【目的】研究金钱鱼(Scatophagus argus)Dmrt4(Doublesex and Mab-3 related transcription factors 4)基因在性腺和胚胎发育中的表达。【方法】克隆金钱鱼Dmrt4,采用逆转录PCR检测Dmrt4的组织表达,用实时荧光定量PCR检测Dmrt4在性腺和...【目的】研究金钱鱼(Scatophagus argus)Dmrt4(Doublesex and Mab-3 related transcription factors 4)基因在性腺和胚胎发育中的表达。【方法】克隆金钱鱼Dmrt4,采用逆转录PCR检测Dmrt4的组织表达,用实时荧光定量PCR检测Dmrt4在性腺和胚胎发育过程中的表达。【结果与结论】金钱鱼Dmrt4的开放阅读框(ORF)全长1 260 bp,编码蛋白全序列为419个氨基酸。金钱鱼Dmrt4氨基酸序列含有DM和DMA结构域。金钱鱼Dmrt4与欧洲海鲈(Dicentrarchus labrax)和大黄鱼(Larimichthys crocea)的同源性最高,为87.6%;与非洲爪蟾(Xenopus laevis)的同源性最低,为47.1%。金钱鱼Dmrt4与其他鲈形目鱼类在系统进化树上聚为一支。金钱鱼Dmrt4在精巢、卵巢和鳃中高表达,在Ⅲ和Ⅳ期精巢中的表达显著高于V期精巢和Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期卵巢。胚胎发育过程中Dmrt4均有表达,原肠胚的表达水平最高。展开更多
罗非鱼全雄养殖可有效控制繁殖、提高养殖效率,遗传全雄罗非鱼(Genetically male tilapia,GMT)技术是性别控制的高效手段,但GMT技术培育的鱼苗雄性率不稳定。基因组学和基因编辑等技术已广泛应用于罗非鱼研究,极大地促进了罗非鱼性别决...罗非鱼全雄养殖可有效控制繁殖、提高养殖效率,遗传全雄罗非鱼(Genetically male tilapia,GMT)技术是性别控制的高效手段,但GMT技术培育的鱼苗雄性率不稳定。基因组学和基因编辑等技术已广泛应用于罗非鱼研究,极大地促进了罗非鱼性别决定与分化基础理论研究。分析导致XY个体性别逆转的可能因素,提出将来GMT技术研究的关键问题,探讨现代基因编辑技术在罗非鱼性别控制育种中可能应用。展开更多
【目的】克隆金钱鱼cyp17a1基因,分析其在组织中的分布、卵巢不同发育时期中的表达变化,为金钱鱼繁殖生物学提供理论依据。【方法】通过金钱鱼转录组文库筛选和RT-PCR进行cyp17a1 c DNA序列扩增;用DNAstar软件比较Cyp17a1同源性,MEGA5....【目的】克隆金钱鱼cyp17a1基因,分析其在组织中的分布、卵巢不同发育时期中的表达变化,为金钱鱼繁殖生物学提供理论依据。【方法】通过金钱鱼转录组文库筛选和RT-PCR进行cyp17a1 c DNA序列扩增;用DNAstar软件比较Cyp17a1同源性,MEGA5.0构建系统进化树,RT-PCR检测cyp17a1组织表达,实时定量PCR检测不同卵巢发育时期cyp17a1的表达量。【结果】金钱鱼cyp17a1开放阅读框编码515个氨基酸残基;Cyp17a1氨基酸序列与同属鲈形目鱼类Cyp17a1同源性较高(87.8%~92.7%),与大黄鱼最高(92.7%),与其他目鱼类同源性次之(72.7%~85.0%),与硬骨鱼类Cyp17a2或Cyp17a1-like同源性最低(48.2%~51.7%);所有硬骨鱼类Cyp17a1聚为一支,在Cyp17a1分支中,金钱鱼与鲈形目鱼类聚为一支;cyp17a1在性腺中表达量较高,在精巢中表达最强;在肝、脑和头肾表达较弱;在脾脏、肠、心脏、肌肉和鳃中未检测到表达;卵巢中cyp17a1的表达量随卵巢发育逐渐增加,Ⅳ期卵巢中cyp17a1表达量最高。【结论】cyp17a1在性腺中表达量较高,在金钱鱼卵巢发育过程中有重要作用。展开更多
文摘罗非鱼全雄养殖可有效控制繁殖、提高养殖效率,遗传全雄罗非鱼(Genetically male tilapia,GMT)技术是性别控制的高效手段,但GMT技术培育的鱼苗雄性率不稳定。基因组学和基因编辑等技术已广泛应用于罗非鱼研究,极大地促进了罗非鱼性别决定与分化基础理论研究。分析导致XY个体性别逆转的可能因素,提出将来GMT技术研究的关键问题,探讨现代基因编辑技术在罗非鱼性别控制育种中可能应用。
文摘【目的】克隆金钱鱼cyp17a1基因,分析其在组织中的分布、卵巢不同发育时期中的表达变化,为金钱鱼繁殖生物学提供理论依据。【方法】通过金钱鱼转录组文库筛选和RT-PCR进行cyp17a1 c DNA序列扩增;用DNAstar软件比较Cyp17a1同源性,MEGA5.0构建系统进化树,RT-PCR检测cyp17a1组织表达,实时定量PCR检测不同卵巢发育时期cyp17a1的表达量。【结果】金钱鱼cyp17a1开放阅读框编码515个氨基酸残基;Cyp17a1氨基酸序列与同属鲈形目鱼类Cyp17a1同源性较高(87.8%~92.7%),与大黄鱼最高(92.7%),与其他目鱼类同源性次之(72.7%~85.0%),与硬骨鱼类Cyp17a2或Cyp17a1-like同源性最低(48.2%~51.7%);所有硬骨鱼类Cyp17a1聚为一支,在Cyp17a1分支中,金钱鱼与鲈形目鱼类聚为一支;cyp17a1在性腺中表达量较高,在精巢中表达最强;在肝、脑和头肾表达较弱;在脾脏、肠、心脏、肌肉和鳃中未检测到表达;卵巢中cyp17a1的表达量随卵巢发育逐渐增加,Ⅳ期卵巢中cyp17a1表达量最高。【结论】cyp17a1在性腺中表达量较高,在金钱鱼卵巢发育过程中有重要作用。