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地鳖纤溶活性蛋白含药血清对人肺癌A549细胞凋亡及凋亡相关表达的影响 被引量:6
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作者 林泽飞 韩雅莉 陈冰 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期807-810,共4页
目的研究地鳖纤溶活性蛋白(EFP)含药血清对人肺癌A549细胞凋亡的影响及凋亡相关基因的表达。方法制备不同浓度EFP小鼠含药血清;采用MTT法检测EFP对A549细胞的增殖抑制效果;采用Annexin V-FITC/PI双荧光染色观察细胞凋亡情况;应用流式细... 目的研究地鳖纤溶活性蛋白(EFP)含药血清对人肺癌A549细胞凋亡的影响及凋亡相关基因的表达。方法制备不同浓度EFP小鼠含药血清;采用MTT法检测EFP对A549细胞的增殖抑制效果;采用Annexin V-FITC/PI双荧光染色观察细胞凋亡情况;应用流式细胞术检测EFP对A549细胞周期的影响;采用免疫组化法检测凋亡相关基因Bax表达水平的改变。结果 EFP含药血清各组对A549细胞有明显抑制作用;EFP使A549细胞发生细胞凋亡,细胞周期发生改变;随着药物浓度的增加,Bax表达逐渐增强,Bcl-2表达逐渐减弱。结论 EFP有较强的体外抗肿瘤活性;EFP可能通过调控Bcl-2,Bax基因表达而诱导凋亡。 展开更多
关键词 地鳖纤溶活性蛋白 含药血清 A549细胞 细胞凋亡
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黄粉虫纤溶活性基因的克隆及在毕赤酵母中的表达及活性检测
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作者 韩雅莉 林非凡 +2 位作者 林泽飞 段雪娟 朱晓琳 《广东工业大学学报》 CAS 2017年第1期19-23,共5页
采用PCR技术,以含有TFP(Tenebrio Fibrinolyric Proteins,TFP)c DNA质粒作为模板,扩增出TFP基因片段.将克隆获得的目的基因插入到毕赤酵母表达载体p PIC9K中,经测序无误后,获得重组表达质粒p PIC9K-TFP.将重组表达质粒线性化后电击转化... 采用PCR技术,以含有TFP(Tenebrio Fibrinolyric Proteins,TFP)c DNA质粒作为模板,扩增出TFP基因片段.将克隆获得的目的基因插入到毕赤酵母表达载体p PIC9K中,经测序无误后,获得重组表达质粒p PIC9K-TFP.将重组表达质粒线性化后电击转化到毕赤酵母GS115中,经筛选并PCR验证获得多拷贝整合型酵母工程菌,对工程菌进行发酵和甲醇诱导表达.阳性样品经纤溶平板实验验证,表明该表达蛋白具有生物活性. 展开更多
关键词 黄粉虫 纤溶酶 基因 载体pPIC9K 毕赤酵母 表达及活性检测
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初中几何教学中的数学情境与提出问题——“平行四边形性质的应用”教学案例 被引量:6
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作者 孙远琴 林泽飞 《数学教育学报》 2002年第4期91-93,共3页
在“平行四边形性质的应用”教学中,教师不仅要引导学生提出“平行四边形的性质”等常规问题,还应引发学生提出具有发展性和探索性的非常规性问题,把学习引入纵深.数学教学中,教师自己首先要想到有价值的数学问题,才能引导学生提出好的... 在“平行四边形性质的应用”教学中,教师不仅要引导学生提出“平行四边形的性质”等常规问题,还应引发学生提出具有发展性和探索性的非常规性问题,把学习引入纵深.数学教学中,教师自己首先要想到有价值的数学问题,才能引导学生提出好的数学问题.“情境与问题”教学课要求学生能根据教师出示的教学情境提出好的、有价值的问题,进而解决学生自己提出的数学问题. 展开更多
关键词 初中 几何教学 数学情境 “平行四边形性质的应用” 教学案例 问题意识
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miR-223通过IGF-1R及NFIA调控乳腺癌细胞及破骨细胞功能的研究 被引量:2
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作者 单臻 李雯 +3 位作者 范远键 林泽飞 林颖 王深明 《中华普通外科学文献(电子版)》 2020年第6期406-410,共5页
目的探索miR-223在乳腺癌骨转移微环境中调控乳腺癌细胞、破骨细胞的功能及其机制。方法采用micro-CT检测野生型及miR-223基因敲除小鼠股骨骨小梁骨体积分数、骨密度等相关数据,并对股骨组织病理切片染色,观察miR-223缺失对破骨活动影... 目的探索miR-223在乳腺癌骨转移微环境中调控乳腺癌细胞、破骨细胞的功能及其机制。方法采用micro-CT检测野生型及miR-223基因敲除小鼠股骨骨小梁骨体积分数、骨密度等相关数据,并对股骨组织病理切片染色,观察miR-223缺失对破骨活动影响。利用RANKL诱导RAW 264.7细胞分化为破骨细胞的体外模型,研究miR-223在其中的作用及机制。通过MDA-MB-231细胞实验研究miR-223对乳腺癌细胞增殖、凋亡功能的调控作用及机制。结果miR-223基因敲除小鼠股骨破骨活动明显活跃;miR-223过表达可以通过NFIA基因抑制RNAKL诱导的破骨细胞分化成熟,还可通过抑制IGF-1R及PI3K/Akt信号通路,抑制乳腺癌细胞增殖并促进其凋亡。结论miR-223是骨转移微环境中抑制乳腺癌骨转移发生发展的保护性因子,可通过抑制破骨细胞分化成熟、破骨活动、乳腺癌细胞增殖及促进乳腺癌细胞凋亡来调节乳腺癌骨转移微环境。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 微RNAS 骨转移 破骨细胞
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