Slug-siRNA干扰Slug基因表达对胰腺癌的抑制作用 被引量：4

1

作者 欧树安 张克君 +1 位作者 严明总 王齐全 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第17期1713-1719,共7页

目的:研究携带Slug-siRNA的rAAV对裸鼠体内胰腺癌的作用.方法:建立人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,2wk后随机将建模成功的裸鼠分为3组,每组6只.构建携带Slug-siRNA的rAAV载体,采用瘤体内多点注射的方法,阴性对照组裸鼠按1×109puf(50... 目的:研究携带Slug-siRNA的rAAV对裸鼠体内胰腺癌的作用.方法:建立人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,2wk后随机将建模成功的裸鼠分为3组,每组6只.构建携带Slug-siRNA的rAAV载体,采用瘤体内多点注射的方法,阴性对照组裸鼠按1×109puf(50μL)标准注射rAAV-EGFP,空白对照组裸鼠注射等量生理盐水,实验组裸鼠按1×109puf(50μL)标准注射rAAV2-EGFP-slug-siRNA,只注射1次.观察裸鼠的一般情况,摄食,活动能力,每周用电子天平秤体质量,绘制裸鼠生长曲线.治疗6wk后二氧化碳吸入法处死裸鼠,切取肿瘤称质量;免疫组织化学SP法检测slug蛋白的表达,TUNEL检测皮下移植瘤细胞凋亡,透射电镜检测细胞超微结构.结果:3组裸鼠分别接受不同的处理后,在开始的2wk皮下移植瘤的生长无明显差别,2wk以后,实验组裸鼠皮下移植瘤的体积增长明显滞后于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗6wk后,实验组裸鼠皮下移植瘤的质量明显轻于阴性对照组和空白对照组差异有统计学意义(3.26±0.48gvs7.56±1.25g,7.50±1.23g,均P<0.05).实验组裸鼠皮下移植瘤的AI值明显高于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(0.27±0.06vs0.024±0.01,0.025±0.01,均P<0.05);实验组的抑瘤率明显高于阴性对照组,差异有统计学差异(71.4%vs0.04%,P<0.01).透射电镜下,实验组肿瘤细胞可见细胞器结构模糊,核固缩,染色质边集等现象.免疫组织化学检测示实验组Slug表达明显减少.结论:Slug基因被有效沉默,Slug基因沉默后促进细胞凋亡,抑制胰腺癌实体瘤增殖和生长. 展开更多

关键词 Slug—siRNA 胰腺癌 基因治疗 免疫组织化学

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小儿急性肠套叠的治疗进展 被引量：4

2

作者 欧树安 《海南医学院学报》 CAS 2002年第1期57-59,共3页

小儿急性肠套叠是小儿外科急腹症中最常见的病因之一,国内外开展了多种治疗方法,本文通过文献回顾,将有关治疗方法进展综述如下.

关键词 急性肠套叠 冲洗法 气压 结肠镜检查 腹腔镜检查 外科手术 儿童

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PUMA在吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡过程中的作用 被引量：1

3

作者 欧树安 张俊 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第32期13-16,共4页

目的研究吉西他滨体外对人胰腺癌AsPC-1细胞生长的作用机制。方法用脂质体转染法将p53正向凋亡调控因子(PUMA)反义核酸(反义PUMA cDNA)的真核表达载体pcDNA3.1-PUMAAS和空载体pcDNA3.1-导入AsPC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的... 目的研究吉西他滨体外对人胰腺癌AsPC-1细胞生长的作用机制。方法用脂质体转染法将p53正向凋亡调控因子(PUMA)反义核酸(反义PUMA cDNA)的真核表达载体pcDNA3.1-PUMAAS和空载体pcDNA3.1-导入AsPC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。将转染载体的AsPC-1阳性克隆细胞和未转染载体的AsPC-1细胞分别暴露于浓度1、5、10和15μmol/ml的吉西他滨中作用72 h。RT-PCR和Western blotting检测不同组细胞经吉西他滨作用72 h后的PUMA表达;MTT检测细胞生长抑制,流式细胞仪(FCM)、Hoechst 33258荧光染色法和TUNEL法检测细胞凋亡。结果吉西他滨促进AsPC-1细胞凋亡,抑制细胞生长,并有明显的剂量依赖性,在细胞凋亡的同时伴有PUMA表达的上调;当细胞转染PUMA反义核酸抑制PUMA表达后,受吉西他滨作用的细胞出现PUMA蛋白表达明显降低,同时伴有细胞凋亡的抑制及细胞的明显增殖。结论吉西他滨促进体外AsPC-1细胞凋亡,并抑制其生长,其诱导凋亡与上调PUMA有关。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 吉西他滨 细胞凋亡 P53正向凋亡调控因子

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非典型急性阑尾炎误诊186例分析 被引量：13

4

作者 欧树安 《中国误诊学杂志》 CAS 2006年第18期3482-3482,共1页

关键词 阑尾炎/诊断 误诊

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自发性大肠穿孔4例诊治体会

5

作者 欧树安 《海南医学院学报》 CAS 1999年第3期131-131,共1页

关键词 大肠穿孔 诊断 外科手术 少见病

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腹腔不同器官异胚源恶性肿瘤并存一例报告

6

作者 欧树安 《海南大学学报（自然科学版）》 CAS 1997年第1期83-84,共2页

关键词 异胚源恶性肿瘤 结肠平滑肌肉瘤 诊断 腹腔 治疗

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山苦茶的镇痛作用 被引量：35

7

作者 华运群 欧树安 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期235-236,共2页

关键词 山苦茶 镇痛作用 中药 药理

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P53和Bcl-2家族蛋白在胰腺癌中的表达 被引量：3

8

作者 吴幸 崔海宁 +4 位作者 明松林 王正文 欧树安 陈兴超 余壮明 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第4期368-372,共5页

目的:探讨胰腺癌组织(pancreatic carcinoma,PC)中P53和Bcl-2家族(Bcl-2,Bax,Bcl-xL,Bcl-xS)蛋白表达及与细胞凋亡的关系.方法:免疫组化法检测35例PC中P53蛋白表达,将PC分为P53阴性表达组(第1组,n=18)和P53阳性表达组(第2组,n=17);Weste... 目的:探讨胰腺癌组织(pancreatic carcinoma,PC)中P53和Bcl-2家族(Bcl-2,Bax,Bcl-xL,Bcl-xS)蛋白表达及与细胞凋亡的关系.方法:免疫组化法检测35例PC中P53蛋白表达,将PC分为P53阴性表达组(第1组,n=18)和P53阳性表达组(第2组,n=17);Western blot检测两组PC中P53,Bcl-2,Bax,Bcl-xL和Bcl-xS蛋白表达,TUNEL法检测第1组中凋亡指数(AI).结果:Bcl-2蛋白在P53阳性PC表达上调,而在P53阴性PC表达下调(P=0.047);Bax和Bcl-xL蛋白在两组PC中表达都明显上调(P=0.274,0.334);Bcl-xS在P53阳性表达PC明显下调,在P53阴性表达组明显上调(P=0.01);在P53阴性和阳性表达PC,AI分别为12.1±2.47和9.1±1.48(P=0.023);Bcl-2家族各成员表达与AI无相关性,而Bcl-2/Bax比率与AI有明显的相关性(P<0.01).结论:Bcl-2是依赖P53调节的抗凋亡蛋白,Bcl-xS是依赖P53调节的促凋亡蛋白,而P53主要通过调节Bcl-2/Bax比率发挥凋亡调节作用. 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 P53 Bcl-2 Bax BCL-XL Bcl—xS 蛋白免疫印迹法 原位缺口末端标记法

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靶向Slug基因腺相关病毒载体的构建及其抑制视网膜母细胞瘤细胞生长的体外研究 被引量：3

9

作者 王鲜 王旭 欧树安 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第7期644-648,共5页

目的构建并制备携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体。方法首先构建pDC316-EGFP-Slug-siRNA质粒,以PCR鉴定正确的pDC316-EGFP-Slug-siRNA克隆为模板扩增EGFP-Slug-siRNA片段,EcoRI和SalI双酶切后回收PCR产物。酶切pSNAV2.0-LacZ... 目的构建并制备携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体。方法首先构建pDC316-EGFP-Slug-siRNA质粒,以PCR鉴定正确的pDC316-EGFP-Slug-siRNA克隆为模板扩增EGFP-Slug-siRNA片段,EcoRI和SalI双酶切后回收PCR产物。酶切pSNAV2.0-LacZ-α载体质粒,并与上述产物进行连接。转化感受态大肠杆菌DH5α,得到重组质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,酶切和测序对其进行鉴定。建立载体细胞株BHK/Slug-siRNA,大规模制备rAAV2-EGFP-Slug-siRNA并对其纯化、鉴定和滴度测定。将体外培养的视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)细胞转染rAAV-EGFP-Slug-siRNA和pSNAV2.0-EGFP空载体。鸡胚绒毛尿囊膜实验检测血管生成,MTT比色法检测细胞存活率,建立鸡胚绒毛尿囊移植瘤。结果携带编码靶向Slug的小发夹状干扰RNA序列的腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,经PCR、酶切和测序鉴定,质粒构建正确。将构建成功的载体质粒与重组Ⅰ型单纯疱疹病毒HSV1-rc/UL2共转染包装细胞BHK-2,成功复制和包装出重组腺相关病毒rAAV2-EGFP-Slug-siRNA,经检测目的片段插入成功,滴度为90.21×109puf。Slug-siRNA有效抑制RB细胞内Slug表达后,肿瘤血管密度明显降低,血管生成被抑制,细胞存活率明显降低。实体瘤血管生成和生长受到抑制。结论成功制备出高滴度的携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体。干扰Slug可抑制肿瘤血管生成,抑制RB细胞的生长增殖。 展开更多

关键词 SLUG基因 干扰 腺相关病毒 视网膜母细胞瘤 增殖 血管生成

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Slug基因表达抑制对体外胰腺癌细胞生物行为的影响 被引量：2

10

作者 陈彦福 宋彩霞 +2 位作者 王全 欧树安 严明总 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第4期483-486,共4页

目的探讨siRNA干扰Slug基因表达对胰腺癌转移、血管生成和生长的影响。方法用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入AS-PC-1细胞,G418筛选阳性细... 目的探讨siRNA干扰Slug基因表达对胰腺癌转移、血管生成和生长的影响。方法用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入AS-PC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。采用RT-PCR技术检测不同处理组细胞中Slug mRNA表达水平,Western-blot测定Slug蛋白表达水平。观察Slug沉默后及对体外胰腺癌细胞侵袭作用的影响;鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验及CAM移植瘤实验检测Slug沉默对血管生成的影响,MTT比色法检测细胞存活率。结果pSlug-siRNA组细胞内Slug表达被有效沉默。重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,pSlug-siRNA组、对照组、pNeg-siRNA组穿透基底膜细胞数分别为(38±6.56)、(164±15.39)、(159.67±8.96)个/高倍镜(×200),差异分别有统计学意义(P<0.05)。体外实验表明,AsPC-1细胞内Slug表达沉默后,血管密度明显降低,血管生成被抑制,细胞存活率明显降低。结论RNA干扰Slug基因抑制胰腺癌细胞生长、侵袭转移和血管生成,Slug可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点。 展开更多

关键词 胰腺癌 SLUG 干扰 NO瘤转移 血管生成

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靶向Slug基因的腺相关腺病毒载体的构建与鉴定

11

作者 严明总 张克君 +1 位作者 王齐全 欧树安 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第11期1179-1183,共5页

目的:构建并制备携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体.方法:首先构建pDC316-EGFP-Slug-siRNA质粒,以PCR鉴定正确的pDC316-EGFP-Slug-siRNA克隆为模板扩增EGFP-Slug-siRNA片段,EcoRⅠ和SalⅠ双酶切回收的PCR产物;酶切pSNAV2.0-la... 目的:构建并制备携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体.方法:首先构建pDC316-EGFP-Slug-siRNA质粒,以PCR鉴定正确的pDC316-EGFP-Slug-siRNA克隆为模板扩增EGFP-Slug-siRNA片段,EcoRⅠ和SalⅠ双酶切回收的PCR产物;酶切pSNAV2.0-lacz-α载体质粒,并与上述产物进行连接;转化感受态大肠杆菌DH5α,得到重组质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,酶切和测序对其进行鉴定.建立载体细胞株BHK/Slug-siRNA,大规模制备rAAV2-EGFP-Slug-siRAN并对其纯化、鉴定和滴度测定.结果:携带编码靶向Slug的小发夹状干扰RNA序列的腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,经PCR、酶切和测序鉴定,质粒构建正确.将构建成功的载体质粒与重组Ⅰ型单纯疱疹病毒HSV1-rc/?UL2共转染包装细胞BHK-2,成功复制和包装出重组腺相关病毒rAAV2-EGFP-Slug-siRNA,经检测目的片段插入成功,滴度为9.23×1010puf.结论:成功制备出高滴度的携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA病毒载体. 展开更多

关键词 SLUG基因 小干扰RNA 重组腺相关腺病毒

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46,XY,t(1;2)inv(11)世界首报1例分析

12

作者 郑小桃 陈月甘 欧树安 《中国优生与遗传杂志》 2000年第6期50-50,共1页

关键词 46 XY t(1 2)inv(11) 隐睾 染色体异常

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海南山苦茶治疗胆道疾病56例临床观察 被引量：14

13

作者 冯朝义 欧树安 +4 位作者 吴雷震 孟津 徐仲仁 郑忠东 陈宜洪 《海南大学学报（自然科学版）》 CAS 1995年第1期74-76,共3页

山苦茶系大戟科野桐属植物，具有清热解毒、消炎利胆之功能，笔者自１９９２年２月至１９９３年１１月用海南山苦茶对５６例胆道疾病进行临床治疗观察，取得了较好的疗效，总有效率达９６．５％．

关键词 山苦茶 胆囊炎 胆道炎 胆道疾病 治疗

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迈之灵治疗精索静脉曲张36例报告 被引量：5

14

作者 谢送红 欧树安 《中国热带医学》 CAS 2007年第7期1162-1162,1166,共2页

目的探讨迈之灵在治疗精索静脉曲张中的作用。方法选择有症状的精索静脉曲张患者36例,服用迈之灵3个月,观察治疗前后精索静脉曲张导致阴囊疼痛症状的改变、彩超了解精索静脉内径缩小和血流改善情况和精液质量。结果与治疗前相比,1个疗程... 目的探讨迈之灵在治疗精索静脉曲张中的作用。方法选择有症状的精索静脉曲张患者36例,服用迈之灵3个月,观察治疗前后精索静脉曲张导致阴囊疼痛症状的改变、彩超了解精索静脉内径缩小和血流改善情况和精液质量。结果与治疗前相比,1个疗程与3个月后患者症状消失和减轻分别为78.78%、69.69%,精索静脉内径缩小和血流改善分别为44.44%、44.45%,精液质量改善分别为37.75%、29.63%。结论迈之灵治疗轻中度精索静脉曲张效果良好,但对精液质量改善不满意,对重度精索静脉曲张治疗效果不佳。 展开更多

关键词 精索静脉曲张 治疗 迈之灵

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生精胶囊治疗男性不育症45例临床观察 被引量：4

15

作者 谢送红 欧树安 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1785-1786,共2页

目的探讨生精胶囊治疗男性不育的临床疗效,为临床采用中医中药治疗男性不育症提供一种有效方法。方法将符合纳入病例标准的45例患者用生精胶囊进行治疗,每次1.6g,1日3次,90d为1疗程。观察治疗前后临床症状、精液质量指标(活力、活动率... 目的探讨生精胶囊治疗男性不育的临床疗效,为临床采用中医中药治疗男性不育症提供一种有效方法。方法将符合纳入病例标准的45例患者用生精胶囊进行治疗,每次1.6g,1日3次,90d为1疗程。观察治疗前后临床症状、精液质量指标(活力、活动率、密度、畸形等)的变化。结果通过治疗,临床治愈率及总有效率明显提高,疗效满意。结论生精胶囊治疗男性不育症疗效明显,无不良反应;值得临床推广应用。 展开更多

关键词 生精胶囊 男性不育

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小儿腹部手术切口裂开的防治 被引量：2

16

作者 欧树安 《中国基层医药》 CAS 2004年第5期586-586,共1页

关键词 小儿 腹部手术 切口裂开 预防 术后并发症 治疗

原文传递

靶向抑制Slug基因表达对BxPC-3细胞凋亡和对5-FU化疗敏感性影响的实验研究

17

作者 张克君 曹红诗 +2 位作者 欧树安 王齐全 魏小斌 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2010年第12期919-922,共4页

目的:探讨siRNA干扰Slug基因表达对BxPC-3细胞增殖、凋亡和对5-FU化疗敏感性的影响。方法:用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和空载体pGen-esil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入胰腺癌BxPC-... 目的:探讨siRNA干扰Slug基因表达对BxPC-3细胞增殖、凋亡和对5-FU化疗敏感性的影响。方法:用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和空载体pGen-esil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入胰腺癌BxPC-3细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。将转染载体的BxPC-3阳性克隆细胞和未转染载体的BxPC-3细胞分别暴露于系列浓度(0.01～100μmol/L)的5-FU72h。RT-PCR和蛋白质印迹法检测不同组细胞经5-FU作用72h后的Slug表达;MTT法测定各组细胞生存率并计算IC50,Hoechst33258和PI双染色和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞的凋亡。结果:实验组细胞内Slug基因被有效沉默;BxPC-3、Bx-PC-3/pSlug-siRNA和BxPC-3/pNeg-siRNA细胞的5-FUIC50分别为(11.0±2.1)、(1.5±0.4)和(9.7±1.3)μmol/L(P<0.05).BxPC-3/pSlug-siRNA细胞对5-FU作用的敏感性增加了7.33倍。5-FU以剂量依赖方式诱导BxPC-3细胞凋亡,但对BxPC-3/pSlug-siRNA细胞所诱导的凋亡比BxPC-3和BxPC-3/pNeg-siRNA更明显。结论:靶向抑制Slug基因表达促进胰腺癌BxPC-3细胞凋亡,并增强BxPC-3对5-FU的化疗敏感性。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤/药物疗法 基因 slug 氟尿嘧啶

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