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产紫杉醇真菌的研究概况与紫杉醇工业生产的一个新思路 被引量：32
1
作者 纪元 毕建男 +1 位作者 严冰 朱旭东 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-6,共6页
分离自太平洋红豆杉的天然抗癌药物紫杉醇(Taxol)已在临床上广泛应用,市场需求日益增强,但工业产量受原料红豆杉树木短缺的制约,供需存在巨大差距。1993年,Stierle等分离到一株与太平洋红豆杉共生的真菌安德烈紫杉菌,证实产生紫杉醇,为... 分离自太平洋红豆杉的天然抗癌药物紫杉醇(Taxol)已在临床上广泛应用,市场需求日益增强,但工业产量受原料红豆杉树木短缺的制约,供需存在巨大差距。1993年,Stierle等分离到一株与太平洋红豆杉共生的真菌安德烈紫杉菌,证实产生紫杉醇,为利用真菌发酵生产紫杉醇带来可能。通过分析目前工业生产技术存在的问题,总结了产紫杉醇真菌研究的进展及其重要意义。认为利用真菌大规模发酵生产紫杉醇或其中间体,是摆脱制约的一条新思路,具有广阔的应用前景,并且可以带动其他产品的开发。 展开更多
关键词 紫杉醇 内共生真菌 小孢拟盘多毛孢 树状多节孢
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一株柏树内生真菌产生抗肿瘤药物紫杉醇 被引量：10
2
作者 严冰 毕建男 +3 位作者 纪元 王文婕 赵阳 朱旭东 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期67-70,共4页
报道了一株从柏树中分离到的产抗癌药物紫杉醇的菌株,样品采自江苏,是第一例柏树内生菌产紫杉醇的报道,表明产紫杉醇真菌的多样性.简化和改进了提取紫杉醇的方法,可以快速得到一定量的紫杉醇满足TLC 分析的需要,该方法提高了处理样品的... 报道了一株从柏树中分离到的产抗癌药物紫杉醇的菌株,样品采自江苏,是第一例柏树内生菌产紫杉醇的报道,表明产紫杉醇真菌的多样性.简化和改进了提取紫杉醇的方法,可以快速得到一定量的紫杉醇满足TLC 分析的需要,该方法提高了处理样品的速度,节省了时间和试剂消耗等,适用于大量样品的初筛. 展开更多
关键词 紫杉醇 内共生真菌 薄层层析 高效液相色谱
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产紫杉醇真菌发酵液脱色处理方法 被引量：1
3
作者 牛学良 南杰 +3 位作者 于溪 毕建男 潘皎 朱旭东 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期22-28,共7页
不同性质的产物发酵后提取纯化工艺技术不同.真菌发酵生产紫杉醇/紫杉烷提取过程中,常常受到色素的干扰,特别是紫杉醇前体10-deacetylbaccatinⅢ(10-DAB)通过HPLC的C_(18)分离柱保留时间与色素峰十分相近,难以分离.为了便于分离纯化产... 不同性质的产物发酵后提取纯化工艺技术不同.真菌发酵生产紫杉醇/紫杉烷提取过程中,常常受到色素的干扰,特别是紫杉醇前体10-deacetylbaccatinⅢ(10-DAB)通过HPLC的C_(18)分离柱保留时间与色素峰十分相近,难以分离.为了便于分离纯化产紫杉醇菌株B19发酵液中紫杉醇、10-DAB等成分,研究了B19发酵液的脱色条件.首先比较了大孔树脂NKA-9,AB-8,D3520,颗粒性活性炭和粉末性活性炭等5种材料的脱色效率,发现粉末性活性炭是紫杉醇发酵液的最佳脱色剂.在单因素试验的基础上又进行了正交试验,确定了脱色及10-DAB疑似分子X回收的最优条件:活性炭用量1%(质量体积比),温度60℃,时间30 min,pH 8.0.在此条件下,B19发酵液脱色率为(62.8±0.7)%,X的回收率为(87.2±5.3)%.建立了紫杉烷发酵后的关键除色素步骤,可为类似工作提供借鉴. 展开更多
关键词 紫杉醇 10-deacetylbaccatinⅢ PESTALOTIOPSIS 脱色 活性炭
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球毛壳菌(Chaetomium globosum)NK102纤维素酶基因及其表达条件 被引量：1
4
作者 胡阳 毕建男 +3 位作者 郝晓冉 陈煌 潘皎 朱旭东 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期354-362,共9页
【目的】生物质的利用是当前生物技术研究的一个热点。本小组分离到一株高效降解纤维素球毛壳菌(Chaetomium globosum)NK102,本文拟探索研究此菌的纤维素酶表达系统并寻找影响酶基因表达的关键因素。【方法】通过对NK102测序,本文界定... 【目的】生物质的利用是当前生物技术研究的一个热点。本小组分离到一株高效降解纤维素球毛壳菌(Chaetomium globosum)NK102,本文拟探索研究此菌的纤维素酶表达系统并寻找影响酶基因表达的关键因素。【方法】通过对NK102测序,本文界定了球毛壳菌NK102的主要纤维素酶编码基因,使用数字基因表达谱升级版(RNA-Seq)的方法得到纤维素酶基因的表达差异,然后观察了营养、物理条件下纤维素酶基因表达和酶活性变化的情况。【结果】发现随着培养时间的延长,纤维素酶基因整体上表达量升高。在所选基因中,外切葡聚糖酶、纤维二糖脱氢酶和内切葡聚糖酶基因(cbh1,cdh和egl1)的表达量最高。糖代谢的负调控因子ACE I和CreA的随时间表达量均降低,而Hap2/3/5复合体的表达量反而升高。之后检测了不同碳源培养基对纤维素酶基因表达量和酶活性的影响,发现葡萄糖为强阻遏因子,纤维二糖为其诱导物,而山梨醇没有影响。特别是,我们发现光照也影响纤维素酶基因的表达,黑暗条件明显抑制酶基因的表达。【结论】转录组学的方法可以初步探索纤维素酶表达的规律,酶基因的表达受到营养、物理条件的影响。本研究为揭示球毛壳菌降解纤维素分子机理和阐释生物质糖代谢途径提供了有用参考。 展开更多
关键词 纤维素酶 球毛壳菌(Chaetomium globosum) RNA—Seq
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纤维素降解球毛壳菌NK-102的高效遗传转化方法
5
作者 郝晓冉 纪元 +3 位作者 陈煌 毕建男 潘皎 朱旭东 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1494-1501,共8页
【目的】在球毛壳菌(Chaetomium globosum)NK-102中,建立菌株特异性转化体系。【方法】构建新的抗性标记pUCATPH-Pgap,转化效率优于pUCATPH和pCM768。建立了PEG-原生质体和根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105介导的两种转化... 【目的】在球毛壳菌(Chaetomium globosum)NK-102中,建立菌株特异性转化体系。【方法】构建新的抗性标记pUCATPH-Pgap,转化效率优于pUCATPH和pCM768。建立了PEG-原生质体和根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105介导的两种转化方法。【结果】原生质体转化效率为30-50个转化子/10μg DNA,抗性标记pUCATPH-Pgap效率最高。EHA105介导转化率达到3.2×102转化子/107孢子。Southern blot证明DNA随机整合于基因组中,转化子抗性稳定。【结论】两种转化体系的建立为筛选高效利用纤维素的球毛壳菌突变株奠定了基础。 展开更多
关键词 球毛壳菌 纤维素 根癌农杆菌 转化
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大学生自主创业资金困难原因及对策 被引量：1
6
作者 毕建男 沙岫 李琦 《才智》 2018年第34期59-59,共1页
随着近年来国家对大学生创造的支持、鼓励和宣传,创业思想在大学生人群中的认知度也普遍较高,但是现实结果却并非想象中的那么理想。这种不理想的情况不仅反映在实际大学生的创业人数上,同时也体现在大学生创业人群中真正成功的人员比... 随着近年来国家对大学生创造的支持、鼓励和宣传,创业思想在大学生人群中的认知度也普遍较高,但是现实结果却并非想象中的那么理想。这种不理想的情况不仅反映在实际大学生的创业人数上,同时也体现在大学生创业人群中真正成功的人员比例较低等方方面面的现实结果上。通过社会研究的普遍论证,我们不难发现,造成这种现实状况的主要原因,便是大学生创业的第一道门槛——资金问题的解决。大学生创业不同于社会其他人员的创业情况,其资金的原始积累普遍较低,而当今社会上的金融贷款及投资机构的资金申请条件及门槛又普遍较高,大学生群体很难满足其苛刻的资金申请条件,因此只能通过个人集资、家庭储蓄等极为有限的资金手段进行创业资金的筹措,这无疑极大的阻碍了大学生创业的起步和开展。为了解决这一问题,我国应该重视起大学生创业资金的解决问题,认识到当前问题,并加以解决和落实。 展开更多
关键词 大学生 创业 资金问题
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