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2,3-吲哚醌对肿瘤凋亡抑制因子survivin的影响及作用机制 被引量:3
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作者 周立冬 侯琳 +3 位作者 宋金莲 葛银林 岳旺 欧阳奇琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期800-804,共5页
目的研究2,3-吲哚醌(2,3-dioxoindoline,isatin,ISA)在体外对人神经母瘤细胞(SH-SY5Y)分泌肿瘤凋亡抑制因子survivin的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞,将SH-SY5Y细胞随机分为对照组和ISA不同浓度(10... 目的研究2,3-吲哚醌(2,3-dioxoindoline,isatin,ISA)在体外对人神经母瘤细胞(SH-SY5Y)分泌肿瘤凋亡抑制因子survivin的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞,将SH-SY5Y细胞随机分为对照组和ISA不同浓度(100、200、400μmol.L-1)处理组,采用荧光染色、DNA Ladder分析细胞凋亡,RT-PCR及Westernblot等方法检测不同浓度ISA作用后survivin及p53在mRNA和蛋白水平的变化,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测Caspase-3蛋白水平的变化。结果ISA(100、200、400μmol.L-1)作用SH-SY5Y细胞48h后,在荧光显微镜下观察到400μmol.L-1ISA组细胞出现典型的凋亡形态学改变:核染色质聚集、核碎裂、胞质浓缩;琼脂糖凝胶电泳显示400μmol.L-1ISA处理组细胞出现明显的梯形条带;RT-PCR及Western blot显示:随着ISA药物浓度的增加,survivin mRNA及蛋白表达逐渐减少(P<0.05),野生型p53mRNA及蛋白表达水平逐渐增加,各用药组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),并呈现浓度依赖关系;FCM结果显示随着ISA药物浓度的增加,活化Caspase-3的表达率分别为18.38%、26.93%、35.66%,明显高于对照组(11.23%,P<0.05)。结论ISA能明显诱导SH-SY5Y细胞凋亡,可能机制是抑制凋亡抑制蛋白(IAP)家族中的生存蛋白(survivin)表达继而增加活化Caspase-3水平来实现的,而这一过程可能与ISA上调野生型p53的表达有关。 展开更多
关键词 2 3-吲哚醌 凋亡 SH-SY5Y细胞 SURVIVIN p53 CASPASE-3
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siRNA沉默血管VEGFR-1基因对乳癌生长抑制作用 被引量:2
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作者 王明明 葛银林 欧阳奇琦 《齐鲁医学杂志》 2009年第4期292-294,共3页
目的探讨应用化学修饰的小干扰RNA(siRNA)沉默人裸鼠乳癌移植瘤新生血管中的血管内皮生长因子受体-1(VEGFR-1)基因对移植瘤生长的影响。方法将组织瘤块接种于裸鼠右侧第二对乳腺的脂肪垫内,肿瘤长至一定大小时,随机分为对照(A)组、转染... 目的探讨应用化学修饰的小干扰RNA(siRNA)沉默人裸鼠乳癌移植瘤新生血管中的血管内皮生长因子受体-1(VEGFR-1)基因对移植瘤生长的影响。方法将组织瘤块接种于裸鼠右侧第二对乳腺的脂肪垫内,肿瘤长至一定大小时,随机分为对照(A)组、转染试剂对照(B)组、siRNA治疗(C)组。于肿瘤局部分别注射PBS溶液、Lipofectamine2000TM转染试剂和Lipofectamine2000TM转染试剂包裹的VEGFR-1siRNA。22d后处死全部动物,取肿瘤,测其大小;用RT-PCR及蛋白印迹法检测乳癌组织VEGFR-1基因的表达。结果与A、B组比较,C组移植瘤增长趋势受到明显抑制(F=158.18、55.72,q=11.39、14.05,P<0.01);RT-PCR结果表明,与A、B组比较,C组明显下调了VEGFR-1mRNA的表达(F=385.06,q=33.43,34.52,P<0.01);蛋白印迹法结果亦显示,C组明显下调了VEGFR-1mRNA的表达(F=114.11,q=9.31,20.75,P<0.01)。A组和B组各指标差异无显著性(P>0.05)。结论化学修饰的siRNA介导的RNAi可以降低人乳癌裸鼠移植瘤血管中VEGFR-1的表达,抑制血管生成进而抑制肿瘤的生长,是潜在的肿瘤治疗的新方法。 展开更多
关键词 RNA 小分子干扰 RNA干扰 血管内皮生长因子受体1 乳腺肿瘤
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肺炎患儿血超敏C反应蛋白、WBC及分类的意义 被引量:1
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作者 王明明 徐莉莉 +1 位作者 欧阳奇琦 苏乃伦 《中国医学创新》 CAS 2014年第7期122-124,共3页
目的:分析肺炎患儿血超敏C反应蛋白(hsCRP)、白细胞计数(WBC)及分类(DF)的检测结果,探讨hsCRP、WBC及分类在肺炎患儿诊疗中的临床意义。方法:根据感染病原体的不同将920例肺炎患儿分为细菌组(n=205)、病毒组(n=280)、支原体组(n=435)。... 目的:分析肺炎患儿血超敏C反应蛋白(hsCRP)、白细胞计数(WBC)及分类(DF)的检测结果,探讨hsCRP、WBC及分类在肺炎患儿诊疗中的临床意义。方法:根据感染病原体的不同将920例肺炎患儿分为细菌组(n=205)、病毒组(n=280)、支原体组(n=435)。100例健康体检儿童为对照组。检测并比较各组hsCRP、WBC及分类的不同。结果:细菌组hsCRP、WBC及N%、B%均显著高于对照组(P<0.05);病毒组、支原体组hsCRP及L%高于对照组(P<0.05),N%低于对照组(P<0.05);各感染组组间比较hsCRP、N%及L%的变化均有显著差异(P<0.05)。结论:肺炎患儿联合检测hsCRP、WBC及分类可有效鉴别细菌、病毒、支原体感染,进而指导临床早期诊疗。 展开更多
关键词 超敏C反应蛋白 白细胞计数 白细胞分类 肺炎
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乙醇在HBV DNA转染中对大鼠血睾屏障的影响及其机制探讨(英文) 被引量:1
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作者 王亮 欧阳奇琦 +1 位作者 李茜 王培林 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第1期19-22,F0003,共5页
目的:探讨机体摄入大量乙醇后,血睾屏障(blood-testis barrier,BTB)能否有效阻止含乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA的质粒转染生精小管生精上皮细胞和影响BTB完整性的因素。方法:取20只Wistar成熟雄性大鼠随机分为实验组(A组)... 目的:探讨机体摄入大量乙醇后,血睾屏障(blood-testis barrier,BTB)能否有效阻止含乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA的质粒转染生精小管生精上皮细胞和影响BTB完整性的因素。方法:取20只Wistar成熟雄性大鼠随机分为实验组(A组)和对照组(B组),应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和原位杂交(in situ hybridization,ISH)检测HBVDNA的存在和生精小管的转染情况,应用透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)技术检测BTB与生精内环境的超微结构形态学变化。结果:①PCR:A组样本可见特异的HBVDNA阳性条带;②原位杂交:A组发现阳性杂交信号弥散,可被广泛发现于生精上皮基底室和近腔室的生精细胞上;③TEM:A组大鼠睾的生精小管基膜厚薄不均,基膜组织疏松增厚,成波浪式皱褶,可见基膜断裂,精原细胞与支持细胞及生精小管的基膜之间出现较多空泡,生精小管、生精上皮、生精细胞及支持细胞与相邻细胞之间的间隙扩大。结论:BTB的完整性是其起保护功能的重要基础,乙醇可以破坏其完整性,会使全部生精细胞易受HBV的感染。 展开更多
关键词 乙醇 基因 HBV 垂直传播 BTB
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敲减VEGFR-1基因抑制乳腺癌细胞增殖的研究
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作者 王明明 葛银林 +2 位作者 李泉 张金玉 欧阳奇琦 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第10期1891-1894,共4页
目的:体外水平探讨利用化学修饰的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲减VEGFR-1基因治疗乳腺癌的可行性和特异性。方法:采用阳离子脂质Lipofectamine2000TM作为转染试剂将同时针对人和大鼠VEGFR-1基因的小干扰RNA转染人乳腺癌细... 目的:体外水平探讨利用化学修饰的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲减VEGFR-1基因治疗乳腺癌的可行性和特异性。方法:采用阳离子脂质Lipofectamine2000TM作为转染试剂将同时针对人和大鼠VEGFR-1基因的小干扰RNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7和大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88,敲减VEGFR-1基因的表达;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,半定量RT-PCR,蛋白印迹试验等检测VEGFR-1mRNA和蛋白表达及细胞增殖变化。结果:靶向VEGFR-1基因的siRNA转染细胞后,两种细胞增殖均被抑制,同浓度两细胞株指标无显著差异,VEGFR-1mRNA和蛋白的表达均明显降低。各对照组指标则无显著变化。结论:化学修饰的siRNA介导的RNAi能成功敲减VEGFR-1基因的表达、抑制乳腺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 SIRNA MCF-7细胞 SHZ-88细胞 血管内皮生长因子受体1 基因治疗
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青岛地区孕中期产前筛查指标中位数的建立及其对筛查效率的影响 被引量:12
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作者 俞冬熠 王芳 +8 位作者 刘奇 姜楠 赵炜 任慧颖 韩美艳 张凯 李朔 欧阳奇琦 聂群 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期587-591,共5页
目的建立青岛地区产前筛查本地化中位数数据,评估中位数数据的修正对唐氏综合征产前筛查效率的影响。方法收集2009年1月至2010年7月18188名孕妇的产前筛查数据,用ElipseMediansTool软件拟合出青岛地区本地化中位数数据,并将其应用于2... 目的建立青岛地区产前筛查本地化中位数数据,评估中位数数据的修正对唐氏综合征产前筛查效率的影响。方法收集2009年1月至2010年7月18188名孕妇的产前筛查数据,用ElipseMediansTool软件拟合出青岛地区本地化中位数数据,并将其应用于2010年8月至2011年3月间10984名产前筛查孕妇的风险评估,对两组筛查的检出率、假阳性率及阳性预测值等指标进行比较及统计分析。同时,对其间确诊的45例染色体异常患者,分别用修正前后的中位数数据进行风险评估,并对评估结果进行比较和统计分析。结果(1)青岛地区孕中期孕妇的甲胎蛋白平均水平与Lifecycle软件内嵌参数源人群(高加索人群)基本一致,游离β-绒毛膜促性腺激素较之高11%,雌三醇较之高33%;修正中位数后的产前筛查数据中,各血清标记物的中位数倍数的中位值波动于0.94~1.02之间;(2)修正后的中位数数据应用于风险评估,21三体筛查的假阳性率由5.2%降至4.9%,检出率由60%上升至69.2%,阳性预测值由1:79提高至1:59;(3)已确诊染色体异常病例中,有3例21三体患儿因采用软件内带数据进行评估为低风险而漏诊。结论建立与实验室筛查人群及检测数据高度匹配的中位数数据,可以有效地提高产前筛查和产前诊断的效率。 展开更多
关键词 唐氏综合征 妊娠中期 甲胎蛋白 β-绒毛促性腺激素 游离雌三醇 产前筛查
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青岛地区汉族育龄妇女亚甲基四氢叶酸还原酶基因667位点多态性分布研究
7
作者 欧阳奇琦 赵炜 +1 位作者 李朔 俞冬熠 《中国优生与遗传杂志》 2014年第6期6-7,共2页
目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因667位点多态性在青岛市汉族育龄妇女中的分布状况。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测98份育龄妇女外周血MTHFR C667T基因型分布。结果本研究人群MTHFR 677位点基因... 目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因667位点多态性在青岛市汉族育龄妇女中的分布状况。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测98份育龄妇女外周血MTHFR C667T基因型分布。结果本研究人群MTHFR 677位点基因的CC、CT、TT基因型频率分别为24.5%、53.1%、22.4%,T等位基因频率为0.49。结论青岛市汉族育龄妇女MTHFR基因667位点多态性与其他地区有较大不同,调查可以为相关研究提供相应的分子生物学依据。 展开更多
关键词 亚甲基四氢叶酸还原酶 基因型 汉族育龄妇女 青岛市
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青岛地区270例非综合征性耳聋患者耳聋相关基因突变分析 被引量:6
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作者 李朔 赵炜 +1 位作者 欧阳奇琦 俞冬熠 《中国优生与遗传杂志》 2014年第10期106-107,共2页
目的分析青岛地区遗传性耳聋的基因突变位点。方法对270例非综合征性耳聋患者用基因芯片技术检测4个耳聋相关基因GJB2、GJB3、SLC26A4、线粒体DNA 12SrRNA的9个突变位点。结果 270例患者中检测出耳聋基因突变者113例(41.9%),GJB2基因突... 目的分析青岛地区遗传性耳聋的基因突变位点。方法对270例非综合征性耳聋患者用基因芯片技术检测4个耳聋相关基因GJB2、GJB3、SLC26A4、线粒体DNA 12SrRNA的9个突变位点。结果 270例患者中检测出耳聋基因突变者113例(41.9%),GJB2基因突变71例(26.3%),SLC26A4基因突变37例(13.7%),GJB3基因突变1例(0.4%),线粒体12S rRNA基因突变4例(1.5%)。结论中国人常见的4个致聋基因突变在青岛地区耳聋人群中都有一定的检出率,GJB2基因235delC突变和SLC26A4基因IVS7-2 A>G突变是常见的突变方式。 展开更多
关键词 非综合征型耳聋 基因 突变 基因芯片
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青岛地区1448例高龄孕妇的产前诊断染色体核型分析 被引量:4
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作者 韩美艳 欧阳奇琦 +1 位作者 王芳 俞冬熠 《中国优生与遗传杂志》 2014年第10期67-68,共2页
目的分析高龄孕妇的胎儿染色体核型检查结果,探讨高龄妊娠胎儿染色体异常的风险。方法对1448例高龄孕妇行羊膜腔穿刺,抽取羊水细胞进行培养,制备染色体并对染色体核型进行分析。结果 1448例高龄孕妇,检出异常核型53例,其中常染色体数目... 目的分析高龄孕妇的胎儿染色体核型检查结果,探讨高龄妊娠胎儿染色体异常的风险。方法对1448例高龄孕妇行羊膜腔穿刺,抽取羊水细胞进行培养,制备染色体并对染色体核型进行分析。结果 1448例高龄孕妇,检出异常核型53例,其中常染色体数目异常39例,性染色体异常5例,其他结构异常9例。结论高龄孕妇进行羊水细胞产前诊断是必要的。 展开更多
关键词 高龄孕妇 羊水细胞 产前诊断 染色体核型
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MTHFR基因型多态性与反复自然流产相关性的研究
10
作者 李朔 欧阳奇琦 +1 位作者 俞冬熠 赵炜 《中国优生与遗传杂志》 2012年第12期38-39,共2页
目的研究N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydro-folate reductase,MTHFR)基因位点C677T的多态性与反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)发生的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)... 目的研究N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydro-folate reductase,MTHFR)基因位点C677T的多态性与反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)发生的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)技术检测134例RSA患者和126例正常妇女MTHFR基因C677T位点的分布和频率。结果①RSA组T/T型出现频率高于对照组,C/C型以及C/T+T/T型频率两组没有显著差异。②RSA组的T等位基因频率高于对照组。结论 MTHFR基因位点T/T型突变是RSA的危险因素。 展开更多
关键词 反复自然流产 MTHFR基因
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