吲哚-3-原醇对乙醛所致精密肝切片中星状细胞活化的影响 被引量：5

1

作者 武晓茜 汪晖 廖长秀 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期441-445,共5页

目的利用精密肝切片(PCLS)技术,研究吲哚-3-原醇(I3C)对乙醛活化肝星状细胞(HSCs)的作用及其机制。方法将200～800μmol.L-1的I3C及700μmol.L-1乙醛与PCLS共同孵育6h,免疫组化法分析肝切片中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,并检测培养... 目的利用精密肝切片(PCLS)技术,研究吲哚-3-原醇(I3C)对乙醛活化肝星状细胞(HSCs)的作用及其机制。方法将200～800μmol.L-1的I3C及700μmol.L-1乙醛与PCLS共同孵育6h,免疫组化法分析肝切片中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,并检测培养液中谷胱甘肽S-转移酶(GST)和乳酸脱氢酶(LDH)活性、转化生长因子-β1(TGF-β1)含量、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达量及组织丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(Hyp)含量。结果200～800μmol.L-1I3C可不同程度的减少乙醛激活的HSCs,并可明显降低乙醛升高的培养液中GST、LDH活性和肝组织中MDA和Hyp含量(P<0.05或P<0.01),呈良好的浓度依赖性。I3C给药组与乙醛对照组比较,培养液中TGF-β1含量降低(P<0.01),MMP-1/TIMP-1蛋白表达比值升高(P<0.01)。结论I3C能有效拮抗乙醛所致的HSCs活化,其机制与降低细胞氧化应激和促进基质胶原降解有关。 展开更多

关键词 吲哚-3-原醇 乙醛 精密肝切片技术 肝星状细胞 激活

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精密肝切片中乙醛活化肝星状细胞模型的建立 被引量：2

2

作者 武晓茜 汪晖 +2 位作者 郭喻 廖长秀 吴勇 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第8期913-916,共4页

目的:在精密肝切片中利用乙醛激活肝星状细胞,建立一种星状细胞激活的体外模型,为研究和筛选阻抑肝纤维化发生的药物奠定基础。方法:利用振荡切片机制备精密肝切片,建立培养系统。以700μmol·L-1乙醛孵育切片,培养0、2、4、6h,测... 目的:在精密肝切片中利用乙醛激活肝星状细胞,建立一种星状细胞激活的体外模型,为研究和筛选阻抑肝纤维化发生的药物奠定基础。方法:利用振荡切片机制备精密肝切片,建立培养系统。以700μmol·L-1乙醛孵育切片,培养0、2、4、6h,测定培养基和组织匀浆中谷胱甘肽S-转移酶(GST)、乳酸脱氢酶(LDH)和羟脯氨酸(Hyp)含量,观察病理切片中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果:与0h相比,乙醛培养2、4、6h培养基的GST、LDH漏出量均显著升高(P<0.05)。切片组织Hyp含量6h较0h相比明显升高(P<0.05)。免疫组化片镜下可见4、6h有α-SMA阳性细胞表达,图像分析显示面积和阳性率较0h明显增加(P<0.05)。结论:精密肝切片与终浓度为700μmol·L-1乙醛共孵育6h可活化切片中星状细胞,该技术可作为良好的体外肝星状细胞激活模型。α-SMA免疫组化是一鉴定体外星状细胞激活的可靠指标。 展开更多

关键词 精密肝切片 乙醛 肝星状细胞 激活 平滑肌肌动蛋白

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PCR-SBT 与 IMS-ELISA 法在强直性脊柱炎患者 HLA-B27检测中的比较 被引量：4

3

作者 孙灵迪 梅传忠 +2 位作者 王平均 武晓茜 邵先安 《现代检验医学杂志》 CAS 2015年第2期16-18,共3页

目的：比较聚合酶链反应-直接测序法（polymerase chain reaction sequence-based typing，PCR-SBT）和磁珠酶联免疫法（immunomagnetic separation and enzyme-linked immunosorbent assay，IMS-ELISA）检测人类白细胞抗原 B27（human ... 目的：比较聚合酶链反应-直接测序法（polymerase chain reaction sequence-based typing，PCR-SBT）和磁珠酶联免疫法（immunomagnetic separation and enzyme-linked immunosorbent assay，IMS-ELISA）检测人类白细胞抗原 B27（human leukocyte antigen B27，HLA-B27）在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）临床诊断中的价值。方法应用 PCR-SBT法和 IMS-ELISA 法对120例疑似 AS 患者外周血进行 HLA-B27检测。以 SPSS17.0软件的配对χ^2检验和受试者工作特征曲线下面积对两种方法检测 HLA-B27在 AS 诊断中的价值进行评价。结果120例疑似 AS 患者中，PCR-SBT 和 IMS-ELISA 法 HLA-B27检测阳性率分别为45.83％（55／120）和37.50％（45／120）。两种方法检测 HLA-B27差异有统计学意义（χ2＝59.455，P ＝0.000）。PCR-SBT 法敏感度和特异度分别为96.36％和96.92％；IMS-ELISA 法的敏感度和特异度分别为69.09％和89.23％。两者的 AUC 分别为0.966和0.792。结论与 IMS-ELISA 法相比，在 AS 的临床诊断中PCR-SBT 法检测 HLA-B27的敏感度和特异度更高，方法更优。 展开更多

关键词 聚合酶链反应-直接测序法 磁珠酶联免疫法 人类白细胞抗原B27 强直性脊柱炎

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HLA—B27基因表达量及亚型分析在AS疾病评估中的意义 被引量：3

4

作者 孙灵迪 王平均 +2 位作者 鹿永 武晓茜 邵先安 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第1期58-60,共3页

目的探讨人类白细胞抗原（human leukocyto antigens, HLA）B27（HLA-B27）基因表达量及其亚型在强直性脊柱炎疾病诊疗中的意义。方法收集120例疑似强直性脊柱炎患者和50例健康体检者的临床资料，时所收集患者的全血采用实时荧光定量聚... 目的探讨人类白细胞抗原（human leukocyto antigens, HLA）B27（HLA-B27）基因表达量及其亚型在强直性脊柱炎疾病诊疗中的意义。方法收集120例疑似强直性脊柱炎患者和50例健康体检者的临床资料，时所收集患者的全血采用实时荧光定量聚合酶链反应检测HLA-B27基因相对表达量，在此基础上通过基因测序确认HLA-B27基因亚型。采用SPSS17．0软件对数据进行分析，P〈0.05被认为差异有统计学意义。结果120例疑似强直性脊柱炎患者中，确诊55倒，其中HLA-B27阳性53倒（96．36％），BASDAI评分与HLA-B27基因表达量具有相关性（r=0．845，P=0．000）。基因亚型分剐为HLA-B27：04型29例（54．72％），HLA-B27：05型20例（37．74％），HLA-B27：02型2例（3．77％），HLA-B27：03型1例（1．89％），HLA-B27：07型1例（1．89％）。50例健康对照组中筛查HLA-B27阳性2例（4％），均为B27：04亚型。对HLA-B27：04和HLA-B27：05两种亚型患者年龄（t=0．711，P=0．480）、性别（χ^2=0．880，P=0．348）、家族史（χ^2=0．01l，P=0．916）和治疗史（χ^2=0．113，P=0．736）比较差异无统计学意义。结论HLA-B27阳性AS患者以HLA-B27：04和HLA-B27：05为主。HLA-B27基因表达量与其疾病活动指数相关。 展开更多

关键词 强直性脊柱炎 人类白细胞抗原-B27 基因 表达量 疾病活动指数

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HLA-B27表达量在评估强直性脊柱炎患者疾病状况中的作用 被引量：3

5

作者 王平均 孙灵迪 +1 位作者 武晓茜 邵先安 《现代检验医学杂志》 CAS 2015年第5期153-156,共4页

目的 通过检测人类白细胞抗原B27（HLA-B27）蛋白表达量,结合强直性脊柱炎（AS）的疾病活动指数（BASDAI）评分,探讨HLA-B27表达量可能在AS疾病诊疗中的意义.方法 收集120例临床疑似AS病例和50例健康体检者的一般临床资料,包括性别、年... 目的 通过检测人类白细胞抗原B27（HLA-B27）蛋白表达量,结合强直性脊柱炎（AS）的疾病活动指数（BASDAI）评分,探讨HLA-B27表达量可能在AS疾病诊疗中的意义.方法 收集120例临床疑似AS病例和50例健康体检者的一般临床资料,包括性别、年龄、家族史等,对所收集病例的全血采用磁珠酶联免疫法检测HLA-B27蛋白表达量.采用SPSS17.0数据分析软件进行分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 120例疑似AS患者中,临床最终确诊为AS患者55例,其中人类HLA-B27检测阳性者53例（96.36％）;50例健康对照组中筛查HLA-B27检测阳性2例（4％）.53例HLA-B27阳性AS患者HLA-B27表达量与BASDAI进行相关性分析显示：BASDAI评分与HLA-B27蛋白质表达量（吸光度A值）呈正相关性（r=0.562,P=0.000）.结论 在AS患者中HLA-B27表达量与AS疾病活动指数之间存在相关性,可以为疾病的状态评估提供参考. 展开更多

关键词 人类白细胞抗原 表达量 强直性脊柱炎 疾病活动指数 相关

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聚合酶链反应-直接测序法在强直性脊柱炎患者HLA-B27检测中的应用 被引量：5

6

作者 王平均 孙灵迪 +2 位作者 梅传忠 武晓茜 邵先安 《中国实验诊断学》 2015年第11期1898-1900,共3页

目的探讨聚合酶链反应-直接测序法(polymerase chain reaction sequence-based typing,PCR-SBT)检测人类白细胞抗原B27(human leukocyte antigen B27,HLA-B27)在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)临床诊断中的价值。方法应用PCR-... 目的探讨聚合酶链反应-直接测序法(polymerase chain reaction sequence-based typing,PCR-SBT)检测人类白细胞抗原B27(human leukocyte antigen B27,HLA-B27)在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)临床诊断中的价值。方法应用PCR-SBT法和临床常用的IMS-ELISA法对120例疑似AS患者外周血进行HLA-B27检测。以SPSS17.0软件的配对χ2检验和受试者工作特征曲线下面积对两种方法检测HLA-B27在AS诊断中的价值进行评价。结果 120例疑似AS患者中,PCR-SBT和IMS-ELISA法HLA-B27检测阳性率分别为45.83%(55/120),37.50%(45/120)。两种方法检测HLA-B27有统计学差异(P=0.031)。PCR-SBT法敏感度和特异度分别为96.36%,96.92%;IMS-ELISA法的敏感度和特异度分别为69.09%,89.23%。两者的AUC分别为0.966和0.792。结论与传统的IMS-ELISA法相比,在AS的临床诊断中PCR-SBT法检测HLA-B27的敏感度和特异度更高,方法更优。 展开更多

关键词 聚合酶链反应-直接测序法 磁珠酶联免疫法 人类白细胞抗原B27 强直性脊柱炎

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“ICSTI 2011”信息环境构建分论坛综述

7

作者 姚长青 武晓茜 李颖 《数字图书馆论坛》 2011年第8期16-19,共4页

“信息环境构建”是“迈向知识服务”大会主题下有关信息环境的分论坛。文章在简要总结分论坛总体情况的基础上，重点论述11篇论坛的主题演讲，最后给出要点分析。

关键词 国际科技信息年会2011 信息环境 WEB环境 数字环境

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吲哚-3-原醇对氧化所致肝纤维化发生的影响及其机制研究

8

作者 吴勇 武晓茜 +1 位作者 张春 汪晖 《中国药理通讯》 2006年第3期39-40,共2页

目的：肝星状细胞（HSC）激活是肝纤维化发生、发展的关键环节。本研究利用精密肝切片技术和HSC培养技术，制作乙醛所致肝切片HSC激活模型以及HSC体外自氧化激活模型，研究了十字花科类蔬菜提取物——吲哚-3-原醇（indole-3-carbinol，... 目的：肝星状细胞（HSC）激活是肝纤维化发生、发展的关键环节。本研究利用精密肝切片技术和HSC培养技术，制作乙醛所致肝切片HSC激活模型以及HSC体外自氧化激活模型，研究了十字花科类蔬菜提取物——吲哚-3-原醇（indole-3-carbinol，I3C）对HSC活化的影响及其机制，为寻找有效的抗肝纤维化药物提供实验依据。方法：（1）不同浓度13C（0、200、400、800μmol·L^-1）与乙醛（700μmol·L^-1）共同孵育精密肝切片6h，检测培养液中谷胱甘肽S-转移酶（GST）和乳酸脱氢酶（LDH）活性、转化生长因子-β1（TGF-β1）含量、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及其抑制物（TIMP）表达量，测定组织中丙二醛（MDA）和羟脯氨酸（Hyp）的生成量，用免疫组化法分析组织病理学肝切片中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达量。 展开更多

关键词 吲哚-3-原醇 氧化 肝纤维化 机制

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慢性乙肝患者血清趋化因子MCP-1浓度与病毒载量关系的研究 被引量：2

9

作者 沈红艳 吴俊英 +3 位作者 邵先安 严家春 武晓茜 耿家珍 《现代检验医学杂志》 CAS 2010年第5期31-33,共3页

目的 研究慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血清中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达水平与HBV DNA载量之间的相关性.方法 用ELISA检测CHB患者和健康对照者血清中的MCP-1 蛋白浓度,以实时荧光定量PCR检测CHB患者血清中HBV DNA拷贝数.结果 ... 目的 研究慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血清中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达水平与HBV DNA载量之间的相关性.方法 用ELISA检测CHB患者和健康对照者血清中的MCP-1 蛋白浓度,以实时荧光定量PCR检测CHB患者血清中HBV DNA拷贝数.结果 CHB组血清中MCP-1浓度是157±80 ng/L,健康对照组MCP-1浓度是265±44 ng/L,CHB组血清中MCP-1浓度显著低于健康对照组,t=5.355,P＜0.001,差异有统计学显著性意义;CHB患者血清中MCP-1浓度与血清中HBV DNA拷贝数呈负相关（r=-0.602,P＜0.001）.CHB患者血清中MCP-1的浓度是降低的,MCP-1浓度与血清中HBV DNA 载量之间呈负相关（r=-0.602,P＜0.001）.结论 乙肝病毒与宿主细胞相互作用下调机体MCP-1表达,可能对HBV致病机理的研究提供一个新的视点. 展开更多

关键词 慢性乙型肝炎 单核细胞趋化蛋白-1 HBV DNA 实时荧光定量 PCR

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我国宏观税负存在的问题及其对策 被引量：4

10

作者 陈长宽 武晓茜 《山东工商学院学报》 2004年第1期32-36,共5页

中国实际宏观税负过高,名义宏观税负偏低,主要原因有收费制度不完善、税收收入与经济增长点错位等,解决问题的措施应是完善收费体系、促进税负公平。

关键词 宏观税负 中国 悦制结构 剩余产品率 社会公共需要量 收费制度 经济增长 税收收入

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人β-防御素-3与人表皮生长因子融合蛋白的克隆及原核表达

11

作者 房兵 孙淼 +3 位作者 李友建 武晓茜 耿家珍 邵先安 《蚌埠医学院学报》 CAS 2012年第5期500-504,共5页

目的:克隆融合蛋白d-EGF成熟链基因,构建原核表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)表达体系中进行有效表达、分离纯化并鉴定其特异性。方法:以蛋白基因序列为基础,RT-PCR扩增人防御素-β和表皮生长因子基因,分别构建β-防御素-3(β-defensin... 目的:克隆融合蛋白d-EGF成熟链基因,构建原核表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)表达体系中进行有效表达、分离纯化并鉴定其特异性。方法:以蛋白基因序列为基础,RT-PCR扩增人防御素-β和表皮生长因子基因,分别构建β-防御素-3(β-defensin-3)、EGF重组质粒,应用重组PCR方法,将EGF的DNA序列拼接到β-defensin-3 DNA序列的3'端,将基因克隆入原核表达载体pET-SUMO,构建重组质粒pET-SUMO-d-EGF。采用PCR、测序等方法鉴定后转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,Ni-trap柱纯化,SDS-PAGE检测表达及纯化结果,最后以Western blot对其进行特异性鉴定。结果:成功构建β-defensin-3、EGF重组质粒,经重组PCR成功扩增出294 bp的目的片段,重组体PCR结果与预期结果一致,测序正确。转入重组质粒的E.coli BL21(DE3)经IPTG诱导经SDS-PAGE分析得到28 kDa左右的目的蛋白条带。Western blot鉴定出融合蛋白含有抗EGF、β-防御素-3两种抗原特异性的蛋白。结论:成功构建原核表达载体pET-SUMO-d-EGF,并获得纯化的融合蛋白,为进一步的活性分析奠定了实验基础。 展开更多

关键词 基因表达 Β-防御素 融合蛋白d-EGF 巢氏PCR 免疫应迹分析

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CHB患者MCP-1表达与肝活检组织学积分相关性研究 被引量：1

12

作者 鹿永 沈红艳 +2 位作者 邵先安 李娜 武晓茜 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第8期994-996,共3页

目的研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者肝脏活检组织和血清的表达。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对124例CHB炎患者和20例对照组血清MCP-1水平进行检测,采用免疫组化和实时荧光定量PCR检测CHB患者肝组织中... 目的研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者肝脏活检组织和血清的表达。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对124例CHB炎患者和20例对照组血清MCP-1水平进行检测,采用免疫组化和实时荧光定量PCR检测CHB患者肝组织中MCP-1蛋白和mRNA表达。结果对照组和CHB组血清中MCP-1水平分别是(265±44)ng/L和(157±80)ng/L,CHB组血清MCP-1水平显著低于对照组(t=5.355,P<0.01)。CHB患者血清MCP-1水平与肝组织炎症分级(r=0.353,P=0.011)和纤维化分期(r=0.496,P<0.01)呈正相关。肝组织中MCP-1mRNA水平与炎症分级和纤维化分期呈正相关(r=0.465,P<0.01;r=0.493,P<0.01)。肝组织中MCP-1蛋白表达与炎症分级和纤维化分期呈正相关(r=0.486,P=0.001;r=0.542,P<0.01)。结论 CHB患者血清中MCP-1水平下调,MCP-1表达水平与肝组织炎症分级、纤维化分期呈正相关。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 单核细胞趋化蛋白-1 聚合酶链反应

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