Wnt10b、β-catenin与鼻咽癌放射敏感性的关系 被引量：1

1

作者 林可焴 苏颖 +2 位作者 何火聪 邹长棪 陈超 《福建医药杂志》 CAS 2016年第6期81-85,共5页

目的探讨Wnt/β-catenin信号通路与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法收集对数生长期以及经直线加速器6MV X射线0、2、4、6Gy照后48h的鼻咽癌CNE2细胞和放射抗拒的CNE-2(R743)细胞,RT-PCR方法检测Wnt10b基因、β-catenin基因mRNA的表达,... 目的探讨Wnt/β-catenin信号通路与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法收集对数生长期以及经直线加速器6MV X射线0、2、4、6Gy照后48h的鼻咽癌CNE2细胞和放射抗拒的CNE-2(R743)细胞,RT-PCR方法检测Wnt10b基因、β-catenin基因mRNA的表达,Western blot检测Wnt10b、β-catenin蛋白的表达。结果放射抗拒株CNE-2(R743)细胞的Wnt10b和β-catenin基因mRNA及蛋白的表达均高于放射敏感的CNE 2细胞(P<0.05)。经照射后CNE 2细胞和CNE-2(R743)细胞的Wnt10b和β-catenin的mRNA及蛋白表达量随着照射剂量的增加而增加;在相同照射剂量下放射抗拒株CNE-2(R743)细胞Wnt10b和β-catenin的表达量均高于CNE 2细胞(P<0.05)。结论 Wnt/β-catenin信号通路可能与鼻咽癌细胞放射敏感性有关。 展开更多

关键词 鼻咽癌 放射敏感性 WNT/Β-CATENIN信号通路 Wnt10b Β-CATENIN

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β-catenin过表达鼻咽癌CNE2细胞模型的构建

2

作者 林可焴 苏颖 +2 位作者 何火聪 邹长棪 陈超 《中国癌症防治杂志》 CAS 2016年第4期201-206,共6页

目的构建β-catenin真核表达载体pc DNA3.1(+)/β-catenin并转染鼻咽癌CNE2细胞,检测β-catenin在CNE2细胞中的表达。方法反转录-聚合酶链式扩增反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增目的基因β-catenin,... 目的构建β-catenin真核表达载体pc DNA3.1(+)/β-catenin并转染鼻咽癌CNE2细胞,检测β-catenin在CNE2细胞中的表达。方法反转录-聚合酶链式扩增反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增目的基因β-catenin,胶回收纯化后克隆至p GEM-T Easy载体,挑选阳性克隆,抽提质粒进行kpn I/xba I双酶切和PCR鉴定,用T4 DNA连接酶将目的基因β-catenin与真核表达载体pc DNA3.1/Hygro(+)连接,构建重组的真核表达载体pc DNA3.1(+)/β-catenin,转化感受态细胞DH5α,再次抽提质粒进行PCR、kpn I/xba I双酶切和测序鉴定,然后用Fu GENE HD将纯化的pc DNA3.1(+)/β-catenin转染入鼻咽癌CNE2细胞,经Hygromycin B筛选,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)验证转染细胞CNE2/β-catenin中β-catenin的表达。结果 PCR、双酶切及测序鉴定表明,成功构建了真核表达载体pc DNA3.1(+)/β-catenin;实时荧光定量PCR和Western blot检测表明,与未转染细胞CNE2比较,被转染的CNE2/β-catenin细胞能够上调目的基因β-catenin的表达(P<0.01)。结论成功构建真核表达载体pc DNA3.1(+)/β-catenin,并能在转染的CNE2/β-catenin细胞上调目的基因β-catenin的表达。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 真核表达载体 Β-CATENIN 细胞模型

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三氧化二砷抑制肝癌细胞端粒酶表达及诱导细胞凋亡作用 被引量：25

3

作者 苏颖 陈增 +2 位作者 林可焴 邹长棪 林华妹 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第3期264-267,共4页

目的:观察三氧化二砷对体外培养的人肝癌细胞株细胞端粒酶表达和细胞生长抑制的影响及诱导细胞凋亡的作用,探讨三氧化二砷的抗肿瘤作用及机制.方法:采用噻唑蓝比色分析法(MTT法),流式细胞分析,原位杂交方法以及TUNEL原位末端标记法观察... 目的:观察三氧化二砷对体外培养的人肝癌细胞株细胞端粒酶表达和细胞生长抑制的影响及诱导细胞凋亡的作用,探讨三氧化二砷的抗肿瘤作用及机制.方法:采用噻唑蓝比色分析法(MTT法),流式细胞分析,原位杂交方法以及TUNEL原位末端标记法观察和检测了不同浓度的三氧化二砷对人肝癌细胞株(SMMC-7721)细胞的增生,细胞DNA含量的分布,细胞端粒酶表达的影响及细胞凋亡的诱导作用.结果:20,5,5μmol/L三氧化二砷在24,48,72h时抑制率分别为22.0%,25.7%,32.0%,均能明显抑制人肝癌细胞株细胞的增生(单侧置信区间为10.1,23.7,18.0,P<0.05).流式细胞分析显示加药组G0/G1期细胞比例减少,S期细胞所占比例增高.随着药物浓度的增加细胞端粒酶的表达下降,而凋亡细胞数增加.结论:三氧化二砷能抑制人肝癌细胞增生,其抑制作用具有时间-计量效应关系,并能抑制肝癌细胞端粒酶的表达及诱导肝癌细胞凋亡. 展开更多

关键词 三氧化二砷 肝癌 细胞端粒酶 细胞凋亡

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三氧化二砷及干扰素联用对K562及K562/ADM耐药细胞系的作用 被引量：8

4

作者 苏颖 邹长棪 +2 位作者 陈增 林华妹 林可焴 《福建医科大学学报》 2003年第2期155-157,共3页

目的　　研究三氧化二砷 (As2 O3)对 K5 6 2及其耐药细胞 K5 6 2 / ADM细胞株几种耐药机制的作用 ,以及干扰素 (IFNα- 2 b)与之联用的效应。方法　　采用免疫细胞化学染色及 TU NEL 原位末端标记检测不同浓度 As2 O3作用不同时间或与 ... 目的　　研究三氧化二砷 (As2 O3)对 K5 6 2及其耐药细胞 K5 6 2 / ADM细胞株几种耐药机制的作用 ,以及干扰素 (IFNα- 2 b)与之联用的效应。方法　　采用免疫细胞化学染色及 TU NEL 原位末端标记检测不同浓度 As2 O3作用不同时间或与 IFNα- 2 b联用 ,对 K5 6 2及 K5 6 2 / ADM细胞相关耐药基因蛋白 (P- gp、GST-π、Bcl- 2 )表达的影响及凋亡诱导作用。　结果　 K5 6 2、K5 6 2 / ADM细胞表面 P- gp蛋白表达无明显改变 ;As2 O3(5 ,10 ,2 0 μm ol/ m L)作用 72 h可降低 K5 6 2、K5 6 2 / ADM细胞 GST- π的表达 ,与对照组比较 P<0 .0 5 ;As2 O3抑制 K5 6 2、K5 6 2 / ADM细胞 Bcl- 2蛋白的表达 ,诱导细胞凋亡 ,并有计量时间效应 ;IFNα- 2 b与 As2 O3联用可增强对 K5 6 2细胞的作用 ,对 K5 6 2 / ADM细胞未见明显增强效应。　结论　As2 O3具有抑制 K5 6 2、K5 6 2 / ADM细胞 GST- π、Bcl- 2蛋白的表达及诱导细胞凋亡作用 ;对 P- gp蛋白表达无明显影响 ;IFNα- 2 b可增强其对 K5 6 展开更多

关键词 砷剂 干扰素 抗药性 多药 细胞凋亡

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鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2(R743)的建立及其差异表达蛋白的初步分析 被引量：5

5

作者 苏颖 吴君心 +2 位作者 何火聪 林可焴 邹长棪 《福建医科大学学报》 2011年第6期398-403,共6页

目的建立放射抗拒的人鼻咽癌(NPC)细胞株,探讨NPC细胞的放射抗拒机制。方法应用X射线反复照射NPC CNE-2细胞,总剂量为51Gy,筛选出放射抗拒的细胞株CNE-2(R743)。采用克隆形成实验测定细胞的放射敏感性,流式细胞术检测细胞周期特征;采用... 目的建立放射抗拒的人鼻咽癌(NPC)细胞株,探讨NPC细胞的放射抗拒机制。方法应用X射线反复照射NPC CNE-2细胞,总剂量为51Gy,筛选出放射抗拒的细胞株CNE-2(R743)。采用克隆形成实验测定细胞的放射敏感性,流式细胞术检测细胞周期特征;采用双向凝胶电泳结合质谱分析法鉴定差异表达蛋白。结果与CNE-2细胞相比,CNE-2(R743)细胞显示出更强的放射抗性,CNE-2(R743)细胞的放射抗性(存活分数SF2)是其亲本细胞CNE-2的1.49倍(P<0.05)。CNE-2(R743)细胞周期分布中,S期比例较其亲本CNE-2细胞明显增高(P<0.01),而G0/G1和G2/M期比例则下降(P<0.01)。与CNE-2相比,CNE-2(R743)细胞存在24个差异表达较显著的蛋白质,其中14个上调,10个下调。结论经辐射诱导所建立的细胞株CNE-2(R743)比其亲本对射线更加抗拒,并显示与亲本不同的细胞周期特征。存在与亲本差异表达的蛋白质,这些蛋白质可能与NPC细胞的放射敏感性相关。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 辐射耐受性 蛋白质组学 细胞周期 肿瘤细胞 培养的

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沉默放射抗拒鼻咽癌细胞Annexin A2基因表达对裸鼠鼻咽癌移植瘤放射敏感性的影响 被引量：2

6

作者 邹长棪 何火聪 +2 位作者 苏颖 林可焴 陈超 《生物医学工程与临床》 CAS 2017年第6期646-652,共7页

目的探讨沉默Annexin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法选择36只SPF级BALB/c裸鼠,雄性,6周龄,体质量18~22 g。按随机数字表法分为对照组[CNE-2(R743)组]、单纯照射组[CNE-2(R743)/R组]、转染对照组(sh R-C组... 目的探讨沉默Annexin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法选择36只SPF级BALB/c裸鼠,雄性,6周龄,体质量18~22 g。按随机数字表法分为对照组[CNE-2(R743)组]、单纯照射组[CNE-2(R743)/R组]、转染对照组(sh R-C组)、转染对照联合照射组(sh R-C/R组)、转染组(sh R-ANXA2组)及转染联合照射组(sh R-ANXA2/R组),每组6只。用p Gene Clip空载体及p Gene Clip-ANXA2-sh RNA载体转染CNE-2(R743)细胞构建移植瘤动物模型,用6 MV X射线在室温下行单次照射动物,总吸收剂量为10 Gy,剂量率为每分钟400 c Gy,照射野面积为20 cm×20 cm。观察各组裸鼠移植瘤照射后的生长情况、移植瘤体积变化情况,免疫组织化学检测移植瘤组织中Annexin A2的表达,Western blot检测移植瘤组织中Ku70和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果 10 Gy X射线照射后3周,sh R-ANXA2/R组(168.46%±129.00%)裸鼠肿瘤生长速度最慢,与CNE-2(R743)/R组(462.26%±195.60%)和sh R-C/R组(407.99%±116.60%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默Annexin A2的sh R-ANXA2/R组(2.68%±1.29%)的相对生长速率较CNE-2(R743)/R组(5.62%±1.96%)和sh R-C/R组(5.08%±1.17%)降低(P<0.05),生长抑制率增加。sh R-ANXA2/R组的q值为1.06,提示有放射增敏作用。免疫组织化学结果显示,sh R-ANXA2组移植瘤中Annexin A2的表达较CNE-2(R743)组和sh R-C组低。各组裸鼠移植瘤组织中Ku70蛋白的表达未见明显变化(P>0.05)。sh R-ANXA2/R组(2.97±0.44)的PCNA蛋白表达水平较CNE-2(R743)/R组(2.04±0.63)和sh R-C/R组(1.26±0.38)明显升高(P<0.05)。结论沉默Annxin A2基因可以提高裸鼠体内鼻咽癌移植瘤的放射敏感性。 展开更多

关键词 鼻咽癌 ANNEXIN A2 移植瘤 放射敏感性

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建立鼻咽癌标本库的经验和体会 被引量：3

7

作者 陈超 潘建基 +4 位作者 邹长棪 宗井凤 林可焴 何火聪 苏颖 《中国癌症防治杂志》 CAS 2016年第1期12-15,共4页

目的利用我院鼻咽癌的标本资源,建立鼻咽癌标本库,为科学研究提供组织标本。方法收集鼻咽癌患者的组织标本及外周血液。将组织标本置于-196℃液氮中保存;将分别处理后的全血液、白细胞层、血浆和血清于-80℃低温冰箱长期保存。将所有资... 目的利用我院鼻咽癌的标本资源,建立鼻咽癌标本库,为科学研究提供组织标本。方法收集鼻咽癌患者的组织标本及外周血液。将组织标本置于-196℃液氮中保存;将分别处理后的全血液、白细胞层、血浆和血清于-80℃低温冰箱长期保存。将所有资料数据信息录入计算机系统。结果目前标本库保存的鼻咽癌组织标本共1 152例,其中原发恶性肿瘤1 151例,复发肿瘤标本1例。鼻咽部正常组织标本95例。鼻咽慢性炎症标本24例。全血液标本、血浆标本、白细胞层标本和血清标本各2 416例。血液标本治疗前1 635例,治疗结束781例,治疗前和治疗结束配对499例。血液标本和组织标本配对614例,其中与治疗前、治疗结束的血液标本均配对者193例。结论初步建立了具有一定规模的鼻咽癌标本库,为标本库的发展积累了一定的经验。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 标本库 组织 血液 经验

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青蒿琥酯及其与放疗联用对CNE细胞的作用 被引量：3

8

作者 林华妹 苏颖 +3 位作者 陈增 林可焴 贾静 邹长棪 《福建医药杂志》 CAS 2009年第5期75-77,共3页

目的研究青蒿琥酯及其与放疗联用对鼻咽癌CNE细胞增殖和凋亡的影响。方法采用细胞集落计数法和原位末端标记（TUNEL）法，测定单用青蒿琥酯及其与放疗联用对CNE细胞增殖的抑制作用和对凋亡的诱导。结果青蒿琥酯能够抑制CNE细胞增殖，并... 目的研究青蒿琥酯及其与放疗联用对鼻咽癌CNE细胞增殖和凋亡的影响。方法采用细胞集落计数法和原位末端标记（TUNEL）法，测定单用青蒿琥酯及其与放疗联用对CNE细胞增殖的抑制作用和对凋亡的诱导。结果青蒿琥酯能够抑制CNE细胞增殖，并呈现明显的剂量效应，药物浓度2．5～50μg／ml的细胞存活率为15．75％～93．64％。青蒿琥酯可诱导CNE细胞凋亡，高浓度组（10μg／ml）作用比低浓度组（5μg／ml）强（P〈0．05）。当青蒿琥酯与放疗联用时作用更为明显，联用组的作用效果均优于单用青蒿琥酯组或单纯放疗组。结论青蒿琥酯对CNE细胞增殖有明显的抑制和诱导凋亡作用，且和放疗联用作用更强。 展开更多

关键词 青蒿琥酯 放疗 CNE细胞

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鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2细胞蛋白质的拉曼光谱初步分析 被引量：2

9

作者 邹长棪 欧琳 +3 位作者 林可焴 陈阳 何火聪 苏颖 《福建医药杂志》 CAS 2015年第1期47-50,共4页

目的以放射敏感性不同的鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2为研究对象,分析经不同剂量X射线照射后鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2蛋白质的拉曼光谱。比较不同剂量X射线对两种鼻咽癌细胞株蛋白质的影响。方法应用细胞集落实验分析CNE-1和CNE-2细胞的... 目的以放射敏感性不同的鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2为研究对象,分析经不同剂量X射线照射后鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2蛋白质的拉曼光谱。比较不同剂量X射线对两种鼻咽癌细胞株蛋白质的影响。方法应用细胞集落实验分析CNE-1和CNE-2细胞的放射敏感性;激光共聚焦显微拉曼光谱仪检测分析射线照射后CNE-1和CNE-2细胞蛋白质的变化。结果 CNE-1细胞的放射抗性(存活分数SF2)是CNE-2细胞的1.43倍。拉曼光谱技术分析结果表明,两种细胞株蛋白质的拉曼光谱谱峰基本一致,在归属为L-苯丙氨酸的952cm-1位置,经照射CNE-1和CNE-2细胞株谱峰强度不同;两种细胞株的L-苯丙氨酸在照射后72h的拉曼谱峰强度显著增强,提示此时L-苯丙氨酸的含量有所增加。结论CNE-1和CNE-2细胞放射敏感性存在着差异;探寻放射敏感性的特征拉曼标志,将可作为研究肿瘤放射敏感性预测的手段之一。 展开更多

关键词 鼻咽癌 放射敏感性 拉曼光谱 X射线 蛋白质

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肝癌组织端粒酶活性表达及DNA含量的研究 被引量：1

10

作者 苏颖 陈增 +2 位作者 林华妹 邹长棪 林可焴 《癌症进展》 2004年第5期378-380,共3页

目的　研究肝癌组织、癌旁组织端粒酶活性的表达及DNA含量的变化。方法　取肝癌手术标本 30例 ,每例均取癌组织、癌旁肝组织及外侧切缘肝组织。采用PCR -ELISA法检测其端粒酶的活性 ;流式细胞仪技术检测细胞DNA含量 ,DNA倍体及细胞分期... 目的　研究肝癌组织、癌旁组织端粒酶活性的表达及DNA含量的变化。方法　取肝癌手术标本 30例 ,每例均取癌组织、癌旁肝组织及外侧切缘肝组织。采用PCR -ELISA法检测其端粒酶的活性 ;流式细胞仪技术检测细胞DNA含量 ,DNA倍体及细胞分期。结果　肝癌组织端粒酶阳性率为 76 7% (2 3 30 ) ,癌旁组织端粒酶阳性率为 16 7% (5 30 ) ,外侧切缘肝组织无阳性 (0 30 ) ,肝癌组织与癌旁组织及外侧切缘肝组织端粒酶的表达有显著差异 (P <0 0 1)。癌旁组织与外侧切缘肝组织端粒酶的表达也有显著差异 (P <0 0 5 )。肝癌组织与外侧切缘肝组织DNA异倍体表达率有显著差异 (P <0 0 5 )。端粒酶阳性及阴性组间DNA异倍体率、DNA指数 (DI)、S期细胞比率 (SPF) ,细胞增殖指数 (PI)未见明显变化。结论　端粒酶与肿瘤的恶性行为存在一定的密切关系 ,其作为肝癌诊断的分子标志具有一定的价值。同时检测DNA倍体类型可进一步提高其临床参考价值。 展开更多

关键词 肝癌 端粒酶 DNA

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三氧化二砷对人肝癌细胞作用的研究 被引量：4

11

作者 苏颖 陈增 +2 位作者 邹长棪 林可焴 林华妹 《肿瘤防治杂志》 2003年第10期1069-1071,共3页

目的 :应用体外培养的肝癌细胞株 (SMMC 772 1)观察砷剂 (As2 O3)的凋亡诱导作用。方法 :采用MTT法检测As2 O3对肝癌细胞增殖的影响 ,DNA电泳及流式细胞仪检测不同浓度As2 O3作用不同时间对肝癌细胞的凋亡诱导作用及细胞周期的影响。结... 目的 :应用体外培养的肝癌细胞株 (SMMC 772 1)观察砷剂 (As2 O3)的凋亡诱导作用。方法 :采用MTT法检测As2 O3对肝癌细胞增殖的影响 ,DNA电泳及流式细胞仪检测不同浓度As2 O3作用不同时间对肝癌细胞的凋亡诱导作用及细胞周期的影响。结果 :As2 O3抑制肝癌细胞的增殖并具有剂量 -时效关系 ;As2 O3可使肝癌细胞周期改变 ,与浓度有关 ,与作用时间未见明显关系 ;As2 O3诱导肝癌细胞发生凋亡 ,并与浓度、时间有关。结论 :As2 O3能抑制肝癌细胞增殖 ,改变肝癌细胞周期 。 展开更多

关键词 肝肿瘤 病理学 砷剂 药理学 脱噬作用 药物作用 肿瘤细胞 培养的 药物作用

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肺癌组织及外周血多药耐药基因相关蛋白的表达及其相关性研究 被引量：1

12

作者 陈增 苏颖 +1 位作者 林可焴 林华妹 《福建医药杂志》 CAS 2011年第5期79-81,共3页

目的检测多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)在肺癌组织及外周血中的表达及其相关性,探讨其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测47例患者肺癌组织及外周血的MRP、LRP mRNA的表达水平。结果肺癌组织及外周血,MRP mRN... 目的检测多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)在肺癌组织及外周血中的表达及其相关性,探讨其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测47例患者肺癌组织及外周血的MRP、LRP mRNA的表达水平。结果肺癌组织及外周血,MRP mRNA的阳性表达率分别为74.5%(35/47)和70.2%(33/47),两者之间呈显著相关(r=0.686,P<0.01);LRP mRNA的阳性表达率分别为82.9%(39/47),76.6%(36/47),两者之间亦呈显著相关(r=0.368,P<0.01);肺癌组织MRP mRNA和LRP mRNA的表达表现为正相关(r=0.384,P<0.01)。结论肺癌患者MRP、LRP mRNA的表达密切相关,检测外周血中MRP、LRP mRNA表达能间接反映癌组织对化疗药物的耐受性。 展开更多

关键词 肺癌 多药耐药 RT—PCR MRNA 表达 化疗

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麦冬提取液对人肺癌细胞株SPC-A1细胞放射效应的影响 被引量：3

13

作者 岳珊珊 李建成 +3 位作者 苏颖 邹长棪 何火聪 林可焴 《福建中医药大学学报》 2014年第2期24-26,共3页

目的观察麦冬提取液对人肺癌细胞株SPC-A1细胞放射效应的影响。方法实验分6组,空白对照组、单纯照射组、单纯药物组、照射前给药组、照射中给药组和照射后给药组。应用集落形成实验测定各组细胞的存活率,计算麦冬提取液的放射增敏比;流... 目的观察麦冬提取液对人肺癌细胞株SPC-A1细胞放射效应的影响。方法实验分6组,空白对照组、单纯照射组、单纯药物组、照射前给药组、照射中给药组和照射后给药组。应用集落形成实验测定各组细胞的存活率,计算麦冬提取液的放射增敏比;流式细胞法分析比较各组细胞周期的变化。结果在2Gy照射剂量下,麦冬提取液与照射联合应用组的存活率低于单纯照射组,并以照射后加药组相对更为明显(P<0.05);在放射前、中、后联用麦冬提取液的各组中,放射增敏比分别为1.11、1.46、1.29。流式细胞法分析显示,麦冬提取液与照射联合应用组G2/M期比例上升,与空白对照组、单纯照射组、单纯药物组比较均具有统计学意义(P<0.05)。结论麦冬提取液对经照射的人肺癌细胞株SPC-A1细胞具有一定的增效作用,其机制可能与改变细胞周期有关。 展开更多

关键词 肺癌 麦冬 细胞株SPC-A1 细胞周期 放射

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放射抗拒鼻咽癌细胞中Annexin A2相互作用蛋白的研究

14

作者 何火聪 苏颖 +4 位作者 林少俊 邹长棪 林可焴 潘剑茹 陈超 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期88-93,共6页

目的筛选放射抗拒鼻咽癌细胞中Annexin A2的相互作用蛋白,以探讨Annexin A2在鼻咽癌放射抗拒中的作用机制。方法采用免疫共沉淀结合质谱(MALDI-TOF/TOF)技术筛选并鉴定放射抗拒鼻咽癌细胞CNE-2(R743)中Annexin A2相互作用蛋白,用Mascot... 目的筛选放射抗拒鼻咽癌细胞中Annexin A2的相互作用蛋白,以探讨Annexin A2在鼻咽癌放射抗拒中的作用机制。方法采用免疫共沉淀结合质谱(MALDI-TOF/TOF)技术筛选并鉴定放射抗拒鼻咽癌细胞CNE-2(R743)中Annexin A2相互作用蛋白,用Mascot软件在NCBInr数据库对质谱数据进行检索,生物信息学分析Annexin A2及其相互作用蛋白在放射抗拒鼻咽癌细胞中的作用。结果有5种蛋白与Annexin A2存在相互作用,分别是Calnexin、HSP90、GRP78、Vimentin、HSP27。将这些蛋白与Annexin A2进行生物信息学分析发现HSP90、GRP78和HSP27与Annexin A2存在直接相互作用,Calnexin、Vimentin与Annexin A2存在间接作用。结论这些蛋白可能与Annexin A2存在相互作用从而导致鼻咽癌细胞的放射抗拒。 展开更多

关键词 鼻咽癌 ANNEXIN A2 相互作用蛋白

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Annexin A2在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义

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作者 何火聪 林少俊 +5 位作者 林可焴 宗井凤 陈超 邹长棪 潘剑茹 苏颖 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1216-1220,共5页

目的探讨Annexin A2表达与鼻咽癌临床特征及预后的关系。方法选取2012年2月至2012年7月初诊的131例经病理确诊的鼻咽癌肿瘤组织标本,免疫组织化学法检测Annexin A2表达情况。根据患者的性别、年龄、病理类型、肿瘤分期等临床资料,分析An... 目的探讨Annexin A2表达与鼻咽癌临床特征及预后的关系。方法选取2012年2月至2012年7月初诊的131例经病理确诊的鼻咽癌肿瘤组织标本,免疫组织化学法检测Annexin A2表达情况。根据患者的性别、年龄、病理类型、肿瘤分期等临床资料,分析Annexin A2表达与临床分期、肿瘤局部复发和远处转移等关系。结果 Annexin A2在鼻咽癌中的阳性表达率为92.4%(121/131),表达强度差异在临床分期Ⅰ~Ⅳ期中均无统计学意义(P>0.05)。Annexin A2蛋白阴性表达者(-)比阳性表达者(+,++,+++)有较高的无局部复发生存率和无远处转移生存率,尽管差异无统计学意义(P>0.05),但两组之间曲线能较好的拉开。Cox模型分析结果显示:病理类型是鼻咽癌患者无局部复发生存时间的独立预后因素(P=0.039)。结论 Annexin A2蛋白高表达与鼻咽癌局部复发和远处转移是否具有相关性尚有待扩大样本量和延长随访时间进一步探讨。 展开更多

关键词 鼻咽癌 ANNEXIN A2 免疫组织化学

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非小细胞肺癌中ARL4C的表达及其在EGFR-TKI耐药中的作用

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作者 陈增 廖锦容 +6 位作者 苏颖 何志勇 胡丹 林可焴 金善丰 林仁章 林贤东 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2020年第7期498-503,共6页

目的探讨非小细胞肺癌中ARL4C的表达及其与临床病理特征的关系以及在EGFR-TKI耐药中的作用。方法收集63例NSCLC患者的癌组织和癌旁组织,qRT-PCR法检测ARL4C的表达并分析其与临床病理特征之间的关系。qRTPCR和Western blot法检测ARL4C在... 目的探讨非小细胞肺癌中ARL4C的表达及其与临床病理特征的关系以及在EGFR-TKI耐药中的作用。方法收集63例NSCLC患者的癌组织和癌旁组织,qRT-PCR法检测ARL4C的表达并分析其与临床病理特征之间的关系。qRTPCR和Western blot法检测ARL4C在各细胞株中的表达,MTS检测细胞活性及IC50的变化,Transwell侵袭实验检测ARL4C表达变化对细胞侵袭能力的影响。结果非小细胞肺癌组织中ARL4C表达水平低于癌旁组织(P<0.05),其表达水平与淋巴结转移、TNM分期和肺膜侵犯密切相关(P<0.05)。TKI耐药细胞株HCC827/ER中ARL4C在mRNA以及蛋白表达水平相较对照细胞株HCC827显著下调(P<0.05);ARL4C过表达细胞株HCC827/ER/ARL4C-OEIC50显著下降(P<0.05),Transwell分析结果显示过表达ARL4C后肺癌细胞的侵袭能力受到抑制(P<0.05)。结论ARL4C异常表达与非小细胞肺癌淋巴结转移、TNM分期和肺膜侵犯密切相关。过表达ARL4C能提高非小细胞肺癌细胞对EGFR-TKI药物的敏感度并抑制非小细胞肺癌细胞的侵袭能力。 展开更多

关键词 ARL4C 非小细胞肺癌 EGFR-TKI 获得性耐药

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shRNA沉默AnnxinA2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响

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作者 何火聪 苏颖 +2 位作者 林可焴 邹长棪 陈超 《中国癌症防治杂志》 CAS 2017年第4期295-301,共7页

目的探讨sh RNA沉默Annxin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响。方法采用Fu GENE HD将Annexin A2 sh RNA转染放射抗拒的鼻咽癌CNE2(R743)细胞,q RT-PCR验证转染细胞中Annxin A2基因的表达,细胞划痕实验和Transwell实验观察下... 目的探讨sh RNA沉默Annxin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响。方法采用Fu GENE HD将Annexin A2 sh RNA转染放射抗拒的鼻咽癌CNE2(R743)细胞,q RT-PCR验证转染细胞中Annxin A2基因的表达,细胞划痕实验和Transwell实验观察下调Annxin A2基因表达及联合照射对鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白的表达。结果转染组细胞Annexin A2基因的m RNA相对表达量为(0.25±0.17),较对照组的(1±0.00)和转染对照组的(0.96±0.06)明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕实验显示,下调Annxin A2基因表达可抑制照射诱导的CNE2(R743)细胞的迁移能力(P<0.05)。Transwell实验结果显示,下调Annxin A2基因表达可抑制照射诱导的CNE2(R743)细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05)。Western blot结果表明,下调Annxin A2基因表达能抑制照射诱导的MMP2蛋白的表达上调(P<0.05)。结论下调Annxin A2基因表达能抑制照射诱导放射抗拒的鼻咽癌CNE2(R743)细胞的迁移和侵袭能力,可能与MMP2蛋白表达下调相关。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 Annxin A2基因 放射抗拒 鼻咽癌CNE2(R743)细胞 迁移 侵袭

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重组真核表达载体pcDNA3.1-Annexin A2的构建与鉴定

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作者 何火聪 苏颖 +2 位作者 林可焴 邹长棪 陈超 《海峡药学》 2015年第9期231-232,共2页

目的构建含Annexin A2目的基因的重组表达质粒。方法从鼻咽癌CNE-2细胞提取总RNA,RT-PCR扩增目的基因片段,经KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后与pc DNA3.1(+)真核表达载体连接,构建真核表达载体pc DNA3.1-Annexin A2,转化DH5α,筛选阳性重组子,抽... 目的构建含Annexin A2目的基因的重组表达质粒。方法从鼻咽癌CNE-2细胞提取总RNA,RT-PCR扩增目的基因片段,经KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后与pc DNA3.1(+)真核表达载体连接,构建真核表达载体pc DNA3.1-Annexin A2,转化DH5α,筛选阳性重组子,抽质粒进行KpnⅠand XbaⅠ双酶切、PCR和测序鉴定。结果重组质粒经PCR和酶切后都获得与RT-PCR大小相同的产物,长度约为1020b P,测序结果与基因库一致。结论成功构建重组真核表达质粒pc DNA3.1-Annexin A2。 展开更多

关键词 ANNEXIN A2 真核表达载体 PC DNA3.1(+)

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非小细胞肺癌组织中circ_0006692的表达及其对肺癌细胞增殖转移的调控机制 被引量：3

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作者 陈增 廖锦容 +5 位作者 邹长棪 苏颖 林可焴 金善丰 郑倩兰 林贤东 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2021年第9期846-852,共7页

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中circ_0006692的表达与临床病理特征的关系及机制。方法收集50对NSCLC和癌旁组织,qRT-PCR法检测癌和癌旁组织中circ_0006692的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系。构建过表达、敲低的circ_0006692的A... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中circ_0006692的表达与临床病理特征的关系及机制。方法收集50对NSCLC和癌旁组织,qRT-PCR法检测癌和癌旁组织中circ_0006692的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系。构建过表达、敲低的circ_0006692的A549肺癌细胞株,MTS、克隆形成实验、划痕创伤愈合实验和Transwell侵袭实验检测circ_0006692表达变化对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。qRT-PCR和Western blot检测circ_0006692表达变化对EMT相关基因表达的影响。结果非小细胞肺癌组织中circ_0006692表达水平高于癌旁组织(P<0.05),其表达水平与肿瘤大小、TNM分期及肺膜侵犯密切相关(P<0.05)。circ_0006692敲低抑制细胞增殖、侵袭和转移,过表达可促进细胞增殖、侵袭和转移。qRT-PCR和Western blot结果显示circ_0006692敲低抑制A549肺癌细胞EMT相关基因CDH2和MMP7促进CDH1表达。结论非小细胞肺癌组织中circ_0006692的表达上调与肿瘤大小、TNM分期及肺膜侵犯密切相关;circ_0006692表达可调节A549肺癌细胞增殖、侵袭、转移以及EMT进展。 展开更多

关键词 circ_0006692 非小细胞肺癌 增殖 转移 EMT

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EBV相关性胃癌中PIWIL1和PIWIL4表达及与预后的相关性 被引量：2

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作者 林华妹 邹长棪 +6 位作者 胡丹 苏颖 廖锦容 林可焴 相智声 郑雄伟 林贤东 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期637-642,649,共7页

目的探讨PIWIL1和PIWIL4表达与EBV相关性胃癌(EBV-associated gastric cancer,EBVaGC)临床病理学特征及预后的关系。方法收集胃腺癌111例,采用原位杂交技术鉴定EBVaGC,应用qRT-PCR检测正常胃黏膜上皮细胞株GES-1、EBV阴性胃癌细胞株MKN... 目的探讨PIWIL1和PIWIL4表达与EBV相关性胃癌(EBV-associated gastric cancer,EBVaGC)临床病理学特征及预后的关系。方法收集胃腺癌111例,采用原位杂交技术鉴定EBVaGC,应用qRT-PCR检测正常胃黏膜上皮细胞株GES-1、EBV阴性胃癌细胞株MKN-28、EBV感染的胃癌细胞株AGS-BX1、胃腺癌组织及癌旁组织中PIWIL1和PIWIL4的表达,并分析其与临床病理特征的相关性;Kaplan-Meier和Logistic以及Cox分析PIWIL1和PIWIL4表达与EBVaGC预后的相关性。结果PIWIL1与PIWIL4在EBVaGC组中的表达均高于非EBV相关性胃癌(non-EBV-associated gastric cancer,EBVnGC)组(P<0.05)。PIWIL1和PIWIL4在EBVaGC中的表达量分别为0.556±0.096、0.778±0.440,在癌旁组织中的表达量为0.240±0.121、0.501±0.431,分别上调2.31倍及1.55倍(P=0.033,P=0.029)。AGS-BX1中PIWIL1与PIWIL4表达水平高于GES-1和MKN-28(P<0.01)。PIWIL1和PIWIL4表达与胃腺癌TNM分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示,PIWIL4高表达组患者的总生存期较低表达组差(P=0.007)。Logistic及Cox分析显示PIWIL4表达与EBVaGC的预后相关(P<0.05),是EBVaGC预后独立危险因素。结论EBVaGC中PIWIL1和PIWIL4过表达,并与TNM分期和淋巴结转移密切相关,且PIWIL4与患者总生存期相关,是EBVaGC预后的独立危险因素,PIWIL4可能是判断EBVaGC预后的分子标志物。 展开更多

关键词 胃肿瘤 EBV PIWIL1 PIWIL4 预后

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