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雨生红球藻质体球滴结构蛋白基因的克隆与原核表达 被引量：5
1
作者 范勇 于广欣 +4 位作者 汪乐霓 曲芳兵 冷鹂 兰利琼 卿人韦 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期640-645,共6页
叶绿体或者有色体中的质体球滴结构(Plastoglobules)是多数植物的类胡萝卜素等次生代谢产物积累的场所,但在能大量积累虾青素的雨生红球藻中,这个结构一直没有得到确认。通过透射电子显微镜观察发现雨生红球藻的质体内确切存在plastoglo... 叶绿体或者有色体中的质体球滴结构(Plastoglobules)是多数植物的类胡萝卜素等次生代谢产物积累的场所,但在能大量积累虾青素的雨生红球藻中,这个结构一直没有得到确认。通过透射电子显微镜观察发现雨生红球藻的质体内确切存在plastoglobules结构;并通过RT-PCR结合RACE技术,从雨生红球藻cDNA文库中克隆到了与编码plastoglobules的结构蛋白(Plastoglobulin)具有高度同源性的基因序列全长,称做Hpgp基因;该基因的表达产物称之为雨生红球藻质体球滴蛋白(HPGP;Haematococcus plastoglobules pro-tein);并进一步利用原核表达系统将该编码基因进行原核诱导表达,用His-Tag蛋白分离纯化系统纯化到了目标蛋白,并用该His-Tag融合蛋白为抗原免疫实验兔,制备到了相应的一抗抗体,为下一步对该蛋白的功能阐明以及雨生红球藻的虾青素积累机制研究提供重要的基础。 展开更多
关键词 雨生红球藻 虾青素 质体球滴 基因克隆 原核表达 抗体
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播娘蒿叶绿体型△12脱饱和酶的功能研究
2
作者 李湘 叶华勋 +4 位作者 兰利琼 傅华龙 汪乐霓 陈波 卿人韦 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1375-1380,共6页
本文应用RT-PCR和RACE方法扩增出了的播娘蒿叶绿体型△12脱饱和酶(Ds-FAD2CHL)全长cDNA,其完整编码框为1344 bp,编码447个氨基酸;该基因ORF在酵母Saccharamyces cerevisiae中的表达阐明其功能为将18:1^(△9)脱饱和生成亚油酸(18:2^(△9,... 本文应用RT-PCR和RACE方法扩增出了的播娘蒿叶绿体型△12脱饱和酶(Ds-FAD2CHL)全长cDNA,其完整编码框为1344 bp,编码447个氨基酸;该基因ORF在酵母Saccharamyces cerevisiae中的表达阐明其功能为将18:1^(△9)脱饱和生成亚油酸(18:2^(△9,12));进一步切除叶绿体信号肽后的脱饱和酶在酵母中把18:1^(△9)脱饱和生成18:2^(△9,12)的效率提高了3.72%;通过GC/MS分析转基因酵母的磷脂及酰基辅酶A库发现,该脱饱和酶的作用底物为磷脂,而不是以酰基辅酶A形式结合的脂肪酸. 展开更多
关键词 播娘蒿 脂肪酸脱饱和酶 底物类型 酰基辅酶A库
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