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HMGA2与胃癌上皮细胞间质转化的相关性及临床意义 被引量:9
1
作者 查郎 王子卫 +1 位作者 张能 黄镇 《生命科学研究》 CAS CSCD 2011年第1期61-65,共5页
探讨HMGA2、E-cadherin及N-cadherin在胃癌组织中差异性表达的临床意义及其与上皮细胞间质转化的关系.应用RT-PCR方法检测20例胃癌组织及对应的正常胃粘膜组织HMGA2 mRNA的表达,应用免疫组织化学法检测71例胃癌组织及癌旁组织中HMGA2、E... 探讨HMGA2、E-cadherin及N-cadherin在胃癌组织中差异性表达的临床意义及其与上皮细胞间质转化的关系.应用RT-PCR方法检测20例胃癌组织及对应的正常胃粘膜组织HMGA2 mRNA的表达,应用免疫组织化学法检测71例胃癌组织及癌旁组织中HMGA2、E-cadherin及N-cadherin的表达情况,与临床资料做统计学分析.HMGA2 mRNA在胃癌组织和癌旁组织中的表达存在显著性差异(P<0.01),在胃癌组织中HMGA2、E-cadherin及N-cadherin的阳性表达率分别为64.7%、29.6%和43.7%,HMGA2和E-cadherin的表达成负相关(P<0.05),和N-cadherin的表达成正相关(P<0.05),HMGA2表达和胃癌患者淋巴结转移及临床分期有显著相关性(P<0.05).HMGA2高表达的胃癌组织中有明显的上皮细胞间质转化表型,其表达与胃癌侵润转移有一定的相关性. 展开更多
关键词 胃癌 高迁移率族蛋白A2(HMGA2) 上皮细胞表形标志物E-cadherin 间质表型标志物N-cadherin 上皮细胞间质化(EMT)
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恶性肿瘤中高迁移率族蛋白A2的功能研究进展 被引量:2
2
作者 查郎 王子卫 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期257-260,共4页
高迁移率族蛋白A2(high mobility group A2,HMGA2)是一种非组蛋白染色体蛋白,本身无转录活性,但是可以通过改变染色质结构来调节其他基因的转录。HMGA2在正常组织中低表达或不表达,而在胚胎期以及恶性肿瘤组织中的表达明显上调。在一些... 高迁移率族蛋白A2(high mobility group A2,HMGA2)是一种非组蛋白染色体蛋白,本身无转录活性,但是可以通过改变染色质结构来调节其他基因的转录。HMGA2在正常组织中低表达或不表达,而在胚胎期以及恶性肿瘤组织中的表达明显上调。在一些恶性肿瘤中,HMGA2可以作为诊断分子标志物或判断预后的独立因子。此外,HMGA2能够促进上皮-间质转化以及维持干细胞的分化潜能和自我更新能力,在肿瘤的发生、生长和转移等方面可能发挥着重要作用。 展开更多
关键词 癌基因 肿瘤干细胞 HMGA2蛋白
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专科医师规范化培训中腹腔镜直肠癌手术OSATS量表的建立与效果研究 被引量:1
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作者 查郎 彭旭东 +2 位作者 魏正强 张宏宇 王子卫 《现代医药卫生》 2022年第8期1367-1369,共3页
目的建立专科医师规范化培训中腹腔镜直肠癌手术客观结构化临床技能评估客观结构化临床技能评估(OSATS)量表并评价其效果。方法通过问卷调查的形式由结直肠癌手术量超过500台以上主任医师结合中国抗癌协会结直肠癌腹腔镜手术操作指南制... 目的建立专科医师规范化培训中腹腔镜直肠癌手术客观结构化临床技能评估客观结构化临床技能评估(OSATS)量表并评价其效果。方法通过问卷调查的形式由结直肠癌手术量超过500台以上主任医师结合中国抗癌协会结直肠癌腹腔镜手术操作指南制定OSATS量表,并对40名学员进行一次性考核,按照评分结果将40名学员的分数等级分为A、B、C和D 4组,比较A、B、C和D 4组学员手术时间、出血量、术后排气时间、住院时间、淋巴结清扫数量的差异。结果在评分量表中不同分数的学员其手术时间[B组(292.0±16.8)min,C组(232.5±26.9)min,D组(188.6±14.9)min]和出血量[B组(140.0±37.4)mL,C组(87.5±15.8)mL,D组(35.7±19.0)mL]差异有统计学意义(P<0.05),评分越高的学员手术时间和出血量均明显低于评分低的学员;各组在排气时间、住院时间及淋巴结清扫数量方面比较,差异均无统计学意义上(P>0,05)。结论通过对OSATS量表的验证当学员等级分数达到80分时,其手术安全性和效果可达到该中心平均水平,有独立开展腹腔镜直肠癌手术的能力。 展开更多
关键词 专科医师规范化培训 腹腔镜直肠癌手术 OSATS 全直肠系膜切除
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纺锤菌素抑制胃癌细胞的侵袭和转移
4
作者 查郎 彭旭东 王子卫 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第5期643-647,共5页
目的探讨纺锤菌素(netropsin)对胃癌细胞侵袭和转移能力的影响及其分子机制。方法用Transwell检测胃癌细胞侵袭和转移能力,用Western blot检测EMT相关标志物E-cadherin和vimentin表达,用免疫荧光检测β-catenin的细胞定位,验证netropsi... 目的探讨纺锤菌素(netropsin)对胃癌细胞侵袭和转移能力的影响及其分子机制。方法用Transwell检测胃癌细胞侵袭和转移能力,用Western blot检测EMT相关标志物E-cadherin和vimentin表达,用免疫荧光检测β-catenin的细胞定位,验证netropsin作用前后Wnt/β-catenin信号通路活性。结果 Netropsin浓度25μmol/L时对MKN28细胞增殖有抑制作用,netropsin可以降低上皮标志物E-cadherin的表达,上调间质标志物vimentin的表达;netropsin可以通过抑制胃癌细胞的EMT,降低胃癌细胞侵袭和转移能力(P<0.05),同时可阻止β-catenin进入细胞核。结论 Netropsin可以通过与HMGA2竞争结合转录因子结合位点抑制Wnt/β-catenin信号通路,降低胃癌细胞EMT的发生,从而抑制胃癌细胞侵袭能力。 展开更多
关键词 胃肿瘤 上皮间质转换 纺锤菌素
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KLF4对胃癌SGC-7901细胞株体外生长增殖的影响 被引量:6
5
作者 黄镇 王子卫 +2 位作者 张能 查郎 吴钊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期822-825,共4页
目的探讨Krppel样因子4(krppel-like factor 4,KLF4)对人胃癌SGC-7901细胞株生长增殖的影响。方法以人胃癌SGC-7901细胞株为研究对象,脂质体介导转染pcDNA3.1IE-KLF4重组质粒并建立KLF4稳定过表达细胞株,以未转染KLF4基因和转染空... 目的探讨Krppel样因子4(krppel-like factor 4,KLF4)对人胃癌SGC-7901细胞株生长增殖的影响。方法以人胃癌SGC-7901细胞株为研究对象,脂质体介导转染pcDNA3.1IE-KLF4重组质粒并建立KLF4稳定过表达细胞株,以未转染KLF4基因和转染空质粒载体的胃癌细胞株为对照。用RT-PCR和免疫细胞化学法检测KLF4 mRNA和蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期及增值指数。结果 RT-PCR和免疫细胞化学法检测示转染组细胞与未转染组和空载体组相比较,KLF4 mRNA和蛋白均明显表达(P<0.05)。流式细胞术检测显示转染组G1期细胞增多[(65.08±3.43)%,P<0.05],而S期和G2/M期细胞减少[(30.39±1.80)%、(4.53±1.66)%,P<0.05],增殖指数亦降低[(34.92±3.42)%,P<0.05]。结论 KLF4对SGC-7901细胞株体外生长增殖具有抑制作用。 展开更多
关键词 Krüppel样因子4 胃癌 转染 细胞周期 增殖
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Ⅲ_B期胃癌合并胃间质瘤1例 被引量:2
6
作者 张能 黄镇 +2 位作者 查郎 廖刚 王子卫 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期966-966,970,共2页
关键词 ⅢB期胃癌 胃间质瘤 重复癌
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KLF4对人胃癌细胞株SGC-7901体外增殖及迁移侵袭能力的影响 被引量:1
7
作者 黄镇 王子卫 +2 位作者 张能 查郎 吴钊 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期130-133,142,共5页
目的探讨Krüppel样因子4(KLF4)对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和迁移侵袭能力的影响。方法以人胃癌SGC-7901细胞株为研究对象,脂质体法转染pcDNA3.1IE-KLF4重组质粒并建立KLF4稳定过表达细胞株,以未转染KLF4基因和转染空质粒载体的胃... 目的探讨Krüppel样因子4(KLF4)对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和迁移侵袭能力的影响。方法以人胃癌SGC-7901细胞株为研究对象,脂质体法转染pcDNA3.1IE-KLF4重组质粒并建立KLF4稳定过表达细胞株,以未转染KLF4基因和转染空质粒载体的胃癌细胞株为对照。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测KLF4mRNA的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后SGC-7901细胞的增殖情况,划痕试验和Transwell小室检测胃癌细胞迁移侵袭能力。结果与未转染组和空载体组比较,转染组细胞KLF4mRNA表达明显,MTT法检测显示48h和72h细胞增殖抑制明显(P<0.05),24、48、72h的增殖抑制率分别为12.90%、23.85%、25.56%。未转染组、空载体组和转染组细胞迁移率分别为(78.15±4.86)%、(73.75±4.03)%、(60.84±5.56)%,侵袭穿膜细胞数分别为(163.53±13.95)个、(158.07±12.54)个、(73.87±8.70)个,转染组细胞迁移率和侵袭穿膜细胞数较对照组均降低(P<0.05)。结论 KLF4对胃癌SGC-7901细胞的体外增殖及迁移侵袭具有抑制作用。 展开更多
关键词 胃肿瘤 转染 细胞增殖 Kriuppel样因子4 侵袭
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急性出血性坏死性小肠炎1例 被引量:1
8
作者 黄镇 王子卫 +1 位作者 张能 查郎 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1279-1280,共2页
1病例资料 患者陈某,男性,28岁,因"上腹部疼痛1周,复发加重15 h"于2010年11月26日3时急诊入院。入院前1周,患者无明显诱因出现上腹部持续性隐痛,伴恶心、呕吐,无畏寒、发热,无返酸、嗳气,无黄疸及厌食。社区医院按"急性胃炎"治疗后... 1病例资料 患者陈某,男性,28岁,因"上腹部疼痛1周,复发加重15 h"于2010年11月26日3时急诊入院。入院前1周,患者无明显诱因出现上腹部持续性隐痛,伴恶心、呕吐,无畏寒、发热,无返酸、嗳气,无黄疸及厌食。社区医院按"急性胃炎"治疗后,患者腹痛有所缓解。15 h前,患者上腹部疼痛复发加重。体格检查:生命体征平稳。 展开更多
关键词 坏死性小肠炎 急性出血性 上腹部疼痛 病例资料 急诊入院 急性胃炎 社区医院 生命体征
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胃癌中HMGA2与HDAC6表达的临床意义及其相关性 被引量:6
9
作者 李逸 王子卫 +1 位作者 孔德全 查郎 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第6期723-727,共5页
目的检测胃癌中高迁移率族蛋白2(HMGA2)和组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在胃癌中的表达情况及相关关系,分析其与临床病理特征的关系。方法分别用免疫组织化学法、Western blot和real-time PCR检测82例配对人胃癌、癌旁及正常组织中HMGA2和HD... 目的检测胃癌中高迁移率族蛋白2(HMGA2)和组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在胃癌中的表达情况及相关关系,分析其与临床病理特征的关系。方法分别用免疫组织化学法、Western blot和real-time PCR检测82例配对人胃癌、癌旁及正常组织中HMGA2和HDAC6的蛋白及mRNA表达,并分析其与临床病理参数的关系及两者表达的相关性。结果胃癌组织中HMGA2和HDAC6蛋白阳性表达率分别为69.51%(57/82)和65.85%(54/82),明显高于癌旁组织14.63%(12/82)、12.20%(10/82)和正常组织9.76%(8/82)、7.32%(6/82)(P<0.05);胃癌组织HMGA2、HDAC6蛋白和mRNA表达较癌旁组织及正常组织高(P<0.05),且两者表达水平与肿瘤的临床分期和淋巴结转移相关(P<0.05);HMGA2和HDAC6在胃癌组织中的表达呈明显正相关(r=0.56,P<0.05)。结论 HMGA2和HDAC6基因在胃癌组织中存在高表达且共存现象,可能与胃癌恶性程度有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 HMGA2 HDAC6
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pEGFPN1-dnEGFR对胃癌细胞的放疗增敏作用 被引量:1
10
作者 秦宇 王子卫 +2 位作者 杨宁波 查郎 朱代亮 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第31期3280-3282,3285,共4页
目的探讨人表皮生长因子(EGFR)显性负性突变体真核表达载体(pEGFPN1-dnEGFR)对胃癌细胞放疗敏感性的影响。方法用pEGFPN1-dnEGFR转染人胃癌细胞株SGC-7901和NCI-N87并联合放疗,将两种胃癌细胞分别分为3组,即未处理组、pEGFP-N1空载体质... 目的探讨人表皮生长因子(EGFR)显性负性突变体真核表达载体(pEGFPN1-dnEGFR)对胃癌细胞放疗敏感性的影响。方法用pEGFPN1-dnEGFR转染人胃癌细胞株SGC-7901和NCI-N87并联合放疗,将两种胃癌细胞分别分为3组,即未处理组、pEGFP-N1空载体质粒转染组(空质粒组)、pEGFPN1-dnEGFR质粒转染组(目的质粒组),用MTT法测定对两种胃癌细胞增殖效应的影响,RT-PCR检测细胞中Bax、Cyclin D1的mRNA表达情况,Western blot检测细胞中Bax、Cyclin D1蛋白表达情况。结果两种胃癌细胞目的质粒转染组的抑制率较空质粒组和未处理组显著提高(P<0.05)。RT-PCR显示两种胃癌细胞目的质粒组Bax mRNA相对表达强度较空质粒组和未处理组升高;目的质粒组Cyclin D1mRNA相对表达强度较空质粒组和未处理组降低(P<0.05)。Western blot显示两种胃癌细胞目的质粒组Bax蛋白表达相对强度较空质粒组和未处理组明显升高;目的质粒组Cyclin D1蛋白表达相对表达强度分别较空质粒组和未处理组降低(P<0.05)。结论 pEGFPN1-dnEGFR能够提高胃癌细胞对放疗的敏感性。 展开更多
关键词 pEGFPN1-dnEGFR 放射疗法 胃肿瘤 CYCLIN D1 BAX
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E-cadherin和KLF 4表达对胃癌侵袭转移的作用 被引量:4
11
作者 张能 査郎 +1 位作者 黄镇 王子卫 《生命科学研究》 CAS CSCD 2011年第2期154-157,183,共5页
观察E-cadherin,Krüppel-like factor 4(KLF4)蛋白在胃癌和正常胃黏膜组织中的表达,分析其与胃癌浸润、转移的关系.应用免疫组织化学SP法检测84例手术切除的胃癌标本及对应正常胃黏膜组织中E-cadherin,KLF4蛋白的表达.各指标之间... 观察E-cadherin,Krüppel-like factor 4(KLF4)蛋白在胃癌和正常胃黏膜组织中的表达,分析其与胃癌浸润、转移的关系.应用免疫组织化学SP法检测84例手术切除的胃癌标本及对应正常胃黏膜组织中E-cadherin,KLF4蛋白的表达.各指标之间相关因素的差异性比较采用χ2检验,E-cadherin,KLF4相关性研究采用Spearman相关分析.结果显示,与正常胃组织相比,E-cadherin、KLF4蛋白在胃癌组织中均呈低表达或者缺失(分别42.9%vs.95.24%,8.3%vs 81%,P<0.05).E-cadherin、KLF4蛋白的阳性表达率与组织分级(P<0.05)、肿瘤浸润深度(P<0.05)、淋巴转移(P<0.05)明确相关.Spearman相关分析显示KLF4蛋白与E-cadherin蛋白的表达呈正相关(P<0.05).因此,E-cadherin,KLF4蛋白水平低表达可能与胃癌浸润和转移有关,而联合检测更能有效判断胃癌这一生物学行为. 展开更多
关键词 胃癌 上皮型钙黏蛋白(E-cadherin) KLF4(Krüppel-like factor4) 侵袭转移
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Krüppel-like factor 4慢病毒表达载体构建及其对胃癌细胞BGC-823生物学行为的影响
12
作者 张能 张军 +2 位作者 王子卫 査郎 何苗 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期5445-5448,共4页
目的构建Krüppel-like factor4(KLF4)过表达慢病毒载体,探讨其对胃癌细胞株BGC-823生物学行为的影响。方法检测BGC-823中KLF4 mRNA的表达水平;用真核表达质粒pcDNA3.1IE-KLF4-EGFP,将KLF4基因连入慢病毒载体pLv-UbC-IRES2-EGFP中,... 目的构建Krüppel-like factor4(KLF4)过表达慢病毒载体,探讨其对胃癌细胞株BGC-823生物学行为的影响。方法检测BGC-823中KLF4 mRNA的表达水平;用真核表达质粒pcDNA3.1IE-KLF4-EGFP,将KLF4基因连入慢病毒载体pLv-UbC-IRES2-EGFP中,构建pLv-KLF4-IRES2-EGFP重组慢病毒表达载体。将酶切和测序鉴定后的重组质粒转染至BGC-823中,观察转染情况,RT-PCR检测KLF4 mRNA。慢病毒包装后转染BGC-823细胞,Western印迹检测KLF4蛋白。结果重组质粒经酶切和DNA测序证实目的基因插入正确;pcDNA3.1IE-KLF4-EGFP转染BGC-823细胞后KLF4 mRNA升高。慢病毒包装后转染BGC-823检测到目的蛋白KLF4。KLF4能够将细胞阻滞于G1/S,抑制其生长、促进细胞凋亡,减少细胞侵袭能力。结论转染BGC-823后KLF4蛋白检测证实慢病毒载体成功构建,KLF4能抑制胃癌细胞的恶性转化。 展开更多
关键词 Krüppel-like FACTOR 4(KLF4) 慢病毒载体 构建及验证 胃癌细胞
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消化系统整合课程改革的实施及其存在的问题和建议 被引量:1
13
作者 查郎 黄镇 +1 位作者 王子卫 张宏宇 《中华医学教育探索杂志》 2022年第12期1686-1690,共5页
以器官系统为中心的医学整合教学模式已经成为现代医学教育的趋势。该模式将基础医学与临床医学紧密结合,以培养合格的临床医师为主要任务,目前在国内外已广泛开展。本文通过总结消化系统整合课程改革在重庆医科大学实施中的经验,分析... 以器官系统为中心的医学整合教学模式已经成为现代医学教育的趋势。该模式将基础医学与临床医学紧密结合,以培养合格的临床医师为主要任务,目前在国内外已广泛开展。本文通过总结消化系统整合课程改革在重庆医科大学实施中的经验,分析参与教育改革的学生成绩,结合重庆医科大学实际情况,发掘教学改革中出现的问题,并探讨可能的解决方案,为进一步深化整合课程改革积累经验。 展开更多
关键词 以器官系统为中心 整合课程 消化系统
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肿瘤干细胞对恶性肿瘤辅助治疗的影响 被引量:1
14
作者 查郎 王子卫 《生命科学》 CSCD 北大核心 2010年第8期801-805,共5页
放化疗是目前恶性肿瘤治疗的重要手段,但是迄今为止,除了手术以外,几乎没有能单独根治恶性肿瘤的治疗方法,甚至一些恶性肿瘤在手术、化疗或放疗后会出现再生和侵袭能力增强,被称为恶性肿瘤治疗后再增殖,这可能是恶性肿瘤治疗失败的主要... 放化疗是目前恶性肿瘤治疗的重要手段,但是迄今为止,除了手术以外,几乎没有能单独根治恶性肿瘤的治疗方法,甚至一些恶性肿瘤在手术、化疗或放疗后会出现再生和侵袭能力增强,被称为恶性肿瘤治疗后再增殖,这可能是恶性肿瘤治疗失败的主要原因,其主要机制可能是肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)对放化疗的耐受,以及放化疗导致肿瘤细胞的上皮细胞间质化,继而提高了肿瘤侵袭性。该文将从CSCs的角度重新探讨放化疗等辅助治疗对恶性肿瘤的影响。 展开更多
关键词 恶性肿瘤 辅助治疗 肿瘤干细胞
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人SOX7启动子荧光素酶报告质粒构建及HMGA2对其活性影响的研究 被引量:1
15
作者 孔德全 查郎 +3 位作者 蒲斌 李军 方勇木 王子卫 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2016年第19期1282-1286,共5页
目的研究发现,HMGA2促进肿瘤细胞发生EMT与其下游基因SOX7有关。为进一步验证转录因子HMGA2与其下游基因SOX7之间的调控关系,本研究通过构建人SOX7基因启动子荧光素酶报告质粒,采用荧光素酶报告实验观察HMGA2对SOX7基因启动子荧光素酶... 目的研究发现,HMGA2促进肿瘤细胞发生EMT与其下游基因SOX7有关。为进一步验证转录因子HMGA2与其下游基因SOX7之间的调控关系,本研究通过构建人SOX7基因启动子荧光素酶报告质粒,采用荧光素酶报告实验观察HMGA2对SOX7基因启动子荧光素酶活性的影响,为研究HMGA2转录表达的调控机制提供必要的实验基础。方法采用PCR技术扩增人SOX7基因启动子序列(-1 549^+79nt),将SOX7基因启动子插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中构建质粒pGL3-SOX7-promoter;再分别将pGL3-SOX7-promoter、pGL3-basic-SOX7-promoter和对照质粒(pLV-UbC-IRES2-EGFP)、pGL3-SOX7-promoter和HMGA2表达质粒(pLV-UbC-HMGA2-IRES2-EGFP)3组质粒共转染293T细胞,培养48h后,检测3组荧光素酶的表达情况,观察HMGA2对SOX7基因启动子的调控作用。结果通过菌落PCR和核酸测序证实,人SOX7基因启动子荧光素酶报告质粒pGL3-SOX7-promoter构建成功;将pGL3-SOX7-promoter和HMGA2表达质粒(pLV-UbC-HMGA2-IRES2-EGFP)共转染293T细胞48h后,与对照组相比,SOX7基因启动子介导荧光素酶的活性降低约31%,受到明显抑制(P=0.003),提示HMGA2可能调控SOX7基因启动子的活性。结论本研究成功构建了SOX7基因启动子荧光素酶报告质粒,初步验证了SOX7是HMGA2下游的作用靶点。 展开更多
关键词 SOX7 HMGA2 荧光素酶报告质粒 启动子活性
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pEGFPN1-dnEGFR对胃癌细胞的化疗增敏作用 被引量:1
16
作者 杨宁波 王子卫 +3 位作者 秦宇 查郎 朱代亮 黄镇 《世界科技研究与发展》 CSCD 2012年第2期329-332,共4页
目的研究人EGFR显性负性突变体真核表达载体(pEGFPN1-dnEGFR)对人胃癌细胞株SGC-7901和NCI-N87化疗敏感性的影响,并探讨其可能机制。方法 MTT法测定奥沙利铂对稳定转染pEGFPN1-dnEGFR和pEGFP-N1载体的两种胃癌细胞的量效反应。奥沙利铂... 目的研究人EGFR显性负性突变体真核表达载体(pEGFPN1-dnEGFR)对人胃癌细胞株SGC-7901和NCI-N87化疗敏感性的影响,并探讨其可能机制。方法 MTT法测定奥沙利铂对稳定转染pEGFPN1-dnEGFR和pEGFP-N1载体的两种胃癌细胞的量效反应。奥沙利铂作用各组细胞24 h后,RT-PCR检测各组细胞中Caspase-3和Cyclin D1的mRNA表达情况;Western blot检测各组细胞中Caspase-3和Cyclin D1蛋白表达情况。结果转染pEGFPN1-dnEGFR后,两种胃癌细胞对奥沙利铂的敏感性增加,奥沙利铂对pEGFPN1-dnEGFR转染组细胞的增殖抑制率(VI)与对照组相比有显著提高(P<0.05)。RT-PCR显示pEGFPN1-dnEGFR转染组细胞Cyclin D1 mRNA表达较对照组下降,而Caspase-3 mRNA表达较对照组升高(P<0.05);Western blot显示pEGFPN1-dnEGFR转染组细胞Cyclin D1蛋白表达较对照组下降,而Caspase-3蛋白表达较对照组升高(P<0.05)。结论 EGFR显性负性突变体能提高胃癌细胞对化疗药物奥沙利铂的敏感性,其机制可能与Caspase-3和Cyclin D1有关。 展开更多
关键词 胃癌 pEGFPNl-dnEGFR 奥沙利铂 CASPASE-3 CYCLIN D1 化疗敏感性
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人EGFR显性负性突变体对胃癌细胞在裸鼠体内成瘤性及淋巴结转移的影响
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作者 毛红朝 王子卫 +3 位作者 廖刚 查郎 黄镇 向吉锋 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期475-480,共6页
为了研究人表皮生长因子显性负性突变体(dominant negative mutant of EGFR,dnEGFR)对胃癌细胞体内成瘤及淋巴结转移的影响,用目的质粒pEGFPN1-dnEGFR,空质粒载体pEGFP-N1分别转染胃癌细胞NCI-N87.筛选出稳定转染株,实验共分3组:NCI-N8... 为了研究人表皮生长因子显性负性突变体(dominant negative mutant of EGFR,dnEGFR)对胃癌细胞体内成瘤及淋巴结转移的影响,用目的质粒pEGFPN1-dnEGFR,空质粒载体pEGFP-N1分别转染胃癌细胞NCI-N87.筛选出稳定转染株,实验共分3组:NCI-N87细胞未转染组(untreated NCI-N87,UN组),NCI-N87细胞pEGFP-N1转染组(EN组);NCI-N87细胞pEGFPN1-dnEGFR转染组(DN组).将3组细胞接种于裸鼠右后足垫,6周后测量移植瘤大小及对应腹股沟转移淋巴结数目,HE染色验证,real-time PCR和Western印迹检测3组细胞中AKT1、MAPK3 mRNA和蛋白的表达改变.结果发现,DN组移植瘤较UN、EN组明显缩小(P<0.05),且右腹股沟转移淋巴结数目较UN、EN组减少(P<0.05).DN组细胞中,AKT1、MAPK3 mRNA和蛋白水平较UN、EN组降低(P<0.05).提示pEGFPN1-dnEGFR可抑制裸鼠体内胃癌细胞成瘤及淋巴结转移,AKT1及MAPK3信号通路可能参与其中. 展开更多
关键词 表皮生长因子显性负性突变体(dnEGFR) AKT1 MAPK3 胃癌 淋巴结转移
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