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Rig-I基因表达下降对成熟B细胞株的影响
1
作者 柳子星 孙岳平 +1 位作者 马志敏 王铸钢 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期131-133,共3页
Rig-I是全反式维甲酸诱导NB4细胞分化过程的上调基因,可能与细胞分化有关。通过RNAi的方法,使一株B细胞株(1B4.B6.细胞株)的Rig-I下降,研究其下调后对该B细胞株的影响。结果表明Rig-I下调表达使1B4.B6.细胞株中的CD138单阳性细胞比例明... Rig-I是全反式维甲酸诱导NB4细胞分化过程的上调基因,可能与细胞分化有关。通过RNAi的方法,使一株B细胞株(1B4.B6.细胞株)的Rig-I下降,研究其下调后对该B细胞株的影响。结果表明Rig-I下调表达使1B4.B6.细胞株中的CD138单阳性细胞比例明显减少,B220单阳性和CD138+B220+双阳性细胞不同程度的升高,这可能与B细胞株分化成浆细胞有关,同时Rig-I下调使LPS刺激该细胞株产生IgG3的胚系转录本(germlinetranscript)的表达下调。提示Rig-I可能参与抗体类别转换。 展开更多
关键词 Rig—I RNAI技术 Iγ3-Cγ3
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AML1-ETO转基因小鼠的建立及初步表型分析
2
作者 柳子星 马志敏 +6 位作者 顾鸣敏 孔辉 王龙 匡颖 徐国江 费俭 王铸钢 《诊断学理论与实践》 2005年第2期133-136,共4页
目的:建立AM L1-ETO融合基因转基因小鼠,在整体动物水平研究AM L1-ETO融合蛋白在白血病发病中所起的作用。方法:构建hCG/AM L1-ETO转基因质粒,通过显微注射将该质粒转入小鼠受精卵中,植入假孕母鼠输卵管,获得G0代转基因小鼠;用聚合酶链... 目的:建立AM L1-ETO融合基因转基因小鼠,在整体动物水平研究AM L1-ETO融合蛋白在白血病发病中所起的作用。方法:构建hCG/AM L1-ETO转基因质粒,通过显微注射将该质粒转入小鼠受精卵中,植入假孕母鼠输卵管,获得G0代转基因小鼠;用聚合酶链反应(PCR)方法检测融合基因的整合情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测融合基因的表达情况和组织表达谱。结果:PCR法共检出10只G0代转基因阳性小鼠,其中8个系均产下F1代小鼠,由此建立了8个AM L1-ETO转基因小鼠系。RT-PCR法证实AM L1-ETO融合基因在22系中稳定表达,但血常规、肝脏、脾脏等组织未见异常变化;对该系小鼠的组织表达谱检测表明,融合基因在肝脏、脾脏、心脏和肌肉组织存在不同程度的表达,但在脑组织中不表达。结论:AM L1-ETO融合基因能在转基因小鼠的骨髓等组织中表达,但尚不足以引发白血病,推测其他致病基因在小鼠白血病的发生中也起一定作用。 展开更多
关键词 转基因小鼠 AML1-ETO融合基因 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 表型分析 聚合酶链反应(PCR) RT-PCR法 组织表达谱 初步 小鼠白血病 融合蛋白 基因质粒 显微注射 表达情况 稳定表达 异常变化 不同程度 肌肉组织 致病基因 受精卵
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猪软骨细胞同种异体移植的免疫排斥机制 被引量：3
3
作者 张惠珍 王树军 +5 位作者 柳子星 李美星 王颖 张勇 陈影 葛海良 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期144-147,共4页
目的探讨猪软骨细胞同种异体移植的免疫排斥机制。方法分离制备猪软骨细胞和淋巴细胞 ,采用同种异体软骨细胞—淋巴细胞混合培养反应和IFN γ诱导比较分析 ,经3 H TdR法观察淋巴细胞刺激指数 ,FACS测定软骨细胞表面猪白细胞抗原(SLA)分... 目的探讨猪软骨细胞同种异体移植的免疫排斥机制。方法分离制备猪软骨细胞和淋巴细胞 ,采用同种异体软骨细胞—淋巴细胞混合培养反应和IFN γ诱导比较分析 ,经3 H TdR法观察淋巴细胞刺激指数 ,FACS测定软骨细胞表面猪白细胞抗原(SLA)分子表达变化 ;不同时间收集混合反应中淋巴细胞 ,分别应用PCR和ELISA技术分析其表达的IFN γ、IL 4mRNA和蛋白含量。结果成功制备了猪的软骨细胞和淋巴细胞 ,软骨细胞表达SLAI类分子 ,而不表达SLAII类分子 ;同种异体软骨细胞对淋巴细胞有轻微刺激扩增作用 ,经IFN γ诱导具有明显增强作用。混合培养 ,18h后上清中可检测到IFN γ蛋白 ,而IL 4表达无变化。结论软骨细胞SLAI类分子刺激同种异体淋巴细胞产生IFN γ,进一步诱导软骨细胞SLAII类分子表达 。 展开更多
关键词 软骨细胞 淋巴细胞 IFN-Γ 同种异体移植 免疫排斥 表达 诱导 TdR法 蛋白含量 混合反应
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RIG-I基因剔除小鼠表型的初步分析 被引量：2
4
作者 孙岳平 张丽君 +6 位作者 张梅 金月娥 柳子星 张洪信 陆顺元 孔辉 王铸钢 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期836-840,共5页
目的通过对视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-I基因)剔除小鼠表型的分析,在整体动物水平揭示RIG-Ⅰ的生物学功能。方法Northern blotting和半定量RT-PCR检测小鼠组织中RIG-I基因的表达;对小鼠的表型分析包括体质量的测量、外周血细胞分类计数、代... 目的通过对视黄酸诱导基因Ⅰ(RIG-I基因)剔除小鼠表型的分析,在整体动物水平揭示RIG-Ⅰ的生物学功能。方法Northern blotting和半定量RT-PCR检测小鼠组织中RIG-I基因的表达;对小鼠的表型分析包括体质量的测量、外周血细胞分类计数、代谢指标测定及病理组织学检查。结果RIG-Ⅰ在小鼠多种组织中广泛表达,但表达水平存在一定差异。RIG-Ⅰ基因剔除后,小鼠未见明显发育异常;无明显预期的粒系分化受阻表现;但RIG-Ⅰ基因剔除小鼠外周血相中的粒/淋比明显倒置,且对条件性致病菌易感。结论RIG-Ⅰ在小鼠抗细菌免疫过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 视黄酸诱导基因Ⅰ 细菌感染 基因剔除小鼠
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大鼠IL-10真核表达载体在软骨细胞中的表达 被引量：2
5
作者 赵阳 柳子星 +3 位作者 王颖 张惠珍 王树军 葛海良 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期349-351,共3页
目的 构建大鼠IL-10真核表达载体并在大鼠软骨细胞中进行表达。方法 将目的基因片段通过酶切连入真核表达载体pcDNA3,并以Super Fect Transfection Reagent介导转入大鼠软骨细胞表达,RT-PCR检测细胞中mRNA水平,及ELISA检测细胞培养上清... 目的 构建大鼠IL-10真核表达载体并在大鼠软骨细胞中进行表达。方法 将目的基因片段通过酶切连入真核表达载体pcDNA3,并以Super Fect Transfection Reagent介导转入大鼠软骨细胞表达,RT-PCR检测细胞中mRNA水平,及ELISA检测细胞培养上清液中的IL-10蛋白含量。结果 成功构建了大鼠IL-10真核表达载体,转入软骨细胞后,检测到细胞内IL-10mRNA转录,细胞培养24、48和72 h后,经ELISA检测上清液中IL-10蛋白含量分别为36、62和100 pg/mL。结论 大鼠IL-10真核表达载体的构建并在软骨细胞中表达,为研究IL-10诱导软骨细胞同种异体移植耐受奠定了基础。 展开更多
关键词 大鼠软骨细胞 真核表达 大鼠IL-10
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建立猪MHCⅠ类抗原特异性人T细胞系的探讨 被引量：1
6
作者 唐军 张冬青 +4 位作者 沈佰华 周洪 周芸 柳子星 周光炎 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期337-339,共3页
目的　建立间接识别中国版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系的方法 ,以进一步研究SLAⅠ类分子的间接识别在猪→人异种细胞性排斥中的作用。方法　以E·coli中表达并纯化的SLAⅠ类分子P1为抗原 ,体外反复刺激健康人PBMC ,3H TdR... 目的　建立间接识别中国版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系的方法 ,以进一步研究SLAⅠ类分子的间接识别在猪→人异种细胞性排斥中的作用。方法　以E·coli中表达并纯化的SLAⅠ类分子P1为抗原 ,体外反复刺激健康人PBMC ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞 ,FACS作表型初步分析。结果　初步测定健康人外周血版纳猪SLAⅠ类P1分子特异性T细胞反应频率约 6 .67× 1 0 - 7,所建 4个T细胞系表型均为TCRαβ+ ,其中 3株以CD4+ 为主 ,1株以CD8+ 为主。结论　利用E .coli表达的纯蛋白抗原可建立间接识别版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系。 展开更多
关键词 猪白细胞抗原 基因表达 T细胞系 间接识别 器官移植 急性细胞性排斥
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水质分析中化学需氧量的快速测定
7
作者 鲍海林 柳子星 《中小企业管理与科技》 2013年第36期302-302,共1页
本课题原理与国标中采用的重铬酸盐法方法相同,但对氧化剂的浓度、反应的酸度、蒸馏的时间等条件做了相应的调整,缩短了蒸馏时间。本设计根据调整的实验条件对特定的水样进行测定,并对与国标重铬酸盐法对比。实验条件为:重铬酸钾标准液C... 本课题原理与国标中采用的重铬酸盐法方法相同,但对氧化剂的浓度、反应的酸度、蒸馏的时间等条件做了相应的调整,缩短了蒸馏时间。本设计根据调整的实验条件对特定的水样进行测定,并对与国标重铬酸盐法对比。实验条件为:重铬酸钾标准液C(1/6K2Cr2O7)=0.1000m ol/L,浓硫酸加入量=21m l,蒸馏时间=5m in。结果表明:快速测定方法本身的精密度及准确度均能达到要求,对水样CO D的测定与标准方法对比具有很高的准确度。 展开更多
关键词 化学需氧量COD 重铬酸盐法 精密度 准确度
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蒽醌法过氧化氢生产中活性氧化铝的应用
8
作者 鲍海林 柳子星 《中小企业管理与科技》 2013年第34期162-162,共1页
本文主要阐述了蒽醌法过氧化氢生产中,氧化铝对降解物的再生作用,给出了评价氧化铝的方法。
关键词 蒽醌法 过氧化氢 降解物 氧化铝
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MHC II类抗原的诱导性表达和同种异体软骨细胞移植的免疫排斥 被引量：14
9
作者 柳子星 张惠珍 +4 位作者 王建 张勇 赵阳 周光炎 葛海良 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期178-181,共4页
本研究将不同年龄香猪的软骨细胞和可注射性材料复合物Pluronic混合在一起 ,以 5 0× 10 6/ml浓度接种到版纳猪的腹部皮下 ,在第 1、 2、 4周取材作组织学检查 ,并进行软骨细胞表面标志的分析和测定淋巴细胞软骨细胞混合反应(MLChR ... 本研究将不同年龄香猪的软骨细胞和可注射性材料复合物Pluronic混合在一起 ,以 5 0× 10 6/ml浓度接种到版纳猪的腹部皮下 ,在第 1、 2、 4周取材作组织学检查 ,并进行软骨细胞表面标志的分析和测定淋巴细胞软骨细胞混合反应(MLChR )的强度。结果显示 :猪的软骨细胞仅表达MHCI类分子 ,分别来自胎猪、幼猪和成年猪的软骨细胞刺激MLChR的能力无显著差别 ,均表现抗原性较弱。经IFN γ诱导后 ,软骨细胞表达MHCII类抗原 ,能明显地刺激淋巴细胞增殖。免疫病理学检测发现 ,在组织化的软骨中 ,第 1周出现大量淋巴细胞浸润 ,第 4周组织化软骨消失。上述结果提示 ,体内同种异体软骨细胞被迅速排异 。 展开更多
关键词 软骨细胞 同种异体移植 MHCⅡ类抗原
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人外周血T细胞系间接识别SLAⅠ类分子引起的异种细胞增殖反应
10
作者 唐军 周芸 +3 位作者 柳子星 张勇 王胜旺 周光炎 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期536-539,共4页
目的　确认猪→人异种移植中存在针对猪白细胞抗原 (swineleukocyteantigen ,SLA)Ⅰ类分子的间接识别而引起的急性细胞性排斥。方法　用纯化的中国版纳猪SLAⅠ类P1基因工程蛋白为抗原 ,体外反复刺激健康人外周血T细胞 ,建立P1特异性T细... 目的　确认猪→人异种移植中存在针对猪白细胞抗原 (swineleukocyteantigen ,SLA)Ⅰ类分子的间接识别而引起的急性细胞性排斥。方法　用纯化的中国版纳猪SLAⅠ类P1基因工程蛋白为抗原 ,体外反复刺激健康人外周血T细胞 ,建立P1特异性T细胞系。观察抗原特异性CD4 + T细胞系在自身APC存在下对版纳猪外周血单个核细胞与软骨细胞的反应性 ,以及HLA DR单抗与氯喹的阻断作用。结果　建立 10株SLAⅠ类P1抗原特异性T细胞系 ,其中 8株以TCRαβ+ CD4 + 为主要表型 ,将其合并使用。该CD4 + P1特异性T细胞系在自身APC存在下对相同品系版纳猪PBMC与软骨细胞均产生显著增殖反应。经抗人HLA DR单抗与氯喹处理均能明显阻断其增殖反应。结论　健康人外周血T细胞可通过间接识别SLAⅠ类抗原对版纳猪细胞产生明显应答。 展开更多
关键词 异种移植 猪白细胞抗原 T淋巴细胞 异种排斥反应 间接识别
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