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试用马利兰治疗β-地中海贫血
1
作者 梁植权 刘利娟 +8 位作者 杨克恭 陈松森 王荣新 敖朝晖 刘德培 贾佩臣 查丹玉 金和谦 黄有文 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期133-136,共4页
对3例重型β-地中海贫血(β-地贫)患儿试用马利兰治疗。患儿每日口服马利兰(0.2mg/kg),20d后,Hb,HbF,RBC等主要血液学指数均有所改善。临床症状缓解,肝脾肿大减轻。2例患儿姐妹染色体互换(SCE)有轻度增加,停药后即可恢复,1例基本无变化... 对3例重型β-地中海贫血(β-地贫)患儿试用马利兰治疗。患儿每日口服马利兰(0.2mg/kg),20d后,Hb,HbF,RBC等主要血液学指数均有所改善。临床症状缓解,肝脾肿大减轻。2例患儿姐妹染色体互换(SCE)有轻度增加,停药后即可恢复,1例基本无变化,提示所用剂量的马利兰对患者染色体DNA无明显损伤。用多聚酶链反应(PCR)和寡聚核苷酸探针杂交测定13例经马利兰治疗的重型β-地贫患儿的DNA,在22条β-地贫染色体中发现有7种β-珠蛋白基因突变类型,提示马利兰对不同突变类型β-地贫均有疗效。 展开更多
关键词 马利兰 地中海贫血
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中国广西、广东、四川三省区β-地中海贫血基因突变类型及产前基因诊断研究 被引量：26
2
作者 刘敬忠 吴冠芸 +10 位作者 高庆生 姜哲 梁植权 罗会元 李琪 龙桂芳 张锦 邓兵 王荣新 黄有文 曾瑞萍 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期90-95,共6页
本文采用聚合酶链反应(PCR)技术及特异寡核苷酸探针斑点杂交,分析研究广西、广东、四川三省区95例β-地中海贫血患者150 条染色体的基因突变。发现发生率最高的前两种突变各有不同。广西的是编码子41-42框架位移与17(A→T)突变。广东的... 本文采用聚合酶链反应(PCR)技术及特异寡核苷酸探针斑点杂交,分析研究广西、广东、四川三省区95例β-地中海贫血患者150 条染色体的基因突变。发现发生率最高的前两种突变各有不同。广西的是编码子41-42框架位移与17(A→T)突变。广东的是编码子41-42框架位移与IVS-Ⅱ-654突变,四川的则是17与41-42(17稍高于41-42)。-29位突变在四川也很常见,但广东、广西不多。-30位的T→C突变,IVS-Ⅰ-1的G→T以及IVS-Ⅰ-5的G→C三种突变,在本研究的病例中没有发现。并在此基础上完成了14例β-地中海贫血病危胎儿的产前基因诊断。 展开更多
关键词 地中海贫血 产前诊断 遗传病
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西藏高原红细胞增多症发病率及其血红蛋白特异性研究 被引量：22
3
作者 陈松森 郑元明 +5 位作者 张秀芳 宋良权 敖朝晖 沈林明 刘源源 梁植权 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期237-243,共7页
在西藏两个不同海拔高度地区世居和移居人群中进行高原红细胞增多症(HAPC)调查及对其血红蛋白(Hb)特异性进行研究。结果表明:(1)西藏拉萨地区人群中HAPC总发病率为2.39％,那曲-安多地区为12.95％,随海拔升高而发病率增多,汉族的发病率... 在西藏两个不同海拔高度地区世居和移居人群中进行高原红细胞增多症(HAPC)调查及对其血红蛋白(Hb)特异性进行研究。结果表明:(1)西藏拉萨地区人群中HAPC总发病率为2.39％,那曲-安多地区为12.95％,随海拔升高而发病率增多,汉族的发病率高于藏族,男性高于女性;(2)HAPC患者红细胞中MetHb为10.14％,显著高于高原健康人红细胞中的MetHb含量(6.35％),这可能是HAPC患者血液携带氧功能降低原因之一;(3)HAPC患者红细胞的穆斯堡尔谱除正常oxy-Hb和deoxy-Hb组分外,还发现存在第三组分“c”,这可能是血红蛋白的变性产物,是否与红细胞携带氧有关尚待研究。 展开更多
关键词 西藏 红细胞增多症 血红蛋白
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改进的反向PCR技术克隆转移基因的旁侧序列 被引量：18
4
作者 李竹红 刘德培 梁植权 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第6期600-602,共3页
对传统的反向ＰＣＲ 技术作了一些改进： 用巢式ＰＣＲ 扩增含量极少的靶序列； ＰＣＲ 反应体系中加入５ ％ 的甲酰胺以减少非特异性扩增． 结果表明， 改进的反向ＰＣＲ 体系是克隆人基因组已知片段旁侧序列的高度灵敏、高度特异的方法．
关键词 反向PCR 旁侧序列 转移基因
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西藏拉萨地区居民红细胞谷胱甘肽和谷胱甘肽过氧化物酶含量和活力 被引量：6
5
作者 陈松森 郑元明 +3 位作者 宋良权 贾佩臣 敖朝晖 梁植权 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1992年第3期258-259,共2页
谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体细胞(尤其是红细胞)一个重要的对抗氧化剂作用的防御体系,它在细胞内能消除有害的氧化代谢产物,阻断脂质过氧化连锁反应,从而保护细胞膜结构和功能完整。所以GSH和GSH-Px含量和活力变... 谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体细胞(尤其是红细胞)一个重要的对抗氧化剂作用的防御体系,它在细胞内能消除有害的氧化代谢产物,阻断脂质过氧化连锁反应,从而保护细胞膜结构和功能完整。所以GSH和GSH-Px含量和活力变化是机体氧化物牵制的重要指标。有关正常人和某些疾病患者红细胞GSH和GSH-Px的资料国内外均有报道。本实验对西藏拉萨地区(海拔3658m)居民和北京地区居民的红细胞GSH和GSH-Px含量和活力进行比较研究,目的是探索GSH和GSH-Px与高原适应之关系,为防治高原疾病提供根据。 展开更多
关键词 红细胞 谷胱甘肽 过氧化物酶 高原
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病毒载体与造血干细胞基因治疗 被引量：5
6
作者 董文吉 祖振响 +1 位作者 刘德培 梁植权 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期383-388,共6页
多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干... 多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干细胞转导条件 ,其介导的腺苷脱氨酶缺陷引起的严重联合免疫缺陷和X染色体连锁的严重联合免疫缺陷的基因治疗已经获得初步成功 ;其他整合型病毒载体如慢病毒和腺相关病毒载体 ,也在临床前造血干细胞基因治疗研究中得到广泛应用。从病毒载体。 展开更多
关键词 造血干细胞 反转录病毒载体 慢病毒载体 腺相关病毒载体 基因治疗
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用同源重组法修饰含人α类珠蛋白基因簇的细菌人工染色体 被引量：5
7
作者 冯东晓 刘德培 +1 位作者 黄粤 梁植权 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期187-191,共5页
采用RecA蛋白介导的同源重组的方法 ,对本实验室筛选出的包含完整人α 类珠蛋白基因簇的细菌人工染色体 (BAC)DNA进行删除修饰。首先采用PCR的方法 ,分别在预删除的HS - 40增强子区域的上游和下游克隆长度约为 5 0 0bp的两段同源序列 ,... 采用RecA蛋白介导的同源重组的方法 ,对本实验室筛选出的包含完整人α 类珠蛋白基因簇的细菌人工染色体 (BAC)DNA进行删除修饰。首先采用PCR的方法 ,分别在预删除的HS - 40增强子区域的上游和下游克隆长度约为 5 0 0bp的两段同源序列 ,并一起克隆到构建载体 pBV的XbaI和HindIII位点上 ,SalI酶切后回收 1kb左右的片段并克隆到温度敏感的穿梭质粒 pSV -RecA中 ,转化带有人α 类珠蛋白基因簇的BACDNA的感受态大肠杆菌DH10B ,经氯霉素正筛选和镰孢菌酸的负筛选 ,获得发生两次同源重组后只含BACDNA而穿梭载体已丢失的菌株 ,经Southern杂交鉴定 ,获得了HS - 40被定位删除的BAC突变体克隆。 展开更多
关键词 细菌人工染色体 同源重组 Α-珠蛋白 修饰
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细菌人工染色体(BAC)及其分析和修饰方法简介 被引量：8
8
作者 黄粤 刘德培 梁植权 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期309-313,共5页
细菌人工染色体是一种新发展起来的DNA载体系统 ,它具有容量大、遗传特性稳定、易于操作等优点 .在基因文库构建和基因功能分析等方面有广泛的应用 .综述了近年来发展起来的对BAC进行分析和修饰的一些方法 .
关键词 细菌人工染色体 定位修饰 同源重组 BAC
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基因敲除 被引量：6
9
作者 刘德培 方福德 梁植权 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期88-92,共5页
基因敲除刘德培，方福德，梁植权（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）目录一、基因敲除（ｇｅｎｅｋｎｏｃｋｏｕｔ）方法二、胚胎干细胞中同源重组的筛选（一）正负筛... 基因敲除刘德培，方福德，梁植权（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学医学分子生物学国家重点实验室，北京１００００５）目录一、基因敲除（ｇｅｎｅｋｎｏｃｋｏｕｔ）方法二、胚胎干细胞中同源重组的筛选（一）正负筛选法（二）标记基因的特异位点表达法... 展开更多
关键词 基因 基因敲除 胚胎干细胞 重组
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人干细胞因子cDNA克隆及其在大肠杆菌中的高效表达 被引量：3
10
作者 陈卫东 狄旭 +3 位作者 李江 宋飞 陈松森 梁植权 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期29-34,共6页
以超速离心法提取的HepG2细胞总RNA为模板，应用RT-PCR技术扩增得到编码人干细胞因子（SCF）全长CDNA（约0.8kb）。克隆、序列分析确证编码人SCF膜外活性区的CDNA（约0.5kb）结构正确，构建了含有该基因的表达质粒（PBV-mhSCF）并在大... 以超速离心法提取的HepG2细胞总RNA为模板，应用RT-PCR技术扩增得到编码人干细胞因子（SCF）全长CDNA（约0.8kb）。克隆、序列分析确证编码人SCF膜外活性区的CDNA（约0.5kb）结构正确，构建了含有该基因的表达质粒（PBV-mhSCF）并在大肠杆菌中获得高效表达。 展开更多
关键词 人干细胞因子 CDNA 聚合酶链反应 基因重组 表达
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两种新的激活γ珠蛋白基因的中药──盐酸山莨菪碱（654－2）和三尖杉酯碱 被引量：7
11
作者 杨克恭 何平 +2 位作者 陈松森 贾佩臣 梁植权 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第3期285-290,共6页
检测了３７种中药对Ｋ５６２细胞生长及血红蛋白合成的影响，发现盐酸山莨菪碱（６５４－２）和三尖杉酯碱可以使Ｋ５６２细胞的血红蛋白细胞增加３倍，细胞平均血红蛋白含量增加４倍，γ珠蛋白ｍＲＮＡ的表达分别增加５０％和４０％。... 检测了３７种中药对Ｋ５６２细胞生长及血红蛋白合成的影响，发现盐酸山莨菪碱（６５４－２）和三尖杉酯碱可以使Ｋ５６２细胞的血红蛋白细胞增加３倍，细胞平均血红蛋白含量增加４倍，γ珠蛋白ｍＲＮＡ的表达分别增加５０％和４０％。电泳结果显示ＨｂＦ和γ珠蛋白肽链。 展开更多
关键词 盐酸 山莨菪碱 三尖杉酯碱 珠蛋白
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人干细胞因子受体膜外区1～3免疫球蛋白样结构域的表达、纯化及活性 被引量：2
12
作者 苏林 刘长征 +3 位作者 邓艳春 杨克恭 梁植权 陈松森 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期154-158,共5页
目的 在原核和真核细胞中表达人干细胞因子受体（c-Kit）配体结合区膜外N端1～3免疫球蛋白样结构域（c-Kit/Ig1～3）,研究其配体结合活性.方法 采用重叠延伸PCR定点诱变法合成c-Kit/Ig1～3双突变片段（c-Kit/Ig1～3DM）,构建pET16b-c-Ki... 目的 在原核和真核细胞中表达人干细胞因子受体（c-Kit）配体结合区膜外N端1～3免疫球蛋白样结构域（c-Kit/Ig1～3）,研究其配体结合活性.方法 采用重叠延伸PCR定点诱变法合成c-Kit/Ig1～3双突变片段（c-Kit/Ig1～3DM）,构建pET16b-c-Kit/Ig1～3DM表达质粒,转化E.coli BL21（DE3）诱导表达,稀释复性,镍柱纯化.将C端添加组氨酸标签的c-Kit/Ig1～3基因克隆入真核表达载体pEAK12中,转染HEK293 ET细胞构建c-kit/Ig1～3高效表达细胞株,从细胞培养上清中使用镍金属螯合柱收集纯化蛋白.His-tag pull-down和酶联免疫结合实验检测融合蛋白配体结合活性.结果 在大肠杆菌中c-Kit/Ig1～3^DM以包涵体形式表达,复性后配体结合活性很低.在HEK293 ET细胞中筛选到2个高效表达c-Kit/Ig1～3的细胞株,上清表达量为2μg/ml,融合蛋白相对分子质量为58 000;受体配体结合实验显示真核表达的c-Kit/Ig1～3有明显的干细胞因子特异结合活性,解离常数Kd值为9.39 nmol/L.结论获得了具有较高配体结合活性的c-Kit/Ig1～3融合蛋白. 展开更多
关键词 人干细胞因子受体 免疫球蛋白样结构域 HIS-TAG pull-down 酶联免疫结合实验
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连接介导PCR及其在体内足迹研究中的应用 被引量：3
13
作者 纪新军 刘德培 梁植权 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第3期224-227,共4页
连接介导聚合酶链反应是以连接反应为基础的单侧PCR技术 ,首先在DNA片段的一端连接上一个公共连接子 ,而后在这个连接子与另一个DNA序列特异的引物间扩增 .Vent聚合酶的使用 ,延伸产物捕获及连接子标记选择策略的采用 ,大大提高了连接... 连接介导聚合酶链反应是以连接反应为基础的单侧PCR技术 ,首先在DNA片段的一端连接上一个公共连接子 ,而后在这个连接子与另一个DNA序列特异的引物间扩增 .Vent聚合酶的使用 ,延伸产物捕获及连接子标记选择策略的采用 ,大大提高了连接介导聚合酶链反应的敏感性 . 展开更多
关键词 连接介导PCR 连接子 体内足迹法 聚合酶链反应
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贵州苗族新生儿HbF中G_λ/A_λ比值测定与~Aγ~T基因频率分析 被引量：3
14
作者 易志勤 南国华 +5 位作者 陈松森 梁植权 姚源黎 杨文鸿 王立荣 丁桂华 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期1-3,共3页
用含Triton X-100的酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法测定了贵州省108例苗族新生儿脐带血胎儿血红蛋白(HbF)中。~Gγ/~Aγ值。显示107例(占99.07％)新生儿的~Gγ值在55—78％之间,均值与标准差为70.42±3.45;高~Gγ值者1例(占0.... 用含Triton X-100的酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法测定了贵州省108例苗族新生儿脐带血胎儿血红蛋白(HbF)中。~Gγ/~Aγ值。显示107例(占99.07％)新生儿的~Gγ值在55—78％之间,均值与标准差为70.42±3.45;高~Gγ值者1例(占0.925％);低~Gγ值者未发现。用Large-pore Vydac C4柱反相高效液相层析法对108例样本进行了~Aγ~T基因频率(f^4γ~T)分析,f^4γ~T为0.0648。 展开更多
关键词 血红蛋白F 苗族 基因频率
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儿童β地中海贫血的分子基础和治疗 被引量：3
15
作者 黄有文 王荣新 +7 位作者 查丹玉 刘利娟 金和谦 刘德培 梁植权 杨克恭 陈松森 吴志奎 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 1994年第1期1-3,共3页
研究目的研究儿童β地中海贫血的基因突变类型、发生率，马利兰、补肾生血药物对β地中海贫血的治疗效果。研究方法：经临床确诊重型β地中海贫血30例的56条染色体，用聚合酶链反应技术和寡核苷酸斑点杂交方法分析该病的基因突变类型和... 研究目的研究儿童β地中海贫血的基因突变类型、发生率，马利兰、补肾生血药物对β地中海贫血的治疗效果。研究方法：经临床确诊重型β地中海贫血30例的56条染色体，用聚合酶链反应技术和寡核苷酸斑点杂交方法分析该病的基因突变类型和发生率。用马利兰治疗重型β-地贫13例，中药补肾生血药物治疗6例。研究结果：本组基因突变类型的染色体条数为Codon41－42（－TTCT）23，Codon17（A－T）14，Codon71－72（＋A）7，－28（A－G）5，－29（A－G）8，IVS－Ⅱ－654（C－T）3，IVS－Ⅰ—5（G－T）1。马利兰治疗组中13例，8例有效，补肾生血药物治疗6例，5例有效，有效病例血红蛋白、红细胞、网织红细胞增加。结论　本组7种基因突变类型，其中以Codon41－42为最高，占41％，马利兰和中药生血药物治疗β地贫有一定疗效。 展开更多
关键词 地中海贫血 基因突变 马利兰
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染色质重塑复合物 被引量：2
16
作者 吕湘 刘德培 梁植权 《生命的化学》 CAS CSCD 2001年第2期96-99,共4页
关键词 染色质量塑 转录 组蛋白八聚体 SWI/SNF复合物
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α人心钠素基因在大肠杆菌两种表达载体系统中的高效表达 被引量：1
17
作者 林缨 卢圣栋 梁植权 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期86-91,共6页
应用ＤＮＡ重组技术，将α人心钠素（α－ｈＡＮＰ）基因克隆到表达性质粒ｐＬＳＤ_（１３）和ｐＬＭＧ_２中，与Ｐ_１噬菌体的ｒｅｆ基因片段融合，并处于Ｐ_Ｌ启动子的控制之下，通过温敏的ｃＩ８５７阻遏予基因加以调控。转化大肠杆... 应用ＤＮＡ重组技术，将α人心钠素（α－ｈＡＮＰ）基因克隆到表达性质粒ｐＬＳＤ_（１３）和ｐＬＭＧ_２中，与Ｐ_１噬菌体的ｒｅｆ基因片段融合，并处于Ｐ_Ｌ启动子的控制之下，通过温敏的ｃＩ８５７阻遏予基因加以调控。转化大肠杆菌后，用４２℃升温诱导，使α－ｈＡＮＰ基因以融合蛋白的形式获得高效表达，产生的融合蛋白分别约占细胞可溶性蛋白，总量的３５％和４８％。经一系列纯化步骤得到的α－ｈＡＮＰ２８肽样品具有明显的舒张血管和降低血压的作用。本文还对两种表达性载体进行了比较研究。 展开更多
关键词 α人心钠素 大肠杆菌 高效表达 融合蛋白
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细胞分化与基因表达调控 被引量：4
18
作者 刘德培 梁植权 《生物工程进展》 CSCD 1994年第1期23-25,共3页
细胞分化与基因表达调控刘德培，梁植权（中国医学科学院基础医学研究所）（医学分子生物学国家重点实验室）（北京东单三条五号１００００５）从单细胞受精卵发育成不同种类的细胞称为分化，细胞分化是基因选择性表达的结果。一系列的... 细胞分化与基因表达调控刘德培，梁植权（中国医学科学院基础医学研究所）（医学分子生物学国家重点实验室）（北京东单三条五号１００００５）从单细胞受精卵发育成不同种类的细胞称为分化，细胞分化是基因选择性表达的结果。一系列的细胞分化、增殖与有序排列形成发育的... 展开更多
关键词 细胞 分化 基因表达 基因调控
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用转基因动物研究珠蛋白基因红系增强子 被引量：1
19
作者 刘德培 梁植权 《蚌埠医学院学报》 CAS 1998年第5期291-293,共3页
珠蛋白基因分为α与β两个基因簇，α基因簇位于１６号染色体，以５′ζ２ψζ１ψα２ψα１α２α１θ１３′的顺序排列；β珠蛋白基因簇位于１１号染色体，以５′εＧγＡγψβδβ３′的顺序排列。... 珠蛋白基因分为α与β两个基因簇，α基因簇位于１６号染色体，以５′ζ２ψζ１ψα２ψα１α２α１θ１３′的顺序排列；β珠蛋白基因簇位于１１号染色体，以５′εＧγＡγψβδβ３′的顺序排列。两个珠蛋白基因簇的序列均已测定。珠... 展开更多
关键词 珠蛋白类 基因重组 转基因动物 动物模型
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珠蛋白基因特异性表达的调控 被引量：1
20
作者 刘德培 梁植权 《基础医学与临床》 CSCD 1992年第2期14-18,共5页
一、珠蛋白基因结构与特异性表达 人类珠蛋白基因包括已确定的八个珠蛋白功能基因和三个珠蛋白假基因,还有一个近年发现的基因,它们在两条染色体上排列成簇。α-珠蛋白基因簇位于16号染色体短臂上,以5′ζ_2-ψζ_1-ψα_2-ψα_1-α_2-... 一、珠蛋白基因结构与特异性表达 人类珠蛋白基因包括已确定的八个珠蛋白功能基因和三个珠蛋白假基因,还有一个近年发现的基因,它们在两条染色体上排列成簇。α-珠蛋白基因簇位于16号染色体短臂上,以5′ζ_2-ψζ_1-ψα_2-ψα_1-α_2-α_1-θ_1-3′的顺序排列,约占30kb。其中ζ为胚胎型功能基因、ψζ与ψα为假基因,θ基因的功能有待研究,另外在22号染色体上还有一个ψθ_2假基因。 展开更多
关键词 珠蛋白 基因表达
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