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纳米化对维生素E抗氧化作用的影响 被引量：4
1
作者 梁智辉 徐勇 +1 位作者 朱颉安 吴雄文 《广东微量元素科学》 CAS 2007年第10期27-30,共4页
为探讨纳米化对vitamin E抗氧化作用的影响,检测了纳米化vitamin E对抑制超氧阴离子自由基产生的能力、总抗氧化能力以及对4℃贮存红细胞SOD活性的影响。结果表明,与乳化vitamin E相比,纳米化vitamin E能显著提高vitamin E总抗氧化能力... 为探讨纳米化对vitamin E抗氧化作用的影响,检测了纳米化vitamin E对抑制超氧阴离子自由基产生的能力、总抗氧化能力以及对4℃贮存红细胞SOD活性的影响。结果表明,与乳化vitamin E相比,纳米化vitamin E能显著提高vitamin E总抗氧化能力和保护4℃贮存红细胞SOD活性的能力(P<0.001);在抑制超氧阴离子自由基的产生方面,乳化vitamin E在低质量浓度(<640μg/L)时,能抑制超氧阴离子自由基的产生,而在高质量浓度(>1 280μg/L)时,则助超氧阴离子自由基的产生;而纳米vitamin E表现为其抗超氧阴离子自由基的能力随其剂量的增加而增强,提示纳米vitamin E在生物学效应方面已发生了某种变化,对纳米化vitamin E的生物学效应还需进一步研究。 展开更多
关键词 VITAMIN E 纳米化 抗氧化
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2019年麻城市小学生营养不良、超重与肥胖状况分析 被引量：6
2
作者 梁智辉 成学胜 《中外医学研究》 2020年第31期167-169,共3页
目的:了解麻城市小学生营养不良、超重与肥胖状况,探讨其影响因素,为学校营养卫生干预工作提供参考依据。方法:收集2019年麻城市4195名小学生健康体检资料,分析营养不良、超重与肥胖状况。结果:4195名小学生,检出营养不良853名,检出率为... 目的:了解麻城市小学生营养不良、超重与肥胖状况,探讨其影响因素,为学校营养卫生干预工作提供参考依据。方法:收集2019年麻城市4195名小学生健康体检资料,分析营养不良、超重与肥胖状况。结果:4195名小学生,检出营养不良853名,检出率为20.33%;男女生10岁~组营养不良检出率比较差异有统计学意义(P=0.010),其余组比较差异均无统计学意义(P>0.05);不同年龄段小学生营养不良检出率比较差异有统计学意义(χ^2=140.03,P=0.000)。4195名小学生,检出超重386名,超重检出率为9.20%;男生超重检出率明显高于女生,差异有统计学意义(χ^2=17.70,P=0.000),不同年龄段小学生超重检出率比较差异有统计学意义(χ^2=15.06,P=0.010)。4195名小学生,检出肥胖242名,肥胖检出率为5.77%;男生肥胖检出率明显高于女生,差异有统计学意义(χ^2=18.14,P=0.000);不同年龄段小学生肥胖检出率比较差异有统计学意义(χ^2=16.80,P=0.005)。私立学校营养不良检出率明显高于公立学校,差异有统计学意义(χ^2=69.72,P=0.000);私立学校超重检出率明显低于公立学校,差异有统计学意义(χ^2=7.15,P=0.007);私立学校肥胖检出率与公立学校比较差异无统计学意义(χ^2=2.65,P=0.104)。结论:麻城市(尤其是私立学校)小学生营养不良防治形势依然严峻,有关部门和学校应制定合理的防治措施,加强营养不良防治工作,也不可忽视肥胖防治工作。 展开更多
关键词 小学生 营养不良 超重 肥胖 留守儿童
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细胞膜染料PKH26在淋巴细胞及其亚群增殖中的应用
3
作者 梁智辉 卢小玲 吴雄文 《华中医学杂志》 2006年第5期378-379,403,共3页
目的探讨细胞膜染料PKH26在淋巴细胞及其亚群增殖中的应用。方法利用PKH26染色、荧光抗体标记和流式细胞术,检测淋巴细胞及其亚群在多克隆刺激剂刺激作用下荧光强度的变化,应用相关软件分析其增殖情况,并与传统MTT方法进行比较。结果经... 目的探讨细胞膜染料PKH26在淋巴细胞及其亚群增殖中的应用。方法利用PKH26染色、荧光抗体标记和流式细胞术,检测淋巴细胞及其亚群在多克隆刺激剂刺激作用下荧光强度的变化,应用相关软件分析其增殖情况,并与传统MTT方法进行比较。结果经不同浓度的多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)刺激72h后,两种方法均能检测淋巴细胞增殖情况,其增殖强度与刺激剂浓度呈正相关(r=0.999)。经同种细胞刺激6d后,结合CD8、CD3抗体染色,经ModFit软件拟合后,PKH26能显示的T细胞亚群与T淋巴细胞明显不同的细胞增殖动力。结论PKH26染色结合荧光抗体标记和流式细胞术,是分析淋巴细胞及其亚群增殖动力的有力工具。 展开更多
关键词 淋巴细胞 PKH26 增殖
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可溶性HLA-A2-肽复合物的体外折叠与生物素化 被引量：10
4
作者 翁秀芳 陈浩 +4 位作者 吴雄文 梁智辉 韩军艳 黄亚非 龚非力 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期265-268,共4页
目的 :可溶性HLA A2 抗原肽复合物的体外折叠复性与生物素化。方法 :原核高效表达的HLAH链及 β2m,在抗原肽 (EB病毒的膜潜伏蛋白LMP2A的NH2 CLGGLLTMV COOH残基 )的存在下 ,通过稀释复性折叠成HLA A2 抗原肽复合物 ,并在BirA酶的作... 目的 :可溶性HLA A2 抗原肽复合物的体外折叠复性与生物素化。方法 :原核高效表达的HLAH链及 β2m,在抗原肽 (EB病毒的膜潜伏蛋白LMP2A的NH2 CLGGLLTMV COOH残基 )的存在下 ,通过稀释复性折叠成HLA A2 抗原肽复合物 ,并在BirA酶的作用下进行生物素化 ,使生物素结合到HLA A2 抗原肽复合物中的H链C端。利用特异性抗体 (mAbW6 / 32和兔抗人 β2m抗体 )及链霉亲合素进行ELISA和Westernblot,检测稀释复性和生物素化的折叠产物。结果 :折叠复合物中 ,主要含有HLAH链聚合体、HLA A2 肽复合物单体及 β2m3种成分 ,其中H链聚合体与HLA A2单体可生物素化。结论 :成功地获得生物素化的HLA A2 抗原肽复合物单体 ,为进一步构建四聚体及制备人工抗原提呈细胞奠定了基础 ,也为过程复杂的HLA 展开更多
关键词 HLA—A2-抗原肽复合物 生物素化 BirA酶
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人β_2m基因的克隆及表达 被引量：7
5
作者 陈浩 翁秀芳 +4 位作者 吴雄文 梁智辉 韩军艳 黄亚非 龚非力 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-4,共4页
目的 克隆和表达HLA I类分子轻链(β2m)基因,为人工制备HLA I类分子提供基础。方法 利用逆转录PCR技术从Jeg-3细胞株中克隆β2m基因,与质粒pET22b(+)重组,构建原核表达载体pET22b(+)-β2m,转化宿主菌E.coli BL21(DE3),诱导β2m基因高效... 目的 克隆和表达HLA I类分子轻链(β2m)基因,为人工制备HLA I类分子提供基础。方法 利用逆转录PCR技术从Jeg-3细胞株中克隆β2m基因,与质粒pET22b(+)重组,构建原核表达载体pET22b(+)-β2m,转化宿主菌E.coli BL21(DE3),诱导β2m基因高效表达,并采用双抗体夹心ELISA法对表达产物进行抗原性和功能鉴定。结果 酶切和测序证实β2m基因克隆和载体构建成功,目的蛋白在宿主菌中高效表达于包涵体中;通过包涵体的分离和纯化获得初步纯化的β2m,所制备的β2m能够与特异性抗体结合,并能与HLA I类分子重链形成具有天然构象的HLA I类分子。结论 人β2m基因能够在原核宿主中高效表达,表达产物具有形成HLA I类分子的功能。 展开更多
关键词 β2m基因 克隆 表达 人工制备
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BirA酶基因表达载体的构建、原核表达及表达产物的活性鉴定 被引量：9
6
作者 李青 吴雄文 +4 位作者 熊敏 翁秀芳 卢小玲 梁智辉 龚非力 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期557-560,共4页
目的:构建生物素-蛋白连接酶(BirA酶)基因的表达载体,并在大肠杆菌BL-21(DE3)中表达具有生物学活性的BirA酶。方法:用PCR法扩增BirA酶基因。将PCR产物克隆入pGEX-4T-2中构建BirA酶-GST融合蛋白基因的重组表达载体pGEX-BirA。经测序验证... 目的:构建生物素-蛋白连接酶(BirA酶)基因的表达载体,并在大肠杆菌BL-21(DE3)中表达具有生物学活性的BirA酶。方法:用PCR法扩增BirA酶基因。将PCR产物克隆入pGEX-4T-2中构建BirA酶-GST融合蛋白基因的重组表达载体pGEX-BirA。经测序验证后,在大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,表达产物采用谷胱苷肽-琼脂糖层析柱进行纯化。以带有生物素酶底物肽(BirAsubstratepeptide,BSP)的HLA-A2-肽复合物为底物,用ELISA和Westernblot鉴定表达产物的生物素化活性。结果:构建了pGEX-BirA原核表达质粒,并在大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达Mr为61300的BirA酶-GST融合蛋白,表达产物经谷胱苷肽-琼脂糖层析柱纯化后,得到N端带有GST标签的BirA酶蛋白。ELISA和Westernblot的结果显示,表达产物能使HLA-A2-肽复合物生物素化。结论:成功地制备了具有生物学活性的Bi-rA酶,为研究蛋白质分子的相互作用提供了有效的制剂。 展开更多
关键词 BirA酶 生物素化 HLA-A2-肽复合物
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Annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的比较 被引量：49
7
作者 张伟 梁智辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1209-1212,共4页
目的比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点。方法用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡... 目的比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点。方法用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡情况。结果 Annexin V-FITC/PI双标记法能准确地反映2种模型中的细胞凋亡情况,与其检测原理一致;而Hoechst33342/PI双标记法虽能准确反映DEX诱导胸腺细胞的凋亡情况,但在检测H2O2诱导的K562细胞凋亡时,其早期凋亡细胞的分布与其检测原理明显不符。结论与annexin-V-FITC/PI双标记法相比,Hoechst33342/PI双标记法有一定的局限性。 展开更多
关键词 凋亡 ANNEXIN V-FITC/PI Hoechst33342/PI 流式细胞术
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可溶性HLA-G1抗原肽复合物的体外折叠及其功能研究 被引量：4
8
作者 杨敬宁 吴雄文 +3 位作者 梁智辉 韩军艳 黄亚非 龚非力 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期265-268,共4页
目的:体外折叠形成可溶性HLA G1抗原肽复合物,并研究其生物学功能。方法:以原核表达的可溶性HLA-G1的重链及轻链β2m,与人工合成的抗原九肽体外进行共折叠复性。将折叠产物通过SephadexG75层析柱纯化,经Westernblot进行构象鉴定。探讨... 目的:体外折叠形成可溶性HLA G1抗原肽复合物,并研究其生物学功能。方法:以原核表达的可溶性HLA-G1的重链及轻链β2m,与人工合成的抗原九肽体外进行共折叠复性。将折叠产物通过SephadexG75层析柱纯化,经Westernblot进行构象鉴定。探讨可溶性HLA-G1分子对NK细胞杀伤活性的影响,对混合淋巴细胞培养中T细胞增殖的影响,以及对活化T细胞凋亡的影响。结果:折叠产物可与mAbW6/32特异性结合,在Westernblot的鉴定中呈阳性反应。可溶性HLA-G1可有效地抑制NK细胞的细胞毒作用,抑制混合淋巴细胞培养中T细胞的增殖,促进活化T细胞发生凋亡。结论:体外折叠成功地形成可溶性HLA-G1抗原肽复合物,该复合物具有抑制NK细胞和T细胞的活性。 展开更多
关键词 sHLA-G1-抗原肽复合物 折叠复性 细胞毒作用 增殖 凋亡
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可溶性HLA-G1重链分子的构建、表达及纯化 被引量：4
9
作者 杨敬宁 吴雄文 +6 位作者 梁智辉 陆盛军 尹姝晗 蔡蕾 韩军艳 黄亚非 龚非力 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期287-290,共4页
目的:获取原核表达的可溶性HLA- G1重链分子(heavychainofsolubleHLA G1,sHLA -G1 hc) ,为进一步构建可溶性HLA- G1单体分子奠定基础。方法:应用引物点突变技术,RT -PCR扩增去信号肽的可溶性HLA -G1重链分子的cDNA序列,构建表达载体pET2... 目的:获取原核表达的可溶性HLA- G1重链分子(heavychainofsolubleHLA G1,sHLA -G1 hc) ,为进一步构建可溶性HLA- G1单体分子奠定基础。方法:应用引物点突变技术,RT -PCR扩增去信号肽的可溶性HLA -G1重链分子的cDNA序列,构建表达载体pET2 2b sHLA -G1 -hc,导入大肠杆菌BL2 1(DE3)Plys,IPTG诱导sHLA-G1- hc- 6 (his融合蛋白表达,提取包涵体蛋白,溶解后经Ni- NTA亲和层析纯化,透析后浓缩保存。SDS PAGE、Westernblot鉴定目的蛋白的表达和纯化。结果:克隆基因序列符合重链基因特征;表达产物以包涵体形式为主,表达量占菌体总蛋白的2 0 % ;纯化后证明表达产物具有较高纯度达到95 %。结论:成功构建可溶性HLA -G1重链分子原核表达载体,为阐明可溶性HLA- G1的功能奠定基础。 展开更多
关键词 人白细胞抗原 点突变 原核表达 蛋白纯化
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HGPRT缺陷型T淋巴瘤细胞系的建立与鉴定 被引量：3
10
作者 翁秀芳 吴雄文 +6 位作者 梁智辉 陆盛军 卢小玲 张彩娥 钟茂华 陈雪玲 龚非力 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期701-704,共4页
目的通过突变诱导次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺陷型的T淋巴瘤细胞系,为制备T细胞杂交瘤提供利于筛选的亲代细胞。方法通过乙基甲磺酸对Jurkat细胞进行突变,逐步提高培养液中6-巯基鸟嘌呤(6-TG)的浓度,筛选出对6-TG具有稳定抗... 目的通过突变诱导次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺陷型的T淋巴瘤细胞系,为制备T细胞杂交瘤提供利于筛选的亲代细胞。方法通过乙基甲磺酸对Jurkat细胞进行突变,逐步提高培养液中6-巯基鸟嘌呤(6-TG)的浓度,筛选出对6-TG具有稳定抗性的单克隆细胞株Jur16-TG细胞。比较Jurkat细胞与Jur16-TG细胞在含6-TG培养液和HAT培养液中的生长情况。结果在含20μg/ml 6-TG的培养液中,Jur16-TG细胞能够稳定生长,而Jurkat细胞在培养1周后基本死亡。在HAT培养液中氨基喋呤的浓度为4×10-8mol/L或8×10-8mol/L时,Jur16-TG细胞4 d内基本死亡,而Jurkat细胞至少能存活7~10 d。Jur16-TG细胞与正常外周血淋巴细胞(PBL)的融合实验显示,35%的Jur16-TG细胞与PBL融合。结论突变筛选出的单克隆细胞株Jur16-TG具有6-TG抗性和在HAT培养液中不能生长的特性,证实该细胞为HGPRT缺陷型细胞株,并且该细胞株可有效地与原代淋巴细胞融合,从而为T细胞杂交瘤的制备提供了利于筛选的亲代永生化的T细胞。 展开更多
关键词 次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷 6-巯基鸟嘌呤抗性 次黄嘌呤/氨基喋呤/胸腺嘧啶(HAT)培养液 T细胞杂交瘤
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血管内皮细胞(ECV304)表达的HLA-G1对NK细胞杀伤活性的抑制作用 被引量：3
11
作者 张彩娥 韩军艳 +4 位作者 杨惠军 吴雄文 黄亚非 梁智辉 龚非力 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期676-678,共3页
目的:证实HLA-G1分子能够抑制NK细胞对同种血管内皮细胞系的杀伤作用。方法:采用脂质体介导的DNA转染技术,以构建的真核表达质粒pcDNA3-HLA-G1转染人脐静脉内皮细胞系ECV304,再用免疫荧光法检测表达的HLA-G1分子。并用MTT比色法检测HLA... 目的:证实HLA-G1分子能够抑制NK细胞对同种血管内皮细胞系的杀伤作用。方法:采用脂质体介导的DNA转染技术,以构建的真核表达质粒pcDNA3-HLA-G1转染人脐静脉内皮细胞系ECV304,再用免疫荧光法检测表达的HLA-G1分子。并用MTT比色法检测HLA-G1对NK细胞杀伤活性的影响。结果:ECV304细胞上可稳定表达HLA-G1。NK细胞对空质粒pcDNA3转染的ECV304细胞的杀伤率为(50.6±18.1)%;而对pcDNA3-HLA-G1转染的ECV304细胞的杀伤率为(29.7±11.4)%,两者差异具有显著意义(P<0.01)。结论:HLA-G1分子可明显抑制NK细胞对同种血管内皮细胞的杀伤效应。 展开更多
关键词 HLA—G1 ECV304 NK细胞 杀伤抑制
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生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物的制备 被引量：3
12
作者 卢小玲 吴雄文 +3 位作者 翁秀芳 李青 梁智辉 龚非力 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期78-81,共4页
目的制备生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物。方法将原核高效表达的sHLA-A*2402-BSP融合蛋白及β2m和HLA-A*2402限制性抗原肽EB病毒BRLF1蛋白中的九肽NH2-TYPVLEEMF-COOH进行稀释、复性、折叠,形成HLA-A*2402-抗原肽复合物单体,并在Bir... 目的制备生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物。方法将原核高效表达的sHLA-A*2402-BSP融合蛋白及β2m和HLA-A*2402限制性抗原肽EB病毒BRLF1蛋白中的九肽NH2-TYPVLEEMF-COOH进行稀释、复性、折叠,形成HLA-A*2402-抗原肽复合物单体,并在BirA酶作用下进行生物素化,使生物素结合到HLA-A*2402-抗原肽复合物中H链C端的BSP序列上形成生物素化的sHLA-A*2402-抗原肽复合物单体。利用特异性单克隆克体(W6/32和兔抗人2β微球蛋白抗体)及链霉亲合素进行ELISA和Western blot,检测稀释复性和生物素化的折叠产物。结果折叠复合物中,主要含有HLA-A*2402-肽复合物单体及β2m两种成分,其中HLA-A*2402-肽复合物单体可生物素化。结论成功制备出生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物单体,为进一步构建四聚体及制备人工抗原提呈细胞奠定了基础。 展开更多
关键词 HLA—A＊2402-抗原肽复合物 生物素化 BirA酶
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膜表达的HLA-G1对同种反应性PBMC分泌Th1/Th2型细胞因子的影响 被引量：2
13
作者 杨惠军 吴雄文 +4 位作者 张彩娥 梁智辉 韩军艳 黄亚非 龚非力 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期300-302,共3页
目的研究人脐静脉内皮细胞系(ECV304)表达的HLA-G1对同种异体外周血单个核细胞(PBMC)Th1/Th2型细胞因子分泌的影响。方法采用脂质体介导的基因转染技术将pcDNA3-HLA-G1转入ECV304,以间接免疫荧光技术在蛋白质水平上检测HLA-G1分子在ECV... 目的研究人脐静脉内皮细胞系(ECV304)表达的HLA-G1对同种异体外周血单个核细胞(PBMC)Th1/Th2型细胞因子分泌的影响。方法采用脂质体介导的基因转染技术将pcDNA3-HLA-G1转入ECV304,以间接免疫荧光技术在蛋白质水平上检测HLA-G1分子在ECV304上的表达;以表达HLA-G1的ECV304作为刺激细胞,灭活后,与健康人PBMC共同培养,用ELISA检测上清液中Th1/Th2型细胞因子的浓度,观察HLA-G1对同种异体抗原激活的PBMC分泌Th1/Th2型细胞因子的影响。结果与转染pcDNA3空质粒的对照组相比,HLA-G1能使PBMC的IL-10分泌增加(P<0.05),而IL-2,IFN-γI、L-4分泌无明显影响。结论HLA-G1能引起由同种异体抗原激活的PBMC分泌IL-10增加,提示HLA-G1有可能使Th1/Th2型细胞因子向Th2型偏移。 展开更多
关键词 HLA-G1 ECV304 TH1/TH2型细胞因子 同种移植 免疫耐受
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CTL对同种异体靶细胞杀伤作用的实验研究 被引量：2
14
作者 房崇芸 吴雄文 +4 位作者 韩军艳 刘敏 杨志章 梁智辉 龚非力 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期119-122,共4页
目的 :研究特异性CTL杀伤的效应与HLA型别之间的关系。方法 :用已知型别的EB病毒转化的B淋巴母样细胞 (Epstein Barr transformedBlymphoblastoidcellline ,EBV LCL)与同种异体外周血单个核细胞 (PBMC)共培养 ,激活同种异体抗原特异性... 目的 :研究特异性CTL杀伤的效应与HLA型别之间的关系。方法 :用已知型别的EB病毒转化的B淋巴母样细胞 (Epstein Barr transformedBlymphoblastoidcellline ,EBV LCL)与同种异体外周血单个核细胞 (PBMC)共培养 ,激活同种异体抗原特异性细胞毒性T细胞 (cytotoxicityTcell,CTL) ,然后利用同位素释放法观察CTL对HLA I类表型不同的EBV LCL的杀伤活性。结果 :用EBV LCL 1刺激自身PBMC 1所诱导的CTL 1a,只能杀伤EBV LCL 1,而不能杀伤HLA I类表型不同的EBV LCL 2 ;但用EBV LCL 2刺激PBMC 1所诱导的CTL 1b ,却能有效杀伤HLA I类表型不同的EBV LCL 2。结论 :①MHC表型不同的免疫细胞之间可以发生相互作用 ;②TCR既不单独识别靶细胞表面的抗原肽 ,也不直接识别靶细胞表面的MHC分子 (MHC特异性抗原决定簇 ) ,而是识别MHC 抗原肽复合物的表面综合信息 ,后者可能是由MHC 抗原肽复合物表面的空间构象、电荷性质及其分布等信息所构成 ;③所谓CTL的特异性杀伤作用 ,是MHC 抗原肽复合物表面信息激活该信息特异性T细胞克隆的结果。 展开更多
关键词 CTL限制性杀伤 HLA型别 TCR MHC-抗原肽复合物 表面信息
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sHLA-A*020-1抗原肽复合物的构建 被引量：3
15
作者 陈浩 吴雄文 +4 位作者 梁智辉 翁秀芳 韩军艳 黄亚非 龚非力 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期232-234,共3页
以原核表达的sHLA A 0 2 0 1 BSP为重链 ,β2 m为轻链 ,与人工合成的EBV抗原肽LMP2A (4 2 6 4 34、NH2 CLGGLLTMV COOH )利用稀释法进行共折叠复性 ,形成可生物素化的可溶性HLA A 0 2 0 1抗原肽复合物。并利用仅与天然构象HLAI类分... 以原核表达的sHLA A 0 2 0 1 BSP为重链 ,β2 m为轻链 ,与人工合成的EBV抗原肽LMP2A (4 2 6 4 34、NH2 CLGGLLTMV COOH )利用稀释法进行共折叠复性 ,形成可生物素化的可溶性HLA A 0 2 0 1抗原肽复合物。并利用仅与天然构象HLAI类分子结合的单抗W6 / 32 ,通过Dot ELISA和Westernblot对折叠产物的构象进行鉴定 ,证实复性后成功获得了天然构象的sHLA A 0 2 0 1 抗原肽复合物。为进一步组装可溶性HLA/抗原肽四聚体以及制备人工抗原提呈细胞奠定基础。 展开更多
关键词 sHLA-A＊0201-抗原肽复合物 稀释复性 四聚体
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sHLA-A*2402融合蛋白的制备与特性研究 被引量：3
16
作者 卢小玲 吴雄文 +3 位作者 翁秀芳 梁智辉 李青 龚非力 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期137-140,共4页
本文用含有HLA-A*2402重链胞外段基因的质粒为模板进行PCR,利用下游引物拼接上依赖BirA的可生物化序列后,构建融合基因sHLA-A*2402-BSP,与质粒pET-21d重组后,在宿主菌E.coliBL21(DE3)中诱导表达。表达的融合蛋白与β2m及HLA-A*2402限制... 本文用含有HLA-A*2402重链胞外段基因的质粒为模板进行PCR,利用下游引物拼接上依赖BirA的可生物化序列后,构建融合基因sHLA-A*2402-BSP,与质粒pET-21d重组后,在宿主菌E.coliBL21(DE3)中诱导表达。表达的融合蛋白与β2m及HLA-A*2402限制性抗原肽EB病毒BRLF1蛋白中的九肽NH2-TYPVLEEMF-COOH进行复性折叠,形成HLA-A*2402-抗原肽复合物单体,并用Westernblot和夹心ELISA法鉴定。证实成功地制备出sHLA-A*2402-生物素化序列融合蛋白并使之正确折叠复性。为研究在原核系统中表达、纯化与复性及体外构建MHCI类分子四聚体,探讨免疫识别机制奠定了基础。 展开更多
关键词 sHLA—A＊2402 生物素化序列 稀释复性
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金叶败毒颗粒抗炎与免疫药理作用的研究 被引量：9
17
作者 杨明炜 陆付耳 +5 位作者 李鸣真 叶望云 梁智辉 冯玮 裘军 郝长江 《中国实验方剂学杂志》 CAS 2000年第3期26-28,共3页
金叶败毒颗粒 (JY)能明显抑制角叉莱胶引起的大鼠足跖肿胀和组织胺引起的大鼠皮肤毛细血管通透性增高 ,提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶菌酶含量、溶血素形成以及迟发型超敏反应。
关键词 金叶败毒颗粒 抗炎 免疫 药理 中药
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高效、优质大型设备开放式平台的管理和运行 被引量：6
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作者 张伟 梁智辉 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2014年第11期294-296,共3页
为探索高效、优质大型设备开放式平台的构建,在分析了当前高校大型设备使用的现状与存在的问题,总结了同济医学院细胞工程中心流式细胞仪平台多年的管理和运行经验,概括起来为:统一规划、相对集中、开放共享,依托学科、专人负责,有偿使... 为探索高效、优质大型设备开放式平台的构建,在分析了当前高校大型设备使用的现状与存在的问题,总结了同济医学院细胞工程中心流式细胞仪平台多年的管理和运行经验,概括起来为:统一规划、相对集中、开放共享,依托学科、专人负责,有偿使用、多劳多得。该管理与运行模式能较好地避免大型设备重复购置,提高大型设备的使用效率,取得了良好的经济效益与社会效益。 展开更多
关键词 大型设备 管理与运行模式 开放式平台
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血清可溶性白细胞抗原G的水平与早期妊娠情况的关联 被引量：3
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作者 黄承芳 吴雄文 梁智辉 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期444-444,464,共2页
关键词 sHLA—G 妊娠 原因不明的习惯性流产 关联
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“小鼠胸腺T淋巴细胞亚群及其凋亡检测”整合实验的建立与初探 被引量：2
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作者 徐勇 马正邦 +6 位作者 叶黄河 罗伟东 郑沛翔 耿二朔 曹璨 谭政 梁智辉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期610-612,共3页
建立"五色流式细胞术同时检测小鼠胸腺淋巴细胞亚群与淋巴细胞凋亡"方法,用于免疫学整合实验"淋巴细胞亚群及其凋亡"的实践教学,亦可作为后疫情时期调整压缩实验课的手段之一。新方法不仅可清楚地显示胸腺中双阴性... 建立"五色流式细胞术同时检测小鼠胸腺淋巴细胞亚群与淋巴细胞凋亡"方法,用于免疫学整合实验"淋巴细胞亚群及其凋亡"的实践教学,亦可作为后疫情时期调整压缩实验课的手段之一。新方法不仅可清楚地显示胸腺中双阴性T细胞、双阳性T细胞、CD4^(+)T细胞与CD8^(+)T细胞的比例,也能反映生理状况下各细胞亚群经过"阳性选择""阴性选择"所发生的细胞凋亡事件。 展开更多
关键词 流式细胞术 淋巴细胞亚群 细胞凋亡 T细胞发育 实验课程整合
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