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三烯高诺酮和米非司酮对大鼠实验性子宫内膜异位症的治疗作用 被引量：21
1
作者 桂耀庭 黄素珍 吴熙瑞 《生殖医学杂志》 CAS 1995年第4期224-227,共4页
以手术方法复制大鼠子宫内膜异位症模型，研究三烯高诺酮和米非司酮对实验性子宫内膜异位症的治疗作用。动物随机分为８组：对照组；卵巢摘除组；丹那唑组，２０ｍｇ／ｋｇ；三烯高诺酮组，０．１２５、０．２５、０．５ｍｇ／ｋｇ；米... 以手术方法复制大鼠子宫内膜异位症模型，研究三烯高诺酮和米非司酮对实验性子宫内膜异位症的治疗作用。动物随机分为８组：对照组；卵巢摘除组；丹那唑组，２０ｍｇ／ｋｇ；三烯高诺酮组，０．１２５、０．２５、０．５ｍｇ／ｋｇ；米非司酮组，１０、５０ｍｇ／ｋｇ。每天灌胃给药，３周后再次剖腹，取异位子宫内膜称重，并作组织切片，以半自动图象分析仪作子宫内膜形态定量分析，取血清测定雌二醇（Ｅ２）、孕酮（Ｐ）浓度。结果表明，三烯高诺酮和米非司酮均能抑制异位子宫内膜的生长，且表现为剂量依赖性。三烯高诺酮能使鼠血清Ｅ２、Ｐ水平降低，米非司酮对鼠血清Ｅ２水平无明显影响，但使Ｐ水平升高。 展开更多
关键词 三烯高诺酮 米非司酮 子宫内膜异位 药物疗法
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雌、孕激素对小鼠子宫血管内皮生长因子及其受体表达的调节作用 被引量：3
2
作者 桂耀庭 喻晶 蔡志明 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期501-503,共3页
目的:探讨雌激素和孕激素对小鼠子宫血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达的影响。方法:将出生后3周的未成熟雌性小鼠随机分为7组,每只分别给予玉米油、雌二醇(estradiol,E2)1.5,3.0,10,25ng,孕酮(progesterone,P)100μg或E210ng+P100μg... 目的:探讨雌激素和孕激素对小鼠子宫血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达的影响。方法:将出生后3周的未成熟雌性小鼠随机分为7组,每只分别给予玉米油、雌二醇(estradiol,E2)1.5,3.0,10,25ng,孕酮(progesterone,P)100μg或E210ng+P100μg,皮下注射,每天1次,共2天,于第二次给药后24h,取小鼠子宫提取总RNA,采用反转录多聚酶链式反应(RTPCR)的方法检测血管内皮生长因子及其受体mRNA的表达水平。结果:与对照组比较,E2和P显著增加血管内皮生长因子VEGF164和VEGF120两个亚型的表达,E2显著降低血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的表达,对血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)在小鼠子宫的表达无明显影响。结论:雌激素和孕激素均增加血管内皮生长因子在小鼠子宫的表达,而雌激素则显著降低血管内皮生长因子受体2在小鼠子宫的表达。 展开更多
关键词 雌激素类 孕激素类 血管内皮生长因子 受体 血管内皮生长因子
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双调蛋白在人体子宫内膜组织中的表达特征 被引量：1
3
作者 桂耀庭 张键荣 +1 位作者 梁婉青 蔡志明 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期241-244,共4页
目的:研究双调蛋白在人体子宫内膜组织中的表达特征。方法:取增殖期和分泌期的人体子宫内膜,采用实时定量RT-PCR方法,检测双调蛋白mRNA在子宫内膜增殖期和分泌期的表达差异;采用原位杂交和免疫组织化学的方法,从基因和蛋白水平检测双调... 目的:研究双调蛋白在人体子宫内膜组织中的表达特征。方法:取增殖期和分泌期的人体子宫内膜,采用实时定量RT-PCR方法,检测双调蛋白mRNA在子宫内膜增殖期和分泌期的表达差异;采用原位杂交和免疫组织化学的方法,从基因和蛋白水平检测双调蛋白在人体子宫内膜组织中的表达特征。结果:定量RT-PCR结果显示,双调蛋白mRNA在增殖期和分泌期的子宫内膜均有表达,在分泌期其表达量显著升高,是增殖期的32倍。原位杂交和免疫组织化学结果显示,双调蛋白主要分布于子宫内膜腺体,定位于细胞浆内;双调蛋白mRNA在增殖期和分泌期子宫内膜的表达分别为0.54±0.22和2.96±0.47(P<0.01);双调蛋白在增殖期和分泌期子宫内膜的表达分别为0.77±0.47和2.60±0.43(P<0.01)。双调蛋白在分泌期子宫内膜中的表达显著升高,与荧光定量RT-PCR分析的结果相符。结论:双调蛋白在子宫内膜分泌期的表达显著增加,提示该蛋白可能与子宫内膜细胞分化或胚胎着床有关。 展开更多
关键词 双调蛋白 子宫内膜 逆转录聚合酶链反应 原位杂交 免疫组织化学
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双调蛋白在人体睾丸组织的表达特征 被引量：1
4
作者 桂耀庭 张键荣 +3 位作者 余振东 唐爱发 李贤新 蔡志明 《生殖医学杂志》 CAS 2008年第2期94-97,共4页
目的确定双调蛋白在人体睾丸组织和精子的表达特征,比较双调蛋白在正常人和隐睾症患者睾丸组织的表达差异。方法收集正常睾丸组织、精液精子和隐睾症患者的睾丸组织,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学的方法检测双调蛋白... 目的确定双调蛋白在人体睾丸组织和精子的表达特征,比较双调蛋白在正常人和隐睾症患者睾丸组织的表达差异。方法收集正常睾丸组织、精液精子和隐睾症患者的睾丸组织,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学的方法检测双调蛋白的表达水平。结果双调蛋白在正常睾丸组织和精子均有表达,主要分布于睾丸长型精子细胞和成熟精子尾部;与正常睾丸组织比较,双调蛋白在隐睾组织的表达显著减少、隐睾组织生精小管的表达基本消失。结论在隐睾症睾丸中双调蛋白的表达显著减少,提示双调蛋白表达与睾丸发育有一定关系。 展开更多
关键词 双调蛋白 睾丸 隐睾症 反转录-聚合酶链反应 免疫细胞化学
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三烯高诺酮和米非司酮对离体大鼠及人体子宫内膜生长的抑制作用 被引量：6
5
作者 桂耀庭 杨仕林 吴熙瑞 《生殖医学杂志》 CAS 1994年第4期204-207,共4页
大鼠子宫内膜离体培养４天后分组给药：对照组；丹那唑１０－６，３×１０－６，１０－５ｍｏｌ／Ｌ；三烯高诺酮３×１０－８，１Ｏ－７，３×１Ｏ－７ｍｏｌ／Ｌ；米非司酮１０－６，１０－５，１０－４ｍｏｌ／Ｌ。于给... 大鼠子宫内膜离体培养４天后分组给药：对照组；丹那唑１０－６，３×１０－６，１０－５ｍｏｌ／Ｌ；三烯高诺酮３×１０－８，１Ｏ－７，３×１Ｏ－７ｍｏｌ／Ｌ；米非司酮１０－６，１０－５，１０－４ｍｏｌ／Ｌ。于给药５天后取培养子宫内膜切片，镜下观察其形态变化，全自动图象分析仪细胞计数。结果表明，丹那唑抑制大鼠子宫内膜的生长，而三烯高诺酮和米非司酮未见明显抑制效应。人体子宫内膜离体培养４天后分组给药，１Ｏ－９ｍｏｌ／Ｌ雌二醇、１０－７ｍｏｌ／Ｌ孕酮均能促进子宫内膜的生长。在给雌二醇或孕酮的同时加３×１０－６ｍｏｌ／Ｌ丹那唑或１０－７ｍｏｌ／Ｌ三烯高诺酮或１Ｏ－５ｍｏｌ／Ｌ米非司酮。结果表明，丹那唑、三烯高诺酮和米非司酮均能抑制子宫内膜的生长，而在雌二醇或孕酮缺乏的条件下，三烯高诺酮和米非司酮对子宫内膜的生长没有明显抑制作用。此结果表明三烯高诺酮和米非司酮对子宫内膜生长的抑制作用有赖于雌二醇或孕酮的存在。 展开更多
关键词 三烯高诺酮 米非司酮 子宫内膜 子宫内膜异位
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表皮生长因子受体在人子宫内膜、蜕膜和绒毛的免疫组化定位 被引量：1
6
作者 桂耀庭 王介东 +5 位作者 王弘毅 罗宏志 程捷 许如华 于波 李伯南 《生殖医学杂志》 CAS 1996年第2期106-107,共2页
表皮生长因子受体在人子宫内膜、蜕膜和绒毛的免疫组化定位桂耀庭王介东王弘毅罗宏志程捷许如华于波李伯南表皮生长因子（ＥＧＦ）对子宫内膜细胞的生长和分化有着十分重要的作用，有关表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的报道结果不一［１... 表皮生长因子受体在人子宫内膜、蜕膜和绒毛的免疫组化定位桂耀庭王介东王弘毅罗宏志程捷许如华于波李伯南表皮生长因子（ＥＧＦ）对子宫内膜细胞的生长和分化有着十分重要的作用，有关表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的报道结果不一［１］。本试验以ＡＢＣ免疫组织化学方法... 展开更多
关键词 表皮生长因子 子宫内膜 蜕膜 绒毛 定位
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三烯高诺酮的生殖生物学活性 被引量：1
7
作者 桂耀庭 吴熙瑞 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1996年第2期148-150,共3页
以小鼠子宫重量法、兔子宫内膜转化实验及大鼠附性器官法研究三烯高诺酮的生殖生物学活性。结果表明：本品具有一定的孕激素活性和较弱的雌激素、雄激素活性；在雌二醇或孕酮存在条件下，表现出一定抗雌激素或抗孕激素作用。
关键词 甾体激素 生殖生物学 三烯高诺酮
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肿瘤基因组学与精准医学 被引量：2
8
作者 桂耀庭 《医药导报》 CAS 2016年第9期911-914,共4页
随着人类基因组计划的完成、肿瘤基因组计划的实施和一系列靶向药物的出现,肿瘤的诊断与治疗已开始迈入精准医学的时代。该文简要回顾了从人类基因组计划到精准医学计划的历史、肿瘤基因组学和靶向治疗的主要成就,并提出了未来肿瘤研究... 随着人类基因组计划的完成、肿瘤基因组计划的实施和一系列靶向药物的出现,肿瘤的诊断与治疗已开始迈入精准医学的时代。该文简要回顾了从人类基因组计划到精准医学计划的历史、肿瘤基因组学和靶向治疗的主要成就,并提出了未来肿瘤研究的方向。 展开更多
关键词 肿瘤基因组学 精准医学 人类基因组计划 肿瘤基因组计划
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孕三烯酮与兔子宫雌激素与孕激素受体的亲和力测定
9
作者 桂耀庭 吴昌杰 吴熙瑞 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期77-78,共2页
孕三烯酮与兔子宫雌激素与孕激素受体的亲和力测定桂耀庭吴昌杰１吴熙瑞１（深圳市红十字会医院中西医结合研究所，深圳５１８０２９；１同济医科大学生殖医学中心，武汉４３００３０）孕三烯酮（ｇｅｓｔｒｉｎｏｎｅ，Ｒ２３２３）是... 孕三烯酮与兔子宫雌激素与孕激素受体的亲和力测定桂耀庭吴昌杰１吴熙瑞１（深圳市红十字会医院中西医结合研究所，深圳５１８０２９；１同济医科大学生殖医学中心，武汉４３００３０）孕三烯酮（ｇｅｓｔｒｉｎｏｎｅ，Ｒ２３２３）是一种１９—去甲基睾丸酮衍生物．８０... 展开更多
关键词 孕三烯酮 雌激素 孕激素 子宫 亲和力
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健康男性和弱精子症患者精液精子中GP130的表达
10
作者 桂耀庭 郭链钿 +3 位作者 张立兵 王贺 于洁 蔡志明 《生殖医学杂志》 CAS 2005年第6期333-336,共4页
目的观察在正常和活动力低下的人精液精子中白细胞介素-6(IL-6)及其受体(IL-6R)和GP130的表达差异。方法收集活动力正常的人精液精子和A、B级精子低于20％的弱精子症患者的精液精子,采用逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR)和免疫细胞化学的... 目的观察在正常和活动力低下的人精液精子中白细胞介素-6(IL-6)及其受体(IL-6R)和GP130的表达差异。方法收集活动力正常的人精液精子和A、B级精子低于20％的弱精子症患者的精液精子,采用逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR)和免疫细胞化学的方法检测IL-6及其受体和GP130的表达水平。结果与活动力正常的精液精子比较, GP130在活动力低下患者精液精子的表达显著降低(P<0．01),本实验未检测到IL-6和IL-6R在人精液精子的表达。结论精液精子GP130的表达减少与人精子活动力低下相关,提示GP130表达减少可能是精子活动力低下的原因之一。 展开更多
关键词 弱精子症 白细胞介素-6 GP130 逆转录一聚合酶链反应 免疫细胞化学
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体外培养方法诱导大鼠精母细胞减数分裂
11
作者 桂耀庭 聂栋 +1 位作者 石敏 蔡志明 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期759-763,共5页
目的:探讨大鼠睾丸精母细胞在体外减数分裂、分化为精子细胞或精子的可能性。方法:取出生后20-22dWistar大鼠睾丸组织,经胶原酶消化分离细胞,分别用含2%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12培养基(对照组)和含2%FBS的DMEM/F12培养基+多种性激素+多... 目的:探讨大鼠睾丸精母细胞在体外减数分裂、分化为精子细胞或精子的可能性。方法:取出生后20-22dWistar大鼠睾丸组织,经胶原酶消化分离细胞,分别用含2%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12培养基(对照组)和含2%FBS的DMEM/F12培养基+多种性激素+多种细胞生长因子等(实验组)作体外培养,于培养后d3、d7、d14收集细胞,采用流式细胞技术,检测培养前后生精细胞染色体倍体的变化;RT-PCR法检测精子细胞特异性基因过渡蛋白1(TP1)mRNA的表达。结果:培养d2,可见支持细胞贴壁生长,生精细胞粘附于支持细胞表面,实验组生精细胞存活率>90%,对照组<5%;培养14d,实验组可见长有鞭毛的长形精子细胞。流式细胞检测结果显示,培养前生精细胞为二倍体和四倍体细胞群,培养d14实验组单倍体细胞占总细胞数的6.2%,对照组未见单倍体峰。RT-PCR结果显示与流式细胞技术检测结果一致:培养前生精细胞未检测到TP1mRNA的表达,培养7d后实验组可检测到该基因的表达,培养14d,其表达量显著增加。结论:采用生精细胞与支持细胞混合培养并在培养液中添加性激素、细胞生长因子等的方法,大鼠精母细胞可以在体外进行减数分裂,分化成长形精子细胞。 展开更多
关键词 精子发生 减数分裂 体外培养
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子宫内膜异位症的药物治疗进展 被引量：1
12
作者 桂耀庭 《现代诊断与治疗》 CAS 1995年第1期51-53,共3页
子宫内膜异位症的药物治疗进展桂耀庭综述吴熙瑞审校（广东省深圳市红十字会医院中西医结合临床研究所，深圳５１８０２９）大量研究资料表明，性激素与子宫内膜异位症的发生、发展密切相关，当体内雌激素水平下降、雄激素水平升高时，... 子宫内膜异位症的药物治疗进展桂耀庭综述吴熙瑞审校（广东省深圳市红十字会医院中西医结合临床研究所，深圳５１８０２９）大量研究资料表明，性激素与子宫内膜异位症的发生、发展密切相关，当体内雌激素水平下降、雄激素水平升高时，异位子宫内膜萎缩。基于上述现象，早... 展开更多
关键词 子宫内膜异位 药物疗法 丹那唑 三烯高诺酮
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核糖核酸酶保护分析试剂盒的研制与质量检测
13
作者 桂耀庭 刘春霖 +1 位作者 喻晶 蔡志明 《生物技术通讯》 CAS 2007年第1期88-90,共3页
目的:开发核糖核酸酶保护分析(RPA)试剂盒,用于组织和细胞mRNA定量分析。方法:参考国外RPA实验方法和试剂盒配方配制RPA试剂盒;以国外同类产品为标准,采用同位素标记探针检测该试剂盒的质量。结果:采用自行研制的核糖核酸酶保护实验试剂... 目的:开发核糖核酸酶保护分析(RPA)试剂盒,用于组织和细胞mRNA定量分析。方法:参考国外RPA实验方法和试剂盒配方配制RPA试剂盒;以国外同类产品为标准,采用同位素标记探针检测该试剂盒的质量。结果:采用自行研制的核糖核酸酶保护实验试剂盒,检测β-肌动蛋白和亲环蛋白mRNA在小鼠肝脏的表达,其灵敏度与美国Ambion公司的RPAⅢ试剂盒相似。结论:研制的RPA试剂盒可用于组织和细胞mRNA的定量分析,其质量能够达到国外同类产品的标准。 展开更多
关键词 核糖核酸酶保护分析 试剂盒 质量检测
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睾丸组织异体异位移植生成成熟精子的动物模型建立 被引量：9
14
作者 于洁 叶静 +5 位作者 张芳婷 万汇涓 尹美珺 房家智 桂耀庭 蔡志明 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期591-594,共4页
目的：采用免疫缺陷小鼠作为孵化器，建立小鼠睾丸组织异体异位移植生成精子的实验模型。方法：以新生小鼠睾丸组织为供体，免疫缺陷小鼠为受体进行组织移植；采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase pol-ymerase chain reactio... 目的：采用免疫缺陷小鼠作为孵化器，建立小鼠睾丸组织异体异位移植生成精子的实验模型。方法：以新生小鼠睾丸组织为供体，免疫缺陷小鼠为受体进行组织移植；采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase pol-ymerase chain reaction，RT-PCR)对移植物中睾丸特异蛋白激酶(testis-specific protein kinase 1，TESK1)mRNA 表达进行检测，并应用组织形态学分析法对生精细胞的发育作进一步的验证。结果：分子生物学及组织学观察显示，移植物组织不仅可像正常小鼠睾丸组织一样表达 TESK1 mRNA，并且富含与正常成年小鼠睾丸组织中类似的精曲小管结构以及各级生精细胞和精子。结论：移植后的生精细胞可在异体异位继续发育生长，完成整个生精过程，最终发育精曲小管及成熟精子。 展开更多
关键词 睾丸组织 精子 生精细胞 异体 异位移植 移植物 动物模型建立 激酶 发育 反转录
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腺苷酸环化酶和磷酸二酯酶在人成熟精子的表达及临床意义 被引量：9
15
作者 蔡志明 桂耀庭 +4 位作者 郭链钿 张立兵 张建荣 王贺 于洁 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期195-198,共4页
目的:比较腺苷酸环化酶(AC)和磷酸二酯酶(PDE)在活动力正常和活动力低下的人精子表达的差异。方法:收集活动力正常的人精子和a、b级精子低于20%的弱精子症患者的精子,提取总RNA,采用反转录多聚酶链式反应(RTPCR)的方法检测AC和PDE亚型m... 目的:比较腺苷酸环化酶(AC)和磷酸二酯酶(PDE)在活动力正常和活动力低下的人精子表达的差异。方法:收集活动力正常的人精子和a、b级精子低于20%的弱精子症患者的精子,提取总RNA,采用反转录多聚酶链式反应(RTPCR)的方法检测AC和PDE亚型mRNA的表达水平;采用酶联免疫吸附法测定两组样本环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)的含量。结果:与活动力正常的精子比较,可溶性腺苷酸环化酶(sAC)表达和cAMP含量在活动力低下的患者精子显著降低(P均<0.01),而磷酸二酯酶4C(PDE4C)的表达显著增加(P<0.01);腺苷酸环化酶3(ACIII)的表达和cGMP的含量在活动力正常和活动力低下的精子差异无显著性(P>0.05)。结论:精子sAC的表达减少和PDE4C的表达增加是精子活动力低下的原因之一。 展开更多
关键词 弱精子症 腺苷酸环化酶 磷酸二酯酶 环磷酸腺苷 环磷酸鸟苷
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组蛋白H3K27去甲基化酶与肿瘤发生 被引量：10
16
作者 郭晓强 陆菁潇 +2 位作者 桂耀庭 段相林 蔡志明 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期706-711,共6页
组蛋白甲基化是一种重要的表观遗传学修饰,在基因表达调节方面发挥着重要的作用.组蛋白H3赖氨酸27三甲基化(H3K27me3)是一种抑制性组蛋白标记,可被去甲基化酶UTX和JMJD3催化而移去甲基.UTX和JMJD3通过激活HOX基因而参与细胞分化和多能... 组蛋白甲基化是一种重要的表观遗传学修饰,在基因表达调节方面发挥着重要的作用.组蛋白H3赖氨酸27三甲基化(H3K27me3)是一种抑制性组蛋白标记,可被去甲基化酶UTX和JMJD3催化而移去甲基.UTX和JMJD3通过激活HOX基因而参与细胞分化和多能细胞抑制过程.在多种肿瘤中检测到UTX和JMJD3突变或表达下降,同时多种基因启动子区H3K27me3含量增多.UTX和JMJD3均被看作肿瘤抑制基因,其中UTX调节了RB依赖的细胞命运控制,而JMJD3通过激活INK4b-ARF-INK4a位点而参与了癌基因诱导的衰老.组蛋白H3K27去甲基化酶与肿瘤发生的研究使我们对癌症发展过程有了更好的理解,同时也为癌症诊断和治疗提供了新靶点. 展开更多
关键词 组蛋白 H3K27去甲基化酶 肿瘤发生 表观遗传学
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外周致密纤维1在人精子中的表达差异及其意义 被引量：9
17
作者 陈静 王勇 +3 位作者 许祥 余州 桂耀庭 蔡志明 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期891-894,共4页
目的:比较外周致密纤维1(ODF1)在健康男性和弱精子症患者精子中的表达差异。方法:根据WHO标准,收集正常男性和弱精子症患者的精液标本各20份,Percoll非连续梯度离心法分离精子,收集95%Percoll以下和57%与76%Percoll层之间的精子,以排除... 目的:比较外周致密纤维1(ODF1)在健康男性和弱精子症患者精子中的表达差异。方法:根据WHO标准,收集正常男性和弱精子症患者的精液标本各20份,Percoll非连续梯度离心法分离精子,收集95%Percoll以下和57%与76%Percoll层之间的精子,以排除生精细胞和白细胞的污染;采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western印迹方法,从mRNA和蛋白水平检测ODF1的表达。结果:RT-PCR结果表明,与正常男性组相比,ODF1在弱精子症患者精子中的mRNA表达水平显著降低(2.79±0.28vs1.35±0.25,P<0.05);免疫印迹与RT-PCR结果一致,与正常男性组相比,弱精子症患者精子中的ODF1蛋白的表达亦显著降低(3.64±0.34vs1.44±0.26,P<0.05)。结论:ODF1在弱精子症患者精子中的表达显著降低,提示其可能与精子活动力低下有关。 展开更多
关键词 精子活动率 外周致密纤维1 弱精子症 基因表达
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新基因TSBAG的生物信息学分析及其在小鼠睾丸组织中的表达 被引量：9
18
作者 余振东 唐爱发 +4 位作者 桂耀庭 张立兵 张键荣 郭新 蔡志明 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期12-15,共4页
目的：筛选与精子发生相关的睾丸特异性新基因,并探讨其在精子发生过程中所起的作用。方法：将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,通过杂交信号的比较,筛选出差异表达的基因。用生物信息学软件对该... 目的：筛选与精子发生相关的睾丸特异性新基因,并探讨其在精子发生过程中所起的作用。方法：将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,通过杂交信号的比较,筛选出差异表达的基因。用生物信息学软件对该基因进行生物信息学分析。RT-PCR分析该基因在小鼠不同发育阶段睾丸、小鼠不同组织中的表达。结果：通过4日龄、9日龄、18日龄、35日龄、54日龄和6月龄小鼠睾丸的芯片信号比较筛选出一个差异表达功能未知的新基因(GenBank登录号：BC049770),全长891 bp,含有702 bp的完整ORF,编码一个233个氨基酸、相对分子量为26．938 kD的蛋白质,我们将其命名为TSBAG(testis-specific BAG-like protein)。亚细胞定位预测显示,TSBAG基因可能在细胞核中表达。EBI功能域预测发现,在蛋白质序列8-62处有一个BAG功能域。RT-PCR分析表明,TSBAG基因特异性表达于小鼠睾丸组织中且具有时序性表达。TSBAG蛋白在人的同源基因GenBank登录号为AY349359,在233个氨基酸区域内有83%的同源性。结论：TSBAG基因在小鼠睾丸组织中特异性表达,且与小鼠精子发生过程一致。 展开更多
关键词 基因芯片 克隆 TSBAG基因 精子发生 RT-PCR
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人睾丸圆形精子细胞在体外向长形精子细胞分化 被引量：7
19
作者 蔡志明 石敏 +4 位作者 龙云 宋博 崔永言 朱辉 桂耀庭 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第7期587-589,593,共4页
目的:探讨人睾丸生精细胞在体外培养条件下发生的分化。方法:取梗阻性无精子症患者睾丸活检标本,机械法离散睾丸细胞。①睾丸细胞混合培养,每24 h观察,计数分析长形精子细胞比率的变化;②显微操作挑取圆形精子细胞,观察单个细胞在微滴... 目的:探讨人睾丸生精细胞在体外培养条件下发生的分化。方法:取梗阻性无精子症患者睾丸活检标本,机械法离散睾丸细胞。①睾丸细胞混合培养,每24 h观察,计数分析长形精子细胞比率的变化;②显微操作挑取圆形精子细胞,观察单个细胞在微滴培养过程中变形分化的情况。结果:在添加卵泡刺激素、睾酮的HTF培养液中进行睾丸细胞混合培养,24 h后长形精子细胞比率较培养前显著增加(P<0.05);单个圆形精子细胞培养,可见到圆形精子细胞长出鞭毛转化为长形精子细胞,48 h的转化率为3.54%。Vero细胞条件培养液中人睾丸生精细胞的分化与HTF培养液中相同,两者无显著差异。结论:人睾丸组织的圆形精子细胞在体外可分化为长形精子细胞,Vero细胞条件培养液对此分化无促进作用。 展开更多
关键词 生精细胞 体外培养 分化 睾丸 人类
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GSB中药血清对rMSCs定向诱导分化为成骨细胞的影响 被引量：8
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作者 阎德文 李海燕 +4 位作者 吴清平 付林 罗国春 桂耀庭 肖建德 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2007年第7期480-485,共6页
目的观察GSB中药血清对大鼠MSCs定向诱导分化成骨的影响。方法将培养的rMSCs分为对照组（C组）[含10%胎牛血清,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的完全培养液]、诱导组（O组）[完全培养液,加诱导培养液（0.1μmol/L地塞米松、10mmol/Lβ... 目的观察GSB中药血清对大鼠MSCs定向诱导分化成骨的影响。方法将培养的rMSCs分为对照组（C组）[含10%胎牛血清,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的完全培养液]、诱导组（O组）[完全培养液,加诱导培养液（0.1μmol/L地塞米松、10mmol/Lβ-甘油磷酸钠及50μg/ml维生素C）,加20%空白血清]和含药血清诱导组（G组）[完全培养液加诱导培养液诱导培养液中加入20%含药血清）。显微镜下观察细胞形态变化,生化法测定上清中Ca^2＋浓度,Gomori改良钙钴法进行ALP染色,Von Kossa法进行矿化结节染色,RT-PCR法测定Ⅰ型胶原（COLL1）和脂蛋白脂酶（LPL）的表达,放免法测定上清中骨钙素含量。结果O组和G组在加入诱导培养液3-4天后梭形细胞比例减少,细胞变形成多角形、乃至方形,部分区域细胞成多层生长;改良Gomori钙钻法碱性磷酸酶染色阳性细胞,Von Kassa染色发现钙盐沉积;培养9d后细胞Ca^2＋浓度开始升高,并随时间持续显著增长,且G组明显高于O组。自第15d后,O组和G组细胞ALP活性随时间延长而明显增高,且G组显著高于O组;培养的第14d,G组骨钙素分泌量明显高于O组。成骨诱导剂作用MSCs12d后,COLLⅠ mRNA表达阳性,LPL mRNA表达阴性,且G组比O组COLLⅠ mRNA表达更强。结论补肾填精中药GSB促进骨钙素分泌、增强ALP活性、促钙盐沉积,具有增强成骨诱导剂诱导rMSCs向成骨细胞分化,并促进成骨细胞成熟作用。 展开更多
关键词 含药血清 间充质干细胞 成骨细胞 分化
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