刻点血蜱成蜱中肠菌群结构的分析

1

作者 刘龙江 刘潇雨 +2 位作者 程天印 段德勇 吴平顺 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第4期54-60,共7页

旨在探明雌、雄刻点血蜱中肠菌群结构特征及其差异。从新疆沙湾市绵羊体表采集刻点血蜱雌、雄蜱,无菌条件下收集雌、雄蜱中肠内容物,提取各样本细菌总DNA,PCR扩增细菌16S rDNA V3-V4区,运用Illiumina NovaSeq高通量双末端测序,对数据进... 旨在探明雌、雄刻点血蜱中肠菌群结构特征及其差异。从新疆沙湾市绵羊体表采集刻点血蜱雌、雄蜱,无菌条件下收集雌、雄蜱中肠内容物,提取各样本细菌总DNA,PCR扩增细菌16S rDNA V3-V4区,运用Illiumina NovaSeq高通量双末端测序,对数据进行拼接和过滤,扩增子序列变异(ASVs)降噪与物种注释后,对比分析雌、雄蜱中肠菌群结构的组成及差异。结果:雌蜱中肠菌群多样性高于雄蜱;在门水平上,变形菌门、厚壁菌门、异常球菌门、拟杆菌门、放线菌门在雌、雄蜱中肠内相对丰度较高,其中变形菌门相对丰度最高,为2个样本的优势菌门,且变形菌门在雄蜱中肠内的含量大于雌蜱;在属水平上,Schlegelella、不动杆菌属、拟杆菌属、乳杆菌属、短波单胞菌属、罗姆布茨菌属等在雌、雄蜱中肠内的相对丰度较高,其中Schlegelella的丰度最高,且在雌蜱(41.7%)中的含量高于雄蜱(0.8%);注释到种水平且2个样本共有的菌种包括:西尔瓦诺斯亚栖热菌、鲍曼不动杆菌、柯克斯氏体共生菌、肠乳杆菌、长双歧杆菌、巴氏杆菌拟杆菌等。本研究表明,刻点血蜱雌、雄蜱中肠菌群结构较为相似,但各细菌在不同分类级别上的相对丰度差异较大,这可能与雌、雄蜱吸血及生理特性不同有关。 展开更多

关键词 刻点血蜱 雌蜱 雄蜱 中肠 菌群结构

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褐黄血蜱HSP70-b2及其类14-Mer肽的作用研究 被引量：1

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作者 程天印 吴聪颖 +1 位作者 刘雨珂 段德勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2570-2580,共11页

褐黄血蜱(Haemaphysalis flava,H.flava)热休克蛋白70-b2(heat shock protein 70-b2,HSP70-b2)属于HSP70家族。为评估褐黄血蜱HSP70-b2的抗凝血活性、免疫原性及其类14-Mer肽的作用,本研究通过RACE技术扩增褐黄血蜱HSP70-b 2基因全长;... 褐黄血蜱(Haemaphysalis flava,H.flava)热休克蛋白70-b2(heat shock protein 70-b2,HSP70-b2)属于HSP70家族。为评估褐黄血蜱HSP70-b2的抗凝血活性、免疫原性及其类14-Mer肽的作用,本研究通过RACE技术扩增褐黄血蜱HSP70-b 2基因全长;定点突变其编码类14-Mer肽段序列获得HSP70-b2^(M)基因全长;分别构建原核表达质粒,经原核表达、镍柱层析纯化获得可溶性重组蛋白,体外凝血四项试验评估rHSP70-b2与rHSP70-b2^(M)的抗凝血活性;将重组蛋白与弗氏(不)完全佐剂按推荐剂量乳化,皮下免疫Sprague Dawley(SD)大鼠,间接ELISA检测血清抗体效价,探究rHSP70-b2与rHSP70-b2^(M)的免疫原性。结果显示:HSP70-b 2基因全长2413 bp,开放阅读框长1905 bp,编码蛋白中具有HSP70蛋白家族标签。成功将HSP70-b 2中编码类14-Mer肽段的核酸序列突变为编码14-Mer肽段的核酸序列。与对照组相比,rHSP70-b2和rHSP70-b2^(M)对凝血酶原时间(prothrombin time,PT)和活化部分凝血酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)无显著作用(P>0.05),但均可延长凝血酶时间(thrombin time,TT)和纤维蛋白原(FIB)凝血时间(P<0.05),且rHSP70-b2^(M)与rHSP70-b2的抗血凝效果相近(P>0.05)。大鼠血清中抗体效价随免疫次数的增加而提升,且rHSP70-b2诱导产生的抗体水平极显著高于rHSP70-b2^(M)(P<0.01)。综上表明:rHSP70-b2和rHSP70-b2^(M)在体外可通过延长凝血酶时间和降低纤维蛋白原含量发挥抗凝血作用;rHSP70-b2和rHSP70-b2^(M)均具有良好的免疫原性,可诱发体液免疫。 展开更多

关键词 褐黄血蜱 HSP70-b2 定点突变 原核表达 抗凝活性 免疫原性

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不同种群白纹伊蚊单倍型多态性、遗传分化及种系发育关系分析

3

作者 李中波 侯强红 段德勇 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1452-1460,共9页

【目的】试验旨在探究湖南怀化地区不同种群白纹伊蚊单倍型多态性、遗传分化情况及种系发育关系。【方法】于湖南怀化地区采集30只白纹伊蚊样本,PCR扩增其核糖体18S rRNA及线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因部分序列。利用Clustal... 【目的】试验旨在探究湖南怀化地区不同种群白纹伊蚊单倍型多态性、遗传分化情况及种系发育关系。【方法】于湖南怀化地区采集30只白纹伊蚊样本,PCR扩增其核糖体18S rRNA及线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因部分序列。利用ClustalX软件对其变异位点进行分析;运用Dnasp 5.0、Network 4.6及Arlequin version 3.0软件进行单倍型多态性与遗传分化分析;利用PhyML 3.0及Mega 5.0软件对白纹伊蚊的种系发育关系进行分析。【结果】所获全部样本的18S rRNA和cox 1基因序列长度均为489和1004 bp。白纹伊蚊18S rRNA基因序列中共存在30个变异位点,17个单倍型(A1~A17,Hd=0.9149),其中单倍型A5为最古老的单倍型,白纹伊蚊18S rRNA的基因分化系数(Gst)、遗传分化系数(Fst)和基因流(Nm)分别为0.05614、0.24001和0.792;白纹伊蚊的cox 1基因序列中共存在2个变异位点,3个单倍型(B1~B3,Hd=0.1908),其中单倍型B1为最古老的单倍型,白纹伊蚊cox 1基因的Gst、Fst和Nm分别为0.05000、0.04762和4.999。系统发育树中,来源于怀化地区的30只白纹伊蚊均分别处于2个发育树的一个分支。【结论】来源于湖南怀化地区的白纹伊蚊个体和种群之间存在一定程度基因变异和单倍型多态性现象,但各单倍型及其个体之间具有较近的亲缘关系,且两种群白纹伊蚊个体间发生了较为频繁的基因交流,未出现遗传分化。 展开更多

关键词 白纹伊蚊 单倍型多态性 基因流 遗传分化 种系发育关系

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绵羊虱蝇形态学与分子生物学鉴定 被引量：11

4

作者 段德勇 汪雅琴 程天印 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2181-2188,共8页

绵羊虱蝇是绵羊体表常见的吸血寄生虫,对其形态学特征的研究较少。为提供能够快速、准确辨识此寄生虫的依据,本研究通过超景深三维显微系统和扫描电镜对绵羊虱蝇的形态特点进行了观察,并通过分析18SrRNA基因序列进行了分子学鉴定。结果... 绵羊虱蝇是绵羊体表常见的吸血寄生虫,对其形态学特征的研究较少。为提供能够快速、准确辨识此寄生虫的依据,本研究通过超景深三维显微系统和扫描电镜对绵羊虱蝇的形态特点进行了观察,并通过分析18SrRNA基因序列进行了分子学鉴定。结果显示,绵羊虱蝇翅完全退化,无平衡棒;头部短小阔扁,无单眼,复眼小,触角极短,刺吸式口器;胸部不分节,有3对足,足末端有发达的爪,4对气门;腹部不分节,雌虫腹部大而圆,末端凹陷;雄虫腹部小,末端凸出;周身布满刚毛。18SrRNA测序结果与GenBank中已公布序列相似度为99.59%。结果表明,本研究从甘肃酒泉绵羊体表采集的寄生虫为绵羊虱蝇,且此寄生虫有较易辨识的形态学特征。 展开更多

关键词 绵羊虱蝇 形态学 分子生物学鉴定

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以培养应用型人才为目的的《动物解剖学》教学探索与实践 被引量：3

5

作者 段德勇 屠迪 +2 位作者 刘自逵 曹迎春 陈海涛 《家畜生态学报》 北大核心 2020年第1期91-93,共3页

在课时严重压缩、教学内容繁多、畜牧业快速发展、宠物行业兴起等的新形势下,动物解剖学如何进行课程改革和建设、提高教学质量,是目前所面临的新课题。文章从动物解剖学课程特点出发,在调整教学内容、改善实验室条件、采取不同教学方... 在课时严重压缩、教学内容繁多、畜牧业快速发展、宠物行业兴起等的新形势下,动物解剖学如何进行课程改革和建设、提高教学质量,是目前所面临的新课题。文章从动物解剖学课程特点出发,在调整教学内容、改善实验室条件、采取不同教学方法、充分利用多媒体等方面做了积极的探索和实践,取得了良好的教学效果。 展开更多

关键词 动物解剖学 教学改革 应用能力

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不同饱血状态微小牛蜱中肠和唾液菌群结构的分析 被引量：3

6

作者 段德勇 程天印 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期530-537,共8页

旨在探明微小牛蜱随吸血时间的延长,中肠和唾液微生物菌群结构的差异,以及优势菌属在中肠和唾液中增殖和迁移的特点。在无菌条件下采集半饱血、饱血微小牛蜱唾液和中肠内容物;提取细菌总DNA,PCR扩增其16SrDNA V3-V4区,Illumina MiSeq双... 旨在探明微小牛蜱随吸血时间的延长,中肠和唾液微生物菌群结构的差异,以及优势菌属在中肠和唾液中增殖和迁移的特点。在无菌条件下采集半饱血、饱血微小牛蜱唾液和中肠内容物;提取细菌总DNA,PCR扩增其16SrDNA V3-V4区,Illumina MiSeq双端测序;对序列进行拼接和过滤、OTUs聚类、物种注释及多样性分析。结果显示,共得到134 317条序列,聚类后获得1 304个OTUs,半饱血雌成蜱唾液(SP)、饱血雌成蜱唾液(SF)、半饱血雌成蜱中肠内容物(MP)、饱血雌成蜱中肠内容物(MF)分别获得336、332、269、289个OTUs,其中152个OTUs为4个样本共有;4个样品在门水平上,以变形菌门和厚壁菌门为优势菌门,变形菌门在中肠中的含量大于唾液,而厚壁菌门反之;在属水平上,4个样本以柯克斯体属、不动杆菌属、甲基杆菌属、短波单胞菌属、立克次体属、埃希菌属为优势菌属,其中柯克斯体属、不动杆菌属在4个样本中含量均较大,柯克斯体属在半饱血状态下,含量高于饱血状态;不动杆菌属在唾液中的含量高于中肠。结果表明,微小牛蜱中肠和唾液中有复杂的微生物菌群结构;细菌在不同组织中的分布不同,其含量随吸血时间的延长而发生变化。 展开更多

关键词 微小牛蜱 不同饱血状态 唾液 中肠 菌群结构

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吸血行为对草原革蜱和森林革蜱中肠菌群结构的影响

7

作者 段德勇 周鸿铭 程天印 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期128-136,共9页

本研究旨在探明随吸血时间的延长,草原革蜱和森林革蜱中肠菌群结构的特征及变化。从内蒙古呼伦贝尔和宁夏固原绵羊体表分别采集半饱血、饱血草原革蜱和半饱血、饱血森林革蜱,无菌条件下收集蜱中肠内容物,提取细菌总DNA,扩增细菌16S rDNA... 本研究旨在探明随吸血时间的延长,草原革蜱和森林革蜱中肠菌群结构的特征及变化。从内蒙古呼伦贝尔和宁夏固原绵羊体表分别采集半饱血、饱血草原革蜱和半饱血、饱血森林革蜱,无菌条件下收集蜱中肠内容物,提取细菌总DNA,扩增细菌16S rDNA V3-V4区,IonS5^TMXL高通量测序,对比分析各样本菌群结构的特征。结果显示,森林革蜱半饱血中肠内的细菌多样性最高,草原革蜱饱血和半饱血中肠内的细菌多样性次之,森林革蜱饱血中肠内的细菌多样性最低;变形菌门为4个样品的优势菌门;无形体属、立克次体属、寡养单胞菌属和柯克斯体属为4个样品的优势菌属,其中无形体属在草原革蜱和森林革蜱饱血中肠内的含量高于2种蜱半饱血中肠,立克次体属和柯克斯体属在2种蜱半饱血中肠内的含量明显大于饱血中肠;边缘无形体、弯曲假单胞菌和柯克斯体科RFE02菌为4个样品的优势菌种,其中边缘无形体的分布特点与无形体属在2种蜱中肠内的分布特点相一致。结果表明,草原革蜱和森林革蜱中肠菌群结构易受到吸血行为的影响,共有菌属和菌种在不同蜱种和不同饱血状态下的相对丰度变化较大。 展开更多

关键词 草原革蜱 森林革蜱 中肠 菌群结构 吸血行为

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运用解剖学知识教会学生分析猪发生咳喘的原因

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作者 段德勇 刘自逵 +3 位作者 曹迎春 屠迪 刘进辉 陈海涛 《甘肃畜牧兽医》 2016年第11期35-36,40,共3页

为使学生全面了解和认识当前规模养猪场常见咳嗽和喘气问题,本文从猪呼吸系统解剖结构特点、神经调节方式,营养物质和氧气在体内大、小循环流动规律,代谢产物、二氧化碳和毒素集聚于肺等特征出发,教会学生正确分析猪异常呼吸(咳嗽、喘气... 为使学生全面了解和认识当前规模养猪场常见咳嗽和喘气问题,本文从猪呼吸系统解剖结构特点、神经调节方式,营养物质和氧气在体内大、小循环流动规律,代谢产物、二氧化碳和毒素集聚于肺等特征出发,教会学生正确分析猪异常呼吸(咳嗽、喘气)与饲料和环境安全之间的关系,提高养殖过程中对环境和饲料安全的重视度,有效降低咳嗽和喘气的发生。 展开更多

关键词 咳嗽 喘气 解剖结构 猪

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盐度对罗氏沼虾代谢率的影响 被引量：17

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作者 邹中菊 姜红霞 +3 位作者 段德勇 熊勤 董天红 王玉凤 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期82-84,共3页

测定了4个盐度水平(0‰,3‰,6‰,12‰)下罗氏沼虾雌雄成虾在饥饿状态下的耗氧率和排氨率.结果表明,随着盐度的增高,罗氏沼虾雌雄成虾耗氧率和排氨率都有增高趋势,在3‰盐度时,罗氏沼虾的耗氧率和排氨率最低;在同一盐度水平下,雌虾的耗... 测定了4个盐度水平(0‰,3‰,6‰,12‰)下罗氏沼虾雌雄成虾在饥饿状态下的耗氧率和排氨率.结果表明,随着盐度的增高,罗氏沼虾雌雄成虾耗氧率和排氨率都有增高趋势,在3‰盐度时,罗氏沼虾的耗氧率和排氨率最低;在同一盐度水平下,雌虾的耗氧率和排氨率较雄虾高. 展开更多

关键词 罗氏沼虾 盐度 耗氧率 排氨率 人工养殖 代谢率

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初生与成年牦牛心肌的组织学结构比较 被引量：2

10

作者 孙娟 崔燕 +4 位作者 段德勇 何俊峰 张倩 贺延玉 黄玉风 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期104-111,共8页

为探究牦牛心肌发育过程中组织学结构的变化,采用组织学、组织化学和免疫组织化学方法对初生和成年牦牛心肌的组织学结构、心钠素(ANP)和缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达情况进行了观察。结果显示,初生牦牛心肌细胞数量少且细短,闰盘为直线... 为探究牦牛心肌发育过程中组织学结构的变化,采用组织学、组织化学和免疫组织化学方法对初生和成年牦牛心肌的组织学结构、心钠素(ANP)和缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达情况进行了观察。结果显示,初生牦牛心肌细胞数量少且细短,闰盘为直线型或V型,心肌细胞间以Ⅲ型胶原纤维为主,Ⅰ型胶原纤维较少;成年牦牛心肌细胞粗长,其数量是初生牦牛的2倍,闰盘呈竹节样吻合或阶梯状,心肌细胞间以Ⅰ型胶原纤维为主。初生和成年牦牛,ANP在心房肌细胞中均表达强烈,且右心房表达量显著高于左心房,心室肌细胞中不表达。ANP在普肯耶纤维中有少量表达。初生牦牛心房肌细胞ANP表达量高于成年牦牛。在心肌细胞膜和胞质内,初生牦牛Cx43表达强于成年牦牛,但在闰盘内,成年牦牛Cx43表达强于初生牦牛。Cx43在初生和成年牦牛的普肯耶纤维中均呈膜阳性。结果提示,初生与成年牦牛相比,成年牦牛的心肌细胞变粗长且数量增多,ANP在心房肌表达减弱,Cx43在闰盘表达更显著,说明成年牦牛较初生牦牛适应循环变化的代偿能力呈进行性减弱;细胞间牢固性增加,有助于实现心肌收缩信号的迅速传导。 展开更多

关键词 牦牛 心肌 闰盘 心钠素(ANP) 缝隙连接蛋白43(Cx43)

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不同饱血状态草原革蜱与森林革蜱中肠菌群结构的对比与分析 被引量：2

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作者 侯强红 尧国民 +3 位作者 罗维 王湘 舒鸣 段德勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期207-211,共5页

为探明草原革蜱和森林革蜱不同饱血状态下中肠菌群结构的特点,本研究在无菌条件下分别采集饱血、半饱血草原革蜱和森林革蜱中肠内容物,提取细菌总DNA,PCR扩增细菌16S rRNA V3区,变性梯度凝胶电泳(DGGE)后,切取优势条带纯化、克隆和测序... 为探明草原革蜱和森林革蜱不同饱血状态下中肠菌群结构的特点,本研究在无菌条件下分别采集饱血、半饱血草原革蜱和森林革蜱中肠内容物,提取细菌总DNA,PCR扩增细菌16S rRNA V3区,变性梯度凝胶电泳(DGGE)后,切取优势条带纯化、克隆和测序,测序结果与GenBank数据库中已知细菌序列进行比对分析。结果显示,在饱血、半饱血草原革蜱和森林革蜱中肠4个肠内容物样品中共检测到巴氏立克次体暂定种、柯克斯体科菌、大肠杆菌、嗜吞噬细胞无形体和斑疹伤寒立克次氏体5种细菌,其中半饱血草原革蜱中肠内存在的菌种为:巴氏立克次体暂定种、柯克斯体科菌和大肠杆菌;饱血草原革蜱中肠内存在的菌种为:巴氏立克次体暂定种、柯克斯体科菌和嗜吞噬细胞无形体;半饱血森林革蜱中肠内存在的菌种为:巴氏立克次体暂定种、大肠杆菌和嗜吞噬细胞无形体;饱血森林革蜱中肠内存在的菌种为:巴氏立克次体暂定种、柯克斯体科菌、嗜吞噬细胞无形体和斑疹伤寒立克次氏体;4个样品中的共有菌为巴氏立克次体暂定种。研究结果表明,不同蜱种中肠内菌群的结构随吸血时间的延长而发生变化。本研究将为防治草原革蜱、森林革蜱及相关蜱传病提供科学依据。 展开更多

关键词 DGGE 草原革蜱 森林革蜱 不同饱血状态 中肠 菌群结构

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牦牛心室普肯耶纤维的分布和结构特点 被引量：5

12

作者 李朝旭 段德勇 崔燕 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期79-84,共6页

目的探讨牦牛心室普肯耶纤维的分布和结构特点,为高原哺乳动物心室传导系统的研究积累形态学资料。方法采用墨汁灌注、ABS树脂灌注铸型,石蜡切片HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色技术,观察60只成年牦牛的心室普肯耶纤维分布及结构... 目的探讨牦牛心室普肯耶纤维的分布和结构特点,为高原哺乳动物心室传导系统的研究积累形态学资料。方法采用墨汁灌注、ABS树脂灌注铸型,石蜡切片HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色技术,观察60只成年牦牛的心室普肯耶纤维分布及结构特征。结果牦牛心室普肯耶纤维束周围包绕有结缔组织鞘。左束支在室间隔内膜下层有2条或3条分支;右束支经隔缘肉柱在右前乳头肌根部心肌层中有3条或4条分支。心室普肯耶纤维在心内膜下层呈多边形网状分布,并在心肌层中发出大量分支,左、右心室乳头肌顶端内膜下层未观察到普肯耶纤维分布。普肯耶纤维呈卷轴状、蜂窝状、漏斗状或脊状构型。Cx43在普肯耶纤维呈膜阳性。结论ABS树脂灌注铸型技术能用于心室普肯耶纤维分布的研究。牦牛心脏左束支和右束支呈不对称分布,左束支较发达。 展开更多

关键词 普肯耶纤维 ABS铸型 墨汁灌注 免疫组织化学 牦牛

原文传递

虚拟现实技术在动物组织胚胎学实验教学中的探索与实践 被引量：4

13

作者 张虹亮 王水莲 +2 位作者 段德勇 屠迪 刘进辉 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第3期118-120,I0006,共4页

动物组织胚胎学是畜牧兽医专业必修课程,属于专业基础课。该课程是一门形态学课程,教学主要包括理论课和实验课2部分。其中,实验课主要是通过验证理论课所学知识,使学生进一步巩固和加强理论课所学内容,加深他们对理论知识的理解和记忆... 动物组织胚胎学是畜牧兽医专业必修课程,属于专业基础课。该课程是一门形态学课程,教学主要包括理论课和实验课2部分。其中,实验课主要是通过验证理论课所学知识,使学生进一步巩固和加强理论课所学内容,加深他们对理论知识的理解和记忆,同时培养学生理论联系实际、抽象联系具体及动手观察能力。动物组织胚胎学实验课的传统教学模式是学生们结合理论课所学的组织和器官微观结构特点,通过显微镜观察教学切片中的细胞、组织和器官微观形态,并在当堂课上绘制组织切片图,最终通过实验操作考试评价学生的学习情况。因此,学生能否正确理解和掌握动物组织形态结构,是本实验课教学效果评价的核心部分。通过一线教学我们发现,通常实验课前很多学生对于理论课所学的知识点都会有不同程度的遗忘,这在一定程度上影响了实验课的教学效果,降低了学生对实验课的积极性和热情,如何让学生在实验课开始前复习回想起理论课所学的内容,对于一些重点的组织结构能先有一个整体的认识,是动物组织胚胎学实验教学中需要重点解决的问题。 展开更多

关键词 动物组织胚胎学 教学效果评价 实验操作考试 畜牧兽医专业 虚拟现实技术 实验课 组织形态结构 理论联系实际

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犬正常发情期与患子宫蓄脓的子宫和卵巢组织结构及乳铁蛋白表达的对比 被引量：2

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作者 刘雨珂 徐倩倩 +3 位作者 孙佩芳 陈美伊 刘铭峰 段德勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1103-1114,共12页

本研究旨在探明犬子宫和卵巢在正常发情期与患子宫蓄脓时,其组织结构及乳铁蛋白(lactoferrin, LF)表达的变化特征。应用Masson’s、VVG、PAS组织化学染色方法观察乏情期、发情期、患子宫蓄脓时犬子宫及卵巢的组织结构特点,用免疫组织化... 本研究旨在探明犬子宫和卵巢在正常发情期与患子宫蓄脓时,其组织结构及乳铁蛋白(lactoferrin, LF)表达的变化特征。应用Masson’s、VVG、PAS组织化学染色方法观察乏情期、发情期、患子宫蓄脓时犬子宫及卵巢的组织结构特点,用免疫组织化学SP法观察LF的分布特征。结果显示,正常发情期犬:乏情期、发情期子宫内膜肌层厚度比分别为0.762 0、0.924 3;乏情期子宫固有层中胶原纤维含量大于发情期,发情期卵巢中胶原纤维含量大于乏情期;子宫血管层及卵巢血管内弹性膜清晰完整;子宫腺在乏情期时浅层管腔小,深层较大、腺管上皮为单层柱状上皮、上皮细胞及管腔内PAS阳性反应较强,发情期子宫腺管腔变大、腺管上皮为单层立方上皮、上皮细胞及管腔内有PAS阳性反应;子宫黏膜上皮在乏情期和发情期均为单层柱状上皮,但胞核位置不同,乏情期胞核位于中央,发情期胞核位于顶部。患子宫蓄脓犬:子宫内膜肌层厚度比为1.615 0;子宫固有层和卵巢中胶原纤维含量少于正常发情期;子宫腺管腔大,且形状不规则,管腔内有炎性细胞浸润,腺管上皮为单层立方上皮,有淋巴细胞位于基膜,上皮细胞及管腔内PAS阳性反应较弱;子宫血管层及卵巢血管内弹性膜较正常发情期变薄,且有断裂现象;子宫黏膜上皮为单层柱状上皮,胞核位于基底。LF在乏情期子宫腺上皮和卵巢中的表达水平高于发情期,而在子宫黏膜上皮中发情期的表达水平高于乏情期。患子宫蓄脓时犬子宫和卵巢中LF的表达水平均较低。综上表明,犬正常发情期与患子宫蓄脓时的子宫和卵巢组织结构特点显著不同,LF的表达水平也存在差异。 展开更多

关键词 正常发情期 子宫蓄脓 犬子宫和卵巢 组织结构 乳铁蛋白表达

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波斯锐缘蜱的形态学和分子标记特征 被引量：3

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作者 段德勇 刘国华 程天印 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期990-997,共8页

为了精准鉴定波斯锐缘蜱,从新疆、甘肃、河北等地采集寄生蜱,借助体视显微镜超景深系统对其形态学特征进行观察;经PCR扩增、测序获得其16S rDNA和cox1基因序列,结合GenBank数据库中参考序列,比对分析同源性并构建系统进化树。结果显示,... 为了精准鉴定波斯锐缘蜱,从新疆、甘肃、河北等地采集寄生蜱,借助体视显微镜超景深系统对其形态学特征进行观察;经PCR扩增、测序获得其16S rDNA和cox1基因序列,结合GenBank数据库中参考序列,比对分析同源性并构建系统进化树。结果显示,波斯锐缘蜱幼蜱形态与其他发育阶段差异较大,其体型较小,背、腹表面光滑,无盘窝,生殖孔未形成,足3对。若蜱除生殖孔不显著外,其他形态结构均与成蜱相似。雌、雄成蜱形态学差异主要为:雌蜱生殖孔呈横裂形,雄蜱生殖孔呈半圆形。同时,在16S rDNA和cox1基因序列的邻位相接系统进化树中,波斯锐缘蜱分布于两大进化枝之一的软蜱科,同种聚类良好。结果提示:波斯锐缘蜱具有显著、易辨识、易鉴定的形态学和分子标记特征。 展开更多

关键词 波斯锐缘蜱 形态学 分子标记 特征

原文传递

爪哇花蜱的形态学和分子标记特征

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作者 段德勇 张清飞 +1 位作者 周鸿铭 程天印 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2166-2172,共7页

为了便于识别和鉴定爪哇花蜱,本试验从湖南省长沙市南郊公园穿山甲体表采集了爪哇花蜱,并借助体视显微镜超景深系统观察雌、雄成蜱的形态结构,通过分子生物学技术测定了COX1和16SrDNA基因序列。结果显示,雌性成蜱假头基呈矩形;孔区小而... 为了便于识别和鉴定爪哇花蜱,本试验从湖南省长沙市南郊公园穿山甲体表采集了爪哇花蜱,并借助体视显微镜超景深系统观察雌、雄成蜱的形态结构,通过分子生物学技术测定了COX1和16SrDNA基因序列。结果显示,雌性成蜱假头基呈矩形;孔区小而深;须肢前宽后窄,第2节长;盾板暗赤褐色,无珐琅斑,心脏形;眼小而扁平,不明显,仅见一痕迹;肛沟位于肛门后;气门板呈逗点形。雄性成蜱假头基、须肢、眼、肛沟和气门板特征与雌蜱相一致;盾板特点为呈宽卵圆形,无珐琅斑,周缘暗赤褐色,中部稍浅,呈黄褐色。爪哇花蜱COX1基因序列与国外花蜱属蜱种Amblyomma fimbriatum、Amblyomma triguttatum等的COX1基因序列相似度均为83%;爪哇花蜱16SrDNA基因序列与嗜龟花蜱、龟形花蜱等花蜱的16SrDNA基因序列相似度为85%~88%,相似度均较低。结果表明:爪哇花蜱具有显著、易辨识、易鉴定的形态学和分子标记特征。 展开更多

关键词 爪哇花蜱 形态学 分子标记 特征

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绵羊虱蝇中肠和蛹菌群结构的分析 被引量：8

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作者 汪雅琴 程天印 段德勇 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期861-865,共5页

为探明绵羊虱蝇雌、雄成虫中肠及蛹的菌群结构特点,提供防控绵羊虱蝇及其传播疾病的科学依据,本研究在无菌条件下采集雌、雄绵羊虱蝇成虫中肠内容物及蛹内容物,用试剂盒提取细菌总DNA,运用通用引物PCR扩增细菌16S r DNA V3区,DGGE电泳,... 为探明绵羊虱蝇雌、雄成虫中肠及蛹的菌群结构特点,提供防控绵羊虱蝇及其传播疾病的科学依据,本研究在无菌条件下采集雌、雄绵羊虱蝇成虫中肠内容物及蛹内容物,用试剂盒提取细菌总DNA,运用通用引物PCR扩增细菌16S r DNA V3区,DGGE电泳,选取优势条带,回收、测序,测序结果与Gen Bank数据库中已知序列进行比对。结果显示,雌、雄绵羊虱蝇成虫中肠及蛹的优势菌均为巴尔通氏体、杀雄菌、沃尔巴克氏体。研究结果表明,雌、雄绵羊虱蝇成虫中肠及蛹的菌群结构相似,且巴尔通氏体、杀雄菌、沃尔巴克氏体可垂直传播。 展开更多

关键词 DGGE 绵羊虱蝇 中肠 蛹 菌群结构

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豪猪血蜱的形态学和分子生物学鉴定 被引量：2

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作者 刘雨珂 王爱兵 +3 位作者 刘国华 刘磊 程天印 段德勇 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期214-222,共9页

为豪猪血蜱的鉴定提供准确依据,从湖南省怀化地区猪獾体表采集蜱,运用体视显微镜超景深系统观察其形态学特征;提取蜱体壁总DNA,经PCR扩增测序获得其COX1、ITS2和16S rDNA基因序列,与GenBank数据库中序列比对,并构建系统发育树,进行同源... 为豪猪血蜱的鉴定提供准确依据,从湖南省怀化地区猪獾体表采集蜱,运用体视显微镜超景深系统观察其形态学特征;提取蜱体壁总DNA,经PCR扩增测序获得其COX1、ITS2和16S rDNA基因序列,与GenBank数据库中序列比对,并构建系统发育树,进行同源性分析。结果显示,该蜱种雌蜱呈南瓜子形,前窄后宽;假头基为矩形,基突后缘短薄,末端刺宽圆;孔区圆形;须肢圆短,第3节背面有1对刺;盾板两侧缘呈深弧状弯曲,刻点散布均匀;颈沟短而深;缘垛较宽但不明显;无外距,内距粗短呈锥状;生殖孔为圆形,前端与基节Ⅱ中部平行,后端止于基节Ⅲ前缘;气门板呈逗点形;肛门圆形,肛沟位于肛后呈酒杯状。雄蜱除体型较小、体色较浅、盾板覆盖全背、颈沟短而浅、缘垛明显形状狭长、生殖孔与基节Ⅱ平行饱满呈唇形、肛门平行于第1缘垛呈圆形突出状、肛沟呈马蹄状等特征外,其他结构与雌蜱的相似。该蜱种COX1、ITS2和16SrDNA基因序列大小分别为749、1 656和440 bp。经测序比对,该蜱种COX1、16SrDNA基因序列与GenBank中已有豪猪血蜱COX1、16S rDNA基因序列的相似度分别可达99.21%、99.32%以上;该蜱种ITS2基因序列在GenBank中尚未有记录,其仅与长角血蜱ITS2基因序列(KX450306)的相似度较高为91.32%。通过COX1、ITS2和16S rDNA基因系统发育树分析,该蜱种与其他血蜱种聚于同一属分支下。结果表明,从猪獾体表采集的蜱种为豪猪血蜱,结合形态结构及分子标记特征较易鉴定该蜱种。 展开更多

关键词 豪猪血蜱 形态学 分子标记特征 系统发育树

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草原革蜱和森林革蜱形态结构与分子标记的比较 被引量：4

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作者 周鸿铭 程天印 段德勇 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期317-323,共7页

为了比较草原革蜱(采自内蒙古呼伦贝尔)和森林革蜱(采自宁夏固原)的形态结构与分子标记异同点,借助体视显微镜超景深系统观察了这2种蜱的形态结构;通过分子生物学技术,测定了这2种蜱COX1、ITS2及16S rDNA基因序列,并通过比对这3种基因... 为了比较草原革蜱(采自内蒙古呼伦贝尔)和森林革蜱(采自宁夏固原)的形态结构与分子标记异同点,借助体视显微镜超景深系统观察了这2种蜱的形态结构;通过分子生物学技术,测定了这2种蜱COX1、ITS2及16S rDNA基因序列,并通过比对这3种基因的同源性、构建系统发生树,分析了这2种蜱的分子标记差异。结果显示,这2种蜱均具有珐琅斑,须肢粗短,缘垛整齐等革蜱属的典型特征。草原革蜱珐琅彩浓厚且色浅呈银白色,刻点小且分布均匀、夹杂少数大刻点,背突直而短,缘垛分布均匀;森林革蜱珐琅彩覆盖大部分盾板且色深呈深褐色,刻点粗细混杂、分布较为稠密,背突向背方弯曲,尾部缘垛较其他缘垛窄;两者具有显著的形态学差异。草原革蜱COX1、ITS2、16S rDNA基因序列与GenBank中已知草原革蜱基因序列的相似度分别为99.88%、99.90%、97.58%;森林革蜱COX1、ITS2、16S rDNA基因序列与GenBank中已知森林革蜱基因序列的相似度分别为98.64%、98.60%、99.53%。进一步对比这2种蜱的COX1、ITS2、16S rDNA基因序列,发现其相似度分别为99.76%、99.75%、98.29%。结果提示:虽然草原革蜱和森林革蜱形态学差异显著,但COX1、ITS2、16S rDNA基因序列相似度极高,两者可能为同一种的不同亚种或COX1、ITS2、16S rDNA基因不适用于革蜱属的种间鉴定。 展开更多

关键词 草原革蜱 森林革蜱 形态学 分子标记 差异分析

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猪圆环病毒2型LAMP可视化检测方法的建立与应用 被引量：1

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作者 廖帆 谭磊 +3 位作者 雷磊 湛洋 段德勇 王爱兵 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期679-684,共6页

为建立一种适用于猪圆环病毒2型(PCV2)现场、快速、可视化检测方法,本研究根据PCV2ORF1基因中的保守序列设计合适的环介导等温扩增(LAMP)引物对,优化反应体系及条件,并评估该方法的灵敏度和特异性。结果显示,63℃恒温扩增45 min即可出... 为建立一种适用于猪圆环病毒2型(PCV2)现场、快速、可视化检测方法,本研究根据PCV2ORF1基因中的保守序列设计合适的环介导等温扩增(LAMP)引物对,优化反应体系及条件,并评估该方法的灵敏度和特异性。结果显示,63℃恒温扩增45 min即可出现梯形条带,检测下限为1.0×10^(1)copies/μL,较普通PCR敏感性提高100倍,且当产物中加入SYBR GreenⅠ染料后可实现可视化检测。应用该方法对72份临床样品进行检测,结果显示,PCV2阳性率为47.2%(34/72),与qPCR检测的符合率为98.6%(71/72),与普通PCR的符合率为94.4%(68/72)。结果表明,该基于LAMP的检测方法具有敏感特异、简便快捷、可视化的特点,为PCV2临床检测提供了一种新的选择。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 ORF1基因 环介导等温扩增技术 可视化

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