期刊文献+
共找到124篇文章
< 1 2 7 >
每页显示 20 50 100
结核分枝杆菌磷酸二酯酶重组腺病毒黏膜免疫诱导的免疫应答特点
1
作者 代婷 路延之 +6 位作者 赵瑞华 宁唤唤 康健 郝乐冉 李嘉玲 常宇骁 柏银兰 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期1-8,共8页
目的结核分枝杆菌(Mtb)耐药菌株的流行加剧了结核病(TB)的全球负担,凸显了对新的TB治疗策略的需求。方法表达环二腺苷酸(c-di-AMP)分解酶磷酸二酯酶B(CnpB)的重组腺病毒疫苗(rAd-CnpB)经黏膜免疫正常小鼠,单独或联合药物免疫治疗Mtb呼... 目的结核分枝杆菌(Mtb)耐药菌株的流行加剧了结核病(TB)的全球负担,凸显了对新的TB治疗策略的需求。方法表达环二腺苷酸(c-di-AMP)分解酶磷酸二酯酶B(CnpB)的重组腺病毒疫苗(rAd-CnpB)经黏膜免疫正常小鼠,单独或联合药物免疫治疗Mtb呼吸道感染小鼠。ELISA检测小鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)抗体水平,实时定量PCR检测小鼠肺组织中细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)转录水平,流式细胞术检测肺、脾CD4^(+)、CD8^(+)T细胞亚群细胞比例,ELISA检测脾细胞抗原刺激后的细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-10、炎症因子IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌水平,平板计数法计数Mtb感染小鼠肺、脾的荷菌数。结果rAd-CnpB滴鼻免疫可诱导小鼠血清高滴度的IgG,以及BALF中IgG和IgA产生,肺、脾T淋巴细胞亚群改变。rAd-CnpB单独或联合药物治疗Mtb感染小鼠可诱导血清IgG水平、BALF中IgA和IgG水平显著增高,rAd-CnpB免疫促进Mtb感染小鼠的脾细胞CnpB抗原特异性的细胞因子和炎症因子分泌。rAd-CnpB单独或联合药物免疫治疗并不显著影响Mtb呼吸道感染小鼠肺、脾荷菌数。结论rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导小鼠显著的黏膜、体液免疫反应,并显著增强Mtb感染小鼠中CnpB特异性细胞免疫应答。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌(Mtb) 环核苷酸磷酸二酯酶B(CnpB) 重组腺病毒 免疫治疗
原文传递
结核分枝杆菌MPT64抗原DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答 被引量:8
2
作者 柏银兰 薛莹 +5 位作者 王丽梅 樊爱琳 张薇 康健 何俊杰 徐志凯 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期418-421,494,共5页
目的研究结核分枝杆菌MPT64抗原DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答。方法用表达MPT64的真核表达质粒pcDNA-M免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测免疫小鼠的特异性抗体滴度和抗体亚类。分离免疫小鼠的脾淋巴细胞,检测淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-12... 目的研究结核分枝杆菌MPT64抗原DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答。方法用表达MPT64的真核表达质粒pcDNA-M免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测免疫小鼠的特异性抗体滴度和抗体亚类。分离免疫小鼠的脾淋巴细胞,检测淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-12产生水平、流式细胞仪计CD4+细胞和CD8+细胞数、脾淋巴细胞特异性CTL杀伤效应。结果MPT64基因免疫可诱导小鼠高水平的体液免疫应答,免疫小鼠脾淋巴增殖显著,IFN-γ和IL-12含量增加,CD4+细胞和CD8+细胞百分比明显增加,CTL杀伤效应明显。结论MPT64 DNA疫苗可诱导小鼠有效的体液和细胞免疫应答,有可能作为新型TB疫苗的组分。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 MPT64 DNA 免疫应答
下载PDF
结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64的克隆、表达与鉴定 被引量:7
3
作者 柏银兰 李元 +3 位作者 李别虎 薛莹 范雄林 徐志凯 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第1期43-45,共3页
目的 :构建表达结核分枝杆菌分泌蛋白MPT6 4重组质粒 ,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白 .方法 :用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增出MPT6 4基因片段 ,插入 pGEM T easy载体中 ,序列测定正确后 ,将其亚克隆到表达载体pProEXHTb... 目的 :构建表达结核分枝杆菌分泌蛋白MPT6 4重组质粒 ,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白 .方法 :用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增出MPT6 4基因片段 ,插入 pGEM T easy载体中 ,序列测定正确后 ,将其亚克隆到表达载体pProEXHTb中 ,在大肠杆菌DH5α中表达 .结果 :获得结核分枝杆菌MPT6 4成熟蛋白基因 ,经序列测定与GenBank公布的序列完全一致 ;表达蛋白经SDS PAGE分析 ,相对分子质量与文献报道一致 ;重组蛋白经蛋白印迹实验 ,在Mr2 .6× 10 4位置有特异条带 .MPT6 4蛋白在宿主菌中表达量约占菌体总蛋白的 13.5 % .结论 :基因重组表达的融合蛋白有可能作为有效抗原用于结核病的预防疫苗的研制和皮肤免疫诊断试剂的制备 . 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 分泌蛋白 MPT64 克隆 基因表达
下载PDF
结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64的免疫学特性 被引量:6
4
作者 柏银兰 薛莹 +3 位作者 李元 徐志凯 师长宏 张海 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第13期1182-1184,共3页
目的 :研究结核分枝杆菌 (MTB)分泌蛋白MPT6 4的免疫学特性 .方法 :用原核表达的MPT6 4蛋白免疫BALB/c小鼠 ,ELISA法检测免疫小鼠的体液免疫应答效果 .分离免疫小鼠的脾淋巴细胞 ,体外用抗原再刺激 ,MTT方法检测IFN γ 产生水平和MTT法... 目的 :研究结核分枝杆菌 (MTB)分泌蛋白MPT6 4的免疫学特性 .方法 :用原核表达的MPT6 4蛋白免疫BALB/c小鼠 ,ELISA法检测免疫小鼠的体液免疫应答效果 .分离免疫小鼠的脾淋巴细胞 ,体外用抗原再刺激 ,MTT方法检测IFN γ 产生水平和MTT法检测淋巴细胞增殖 ,并对脾脏细菌负荷计数 .结果 :MPT6 4免疫小鼠可引起体液免疫和保护性细胞免疫 ,免疫小鼠的脾淋巴细胞体外用抗原再刺激 ,淋巴细胞的增殖较显着 .MTT方法检测小鼠的IFN γ 量为 1 0 2 4ng/L ,而生理盐水对照组低于 80ng/L .结论 :MPT6 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 分泌蛋白 MPT64 免疫学
下载PDF
结核分枝杆菌mpt64基因重组穿梭表达载体的构建与鉴定 被引量:2
5
作者 柏银兰 薛莹 +4 位作者 王瑞 高辉 王丽梅 樊爱琳 徐志凯 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期869-872,877,共5页
目的在分枝杆菌系统中表达结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64。方法用PCR法扩增mpt64基因,构建表达载体穿梭质粒pDE22-mpt64。在母牛分枝杆菌中表达MPT64蛋白,间接免疫荧光和Western-blot鉴定、离子亲和层析法纯化目的蛋白。结果大肠—分枝杆... 目的在分枝杆菌系统中表达结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64。方法用PCR法扩增mpt64基因,构建表达载体穿梭质粒pDE22-mpt64。在母牛分枝杆菌中表达MPT64蛋白,间接免疫荧光和Western-blot鉴定、离子亲和层析法纯化目的蛋白。结果大肠—分枝杆菌穿梭质粒pDE22-mpt64可以在母牛分枝杆菌中复制并表达26kDa蛋白。蛋白印迹实验证实可与抗His单克隆抗体特异结合。结论成功构建了结核分枝杆菌mpt64基因重组穿梭表达质粒,为进一步研究该蛋白奠定了的基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 MPT64 母牛分枝杆菌 穿梭质粒 表达 重组
下载PDF
案例教学法在全科医学教学中的应用及其探讨 被引量:11
6
作者 柏银兰 柴春雨 +2 位作者 徐志凯 张芳琳 吴兴安 《继续教育》 2016年第3期70-72,共3页
案例教学法(CTM)是教学方法改革的方向之一。构建案例教学和传统讲授式结合的教学形式,并在全科医学专业医学基础教育中进行了实践。对学员的调查结果显示,CTM可显著提高学习兴趣,促进学员的学习。对案例教学法的实施对象、范围、实施... 案例教学法(CTM)是教学方法改革的方向之一。构建案例教学和传统讲授式结合的教学形式,并在全科医学专业医学基础教育中进行了实践。对学员的调查结果显示,CTM可显著提高学习兴趣,促进学员的学习。对案例教学法的实施对象、范围、实施条件及与其他教学方法的比较和结合等问题进行了总结,为案例教学法在医学基础教育中的推广和应用提供了实践经验。 展开更多
关键词 教学方法 案例教学法 全科医学
下载PDF
结核分枝杆菌MPT64重组母牛分枝杆菌免疫学特性 被引量:1
7
作者 柏银兰 薛莹 +5 位作者 王丽梅 樊爱琳 张薇 何俊杰 康健 徐志凯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期211-214,共4页
目的:研究结核分枝杆菌MPT64重组母牛分枝杆菌疫苗免疫学特性。方法:用分泌表达MPT64的重组母牛分枝杆菌疫苗免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测免疫小鼠的特异性抗体滴度和抗体亚类。分离免疫小鼠脾淋巴细胞,检测淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-12... 目的:研究结核分枝杆菌MPT64重组母牛分枝杆菌疫苗免疫学特性。方法:用分泌表达MPT64的重组母牛分枝杆菌疫苗免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测免疫小鼠的特异性抗体滴度和抗体亚类。分离免疫小鼠脾淋巴细胞,检测淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-12产生水平、CD4+细胞和CD8+细胞数、脾淋巴细胞特异性CTL杀伤效应。毒株攻击后对脾脏细菌负荷计数。结果:MPT64重组母牛分枝杆菌疫苗免疫可诱导小鼠高水平的体液免疫应答,免疫小鼠脾淋巴增殖明显,IFN-γ和IL-12含量增加,CD4+和CD8+细胞百分比明显增加,CTL杀伤效应明显,对MTBH37Rv攻击后有一定的保护作用。结论:MPT64重组母牛分枝杆菌疫苗可诱导小鼠有效的体液和细胞免疫应答,有可能作为新型TB疫苗候选。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 母牛分枝杆菌 疫苗 MPT64
原文传递
结核分枝杆菌mpt64基因真核表达载体的构建及表达 被引量:2
8
作者 柏银兰 薛莹 +5 位作者 徐志凯 高辉 王丽梅 师长宏 张海 樊爱琳 《科学技术与工程》 2007年第15期3655-3659,共5页
构建结核分枝杆菌分泌蛋白mpt64基因真核表达载体。通过PCR法从MTBH37Rv株基因组中扩增mpt64基因,插入pGEM-T-easy载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-),重组质粒酶切鉴定正确后,以Lipo-fectamine2000转染COS-7... 构建结核分枝杆菌分泌蛋白mpt64基因真核表达载体。通过PCR法从MTBH37Rv株基因组中扩增mpt64基因,插入pGEM-T-easy载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-),重组质粒酶切鉴定正确后,以Lipo-fectamine2000转染COS-7细胞后,分别以RT-PCR方法检测mRNA表达和间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达。构建了真核表达载体pcDNA-mpt64,RT-PCR结果证明mpt64基因可在COS-7细胞中转录,用间接免疫荧光检测,有表达mpt64蛋白的细胞着染。结果表明,构建结核分枝杆菌mpt64基因的真核表达载体pcDNA-mpt64成功,mpt64基因可以在COS—7细胞中表达。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 MPT64 真核表达
下载PDF
Toll样受体与抗结核感染免疫 被引量:2
9
作者 柏银兰 薛莹 徐志凯 《生物技术通讯》 CAS 2006年第6期961-963,共3页
结核分枝杆菌(MTB)是结核病的致病菌,其发病机制仍未阐明。Toll样受体(TLR)蛋白家族属于动物模式识别受体家族。研究表明,TLR对先天免疫和获得性免疫都有调控作用,与抗结核感染免疫有关的主要是TLR2和TLR4。对TLR的研究为MTB诱导先天免... 结核分枝杆菌(MTB)是结核病的致病菌,其发病机制仍未阐明。Toll样受体(TLR)蛋白家族属于动物模式识别受体家族。研究表明,TLR对先天免疫和获得性免疫都有调控作用,与抗结核感染免疫有关的主要是TLR2和TLR4。对TLR的研究为MTB诱导先天免疫反应机制的阐明以及治疗方法的进步提供了新的思路。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 TOLL样受体 免疫 感染
下载PDF
结核分枝杆菌esat6-mpt64融合基因真核表达载体的构建 被引量:1
10
作者 柏银兰 薛莹 +4 位作者 徐志凯 高辉 王丽梅 师长宏 张海 《生物技术通讯》 CAS 2007年第2期196-198,共3页
目的:构建结核分枝杆菌分泌蛋白基因esat6-mpt64的真核表达载体。方法:用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中分别扩增esat6、mpt64基因,插入pGEM-T-easy载体,序列测定正确后,将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+);重组质粒经酶切鉴定... 目的:构建结核分枝杆菌分泌蛋白基因esat6-mpt64的真核表达载体。方法:用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv株基因组中分别扩增esat6、mpt64基因,插入pGEM-T-easy载体,序列测定正确后,将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+);重组质粒经酶切鉴定正确后,用LipofectAMINE2000转染COS-7细胞;用RT-PCR检测mRNA的表达,用间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达。结果:RT-PCR表明esat6-mpt64融合基因可在COS-7细胞中转录;用间接免疫荧光检测,有表达蛋白的细胞着染。结论:构建了真核表达载体pcDNA-esat6-mpt64,并在真核COS-7细胞中表达。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 ESAT6 MPT64 真核表达
下载PDF
在微生物学教学中激发学习动机,提高教学效果 被引量:15
11
作者 柏银兰 薛莹 柴春雨 《山西医科大学学报(基础医学教育版)》 2003年第6期566-567,共2页
心理学认为:人的行为受动机驱使.动机是人们活动的一种动因或力量,包括个人的意图、愿望、心理的冲动,或企图达到的目标等.动机具有唤醒和指向的功能.要进行长期的有效的学习,动机是不可少的.学习动机是在社会生活条件和教育的影响下逐... 心理学认为:人的行为受动机驱使.动机是人们活动的一种动因或力量,包括个人的意图、愿望、心理的冲动,或企图达到的目标等.动机具有唤醒和指向的功能.要进行长期的有效的学习,动机是不可少的.学习动机是在社会生活条件和教育的影响下逐渐形成起来的,因此不同的社会和教育对学生的学习有着不同的要求.在实际教学过程中,教师要根据不同的授课对象,采取合适的教学手段,最大限度地激发学生的学习动机,以达到良好的教学效果[1]. 展开更多
关键词 微生物学 教学方法 教学效果 心理学
下载PDF
高校护理专业学员基础课学习状况的调查与研究 被引量:1
12
作者 柏银兰 柴春雨 +4 位作者 王丽梅 尹文 康健 张薇 何俊杰 《西北医学教育》 2008年第6期1125-1127,共3页
目的了解护理专业学员的基础课学习状况。方法采用文献资料法、问卷调查法、教师访谈法进行调查。结果大多数学员学习目的明确,但学习方法有待改进。教师在教学过程中影响较大。教学课程设置应针对专业特点更趋合理。教学效果考评方式... 目的了解护理专业学员的基础课学习状况。方法采用文献资料法、问卷调查法、教师访谈法进行调查。结果大多数学员学习目的明确,但学习方法有待改进。教师在教学过程中影响较大。教学课程设置应针对专业特点更趋合理。教学效果考评方式应以闭卷和开卷考试结合的方式进行。结论此调查研究对护理专业的教学有一定的指导意义。 展开更多
关键词 护理 学习状况 调查 研究
下载PDF
医学微生物学小班教学理念探讨 被引量:1
13
作者 柏银兰 柴春雨 薛莹 《山西医科大学学报(基础医学教育版)》 2007年第2期113-114,共2页
教学理念就是人们对教学和学习活动内在规律的认识的集中体现。微生物学小班教学理念以“一切为了学生的发展”为中心,正确处理教学与教程的关系,并采用多种手段,促进学生自主学习,培养求异思维,激发学生勇于创新的精神。
关键词 微生物学 教学方法 教学理念
下载PDF
结核分枝杆菌mpt64基因稳定表达细胞系的建立
14
作者 柏银兰 王丽梅 +6 位作者 杨芳 薛莹 樊爱琳 康健 张薇 何俊杰 徐志凯 《科学技术与工程》 2009年第8期2047-2050,2055,共5页
为建立稳定表达结核分枝杆菌分泌蛋白MTP64的P815细胞系,将mpt64基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-),构建mpt64真核表达载体。重组质粒酶切鉴定正确后,以Lipofectamine2000转染P815细胞,通过G418筛选后,得到阳性克隆,分别以RT-PCR方法检... 为建立稳定表达结核分枝杆菌分泌蛋白MTP64的P815细胞系,将mpt64基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-),构建mpt64真核表达载体。重组质粒酶切鉴定正确后,以Lipofectamine2000转染P815细胞,通过G418筛选后,得到阳性克隆,分别以RT-PCR方法检测mRNA表达,间接免疫荧光和Western-blot检测目的蛋白的表达。表达结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64的真核表达载体转染细胞后,RT-PCR可扩增出目的基因片段,转染细胞间接免疫荧光检测阳性,Western-blot检测在约26 kDa处有特异显色条带,证实转染细胞表达目的基因。成功地建立mpt64稳定表达细胞系,为进一步结核疫苗评价奠定一定基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 MPT64 细胞 表达
下载PDF
多媒体教学在医学微生物学教学中的应用体会
15
作者 柏银兰 柴春雨 薛莹 《山西医科大学学报(基础医学教育版)》 2006年第4期340-341,共2页
针对医学微生物学教学特点,提出在教学过程中合理使用多媒体技术辅助教学,可以激发学生探求新知的欲望。提高学习兴趣;加深印象;展现规律,突出重难点;学以致用,运用所学知识解决实际问题;创设情境,发展创新思维。提出在微生物... 针对医学微生物学教学特点,提出在教学过程中合理使用多媒体技术辅助教学,可以激发学生探求新知的欲望。提高学习兴趣;加深印象;展现规律,突出重难点;学以致用,运用所学知识解决实际问题;创设情境,发展创新思维。提出在微生物教学过程中,尽可能地使用多媒体教学,以期获得最好的教学效果。 展开更多
关键词 微生物学 多媒体教学 教学效果
下载PDF
结核分枝杆菌ESAT6-CFP10融合蛋白诱导的小鼠免疫应答及其保护力 被引量:12
16
作者 张海 师长宏 +3 位作者 薛莹 柏银兰 王丽梅 徐志凯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期443-446,共4页
目的:研究结核分枝杆菌(MTB)ESAT6-CFP10融合蛋白诱导的小鼠体液和细胞免疫应答以及对MTB感染小鼠的保护能力。方法:用预先转移到硝酸纤维素膜条的ES-AT6-CFP10融合蛋白采用皮下包埋的方法免疫小鼠。用MTB培养上清滤液蛋白(CFP)作为抗原... 目的:研究结核分枝杆菌(MTB)ESAT6-CFP10融合蛋白诱导的小鼠体液和细胞免疫应答以及对MTB感染小鼠的保护能力。方法:用预先转移到硝酸纤维素膜条的ES-AT6-CFP10融合蛋白采用皮下包埋的方法免疫小鼠。用MTB培养上清滤液蛋白(CFP)作为抗原,用ELISA法测定免疫小鼠血清特异性抗体的滴度。末次免疫后,取部分免疫小鼠脾淋巴细胞,体外用ESAT6-CFP10融合蛋白刺激后,以MTT比色法检测淋巴细胞增殖反应,同时检测免疫小鼠IFN-γ和IL-2水平及脾细胞杀伤效应。另一部分免疫的BALB/c小鼠经尾静脉感染MTB毒株H37Rv,4周后计数脾脏中的细菌数。结果:ESAT6-CFP10融合蛋白免疫小鼠血清特异性抗体的滴度为1∶6400。淋巴细胞刺激增殖指数为1.90±0.15,明显高于生理盐水组(0.90±0.15);IFN-γ和IL-2的含量分别为1.792±19ng/L和0.211±11ng/L,显著高于生理盐水对照组,但不及BCG免疫组;同时融合蛋白诱导的脾细胞杀伤率为36%。与生理盐水免疫组(细菌负荷6.51±0.13)相比较,融和蛋白免疫的BALB/c小鼠,对攻击感染后MTB在脾脏中增殖有显著作用(细菌负荷为5.24±0.15,P<0.05),但与BCG免疫组相比脾脏中细菌负荷减少甚微。结论:ESAT6-CFP10融合蛋白可作为新型结核疫苗的候选组分。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 疫苗 ESAT6 CFP10 重组融合蛋白
原文传递
抗藤黄微球菌Rpf结构域单克隆抗体的制备与特性鉴定 被引量:9
17
作者 樊爱琳 师长宏 +5 位作者 苏明权 马静 柏银兰 程晓东 徐志凯 郝晓柯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期484-487,共4页
目的:克隆、表达藤黄微球菌Rpf结构域多肽,并制备针对该多肽的单克隆抗体(mAb)。方法:采用聚合酶链反应(PCR)藤黄微球菌基因组中扩增出藤黄微球菌Rpf结构域基因,用限制性内切酶消化后插入到pUC-19克隆载体中,测序正确后,再亚克隆到融合... 目的:克隆、表达藤黄微球菌Rpf结构域多肽,并制备针对该多肽的单克隆抗体(mAb)。方法:采用聚合酶链反应(PCR)藤黄微球菌基因组中扩增出藤黄微球菌Rpf结构域基因,用限制性内切酶消化后插入到pUC-19克隆载体中,测序正确后,再亚克隆到融合表达载体pPro-EXHT中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的Rpf结构域基因多肽,在变性条件下纯化目的蛋白。用纯化的目的蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,进行细胞融合、克隆化制备抗Rpf domain单抗(mAb),用ELISA法初步鉴定其特异性和相对亲和力。结果:在变性条件下用Ni2+-NTA亲和色谱柱纯化目的融合蛋白,纯化获得的蛋白纯度大于90%。用该融合蛋白免疫小鼠后,获得了3株抗Rpfdomain mAb,这3株mAb均特异性识别Rpf domain多肽。结论:所获得的抗Rpfdomain mAb特异性强、效价高,对进一步研究Rpf domain在结核病免疫预防中的作用提供了有力的工具。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 藤黄微球菌 Rpf DOMAIN MAB
原文传递
结核分枝杆菌Ag85B-ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及其保护力 被引量:11
18
作者 师长宏 范雄林 +3 位作者 柏银兰 薛莹 张海 徐志凯 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第18期1633-1636,共4页
目的 :研究Ag85B与ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答以及对MTB感染小鼠的保护力 .方法 :采用皮下包埋的方法 ,将预先转移到硝酸纤维素膜上的表达蛋白免疫小鼠 3次 ,每次间隔 2wk,用MTB培养上清滤液蛋白 (culturefiltrat... 目的 :研究Ag85B与ESAT6融合蛋白在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答以及对MTB感染小鼠的保护力 .方法 :采用皮下包埋的方法 ,将预先转移到硝酸纤维素膜上的表达蛋白免疫小鼠 3次 ,每次间隔 2wk,用MTB培养上清滤液蛋白 (culturefiltrateproteins,CFP)作为抗原 ,ELASA测定免疫小鼠血清特异性抗体的滴度 .为了检测融合蛋白免疫小鼠引起的细胞免疫应答 ,最后一次免疫完成后 4wk ,取一部分免疫小鼠分离脾淋巴细胞 ,体外用抗原刺激 ,MTT法检测淋巴细胞刺激反应 ,ELISA检测悬液中IFN γ水平 .另一部分免疫的BALB/c小鼠经尾静脉感染MTB毒株H37Rv ,4wk后计数脾脏细菌负荷数 .结果 :Ag85B ESAT6蛋白免疫小鼠血清特异性抗体滴度为 1∶10 0 0 ,ESAT6 Ag85B蛋白免疫小鼠血清特异性抗体滴度为 1∶5 0 0 0 .融合蛋白Ag85B ESAT6和ESAT6 Ag85B免疫组淋巴细胞刺增殖指数分别为 2 .4 0± 0 .17和 2 .6 0± 0 .2 5 ,而生理盐水组只有 0 .90± 0 .2 1;相对应的IFN γ含量分别为 (3.5 1± 0 .30 ) μg/L和 (4 .0 5± 0 .4 1) μg/L ,显著高与生理盐水对照组 (0 .5 0± 0 .2 5 ) μg/L ,P <0 .0 5 ,但不及BCG免疫组 (5 .5 5±0 .31) μg/L .与生理盐水免疫组 (细菌负荷6 .31± 0 .13)相比较 ,融合蛋白免疫的BALB/c小鼠 。 展开更多
关键词 分支杆菌 结核 疫苗 抗原85B ESAT6 重组融合蛋白质类
下载PDF
屋尘螨抗原Derp2基因的克隆和表达 被引量:9
19
作者 史皆然 李元 +4 位作者 戚好文 李别虎 柏银兰 范雄林 薛莹 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第13期1161-1165,共5页
目的 构建并克隆屋尘螨抗原 Der p2基因 ,在大肠杆菌中初步表达 .方法 根据已发表的 Der p2基因 ,人工设计合成一系列基因片段 ,经单链扩增后连接成完整的 Der p2基因 ;将该基因克隆入表达载体 p Pro EX HTb中 ,测序并进行初步表达 .... 目的 构建并克隆屋尘螨抗原 Der p2基因 ,在大肠杆菌中初步表达 .方法 根据已发表的 Der p2基因 ,人工设计合成一系列基因片段 ,经单链扩增后连接成完整的 Der p2基因 ;将该基因克隆入表达载体 p Pro EX HTb中 ,测序并进行初步表达 .结果 利用所设计的结构制备了完整的 Der p2基因 ,以大肠杆菌为宿主在 IPTG的诱导下获得初步表达 ,该外源蛋白 Mr约为 17× 10 3,占总蛋白量的 2 0 % .结论 所构建的 Der 展开更多
关键词 Der p2基因 屋尘螨抗原 基因克隆 基因表达 哮喘 重组BCG疫苗 疾病预防
下载PDF
结核分枝杆菌Ag85B基因疫苗免疫保护作用的初步研究 被引量:8
20
作者 范雄林 徐志凯 +5 位作者 李元 李别虎 薛莹 柏银兰 白光春 贾向志 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期90-92,共3页
目的:研究编码结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B的基因疫苗pTB30m和pTB30s对免疫动物的保护作用。方法:以基因疫苗pTB30m和pTB30s肌注免疫BALB/c小鼠。免疫完成6 wk后,用5×105 CFU的MTB H37Rv毒株经小鼠尾静脉攻击感染。同时用尼龙毛柱... 目的:研究编码结核分枝杆菌分泌蛋白Ag85B的基因疫苗pTB30m和pTB30s对免疫动物的保护作用。方法:以基因疫苗pTB30m和pTB30s肌注免疫BALB/c小鼠。免疫完成6 wk后,用5×105 CFU的MTB H37Rv毒株经小鼠尾静脉攻击感染。同时用尼龙毛柱分离基因免疫BALB/c小鼠的T细胞,并以5×106 T细胞/只小鼠过继免疫正常BALB/c小鼠,立即用105 CFU的MTB毒株经小鼠尾静脉攻击感染。4 wk后分别计数脾脏中的细菌负荷。结果:与生理盐水对照组相比较,pTB30m及pTB30s质粒免疫组BALB/c小鼠脾脏中的细菌负荷均减少,分别为0.645(log10 CFU,P<0.01)和0.839(log10CFU,P<0.001);而空质粒对照组小鼠脾脏中的细菌负荷减少较少。经质粒pTB30m和pTB30s免疫的BALB/c小鼠的T细胞,过继免疫的正常BALB/c小鼠,对攻击感染的MTB H37Rv毒株在脾脏中的增殖具有部分抑制作用。结论:pTB30s免疫的BALB/c小鼠,对MTB H37 Rv毒株攻击的保护作用优于pTB30m质粒免疫,有望进一步用于结核病的防治研究。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 AG85B 基因疫苗 免疫保护作用
原文传递
上一页 1 2 7 下一页 到第
使用帮助 返回顶部