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基于数字化的压铸产品全流程质量管理
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作者 陈庆 杨军 +4 位作者 刘云 袁旭鹏 王绍刚 高军 毛春生 《中国铸造装备与技术》 CAS 2024年第2期67-71,共5页
传统铸造工厂的质量管理针对产品全生命周期建立完整的质量检验标准,即建立与产品相对应的首检、巡检、尾检、抽检标准,这样的质量管理模式适用于生产节拍相对较慢的铸造工厂,但是压铸行业具备高精度、高效率、灵活性强的生产特点,如何... 传统铸造工厂的质量管理针对产品全生命周期建立完整的质量检验标准,即建立与产品相对应的首检、巡检、尾检、抽检标准,这样的质量管理模式适用于生产节拍相对较慢的铸造工厂,但是压铸行业具备高精度、高效率、灵活性强的生产特点,如何高效、准确的进行产品质量管理成为了当前行业内的一大难点,本文基于数字化的压铸产品的全流程质量管理模式进行一个简单的分享。 展开更多
关键词 全流程 压铸 质量管理
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抗HBsAg抗体Fab段在大肠肝菌中的高效表达与复性 被引量:8
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作者 毛春生 宋宏彬 +2 位作者 李季枝 于长明 王海涛 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期229-231,共3页
将抗HBsAg 抗体的轻链(L)和重链Fd 段基因,分别克隆于pET20b 质粒中并分别转化到大肠肝菌BL21(DE3),LPTG诱导后,SDS-PAGE分析发现在27KD(L)和25KD(Fd)处有外源蛋白表达,表达... 将抗HBsAg 抗体的轻链(L)和重链Fd 段基因,分别克隆于pET20b 质粒中并分别转化到大肠肝菌BL21(DE3),LPTG诱导后,SDS-PAGE分析发现在27KD(L)和25KD(Fd)处有外源蛋白表达,表达蛋白含量分别为53% 和48% 。L链和Fd 包涵体蛋白经盐酸胍变性后,等量混合于折叠液中,L和Fd 可复性形成了约50KD的蛋白。ELISA结果表明,复性蛋白具有与HBsAg 结合的能力。抗HBsAg 抗体Fab 段在大肠杆菌中的表达与复性的成功,表明包涵体表达基因工程抗体在技术是可行的。 展开更多
关键词 抗HBSAG FAB段 表达 复性 抗体
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HIV-1gag基因重组痘苗病毒的构建和高效表达 被引量:9
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作者 毛春生 金宁一 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第6期561-569,共9页
Gag蛋白是人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV-1)重要的结构蛋白,可诱导机体产生体液和细胞免疫应答。本试验将HIV-1不同长度的长末端重复序列(LTR)和全长的gagORF置于痘病毒启动子控制下,经过同源重组、红细胞吸附试... Gag蛋白是人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV-1)重要的结构蛋白,可诱导机体产生体液和细胞免疫应答。本试验将HIV-1不同长度的长末端重复序列(LTR)和全长的gagORF置于痘病毒启动子控制下,经过同源重组、红细胞吸附试验筛选和间接免疫荧光试验鉴定,分离了6株重组痘苗病毒。免疫印迹(Westernblot)和免疫酶试验检测表明,6株病毒均能表达gag基因,其中以v16LG△2的Gag蛋白表达量最高,占细胞裂解物上清的5.19%,相当于14.7μg/106细胞,接近杆状病毒的表达产量。重组蛋白主要为p55gag蛋白前体,但也有一部分被加工,生成成熟蛋白p24gag、p17gag及其中间蛋白。表达的重组蛋白可形成病毒样粒子(VLP)。 展开更多
关键词 HIV-1 GAG蛋白 高效表达 重组痘苗病毒
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新型马氏体耐热钢G115焊接及焊后热处理工艺研究
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作者 王登第 毛春生 +7 位作者 李平 苗慧霞 柴茂海 刘磊 王能淼 黄振涛 杨志鹏 王伟 《金属加工(热加工)》 2024年第1期60-64,共5页
随着我国超超临界燃煤机组技术的不断提高,机组参数越来越高,目前630℃参数超超临界机组已基本成熟,G115耐热钢成为当前我国630℃超超临界机组主蒸汽管道的唯一候选材料,将应用于超(超)临界锅炉的集箱、蒸汽管道、受热面管子等部件,其... 随着我国超超临界燃煤机组技术的不断提高,机组参数越来越高,目前630℃参数超超临界机组已基本成熟,G115耐热钢成为当前我国630℃超超临界机组主蒸汽管道的唯一候选材料,将应用于超(超)临界锅炉的集箱、蒸汽管道、受热面管子等部件,其现场焊接及热处理工艺仍处于探索研究阶段。通过对国产新型马氏体耐热钢G115(以下简称G115钢)进行焊接及热处理工艺研究,系统分析了G115钢与现有其他同类型钢种性能,掌握了G115钢的焊接性能。结合已掌握的高合金大径厚壁管道焊接关键技术,制定了可行的焊接及热处理工艺。经检测,性能满足要求,为G115钢的推广应用提供了技术储备。 展开更多
关键词 马氏体耐热钢G115 焊接 焊后热处理工艺
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一种高效通用的平端亚克隆方法 被引量:4
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作者 毛春生 金宁一 顾万钧 《生命的化学》 CAS CSCD 1995年第5期42-43,共2页
一种高效通用的平端亚克隆方法毛春生,金宁一,顾万钧(解放军农牧大学研究所病毒室,长春130062)关键词平端亚克隆亚克隆是分子生物学和基因工程研究中常用技术之一。在理论上,任何一对平末端DNA片段都可经T4连接酶催化... 一种高效通用的平端亚克隆方法毛春生,金宁一,顾万钧(解放军农牧大学研究所病毒室,长春130062)关键词平端亚克隆亚克隆是分子生物学和基因工程研究中常用技术之一。在理论上,任何一对平末端DNA片段都可经T4连接酶催化连接。这给不同DNA分子之间的连接... 展开更多
关键词 克隆 平端亚克隆 基因工程
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鸡大肠杆菌多价自家灭活菌苗的研制和应用初报 被引量:1
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作者 毛春生 卢中华 +5 位作者 崔保安 张红英 晁瑞苹 王亚宾 王自振 陈丽颖 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 1992年第4期388-391,共4页
从11个血清型为O_1、O_2、O_(78)的标准菌株及地方分离的埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli)中筛选出6个强毒菌株,作为制苗基础菌株,并加入发病鸡场的自家分离株,一起作为制苗菌种。干酵母肉汤中培养18~24h,甲醛灭活后,制成鸡大肠杆菌... 从11个血清型为O_1、O_2、O_(78)的标准菌株及地方分离的埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli)中筛选出6个强毒菌株,作为制苗基础菌株,并加入发病鸡场的自家分离株,一起作为制苗菌种。干酵母肉汤中培养18~24h,甲醛灭活后,制成鸡大肠杆菌多价自家灭活铝胶苗。试验证实,该苗接种雏鸡0.5ml.成鸡1ml,无毒副作用。鸡只免疫后,对同型菌株近期攻毒的保护半为100%;现地应用结果表明,鸡只免疫后12周,血清中抗体平均凝集价为1:26.4,高于免疫临界线,并且鸡群健康状况稳定,增重加快,饲料利用率和产蛋率增加。 展开更多
关键词 大肠杆菌 疫苗 研制 应用 鸡病
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基因工程二硫键抗体 被引量:1
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作者 毛春生 宋宏彬 王海涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第6期522-526,共5页
二硫键抗体(dsFv)的概念最早出现于1990年,它是将抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的各一个氨基酸残基突变为半胱氨酸,通过链间二硫键连接抗体可变区(Fv)的片段抗体.通用的突变位点是重链的44位和轻链的... 二硫键抗体(dsFv)的概念最早出现于1990年,它是将抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的各一个氨基酸残基突变为半胱氨酸,通过链间二硫键连接抗体可变区(Fv)的片段抗体.通用的突变位点是重链的44位和轻链的100位或重链的105位和轻链的43位.dsFv最显著的优点是生化性质稳定,能够耐受环境条件的剧烈作用,在血液中的半衰期长达14d以上,符合临床给药要求.动物实验显示,dsFv毒素在不对动物造成毒副作用的情况下,可完全抑制肿瘤生长. 展开更多
关键词 二硫键抗体 基因工程 分子设计
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间接血凝试验检测鸡血清中多杀性巴氏杆菌抗体 被引量:2
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作者 毛春生 卢中华 +2 位作者 崔保安 李海东 王付华 《中国兽医科技》 CSCD 1991年第7期29-31,共3页
近几年来,国内外对禽多杀性巴氏杆菌(Pas-teurella multocida)的免疫应答研究表明,体液免疫和细胞免疫在抵抗巴氏杆菌的再感染均有重要的作用。并应用试管凝集反应、间接血凝(IHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等检测多杀性巴氏杆菌免疫后... 近几年来,国内外对禽多杀性巴氏杆菌(Pas-teurella multocida)的免疫应答研究表明,体液免疫和细胞免疫在抵抗巴氏杆菌的再感染均有重要的作用。并应用试管凝集反应、间接血凝(IHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等检测多杀性巴氏杆菌免疫后鸡和火鸡的血清抗体,并认为此3种方法所检出的抗体滴度与对抗强毒的保护作用一致。本研究优化了检测鸡血清抗体的IHA试验及抗原制备的条件,并比较了IHA滴度与攻毒保护的关系。(一)材料和方法1.菌种:中国兽医药品监察所保藏的C_(48)-1强毒菌株,用前通过小白鼠3代,鸡1代复壮,然后接种于血液马丁肉汤或血液马丁琼脂培养,培养移植不超过3次,菌液10^(-8)稀释0. 展开更多
关键词 巴氏杆菌 间接血凝试验 检测
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双链抗体——一种新型基因工程抗体 被引量:1
9
作者 毛春生 李季枝 王海涛 《生命的化学》 CAS CSCD 1999年第3期121-124,共4页
双链抗体(Diabody),是一种新型基因工程抗体。“Diabody”一词最早由Holiger等于1993年提出[1],他们的解释是,双链抗体乃是一种小分子的双价双特异性抗体片段。我们将“Diabody”试译为“双链... 双链抗体(Diabody),是一种新型基因工程抗体。“Diabody”一词最早由Holiger等于1993年提出[1],他们的解释是,双链抗体乃是一种小分子的双价双特异性抗体片段。我们将“Diabody”试译为“双链抗体”的理由有二:(1)前缀“Di... 展开更多
关键词 基因工程抗体 双链抗体 分子设计 表达
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两株鸡减蛋综合症病毒在鸭胚中增殖规律的观察 被引量:1
10
作者 毛春生 卢中华 +3 位作者 崔保安 李季枝 陈丽颖 王英汉 《中国畜禽传染病》 CSCD 1994年第5期1-2,共2页
两株鸡减蛋综合症病毒在鸭胚中增殖规律的观察毛春生,卢中华,崔保安,李季枝,陈丽颖,王英汉(河南农业大学牧医系)减蛋综合征(EDS)是由禽腺病毒引起的鸡的传染病,该病以病鸡产蛋减少和蛋壳形成不良为特征。目前世界上许多国... 两株鸡减蛋综合症病毒在鸭胚中增殖规律的观察毛春生,卢中华,崔保安,李季枝,陈丽颖,王英汉(河南农业大学牧医系)减蛋综合征(EDS)是由禽腺病毒引起的鸡的传染病,该病以病鸡产蛋减少和蛋壳形成不良为特征。目前世界上许多国家和地区都有流行[1,2]。该病已... 展开更多
关键词 减蛋综合症 病毒 鸭胚 增殖
原文传递
杯状病毒的分类和分子生物学研究进展 被引量:2
11
作者 毛春生 金宁一 殷震 《中国病毒学》 CSCD 1996年第2期110-115,共6页
杯状病毒的分类和分子生物学研究进展毛春生,金宁一,殷震(解放军农牧大学研究所,长春130062)ClassificationandMolecularBiologyofCalicivirusMaoChunsheng;J... 杯状病毒的分类和分子生物学研究进展毛春生,金宁一,殷震(解放军农牧大学研究所,长春130062)ClassificationandMolecularBiologyofCalicivirusMaoChunsheng;JinNingyi;YinZhen(... 展开更多
关键词 杯状病毒 分子生物学 分类
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人源基因工程抗体技术的进展与展望 被引量:1
12
作者 毛春生 于长明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第4期327-329,共3页
鼠源抗体对人的异源免疫原性问题直接导致了人源抗体技术的出现,经过十几年的研究,该技术日臻成熟.嵌合和人源化抗体的研究巳经取得了很大的成功,巳有产品应用于临床,但在实践中有其局限性.噬菌体抗体库体系的创建,用细菌克隆代替B细胞... 鼠源抗体对人的异源免疫原性问题直接导致了人源抗体技术的出现,经过十几年的研究,该技术日臻成熟.嵌合和人源化抗体的研究巳经取得了很大的成功,巳有产品应用于临床,但在实践中有其局限性.噬菌体抗体库体系的创建,用细菌克隆代替B细胞克隆,是人源抗体技术又一次突破性进展.噬菌体抗体操作简便,可以从中筛选出包括中和抗体、毒素抗体、多糖抗体、自身抗体、抗全细胞抗体在内的各种高亲和力抗体.转基因动物抗体技术于叨年代初出现,技术还不大成熟,目前人们只能将一部分人的Ig全套胚系基因转移到动物体内,但发展前景不可限量. 展开更多
关键词 人源抗体 噬菌体文库 人源化抗体 基因工程
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鸡传染性鼻炎的血凝和血凝抑制试验的初步研究 被引量:1
13
作者 毛春生 卢中华 +1 位作者 崔保安 曹定盈 《中国兽医科技》 CSCD 1994年第6期5-7,共3页
利用鸡副嗜血杆菌HPG9323株研制了血球凝集抗原,进行鸡传染性鼻炎的血球凝集(HA)和血球凝集抑制(HI)试验。表明HI试验是初步鉴定A型鸡副嗜血杆菌的快速、简便的方法,HI试验可以快速、特异地进行鸡传染性鼻炎的抗... 利用鸡副嗜血杆菌HPG9323株研制了血球凝集抗原,进行鸡传染性鼻炎的血球凝集(HA)和血球凝集抑制(HI)试验。表明HI试验是初步鉴定A型鸡副嗜血杆菌的快速、简便的方法,HI试验可以快速、特异地进行鸡传染性鼻炎的抗体检查。检测结果说明,人工感染鸡的传染性鼻炎抗体阳转率可达100%,感染后12用,25%的鸡仍为HI试验阳性。 展开更多
关键词 鸡病鼻炎 抗原 血球凝集 试验
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基因工程抗体的新种类—双链抗体 被引量:3
14
作者 毛春生 李季枝 《国外医学(免疫学分册)》 2000年第2期121-124,共4页
双链抗体 (Diabody)是将两种抗体的重链可变区 (VH)和轻链可变区 (VL)基因交叉连接 ,形成“杂交”的单链抗体基因 ,表达后 ,两条单链抗体双链抗体自动互相折叠 ,形成双加或双特异性抗体片段。双链抗体在科学研究、免疫诊断和免疫治疗中... 双链抗体 (Diabody)是将两种抗体的重链可变区 (VH)和轻链可变区 (VL)基因交叉连接 ,形成“杂交”的单链抗体基因 ,表达后 ,两条单链抗体双链抗体自动互相折叠 ,形成双加或双特异性抗体片段。双链抗体在科学研究、免疫诊断和免疫治疗中都有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 基因工程技术 双链抗体 表达 应用
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人源性抗HIV-1 V3环噬菌体抗体的基因克隆与序列分析
15
作者 毛春生 李季枝 +3 位作者 宋宏彬 于长明 杜桂鑫 王海涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期178-181,共4页
以HIV1gp120V3环的合成环肽为抗原,从人的噬菌体抗体组合文库中,筛选出与HIV1V3肽具有结合活性的人源性噬菌体抗体(Fab段)。用ELISA测定其活性,竞争抑制实验证实了该噬菌体抗体的特异性。序列分析表明,重链基因为IgG1亚类,可变区属VHI亚... 以HIV1gp120V3环的合成环肽为抗原,从人的噬菌体抗体组合文库中,筛选出与HIV1V3肽具有结合活性的人源性噬菌体抗体(Fab段)。用ELISA测定其活性,竞争抑制实验证实了该噬菌体抗体的特异性。序列分析表明,重链基因为IgG1亚类,可变区属VHI亚组,与胚系基因DP88的同源性最高,D区为D33,J区为JH5;轻链为κ亚型,可变区属VLIV亚群,D区为DPK22,J链为JK4胚系。 展开更多
关键词 噬菌体抗体 HIV-1 V3环 核苷酸序列 基因克隆
原文传递
HIV-1 Gag蛋白在重组痘苗病毒中的高效表达及其特性分析
16
作者 毛春生 金宁一 +5 位作者 佟明华 常国权 郭军庆 杨盛华 邹啸环 殷震 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期72-75,共4页
在构建3株人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV-1)Gag基因重组痘苗病毒的基础上,实现了Gag蛋白的高效表达,3株重组病毒在感染细胞中表达量分别为14.7、6.0和4.5μg/106细胞/20h,接近杆状病毒的表达水平。表达的重组蛋白可形成病毒样粒子(... 在构建3株人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV-1)Gag基因重组痘苗病毒的基础上,实现了Gag蛋白的高效表达,3株重组病毒在感染细胞中表达量分别为14.7、6.0和4.5μg/106细胞/20h,接近杆状病毒的表达水平。表达的重组蛋白可形成病毒样粒子(VLP),并可诱导小鼠产生抗HIV抗体。 展开更多
关键词 HIV-1 GAG蛋白 重组痘苗病毒 生物学特性
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HIV-1 Gag蛋白的高效表达调控研究
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作者 毛春生 金宁一 +5 位作者 郭志儒 王宏伟 马奉龙 司兴奎 李萍 殷震 《生物技术通讯》 CAS 1997年第Z1期108-108,共1页
LTR位于HIV前病毒同DNA基因组的两末端,Gag基因位于5′端LTR的下游。LTR对转录的调控作用主要是由5′端LTR进行的。LTR具有启动子的作用,在结构上具有真核启动子的典型特征。另外,HIV-1 Gag蛋白还有能够自我装配成病毒样粒子(virus like... LTR位于HIV前病毒同DNA基因组的两末端,Gag基因位于5′端LTR的下游。LTR对转录的调控作用主要是由5′端LTR进行的。LTR具有启动子的作用,在结构上具有真核启动子的典型特征。另外,HIV-1 Gag蛋白还有能够自我装配成病毒样粒子(virus like particle,VLP)并从细胞中释放出来的重要特性。 我们利用痘苗病毒表达系统。 展开更多
关键词 GAG蛋白 表达调控 重组痘苗病毒 HIV-1 病毒样粒子 启动子 高效表达 表达系统 GAG基因 重组病毒
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微量凝集试验检测鸡霍乱抗体的研究
18
作者 毛春生 卢中华 +2 位作者 崔保安 王付华 李海东 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 1992年第1期48-51,共4页
试验优选了检测鸡血清中多杀性巴氏杆菌抗体的微量凝集试验条件,改进了抗原的制备方法。结果表明,改进后的微量凝集试验具有良好的敏感性和特异性,凝集图案清晰,易于观察;试验还证实了鸡血清中的抗体凝集效价与其对强毒菌株攻击的保护... 试验优选了检测鸡血清中多杀性巴氏杆菌抗体的微量凝集试验条件,改进了抗原的制备方法。结果表明,改进后的微量凝集试验具有良好的敏感性和特异性,凝集图案清晰,易于观察;试验还证实了鸡血清中的抗体凝集效价与其对强毒菌株攻击的保护作用一致,初步认为,鸡霍乱抗体的免疫临界线为1:28。 展开更多
关键词 微量凝集试验 抗体 鸡霍乱 凝集原
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HIV-1长末端重复序列对重组痘苗病毒表达Gag蛋白的影响
19
作者 毛春生 金宁一 +4 位作者 佟明华 郭军庆 王秀清 郭志儒 殷震 《中国病毒学》 CSCD 1998年第3期199-207,共9页
将系列缺失的HIV1长末端重复序列(LTR)和全长的gagORF置于痘苗病毒载体中,经同源重组和血球吸附试验,成功地构建了6株重组痘苗病毒。免疫印迹和免疫酶试验检测均表明,6株重组病毒的Gag蛋白表达量因LTR不同... 将系列缺失的HIV1长末端重复序列(LTR)和全长的gagORF置于痘苗病毒载体中,经同源重组和血球吸附试验,成功地构建了6株重组痘苗病毒。免疫印迹和免疫酶试验检测均表明,6株重组病毒的Gag蛋白表达量因LTR不同而有明显差异,表明HIV1的LTR及其下游基因置于痘病毒启动子控制下,在痘苗病毒中表达时有下述特点:(1)不同的痘苗病毒启动子与全长LTR相互作用,对gag基因表达有显著不同的调控效果;(2)NR序列对Gag蛋白表达没有明显影响;(3)EN序列不能被重组痘苗病毒表达系统识别;(4)TAR序列可提高Gag蛋白的表达量;(5)U5区及下游非翻译序列不影响Gag蛋白的表达。 展开更多
关键词 HIV-1 LTR GAG蛋白 表达调控 痘苗病毒
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HA基因侧翼重组痘苗病毒的生物学特性研究
20
作者 毛春生 金宁一 李季枝 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 1997年第4期313-318,共6页
以痘苗病毒HA基因为侧翼,在多种类型痘病毒)启动子的下游,插入HIV-1的gag基因及其上游序列、或HIV-1gag-env嵌合基因、或狂犬病病毒的糖蛋白基因,从而构建了12株重组痘苗病毒。统计发现,以HA基因为侧翼... 以痘苗病毒HA基因为侧翼,在多种类型痘病毒)启动子的下游,插入HIV-1的gag基因及其上游序列、或HIV-1gag-env嵌合基因、或狂犬病病毒的糖蛋白基因,从而构建了12株重组痘苗病毒。统计发现,以HA基因为侧翼构建重组病毒的重组率约为0.1%,与TK基因为侧翼的重组率差别不大,但阳性重组率有很大差别,从2.7%到100%。试验观察发现,HA基因为侧翼的重组病毒具有以下生物学特性:(1)感染性稍低于野生型病毒;(2)能够稳定地表达外源蛋白;(3)可引起细胞融合。根据重组病毒能引起细胞融合的特性,改进了重组病毒的筛选方法。 展开更多
关键词 重组痘苗病毒 HA侧翼 生物学特性
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