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粪肠球菌生长曲线的测定及其对小鼠脑组织的影响 被引量：21
1
作者 王蒙蒙 张莉 +6 位作者 李慧 汪骁轩 魏殿华 高静雯 高建鹏 张华雷 齐亚银 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第4期1041-1049,共9页
为测定致羔羊脑炎粪肠球菌(Enterococcus faecalis)的生长曲线,寻求一种快速而准确的方法测定不同生长时期粪肠球菌数量,并客观评价其毒性强弱及其对小鼠脑组织的影响,试验采用平板菌落计数法和OD-Monitor振荡比浊法(Dλ值法)测定粪肠... 为测定致羔羊脑炎粪肠球菌(Enterococcus faecalis)的生长曲线,寻求一种快速而准确的方法测定不同生长时期粪肠球菌数量,并客观评价其毒性强弱及其对小鼠脑组织的影响,试验采用平板菌落计数法和OD-Monitor振荡比浊法(Dλ值法)测定粪肠球菌的生长曲线,探究该菌在合适时间段内的吸光值(D600nm)与平板菌落计数法测定的活菌数(CFU)的关系。用粪肠球菌感染小鼠,观察记录小鼠的死亡情况,最后采用Karber法计算粪肠球菌感染小鼠的半数致死量(LD50)。用LD50的剂量感染小鼠,及时采集死亡小鼠脑组织,未死亡的小鼠72h后全部剖杀取脑组织,一部分做涂片染色,制作病理切片,观察病理变化;一部分进行培养,用于PCR方法进行细菌的回收鉴定。结果显示,用两种方法测定此株粪肠球菌的生长曲线基本一致,在2~8h生长迅速,为对数生长期,8~14h生长缓慢,为稳定期,14h之后死亡数增加,进入衰亡期;对12h粪肠球菌D600nm与CFU的关系进行探讨,成功建立回归方程:y=20.769x-1.3422,R2=0.997;其感染小鼠的LD50为7.77×1011个活菌。以此剂量感染小鼠,脑组织涂片染色和培养染色,均能看到革兰氏阳性球菌;PCR结果显示,均出现了大小为112bp的条带。对脑组织进行病理学观察发现该菌可导致脑组织充血、出血、形成微血栓,脑膜充血。通过生长曲线和其D600nm与CFU关系的建立,可实时监测粪肠球菌数量,为后期更深入研究粪肠球菌穿越血脑屏障的机制奠定重要的理论基础。 展开更多
关键词 粪肠球菌 Dλ值法 平板菌落计数法 半数致死量
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不同程度冷应激对阿勒泰羔羊及杂交种血清中部分激素与抗氧化能力的影响 被引量：8
2
作者 高静雯 高建鹏 +4 位作者 汪骁轩 李傲寒 赵鑫 张莉 齐亚银 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第3期14-19,共6页
为研究强(-30~-35℃)、弱(-15~-25℃)2个温度条件下,经过0 h(常温对照)、6 h、1 d、4 d、12 d、24 d冷刺激后,阿勒泰和杂交种羔羊血清中激素和抗氧化指标的变化,为绵羊抗寒育种工作和冬季饲养管理提供相应理论参考。选取阿勒泰及杂交种... 为研究强(-30~-35℃)、弱(-15~-25℃)2个温度条件下,经过0 h(常温对照)、6 h、1 d、4 d、12 d、24 d冷刺激后,阿勒泰和杂交种羔羊血清中激素和抗氧化指标的变化,为绵羊抗寒育种工作和冬季饲养管理提供相应理论参考。选取阿勒泰及杂交种公羔各22只,随机分为11组,每组4只,冷刺激后对空腹羔羊进行颈静脉采血测定激素及抗氧化指标。结果显示,阿勒泰羔羊在急性冷应激时,胰岛素(INS)的含量较常温有所下降,低强度时差异极显著(P<0.01),高强度时差异不明显(P>0.05);2个强度冷刺激时胰高血糖素(GC)的含量都是先极显著降低后升高,慢性冷应激时,INS含量在2个强度冷刺激下都极显著下降(P<0.01),GC含量在弱冷刺激时低于常温,在强冷刺激时高于常温。杂交种羔羊冷刺激后GC含量皆高于常温,弱冷应激时下降,强时上升,冷刺激后INS含量高于常温,急性时先上升后下降,慢性时低强度时先上升后下降,高强度时为上升趋势差异不显著(P>0.05)。杂交种羔羊在强冷应激时瘦素(LEP)含量先下降后上升。2个品种羔羊急性冷应激后超氧化物歧化酶(SOD)活性都是先上升后下降,下降至低于常温的活力,慢性冷应激先上升后下降最后再上升;丙二醛(MDA)含量在弱急性冷应激时均先上升后下降,强冷刺激则持续下降;还原型谷胱甘肽(GSH)含量在急性冷应激时下降,慢性冷应激先上升后下降;谷胱甘肽还原酶(GR)含量在急性冷应激先上升后下降,慢性冷应激先下降后回升。表明冷应激能够改变机体抗氧化性能和抗寒性能,而阿勒泰羔羊和杂交种羔羊能较好的适应高寒天气。 展开更多
关键词 冷应激 激素 超氧化物歧化酶 丙二醛 谷胱甘肽 谷胱甘肽还原酶
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强冷应激对阿勒泰及杂交种羔羊脂质代谢相关基因mRNA表达量及脂肪沉积的影响 被引量：15
3
作者 汪骁轩 高静雯 +4 位作者 魏殿华 高健鹏 章莲 张莉 齐亚银 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期51-56,共6页
为探讨强冷应激对阿勒泰羊、阿勒泰和萨福克杂交羊、阿勒泰断尾羊脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,FAS)和脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)基因mRNA表达量、屠宰性能及血脂指标的影响,本实验设置常温组(15~20℃)与冷应激组(-25^-30... 为探讨强冷应激对阿勒泰羊、阿勒泰和萨福克杂交羊、阿勒泰断尾羊脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,FAS)和脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)基因mRNA表达量、屠宰性能及血脂指标的影响,本实验设置常温组(15~20℃)与冷应激组(-25^-30℃),每组每个品种3只,选择体况相近、体重(34±4)kg的6月龄羔羊,12 d后采取血液及不同部位脂肪组织。使用荧光定量PCR技术检测FAS和LPL基因mRNA含量变化,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检查羔羊血脂指标,同时测定其屠宰性能。结果表明:相较于常温组,冷应激后LPL mRNA在阿勒泰羔羊与杂交种羔羊胸部脂肪中的表达量均增高,而在断尾羊中呈下降趋势;肩胛间脂肪和腹股沟脂肪中3种羔羊的LPL mRNA的表达量都呈升高趋势。冷应激后阿勒泰羊与杂交羊胸部脂肪FAS含量升高,而断尾羊的表达下降;3种羊冷应激后肩胛间脂肪和腹股沟脂肪中FAS mRNA的表达都呈升高趋势。冷应激前后肩胛间脂肪和腹股沟脂肪中LPL表达量高于FAS。冷应激后阿勒泰羊与杂交羊总胆固醇含量显著增高,断尾羊则显著降低,冷应激后阿勒泰羊与断尾羊甘油三酯含量升高,杂交羊降低,3种羊高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量均升高。3种羊冷应激后宰前活重、胴体重、脂肪重、肌肉重、骨重、肉骨比、屠宰率、净肉率、背膘厚、GR值、眼肌面积均有所下降,皮重增高,脏器变化不明显。此结果表明寒冷环境下,机体为了抵御寒冷,需要动员更多的脂肪组织来维持机体的正常生理功能,冷应激对3种绵羊不同部位脂肪沉积与代谢有一定影响,且不同品系之间具有一定差异性。 展开更多
关键词 冷应激 脂蛋白脂酶 脂肪酸合成酶 血脂指标 屠宰性能
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急性冷应激对阿勒泰羊HSP60、HSP70和HSP90基因mRNA表达的影响 被引量：6
4
作者 魏殿华 高静雯 +2 位作者 汪骁轩 张莉 齐亚银 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第12期3680-3689,共10页
为研究急性冷应激通过影响热休克蛋白含量的变化对阿勒泰羊抗寒性能、生产性能及抗病性能等的影响,试验设置常温组(15℃±2℃)与冷应激组(-25℃±2℃),每组各5只羊,屠宰后分别采集急性冷应激组(冷应激24 h后)和常温组的心脏、... 为研究急性冷应激通过影响热休克蛋白含量的变化对阿勒泰羊抗寒性能、生产性能及抗病性能等的影响,试验设置常温组(15℃±2℃)与冷应激组(-25℃±2℃),每组各5只羊,屠宰后分别采集急性冷应激组(冷应激24 h后)和常温组的心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织。采用实时荧光定量PCR技术对HSP60、HSP70和HSP90 mRNA含量变化进行检测,并对HSP 60、HSP 70和HSP 90基因进行同源性分析。结果显示,HSP 70和HSP 90基因与已有绵羊序列同源性高于99%,而HSP 60基因与已有波斯金牛序列同源性高于99%;冷刺激后HSP 60基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肾脏中的表达量差异极显著(P<0.01);冷刺激后HSP 70基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肝脏和肾脏组织中的表达量差异极显著(P<0.01);冷刺激后HSP 90基因在心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织中的表达较常温组均升高,且在肝脏组织中表达量差异显著(P<0.05),而在脾脏和肾脏组织中的表达量差异极显著(P<0.01)。表明急性冷应激极大程度地刺激了机体的产热机能,通过通路中的产热相关基因的相互调节使其能量代谢发生改变,从而提高细胞生存率,增强机体对环境胁迫的耐受力,能更好地适应环境温度的变化。试验结果为进一步深入研究急性冷应激对阿勒泰羊机体的影响提供一定理论依据。 展开更多
关键词 急性冷应激 HSP 60基因 HSP 70基因 HSP 90基因
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寒冷环境下阿勒泰羊血常规指标检测
5
作者 汪骁轩 高静雯 +4 位作者 魏殿华 高建鹏 章莲 张莉 齐亚银 《畜牧兽医杂志》 2019年第4期53-54,共2页
为了探讨寒冷环境下对阿勒泰羊血常规指标的影响,本试验于冬季采集30只阿勒泰羊颈静脉血进行血常规检测。结果表明,阿勒泰羊在寒冷环境下白细胞、中间细胞、粒细胞数目上升;红细胞总数、血红蛋白含量有所下降。此结果说明寒冷环境会导... 为了探讨寒冷环境下对阿勒泰羊血常规指标的影响,本试验于冬季采集30只阿勒泰羊颈静脉血进行血常规检测。结果表明,阿勒泰羊在寒冷环境下白细胞、中间细胞、粒细胞数目上升;红细胞总数、血红蛋白含量有所下降。此结果说明寒冷环境会导致阿勒泰羊体内有炎症发生,还会导致阿勒泰羊出现贫血的情况,为冬季饲养阿勒泰羊提供技术支持. 展开更多
关键词 阿勒泰羊 血常规指标 寒冷环境
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慢性冷应激对断尾阿勒泰羔羊脂肪代谢相关基因mRNA表达量的影响 被引量：5
6
作者 魏殿华 汪骁轩 +3 位作者 高静雯 高建鹏 张莉 齐亚银 《现代畜牧兽医》 2019年第7期1-8,共8页
为了探讨冷应激对断尾阿勒泰羔羊FAS、LPL、SCD和PPARγmRNA表达量的影响。设置常温对照组(10~20℃),温度Ⅰ(-20^-10℃)和温度Ⅱ(-30^-20℃),每组3只羔羊,分别在4、12、24 d后采取不同部位脂肪组织。用荧光定量PCR技术对FAS、LPL、SCD和... 为了探讨冷应激对断尾阿勒泰羔羊FAS、LPL、SCD和PPARγmRNA表达量的影响。设置常温对照组(10~20℃),温度Ⅰ(-20^-10℃)和温度Ⅱ(-30^-20℃),每组3只羔羊,分别在4、12、24 d后采取不同部位脂肪组织。用荧光定量PCR技术对FAS、LPL、SCD和PPARγmRNA含量变化情况进行检测;用ELISA法测定部分血脂指标及部分血液激素指标。试验结果表明,冷应激后FAS、LPL mRNA的表达量在腹股沟脂肪中上升,在温度Ⅱ的肩胛间脂肪中上升,温度Ⅰ中下降。SCD mRNA的表达量在颈部脂肪中下降,肩胛间和腹股沟脂肪中上升。PPARγmRNA的表达量在颈部脂肪和腹股沟脂肪中上升,肩胛间脂肪中下降;血液中TG、T-CHO、LDL-C和HDL-C大体呈先上升后下降趋势,GC、LEP大体呈先下降后上升趋势,INS在不同温度下变化趋势不相同。说明了羔羊在寒冷环境下,需要消耗部分脂肪组织来维持机体的正常生理功能,而在不同温度下不同部位脂肪消耗速率有所差异。 展开更多
关键词 慢性冷应激 脂肪代谢 断尾羔羊
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慢性冷应激对断尾阿勒泰羔羊细胞因子mRNA表达量的影响 被引量：1
7
作者 魏殿华 汪骁轩 +3 位作者 高静雯 高建鹏 张莉 齐亚银 《现代畜牧兽医》 2019年第9期1-6,共6页
为了研究慢性冷应激对断尾阿勒泰羔羊IL-1(白细胞介素1)、IL-6(白细胞介素6)、IL-12(白细胞介素12)和IFNγ(γ-干扰素)mRNA表达量的影响。试验设置常温对照组(10~20℃)、温度一(-20^-10℃)和温度二(-30^-20℃),每组3只羔羊,分别在4、12... 为了研究慢性冷应激对断尾阿勒泰羔羊IL-1(白细胞介素1)、IL-6(白细胞介素6)、IL-12(白细胞介素12)和IFNγ(γ-干扰素)mRNA表达量的影响。试验设置常温对照组(10~20℃)、温度一(-20^-10℃)和温度二(-30^-20℃),每组3只羔羊,分别在4、12、24 d后采集外周血液白细胞和脾脏组织。用荧光定量PCR技术对IL-1、IL-6、IL-12和IFNγmRNA含量变化情况进行检测。结果表明:冷应激后IL-6、IL-12 mRNA的表达量在外周血液白细胞和脾脏中上升。IL-1、IFNγm RNA的表达量在脾脏中上升,在-30^-20℃下外周血液白细胞中上升。说明断尾阿勒泰羔羊在寒冷环境下,体内细胞因子含量总体出现上升趋势,冷应激会造成断尾阿勒泰羔羊机体内出现炎症等损伤。 展开更多
关键词 慢性冷应激 细胞因子 断尾羔羊 外周血液白细胞
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北疆地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏试验 被引量：1
8
作者 章莲 武磊 +4 位作者 高建鹏 汪骁轩 赵鑫 齐亚银 张莉 《甘肃畜牧兽医》 2019年第4期45-49,共5页
为科学防控新疆北疆地区3个规模化猪场副猪嗜血杆菌病,本试验采集表现出HPS病典型症状的病死猪肺脏、淋巴结和胸腹腔渗出液等病料,选择TSA培养基进行致病菌的分离,采用生理生化特性及基于PCR的分子特性对病原菌进行鉴定,同时对其药物敏... 为科学防控新疆北疆地区3个规模化猪场副猪嗜血杆菌病,本试验采集表现出HPS病典型症状的病死猪肺脏、淋巴结和胸腹腔渗出液等病料,选择TSA培养基进行致病菌的分离,采用生理生化特性及基于PCR的分子特性对病原菌进行鉴定,同时对其药物敏感性进行检测。结果表明,从病料中共分离出5株副猪嗜血杆菌,分别编号为XJS1-2、XJS3-6、XJS3-9、XJS7-W、XJS7-7,药敏试验结果表明,不同来源的分离株对不同药物的敏感程度不同,5株分离株均对环丙沙星、诺氟沙星和新霉高敏,对氨苄西林较为中敏,对利福平和头孢类药物耐药。研究结果对该地区规模化猪场的副猪嗜血杆菌病防治提供临床防控参考。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 分离 药敏试验
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强冷应激对阿勒泰羔羊血清IgG、皮质醇及小肠免疫相关细胞的影响 被引量：8
9
作者 高静雯 汪骁轩 +4 位作者 魏殿华 高建鹏 章莲 张莉 齐亚银 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期967-974,共8页
为了探讨较强寒冷刺激对阿勒泰羔羊血清IgG和皮质醇含量的影响及小肠黏膜免疫屏障的适应特征。把阿勒泰羔羊置于-30～-35℃分别进行0,6 h、1,4,12,24 d的冷刺激,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对阿勒泰羔羊血清中IgG和皮质醇的含量进行测... 为了探讨较强寒冷刺激对阿勒泰羔羊血清IgG和皮质醇含量的影响及小肠黏膜免疫屏障的适应特征。把阿勒泰羔羊置于-30～-35℃分别进行0,6 h、1,4,12,24 d的冷刺激,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对阿勒泰羔羊血清中IgG和皮质醇的含量进行测定;通过石蜡切片和HE染色对阿勒泰羔羊小肠的显微结构进行观察;并通过改良甲苯胺蓝染色鉴定小肠中的甲苯胺蓝染色阳性细胞。发现冷应激后IgG质量浓度都比正常组明显降低,其中冷应激4 d与正常组质量浓度差异极显著(P<0.01),冷应激后皮质醇质量浓度比正常组表达上升,其中冷应激6 h时与正常组差异显著(P<0.05),而24 d与正常组差异极显著(P<0.01);IgG与皮质醇浓度在4,12和24 d呈较强正相关,6 h和1 d呈负相关,说明在强冷应激时,绵羊机体免疫机能的调节及抗炎症反应等受到了抑制。冷应激后十二指肠、空肠和回肠的显微结构发生了相应变化,其中最明显的是肠绒毛变短且变粗,回肠内淋巴小结数量增多;对小肠免疫相关细胞而言,同一温度下各肠段中细胞数量呈趋势变化,上皮内淋巴细胞和杯状细胞的数量在十二指肠、空肠和回肠中呈上升趋势,而肥大细胞数量呈下降趋势;冷应激后淋巴细胞数量较常温有所减少,杯状细胞和肥大细胞数量较常温下都有所增加,说明在强冷应激下机体通过激素的释放努力适应环境变化的同时,也会使小肠免疫功能下降。 展开更多
关键词 阿勒泰羔羊 强冷应激 IgG 皮质醇 上皮内淋巴细胞 杯状细胞 肥大细胞
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新疆奎屯地区奶牛子宫内膜炎病原菌分离鉴定及药敏试验 被引量：4
10
作者 赵鑫 高建鹏 +3 位作者 章莲 汪骁轩 齐亚银 张莉 《当代畜牧》 2018年第12期27-29,共3页
为了解引起新疆奎屯地区奶牛子宫内膜炎的致病菌种类及其耐药性,笔者采用常规方法采集患病牛只的子宫分泌物,并对其进行致病菌的分离、培养、纯化和鉴定,用药敏纸片扩散法测定药物敏感性。结果显示,引起奶牛子宫内膜炎的致病菌主要为大... 为了解引起新疆奎屯地区奶牛子宫内膜炎的致病菌种类及其耐药性,笔者采用常规方法采集患病牛只的子宫分泌物,并对其进行致病菌的分离、培养、纯化和鉴定,用药敏纸片扩散法测定药物敏感性。结果显示,引起奶牛子宫内膜炎的致病菌主要为大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、蜡样芽孢杆菌和沙门氏菌。分离菌株的药敏试验表明,主要病原菌对喹诺酮类药物、内酰胺类药物敏感性较强;对四环素、利福平类药物有一定的耐药性。 展开更多
关键词 奶牛 子宫内膜炎 致病菌 分离鉴定 药敏试验
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