测BBTV和CMV。结果显示,虽然BBTV和CMV属于不同核酸性质的病毒,但可以通过一步RT-PCR的方法同时被检测出来,为实际检测香蕉... 采用改进的CTAB方法同时提取BBTV和CMV侵染的香蕉叶片的总核酸,然后同时加入BBTV和CMV的特异性引物进行扩增来检测BBTV和CMV。结果显示,虽然BBTV和CMV属于不同核酸性质的病毒,但可以通过一步RT-PCR的方法同时被检测出来,为实际检测香蕉组培苗中的这2种最主要的病毒提供了一个有效的检测方法。 展开更多

关键词 香蕉束顶病毒 黄瓜花叶病毒 一步法RT PCR

下载PDF 职称材料

李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP基因的克隆、原核表达及其抗血清制备 被引量：1

15

作者 李明福 陈洪俊 +3 位作者 陈定虎 邱德义 杨雷亮 赵世恒 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期29-33,共5页

本研究通过RT-PCR技术获得了包含李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP蛋白基因的DNA片段,构建了针对pET29a载体的两种表达质粒;转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达了带不同融合肽段的PNRSV1(25 ku)和PNRSV2(29 ku)融合蛋白。经过Ni-NTA... 本研究通过RT-PCR技术获得了包含李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP蛋白基因的DNA片段,构建了针对pET29a载体的两种表达质粒;转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达了带不同融合肽段的PNRSV1(25 ku)和PNRSV2(29 ku)融合蛋白。经过Ni-NTA亲和柱与SDS-PAGE分离纯化,获得大量表达融合蛋白,并免疫家兔制备了融合表达蛋白的特异性抗体。间接ELISA测定其效价分别为8×103和3.2×104。 展开更多

关键词 李属坏死环斑病毒 外壳蛋白 原核表达 蛋白纯化 抗体

下载PDF 职称材料

中山口岸从芒果中检出番石榴实蝇 被引量：1

16

作者 管维 王章根 +2 位作者 梁献祥 杨雷亮 陈定虎 《植物检疫》 2008年第5期335-335,共1页

关键词 番石榴实蝇 中山口岸 芒果 出入境检验检疫局 旅客携带物 危险性害虫 工作人员 截获

下载PDF 职称材料

进口原木木种鉴定技术综述 被引量：1

17

作者 单振菊 杨雷亮 +2 位作者 陈志云 管维 王章根 《林业与环境科学》 2017年第6期119-123,共5页

原木在我国木材产业发展过程中具有基础性作用,随着木材加工业的发展,原木进口量逐年上升。目前进口原木存在着进口木种种类多、进口国家多、木种价格差异大、木种鉴定难度大等特点,导致进口商为了追求利益虚报木种、逃避关税等现象越... 原木在我国木材产业发展过程中具有基础性作用,随着木材加工业的发展,原木进口量逐年上升。目前进口原木存在着进口木种种类多、进口国家多、木种价格差异大、木种鉴定难度大等特点,导致进口商为了追求利益虚报木种、逃避关税等现象越来越严重。文章概述了进口原木的现状与存在问题,重点总结分析了当前木种鉴定方法的优点和缺点,并对今后木种鉴定方向提出了建议。 展开更多

关键词 原木 木种 鉴定

下载PDF 职称材料

李痘病毒CP基因在大肠杆菌中的表达、纯化及其抗血清制备 被引量：1

18

作者 邱德义 杨雷亮 +3 位作者 岳巧云 管维 王章根 陈定虎 《植物检疫》 2008年第5期271-274,共4页

用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体pET29(a)上,得到pET29a-PPV重组载体,将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导表达产物经过SDS-PAGE分析,结果表明PPVCP基因在大肠杆菌中得到了高效表达。... 用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体pET29(a)上,得到pET29a-PPV重组载体,将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导表达产物经过SDS-PAGE分析,结果表明PPVCP基因在大肠杆菌中得到了高效表达。分别用亲和柱法和切胶法回收特异性表达蛋白,再免疫家兔,获得PPV特异性抗血清,经过酶联免疫吸附法测定其效价分别为3.2×104和4×103,且具有较高的特异性。 展开更多

关键词 李痘病毒 外壳蛋白 原核表达抗血清

下载PDF 职称材料

中山口岸截获眉斑并脊天牛

19

作者 管维 杨雷亮 +2 位作者 王章根 罗利娟 陈定虎 《植物检疫》 2008年第6期376-376,共1页

关键词 中山口岸 天牛 截获 印度尼西亚 实验室鉴定 集装箱

下载PDF 职称材料

中山口岸首次截获巴西苍耳等多种检疫性杂草 被引量：2

20

作者 杨雷亮 王章根 +2 位作者 管维 陈定虎 吴海荣 《植物检疫》 北大核心 2013年第6期50-50,共1页

2013年8月,中山检验检疫局从进境阿根廷大豆中截获检疫性有害生物——巴西苍耳(Xanthium brasilicum)。据悉,这是广东局首次截获该种外来检疫性杂草。同时,该批大豆中还发现有球果苍耳(Xanthium globosum)、假高粱(Sorghum halepense)... 2013年8月,中山检验检疫局从进境阿根廷大豆中截获检疫性有害生物——巴西苍耳(Xanthium brasilicum)。据悉,这是广东局首次截获该种外来检疫性杂草。同时,该批大豆中还发现有球果苍耳(Xanthium globosum)、假高粱(Sorghum halepense)、黑高粱(Sorghum almum)和黄顶菊(Flaveria bidentis)4种检疫性杂草和曼陀罗、凹头苋、牛筋草和三叶鬼针草等十几种杂草。 展开更多

关键词 检疫性杂草 检疫性有害生物 SORGHUM 黄顶菊 Xanthium 牛筋草 三叶鬼针草 凹头苋 吴海荣 检疫监督

原文传递