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弓形虫GRA6-GRA2蛋白表达及检测应用
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作者 张宁 刘伟 +5 位作者 吴铭洁 夏霖亚 王蕾 殷玉和 石晶 吴丛梅 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第3期91-98,共8页
为建立一种敏感性好、特异性强、方便快捷的检测猫弓形虫抗体的方法,本研究通过分子生物学方法、优化合成了GRA1-GRA7、SAG1和GRA6-GRA2基因,采用大肠杆菌ER2566表达了GRA1-GRA7、SAG1和GRA6-GRA2三种蛋白;表达产物利用His亲和层析柱纯... 为建立一种敏感性好、特异性强、方便快捷的检测猫弓形虫抗体的方法,本研究通过分子生物学方法、优化合成了GRA1-GRA7、SAG1和GRA6-GRA2基因,采用大肠杆菌ER2566表达了GRA1-GRA7、SAG1和GRA6-GRA2三种蛋白;表达产物利用His亲和层析柱纯化后,经Western blot鉴定三种蛋白表达产物都有较好的抗原特异性;通过ELISA方法进行检测比较,确定GRA6-GRA2蛋白敏感性最高;以GRA6-GRA2蛋白作为标记抗原,制备弓形虫抗体检测试纸条,分别对敏感性对照阳性血清、特异性对照血清进行检测,并与弓形虫抗体间接血凝法对289份临床血清进行对比检测。结果表明:检测敏感性对照阳性血清可检测至1∶256,检测临床常见的猫细小病毒阳性血清、猫杯状病毒阳性血清和猫疱疹病毒阳性血清结果均为阴性;在弓形虫抗体检测试纸条和弓形虫抗体间接血凝法对289份临床血清的对比检测中,阳性率分别为2.42%和2.07%,符合率为99.5%。通过以上结果可知,采用GRA6-GRA2蛋白作为诊断抗原制备的胶体金试纸,具有良好的敏感性和特异性,为弓形虫病的快速诊断提供了切实可行的检测手段。 展开更多
关键词 弓形虫 抗原 GRA6-GRA2蛋白
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UPLC-Q Exactive Plus-MS分析高粱壳化学成分及黄嘌呤氧化酶体外抑制活性筛选
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作者 张瀚水 龚本义 +4 位作者 南敏伦 赫玉芳 赵昱玮 吴丛梅 殷玉和 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1587-1594,共8页
采用高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱对高粱壳中的化学成分进行分析鉴定,并通过高效液相色谱法筛选抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。该实验使用Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(2.1 nm×30 nm,3μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯... 采用高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱对高粱壳中的化学成分进行分析鉴定,并通过高效液相色谱法筛选抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。该实验使用Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(2.1 nm×30 nm,3μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱,流速1.0 m L/min,进样量10μL。质谱分析采用ESI离子源,在正离子模式下采集数据,利用Xcalibur 4.1软件结合数据库对所得数据进行分析,共鉴定出27种化学成分。对刺槐素、葛根素、芹菜素、根皮苷、异鼠李素和3,3’,4’,7-四羟基黄酮6种化学成分进行活性筛选,发现芹菜素和3,3’,4’,7-四羟基黄酮对黄嘌呤氧化酶(XO)表现出较强的抑制活性,IC_(50)分别为18.11和34.59μmol/L。 展开更多
关键词 高粱壳 化学成分鉴定 质谱碎裂机理 黄嘌呤氧化酶 抑制活性成分
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发酵诺丽果汁对高尿酸血症细胞模型的保护作用及其机制研究
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作者 柳越 毕樱馨 +8 位作者 殷玉和 陈长武 孟祥龙 王梦媛 王铭传 陈昕莹 李占东 刘咸筠 李皓 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第14期370-376,共7页
目的:探究发酵诺丽果汁(fermented noni(Morinda citrifolia)fruit juice,FNJ)对高尿酸血症人肾皮质近曲小管上皮细胞(Human renal proximal tubular epithelial cells,HK-2)的保护作用并阐述其机制。方法:制备诺丽果浆,果胶酶和植物乳... 目的:探究发酵诺丽果汁(fermented noni(Morinda citrifolia)fruit juice,FNJ)对高尿酸血症人肾皮质近曲小管上皮细胞(Human renal proximal tubular epithelial cells,HK-2)的保护作用并阐述其机制。方法:制备诺丽果浆,果胶酶和植物乳杆菌发酵处理后获得发酵诺丽果汁。利用腺苷联合黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XO)建立HK-2细胞高尿酸血症模型;通过CCK-8实验检测发酵诺丽果汁对HK-2细胞的细胞毒性;检测发酵诺丽果汁干预后HK-2细胞培养液上清中尿酸含量以及通过Western blot法检测细胞中尿酸盐转运蛋白1(Urate anion transporter 1,URAT1)和葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9,GLUT9)的表达水平,验证发酵诺丽果汁对高尿酸血症HK-2细胞的降尿酸作用;通过检测HK-2细胞中白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平,确定发酵诺丽果汁对高尿酸血症HK-2细胞中炎症反应的作用;通过检测HK-2细胞中磷酸化核转录因子-κB(Nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)p-p65/p65的表达水平,验证发酵诺丽果汁对NF-κB信号通路的抗炎作用。结果:处理浓度低于60μL/mL时,发酵诺丽果汁不表现细胞毒性;发酵诺丽果汁干预后细胞培养液上清中的尿酸含量显著下降并呈剂量依赖性;发酵诺丽果汁干预组的URAT1、GLUT9表达较模型组显著降低;发酵诺丽果汁可以显著抑制高尿酸血症HK-2细胞模型中IL-1β和TNF-α的表达水平;发酵诺丽果汁可以显著抑制疾病模型中p-p65/p65的表达。结论:发酵诺丽果汁对高尿酸血症HK-2细胞起到降尿酸作用,进而通过调控NF-κB信号通路抑制了炎症反应,从而发挥保护作用。 展开更多
关键词 发酵诺丽果汁 高尿酸血症 HK-2细胞 NF-ΚB信号通路
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中空纤维超滤和疏水层析大规模纯化质粒DNA 被引量:4
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作者 殷玉和 孙博 +2 位作者 郭丽姝 所丹 孔维 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期133-135,共3页
目的建立适合大规模纯化质粒DNA的工艺。方法采用碱裂解、中空纤维超滤浓缩、疏水层析、分子筛等分离技术纯化质粒DNA。结果纯化后的质粒DNA纯度达95%以上,整个工艺流程总产率为58%,各项指标均符合药用质粒DNA质量标准。结论此纯化工艺... 目的建立适合大规模纯化质粒DNA的工艺。方法采用碱裂解、中空纤维超滤浓缩、疏水层析、分子筛等分离技术纯化质粒DNA。结果纯化后的质粒DNA纯度达95%以上,整个工艺流程总产率为58%,各项指标均符合药用质粒DNA质量标准。结论此纯化工艺简便,产率较高,为DNA疫苗大规模纯化奠定了基础。 展开更多
关键词 质粒 超滤 疏水层析
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重组质粒DNA D-GPEi工程菌发酵工艺的优化 被引量:1
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作者 殷玉和 高冷 +1 位作者 吴丛梅 李东风 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期150-152,共3页
目的优化重组质粒D-GPEi工程菌发酵工艺条件。方法控制相关发酵参数,观察溶解氧浓度、比生长速率和培养时间对工程菌生长和质粒浓度的影响。结果发酵培养对数生长期溶解氧浓度控制在30%-50%。补料前比生长速率为0.5-0.7/h,6 h开始补料,... 目的优化重组质粒D-GPEi工程菌发酵工艺条件。方法控制相关发酵参数,观察溶解氧浓度、比生长速率和培养时间对工程菌生长和质粒浓度的影响。结果发酵培养对数生长期溶解氧浓度控制在30%-50%。补料前比生长速率为0.5-0.7/h,6 h开始补料,比生长速率下降,12 h后比生长速率为0.1-0.2/h。连续发酵3批工程菌,21 h后收集菌体,得到菌体平均产量为89.4 g/L(A=52.6),质粒平均产量为359.8 mg/L。3批工程菌浓度和质粒拷贝数差异无显著意义。结论此发酵工艺得到工程菌浓度和质粒拷贝数较高,重复性好,适用于大规模工业化生产。 展开更多
关键词 工程菌 发酵工艺 质粒DNA 溶解氧浓度 比生长速率
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靶向RNA药物检测和筛选的生物物理学方法 被引量:2
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作者 殷玉和 王颖 傅学奇 《生命的化学》 CAS CSCD 2001年第3期234-237,共4页
关键词 靶向RNA药物 药物检测 药物筛选 生物物理学方法
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犬干扰素α制备工艺的优化 被引量:1
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作者 殷玉和 李莹莹 +1 位作者 刘新涛 吴丛梅 《中国兽药杂志》 2012年第3期44-47,共4页
根据Genbank的犬干扰素α序列,经密码子优化后,设计并合成了编码CaIFN-α蛋白的基因片段。CaIFN-α基因与pBV220温度诱导表达载体连接,转化大肠杆菌BL21。经培养、升温诱导表达,目的蛋白以包涵体的形式存在,蛋白分子量约为18000,蛋白表... 根据Genbank的犬干扰素α序列,经密码子优化后,设计并合成了编码CaIFN-α蛋白的基因片段。CaIFN-α基因与pBV220温度诱导表达载体连接,转化大肠杆菌BL21。经培养、升温诱导表达,目的蛋白以包涵体的形式存在,蛋白分子量约为18000,蛋白表达量为25%。菌体经超声破碎、变性、复性后,目的蛋白纯度为69%,收率为28%;疏水层析后,目的蛋白纯度87%,收率为81%;分子筛层析后,目的蛋白纯度为96%,收率为90%。纯化的CaIFN-α蛋白的生物学比活性为3×107 IU/mg,内毒素≤10 EU/mg,符合兽用药要求。此制备工艺总产率高达20%、重现性好,适用于大规模生产。 展开更多
关键词 犬干扰素α 原核表达 纯化 质量
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异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的优化筛选 被引量:3
8
作者 吴丛梅 赵韫慧 +2 位作者 李莹莹 孙宝娲 殷玉和 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期581-586,共6页
利用噬菌体肽库筛选与计算机模拟分子对接技术,优化异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的筛选.先通过噬菌体肽库筛选出与异柠檬酸裂解酶(ICL)具有高亲和力的结合肽,再利用Discovery Studio 2.1模拟多肽与ICL蛋白晶体(1F8I)的分子对接,最后用Fmoc... 利用噬菌体肽库筛选与计算机模拟分子对接技术,优化异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的筛选.先通过噬菌体肽库筛选出与异柠檬酸裂解酶(ICL)具有高亲和力的结合肽,再利用Discovery Studio 2.1模拟多肽与ICL蛋白晶体(1F8I)的分子对接,最后用Fmoc固相合成法合成多肽,并对其生物活性进行检测.实验结果表明,通过噬菌体肽库筛选得到了29条七肽序列,其中12条可与ICL蛋白晶体成功对接.体外生物活性检测结果显示,得到的12条七肽均对ICL的活性有明显抑制作用(抑制率均超过50%). 展开更多
关键词 异柠檬酸裂解酶 肽类抑制剂 噬菌体肽库 虚拟筛选 分子对接
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肽类化合物对H_(37)Ra抑制的优化筛选 被引量:1
9
作者 吴丛梅 李玲玲 +3 位作者 关晓侠 刘新涛 陈吉 殷玉和 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期196-201,共6页
通过抑菌试验,确定不同培养基条件下多肽化合物的抑菌效果,并测定其最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。加入Vc,比较抑菌效果,进一步优化筛选H37Ra抑制剂。先根据ELISA试验结果进行噬菌体肽库筛选,然后利用分子对接... 通过抑菌试验,确定不同培养基条件下多肽化合物的抑菌效果,并测定其最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。加入Vc,比较抑菌效果,进一步优化筛选H37Ra抑制剂。先根据ELISA试验结果进行噬菌体肽库筛选,然后利用分子对接软件模拟多肽与ICL蛋白晶体(1F8I)的分子对接,将成功对接的多肽采用Fmoc固相合成法合成,并对其生物活性进行检测。用制备型反相高效液相色谱仪对合成的多肽进行纯化并进行质谱检测。共筛选得到4条多肽且均有抑菌效果,并与剂量相关。结果显示,浓度为800-1 500μg/mL时,各组多肽均抑菌。浓度为500μg/mL时,正常培养基中只有一种肽有抑菌作用,而限制碳源培养基中均不能抑菌。2号肽抑菌效果最好,正常培养基中MIC为200μg/mL,限制碳源中为500μg/mL。阳性对照组,两种培养基抑菌效果一致,利福平MIC为0.8μg/mL,异烟肼MIC为0.5μg/mL。根据MIC结果,在正常培养基中加入Vc,检测到多肽、利福平和异烟肼的抑菌效果呈剂量依赖性升高。 展开更多
关键词 肽类化合物 MIC 噬菌体肽库 分子对接 Fmoc固相合成
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HIV-GAG质粒DNA疫苗的纯化工艺 被引量:1
10
作者 刘新涛 吴丛梅 +2 位作者 臧阳 孙博 殷玉和 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期720-723,共4页
采用中空纤维超滤浓缩、离子交换介质和复合模式凝胶过滤介质纯化获得了HIV-GAG药用级质粒DNA疫苗,并对菌体培养、菌体裂解、粗提分离和柱层析等环节进行研究.实验结果表明,产品基本符合药用级的质粒DNA要求.
关键词 DNA疫苗 菌体裂解 离子交换介质 复合模式凝胶过滤介质
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生物工艺学课程教学之体会 被引量:3
11
作者 牛晓晖 高冷 +2 位作者 吴丛梅 殷玉和 张秀英 《科技信息》 2009年第28期I0333-I0333,共1页
本文通过对生物工艺学课程的长期教学,在教材选用、教学方法、教学手段及实验教学等几方面总结出若干教学经验。
关键词 生物工艺学 教学方法 实践教学
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生物工艺学课程教学活动中激发策略的研究与实践 被引量:1
12
作者 高冷 牛晓晖 殷玉和 《科技视界》 2012年第17期14-15,共2页
通过对学生进行学习动机的调查,了解学生存在的问题,并制定相应激发策略。注重学生综合能力的培养,采用问题教学法和案例法等教学方法,提高学生自身素质,增强自信、制定合理计划,以达到提高学生学习生物工艺学课程的兴趣,提高学生综合... 通过对学生进行学习动机的调查,了解学生存在的问题,并制定相应激发策略。注重学生综合能力的培养,采用问题教学法和案例法等教学方法,提高学生自身素质,增强自信、制定合理计划,以达到提高学生学习生物工艺学课程的兴趣,提高学生综合能力的目的。 展开更多
关键词 生物工艺学 激发策略 综合能力
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一种新型小分子化合物增强PC3细胞的辐射敏感性
13
作者 吴丛梅 殷玉和 吴德生 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期28-30,共3页
目的检测小分子化合物8-氧-8H-苊并[1,2-b]吡咯-9-腈的氨基取代衍生物(S1)对前列腺癌细胞系PC3辐射敏感性的作用。方法采用流式细胞术分别检测不同剂量X射线和不同浓度S1化合物以及两者联合作用后,PC3细胞凋亡率的变化;采用Western blo... 目的检测小分子化合物8-氧-8H-苊并[1,2-b]吡咯-9-腈的氨基取代衍生物(S1)对前列腺癌细胞系PC3辐射敏感性的作用。方法采用流式细胞术分别检测不同剂量X射线和不同浓度S1化合物以及两者联合作用后,PC3细胞凋亡率的变化;采用Western blot方法检测S1作用后不同时间Bcl-2蛋白在PC3细胞中的表达变化。结果X射线诱导PC3细胞凋亡具有剂量依赖特性,2Gy、5GyX射线照射未发现明显的凋亡,10Gy、20Gy照射组有明显的凋亡产生(P<0.01);S1化合物能够显著诱导PC3细胞凋亡,并具有剂量依赖特性,其中5μmol/L和10μmol/L组凋亡率明显高于对照组(P<0.01);S1作用后2~12hPC3细胞中Bcl-2蛋白表达逐渐减低;S1作用后,分别给予PC3细胞2Gy和8GyX射线照射,细胞凋亡率明显高于单独照射组和单独S1作用组(P<0.01)。结论S1能够增强PC3细胞对X射线的敏感性,可望为临床提高前列腺癌放疗效果,降低辐射损伤提供新的治疗方案。 展开更多
关键词 前列腺癌 放疗 增敏
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pEgr-Endostatin-EGFP抑制黑色素瘤生长及血管生成
14
作者 吴丛梅 张洁琼 殷玉和 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期905-907,共3页
目的检测pEgr-Endostatin-EGFP质粒的表达特性和pEgr-Endostatin-EGFP基因-放射治疗小鼠黑色素瘤的作用。方法pEgr-Endostatin-EGFP重组质粒用脂质体方法转染B16细胞,采用Western blot方法检测Endostatin表达。建立小鼠荷瘤模型,注射质... 目的检测pEgr-Endostatin-EGFP质粒的表达特性和pEgr-Endostatin-EGFP基因-放射治疗小鼠黑色素瘤的作用。方法pEgr-Endostatin-EGFP重组质粒用脂质体方法转染B16细胞,采用Western blot方法检测Endostatin表达。建立小鼠荷瘤模型,注射质粒并给予5GyX射线照射,共3次,18天观察肿瘤生长情况,并采用免疫组织化学方法检测肿瘤血管生成。结果转染了pEgr-Endostatin-EGFP质粒的B16细胞和转染并接受照射的B16细胞组可以检测到Endostatin蛋白表达。C57BL/6J小鼠给予pEgr-Endostatin-EGFP质粒注射并接受肿瘤X射线照射,可以显著抑制肿瘤生长(P<0.01),而且肿瘤局部血管生成明显降低(P<0.01)。结论本研究数据为肿瘤基因-放射治疗提供了新的治疗方案。 展开更多
关键词 ENDOSTATIN X射线 血管生成
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生物工程专业学生新培养模式
15
作者 吴丛梅 殷玉和 +1 位作者 高冷 李东风 《吉林省教育学院学报》 2012年第1期125-126,共2页
生物工程产业是目前国家重点支持的领域,新技术的快速发展也带动了生物工程成为最有前途和希望的产业。但是由于我国生物工程方面起步较晚,基础比较薄弱,对毕业生的需求没有形成规模,造成就业形势紧张。在目前情况下,我们根据对人才市... 生物工程产业是目前国家重点支持的领域,新技术的快速发展也带动了生物工程成为最有前途和希望的产业。但是由于我国生物工程方面起步较晚,基础比较薄弱,对毕业生的需求没有形成规模,造成就业形势紧张。在目前情况下,我们根据对人才市场需求的跟踪和了解,改变相关的教学模式,尽力适应行业发展需要,使学生更好掌握专业知识的同时,有更好的发展前景。 展开更多
关键词 生物工程 培养模式 综合能力 分组培养
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SPSS在生物工艺学课程问卷调查中的应用
16
作者 牛晓晖 高冷 殷玉和 《科技视界》 2012年第17期29-30,291,共3页
在对我院生物工程专业2008级学生进行生物工艺学课程问卷调查的基础上,利用SPSS对问卷结果进行分析。获得学生学习态度与相关因素的关系,为确定生物工艺学课程中激发策略提供依据。
关键词 生物工艺学 问卷调查 SPSS 激发策略
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狂犬病病毒抗原的浓缩及纯化工艺的研究
17
作者 张宁 龚本义 +3 位作者 刘冬禹 杨丹丹 殷玉和 吴丛梅 《兽医导刊》 2020年第14期216-217,共2页
[目的]研究狂犬病病毒纯化抗原生产工艺。[方法]通过对聚乙二醇(PEG)沉淀浓缩及蔗糖密度梯度离心纯化、Zn(AC)2沉淀浓缩及蔗糖密度梯度离心纯化、Zn(AC)2沉淀浓缩及Sepharose 4 Fast Flow分离纯化三种方法制备狂犬病病毒纯化抗原进行比... [目的]研究狂犬病病毒纯化抗原生产工艺。[方法]通过对聚乙二醇(PEG)沉淀浓缩及蔗糖密度梯度离心纯化、Zn(AC)2沉淀浓缩及蔗糖密度梯度离心纯化、Zn(AC)2沉淀浓缩及Sepharose 4 Fast Flow分离纯化三种方法制备狂犬病病毒纯化抗原进行比较。[结果]Zn(AC)2沉淀浓缩后蔗糖密度梯度离心纯化抗原与Sepharose 4 Fast Flow纯化抗原收获蛋白总量无明显差异。PEG沉淀浓缩及蔗糖密度梯度离心纯化抗原制备的检测试纸条荧光强度较弱。[结论]用Zn(AC)2沉淀法浓缩及蔗糖密度梯度离心纯化法制备狂犬病病毒抗原。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 浓缩 纯化
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轮状病毒间接免疫荧光的检测方法 被引量:2
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作者 姜涛 吴丛梅 +2 位作者 刘新涛 金浩 殷玉和 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期919-923,共5页
以兔抗SA11多克隆抗体为一抗、Alexa-488标记的山羊抗兔抗体为二抗,通过对反应条件的优化建立轮状病毒(RV)检测的间接免疫荧光法(IFA).实验结果表明,IFA最佳工作条件为:MA104细胞密度为每孔2×104个,胰酶活化轮状病毒质量浓度... 以兔抗SA11多克隆抗体为一抗、Alexa-488标记的山羊抗兔抗体为二抗,通过对反应条件的优化建立轮状病毒(RV)检测的间接免疫荧光法(IFA).实验结果表明,IFA最佳工作条件为:MA104细胞密度为每孔2×104个,胰酶活化轮状病毒质量浓度为1μg/mL,培养时间为18h,一抗最适稀释度为1∶800,二抗最适稀释度为1∶500. 展开更多
关键词 轮状病毒 间接免疫荧光 胰酶活化 滴度
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合成多肽对结核分枝杆菌的胞内抑制作用 被引量:2
19
作者 陈吉 殷玉和 +3 位作者 李玲玲 金浩 唐铭一 吴丛梅 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期222-227,共6页
评价合成多肽对人白血病单核巨噬细胞THP-1的毒性和对结核分枝杆菌H37Rv的胞内抑菌作用。通过多肽的不同给药浓度,确定多肽对结核分枝杆菌的最小抑菌浓度(MIC),利用流式细胞术方法和MTT法检测2号肽对细胞THP-1的毒性作用,同时采用CFU方... 评价合成多肽对人白血病单核巨噬细胞THP-1的毒性和对结核分枝杆菌H37Rv的胞内抑菌作用。通过多肽的不同给药浓度,确定多肽对结核分枝杆菌的最小抑菌浓度(MIC),利用流式细胞术方法和MTT法检测2号肽对细胞THP-1的毒性作用,同时采用CFU方法检测其对H37Rv菌株的胞内抑菌作用。筛选的4条多肽均有抑菌作用,其中2号肽的最小抑菌浓度(MIC)最小,为200μg/m L。2号肽与细胞THP-1作用时,浓度为1 200μg/m L时表现出细胞毒性,与INH细胞毒性无显著差别。对于胞内H37Rv,2号肽抗结核作用具有时间和剂量依赖效应,随给药时间和剂量的增加H37Rv菌落数明显下降。2号肽不仅对巨噬细胞THP-1的毒性小,而且具有较好的抗胞内结核分枝杆菌活性,是一种潜在的抗结核新型药物。 展开更多
关键词 合成多肽 结核杆菌 巨噬细胞 胞内抑菌
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茶多酚EGCG通过调控miR-16-5p/含铜胺氧化酶1轴发挥对过氧化氢诱导的人心肌细胞凋亡的保护作用 被引量:3
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作者 毕樱馨 刘咸筠 +6 位作者 孟祥龙 柳越 王梦媛 张妍 李占东 殷玉和 李皓 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第7期376-383,共8页
目的:探究茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导人心肌细胞HCM凋亡的保护作用中的分子机制。方法:利用H_(2)O_(2)建立HCM细胞凋亡模型;通过caspase-3活性检测实验评价细胞凋亡水平;利用CCK-8法检测药物的细... 目的:探究茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导人心肌细胞HCM凋亡的保护作用中的分子机制。方法:利用H_(2)O_(2)建立HCM细胞凋亡模型;通过caspase-3活性检测实验评价细胞凋亡水平;利用CCK-8法检测药物的细胞毒性;qPCR和Western blot用于检测含铜胺氧化酶1(AOC1)和miR-16-5p的表达水平;通过细胞转染调控AOC1和miR-16-5p在HCM细胞中的表达;通过TargetScan预测以及双荧光素酶报告基因实验验证miR-16-5p和AOC1 mRNA 3'UTR区的结合关系以及结合位点。结果:EGCG处理后可以显著抑制H_(2)O_(2)诱导的HCM细胞凋亡(P<0.05);在凋亡细胞中,AOC1表达显著下降,EGCG可以显著上调AOC1的表达,而敲减AOC1显著逆转EGCG对凋亡的抑制(P<0.05);同时,在凋亡细胞中,miR-16-5p表达显著上升,EGCG可以显著抑制miR-16-5p的表达,而上调miR-16-5p显著逆转了EGCG对凋亡的抑制(P<0.05);上调miR-16-5p显著逆转了EGCG对凋亡细胞中AOC1表达的促进;最后,miR-16-5p可以靶向抑制AOC1的表达,而过表达AOC1显著逆转了miR-16-5p诱导的HCM细胞凋亡。结论:EGCG通过调控miR-16-5p/AOC1轴发挥了对H_(2)O_(2)诱导HCM细胞凋亡的保护作用,同时提示AOC1是保护心肌细胞损伤治疗的潜在新靶点。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 人心肌细胞 miR-16-5p AOC1 细胞凋亡 H O
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