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沈佰华作品
1
作者 沈佰华 《美术教育研究》 2015年第2期178-178,共1页
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多糖和益生菌对暗纹东方免疫功能的调节 被引量：26
2
作者 华雪铭 周洪琪 +3 位作者 张冬青 李宁丽 余奇文 沈佰华 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期230-235,共6页
为了研究多糖、益生菌等免疫增强剂对暗纹东方的免疫调节作用,本试验随机将暗纹东方[(167.8±24.4)g]分为6组。其中阳性对照组为免疫功能低下组,投喂基础饲料、注射8mg.kg-1体重的环磷酰胺;阴性对照组为免疫功能正常组,投喂基础饲... 为了研究多糖、益生菌等免疫增强剂对暗纹东方的免疫调节作用,本试验随机将暗纹东方[(167.8±24.4)g]分为6组。其中阳性对照组为免疫功能低下组,投喂基础饲料、注射8mg.kg-1体重的环磷酰胺;阴性对照组为免疫功能正常组,投喂基础饲料、注射生理盐水;其余试验组分别用含有0.2%壳聚糖、0.1%益生菌、甘露聚糖与益生菌混合物、壳聚糖与益生菌混合物的饲料连续投喂30d,同时注射8mg.kg-1体重的环磷酰胺。测定各组暗纹东方的外周血白细胞数量及吞噬活性、肝胰脏溶菌酶活性、头肾与脾脏淋巴细胞转化、头肾与脾脏IFN-α含量、头肾与脾脏IgM含量进行免疫功能的比较。结果表明,多糖和益生菌对免疫功能低下的暗纹东方具有免疫调节作用。所检测的各项免疫指标均有不同程度的恢复,或处于免疫功能正常与环磷酰胺所致免疫抑制水平之间,或恢复至正常水平或超过正常水平。不同免疫增强剂对同一种免疫器官、免疫细胞或免疫分子的调节作用或同一种免疫增强剂对不同的免疫器官或免疫细胞或免疫分子的调节作用均存在差异。从整体效果看,在所研究的4种免疫增强剂中,甘露聚糖与益生菌混合物的免疫调节作用最弱。 展开更多
关键词 暗纹东方纯 多糖 益生菌 免疫调节
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丹参对衰老鼠脑海马神经细胞凋亡作用的研究 被引量：23
3
作者 朱健 蔡文纬 +3 位作者 陈朝婷 成静 张静敏 沈佰华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期46-48,共3页
目的　研究丹参对衰老鼠脑海马神经细胞凋亡的作用。方法　用 TUNEL法及流式细胞仪观察衰老鼠的神经细胞凋亡 ,并用免疫组织化学法检测相关基因表达变化。以丹参注射液干预衰老的大鼠模型 ,观察了丹参对衰老鼠神经细胞凋亡的作用。结果... 目的　研究丹参对衰老鼠脑海马神经细胞凋亡的作用。方法　用 TUNEL法及流式细胞仪观察衰老鼠的神经细胞凋亡 ,并用免疫组织化学法检测相关基因表达变化。以丹参注射液干预衰老的大鼠模型 ,观察了丹参对衰老鼠神经细胞凋亡的作用。结果　衰老鼠海马细胞有典型的凋亡特征 ,与丹参组比较海马细胞的凋亡率有明显差异 ,衰老鼠 bcl- 2表达下调 ,而 bax的表达量明显增加 ,基因表达变化与流式细胞仪测定的细胞凋亡率相一致。 展开更多
关键词 衰老 丹参 海马神经细胞 细胞凋亡
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用荧光定量法检测Caspase-3的活性 被引量：14
4
作者 张勇 沈佰华 +3 位作者 余奇文 马安伦 李宁丽 张冬青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期188-190,共3页
目的通过检测Caspase3的活性反映Jurkat细胞凋亡。方法用放线菌素D诱导Jurkat细胞8h,裂解细胞,荧光分光光度计测定Caspase3的活性。同时,用Hoechst法进行检测,并进行平行的方法学比较。结果Ju-rkat细胞经不同浓度50μmol/L和100μmo... 目的通过检测Caspase3的活性反映Jurkat细胞凋亡。方法用放线菌素D诱导Jurkat细胞8h,裂解细胞,荧光分光光度计测定Caspase3的活性。同时,用Hoechst法进行检测,并进行平行的方法学比较。结果Ju-rkat细胞经不同浓度50μmol/L和100μmol/L的放线菌素D诱导后,Caspase3的活性显著增高,倍增值分别为10.091和10.818,相应的Caspase3活性单位为0.641和0.659;而未经诱导的Jurkat细胞仅为0.061。加入Cas-pase3抑制剂后,倍增值分别为0.101和0.119,Caspase3的活性单位为0.006和0.007。而用Hoechst法染色时,可见Jurkat细胞仅出现早期凋亡的形态学改变。结论荧光定量法是一种良好的定量检测Caspase3的方法,可用于检测早期的细胞凋亡。 展开更多
关键词 CASPASE-3 荧光定量法 细胞凋亡 检测 JURKAT细胞
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异育银鲫实验性免疫抑制模型的建立 被引量：10
5
作者 陈勇 周洪琪 +3 位作者 余奇文 张继英 沈佰华 柏峻 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期227-231,共5页
分别以每kg体重鱼注射0、1、10、20 mg环磷酰胺的剂量、每隔5 d给异育银鲫注射1次,共注射3次,第16天检测各组试验鱼外周血白细胞数量及吞噬活性、不同类型的白细胞数量变化、脾脏和头肾的溶菌酶活性、体外培养外周血B淋巴细胞分泌的IgM... 分别以每kg体重鱼注射0、1、10、20 mg环磷酰胺的剂量、每隔5 d给异育银鲫注射1次,共注射3次,第16天检测各组试验鱼外周血白细胞数量及吞噬活性、不同类型的白细胞数量变化、脾脏和头肾的溶菌酶活性、体外培养外周血B淋巴细胞分泌的IgM、IFN-α含量、外周血NK细胞杀伤功能及头肾、脾脏、外周血B淋巴细胞转化能力。结果表明,环磷酰胺剂量的增加可以使试验鱼外周血白细胞的数量包括各种类型的白细胞的数量、体外培养外周血B淋巴细胞分泌的IgM、IFN-α含量下降,脾脏和头肾的溶菌酶活性、外周血白细胞吞噬活性及头肾、脾脏、外周血B淋巴细胞转化能力降低。提出每kg鱼10mg的环磷酰胺是建立异育银鲫实验性免疫抑制模型的适宜剂量。 展开更多
关键词 异育银鲫 免疫抑制模型 环磷酰胺
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中国猪种DQA新等位基因的克隆和分析 被引量：11
6
作者 陈福祥 谢晋 +2 位作者 张勇 沈佰华 周光炎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期111-116,共6页
目的 :克隆和序列分析中国猪种DQA基因cDNA ,为猪异种器官移植的免疫识别机理的研究提供基础。方法 :采用RT PCR方法扩增广西巴马猪 (GXP)、贵州香猪 (GZP)及云南小耳猪 (YNP)DQA基因cDNA ,克隆入测序载体 ,然后进行测序及其序列分析。... 目的 :克隆和序列分析中国猪种DQA基因cDNA ,为猪异种器官移植的免疫识别机理的研究提供基础。方法 :采用RT PCR方法扩增广西巴马猪 (GXP)、贵州香猪 (GZP)及云南小耳猪 (YNP)DQA基因cDNA ,克隆入测序载体 ,然后进行测序及其序列分析。结果 :获得具有阅读框架的 3个结构和已有序列不同的DQA新等位基因 (GXPDQA、GZPDQA和YNPDQA) ,基因序列号分别为AY10 2 4 73,AY10 2 4 74和AY10 2 4 75 ,其长度分别为 76 5、76 8和 76 8个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,分别编码2 5 4、2 5 5和 2 5 5个氨基酸残基。结论 :发现了 3个猪DQA新等位基因 ,同时发现中国猪种DQA基因及其推导的氨基酸与人相应基因的同源性明显高于小鼠。 展开更多
关键词 猪白细胞抗原DQA 主要组织相容性复合体 异种移植
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环磷酰胺和嗜水气单胞菌对暗纹东方免疫抑制的研究 被引量：11
7
作者 华雪铭 周洪琪 +3 位作者 余奇文 沈佰华 张继英 柏峻 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期494-498,共5页
对暗纹东方分别注射 8、 0 8、 0 0 8mg/kg·bw的环磷酰胺 ,5d一次 ,连续 3次 ,并与一次性注射嗜水气单胞菌 (1× 1 0 5CFU/kg·bw )相比较 ,研究其对暗纹东方免疫功能的影响。结果显示 ,注射适当浓度的环磷酰胺和... 对暗纹东方分别注射 8、 0 8、 0 0 8mg/kg·bw的环磷酰胺 ,5d一次 ,连续 3次 ,并与一次性注射嗜水气单胞菌 (1× 1 0 5CFU/kg·bw )相比较 ,研究其对暗纹东方免疫功能的影响。结果显示 ,注射适当浓度的环磷酰胺和嗜水气单胞菌可明显减弱暗纹东方肝胰脏溶菌酶活性、脾脏NK细胞杀伤率、脾脏B淋巴细胞转化能力 ,显著降低白细胞吞噬指数和血清干扰素 (IFN α )含量 (P <0 0 5 )。选择 8mg/kg·bw环磷酰胺和 1× 1 0 5CFU/kg·bw的嗜水气单胞菌作为注射浓度可以抑制暗纹东方的免疫功能。相比之下 ,在试验范围内 ,环磷酰胺对暗纹东方免疫能力的抑制程度更大 ,范围更广 ,稳定性更好。 展开更多
关键词 暗纹东方鲍 免疫抑制 环磷酰胺 嗜水气单胞菌
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类风湿性关节炎患者关节滑膜液浸润的T细胞表达特性 被引量：6
8
作者 张冬青 李宁丽 +6 位作者 王利 余奇文 沈佰华 臧敬五 冯国璋 许荣 倪立清 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期275-277,共3页
目的 :为研究类风湿性关节炎 (RA)患者关节滑膜液浸润的淋巴细胞介导自身免疫病的特性 ,分析了 2 2例RA患者滑膜液中淋巴细胞的免疫表型、对II型胶原的反应频率及IL 10、IL 12的分泌格局。方法 :用流式细胞术分别测定滑膜液和外周血淋... 目的 :为研究类风湿性关节炎 (RA)患者关节滑膜液浸润的淋巴细胞介导自身免疫病的特性 ,分析了 2 2例RA患者滑膜液中淋巴细胞的免疫表型、对II型胶原的反应频率及IL 10、IL 12的分泌格局。方法 :用流式细胞术分别测定滑膜液和外周血淋巴细胞表型 ,并采用国际标准半有限稀释法分析了关节滑膜液中浸润的淋巴细胞对II型胶原 (CII)的反应频率 ,同时用ELISA方法检测了滑膜液与外周血中IL 10与IL 12含量。结果 :滑膜液中的T淋巴细胞的表型分别为CD4 (39 6 %±10 5 % )和CD8细胞 (36 4 %± 16 4 % ) ,CD4 CD8细胞比值显著低于外周血 ,且同时表达CD16和CD5 6的活化NK细胞占15 5 %± 11 1%。T细胞受体谱取用表明仍以αβTCR为主 (6 9 6 %± 15 7% )。有意义的是 :滑膜液中的T细胞对CII的反应频率为 15 2× 10 - 6 ,远远高于外周血 (4 0× 10 - 6 )。IL 12含量为 (4 19 9± 89 2 )pg ml,IL 10含量为 (187 7± 34 5 )pg ml,与外周血中这 2种细胞因子的含量〔分别为IL 12 :(6 5 32± 34 2 )pg ml和IL 10 :(85± 12 7)pg ml〕比较 ,具有显著的统计学差异。结论 :上述实验结果表明这种具有表达特性的浸润T细胞介导了RA患者关节滑膜组织的免疫损伤。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 关节滑膜液 浸润 T细胞
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DNA断端标记法分析HL-60和U937白血病细胞株凋亡 被引量：8
9
作者 李宁丽 沈佰华 +1 位作者 郑泽铣 周光炎 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期391-394,共4页
使用DNA断端标记法（TDT法）定量观察了白血病细胞株HL－60和U937对顺氯氨铂，羟基喜树碱，长春新碱3种抗肿瘤药物所发生的凋亡变化。HL－60对顺氯氨铂很敏感。U937对羟基树碱、长春新碱敏感。比较了核酸电泳检测的结果。并首次报道了用... 使用DNA断端标记法（TDT法）定量观察了白血病细胞株HL－60和U937对顺氯氨铂，羟基喜树碱，长春新碱3种抗肿瘤药物所发生的凋亡变化。HL－60对顺氯氨铂很敏感。U937对羟基树碱、长春新碱敏感。比较了核酸电泳检测的结果。并首次报道了用TDT法在荧光显微镜下可观察到细胞凋亡的三种不同形态。 展开更多
关键词 DNA断端标记法 细胞凋亡 白血病
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Cyr61促进RA滑膜细胞增殖及炎症因子调控研究 被引量：5
10
作者 林锦骠 吴娟娟 +3 位作者 王利 邹静 沈佰华 李宁丽 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期264-269,共6页
目的:采用类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞的体外培养,研究基质蛋白Cyr61在RA滑膜细胞增殖中的作用及其机制。方法:通过Real-time PCR、Western blot和免疫组化检测RA病人的滑膜组织和细胞中Cyr61的表达情况;用3H-TdR掺入法检测滑膜液(... 目的:采用类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞的体外培养,研究基质蛋白Cyr61在RA滑膜细胞增殖中的作用及其机制。方法:通过Real-time PCR、Western blot和免疫组化检测RA病人的滑膜组织和细胞中Cyr61的表达情况;用3H-TdR掺入法检测滑膜液(SF)对滑膜细胞增殖的影响;用ELISA方法检测RA患者滑膜液中Cyr61蛋白的水平。结果:RA病人的滑膜组织和细胞中高表达Cyr61;SF能刺激滑膜细胞发生明显增殖;且RA患者滑膜液中含高浓度的Cyr61蛋白。用SiRNA干扰技术抑制滑膜细胞中Cyr61基因表达,再加入滑膜液后,则滑膜细胞增殖明显降低。同时,将SF与anti-Cyr61抗体共同孵育后再刺激滑膜细胞,FLS也不再发生明显增殖。进一步研究滑膜液中与上调Cyr61表达有关的炎症细胞因子,发现SF中IFNγ-和TNFα-具有上调Cyr61蛋白表达的作用。结论:Cyr61蛋白是促进滑膜细胞增殖的重要调控基因;RA患者滑膜液中含有高浓度的炎症因子IFNγ-和TNFα-,通过上调Cyr61蛋白表达而促进滑膜细胞增殖,可能是促进RA病理性滑膜增生的重要因素之一。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 滑膜液 Cyr61 滑膜纤维样细胞 TNFα-/IFNγ-
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重组人可溶性TRAIL分子诱导细胞凋亡机理探讨 被引量：8
11
作者 李宁丽 路丽明 +4 位作者 沈佰华 刘莉莉 王利 余奇文 张冬青 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第1期10-14,共5页
目的探讨重组人可溶性TRAIL蛋白(rhsTRAIL)诱导细胞凋亡的机理。 方法应用DNA染料和流式细胞仪定性分别检测rhsTRAIL诱导的细胞凋亡;流式细胞仪检测靶细胞膜表面TRAIL受体表达格局,荧光定量法检测凋亡细胞中Caspase-3活性。 结果100ng/m... 目的探讨重组人可溶性TRAIL蛋白(rhsTRAIL)诱导细胞凋亡的机理。 方法应用DNA染料和流式细胞仪定性分别检测rhsTRAIL诱导的细胞凋亡;流式细胞仪检测靶细胞膜表面TRAIL受体表达格局,荧光定量法检测凋亡细胞中Caspase-3活性。 结果100ng/ml人可溶性TRAIL蛋白分子对外周血淋巴细胞无明显毒性,但可诱导肿瘤细胞凋亡,不同的肿瘤细胞凋亡率有差异,凋亡范围在26％-57％。不同细胞表面TRAIL受体表达量不同,外周血淋巴细胞的死亡受体DR4、DR5受体表达5％,而诱骗受体DcRl表达55％,相反肿瘤细胞上的DR4、DR5表达高(40％-88％),而DcRI表达很低(8％-17％)。rhsTRAIL诱导HL-60细胞发生凋亡,其细胞内Caspase-3活性增高。ActD可增加TRAIL抑制细胞生长活性。 结论重组人可溶性TRAIL蛋白分子可诱导肿瘤细胞凋亡,凋亡活性TRAIL受体类型及Caspase-3活性增高有关。 展开更多
关键词 人可溶性TRAIL蛋白 细胞凋亡 CASPASE-3 诱骗受体 死亡受体
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酵母菌表达倍菲隆发酵工艺研究 被引量：4
12
作者 李宁丽 马安伦 +8 位作者 余奇文 沈佰华 张继英 聂红 柏峻 沈天伟 席波 李广善 张冬青 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第1期57-61,共5页
目的 :为了探索用酵母菌表达乙型干扰素 (倍菲隆 )的大批生产的发酵工艺流程及优化的重要参数。选用 1 5L不锈钢发酵罐作为乙型干扰素发酵工艺研究系统。方法 :探索了种细胞密度对初始发酵期 (甘油利用期 )的影响 ,启动甘油补充期的溶... 目的 :为了探索用酵母菌表达乙型干扰素 (倍菲隆 )的大批生产的发酵工艺流程及优化的重要参数。选用 1 5L不锈钢发酵罐作为乙型干扰素发酵工艺研究系统。方法 :探索了种细胞密度对初始发酵期 (甘油利用期 )的影响 ,启动甘油补充期的溶解氧浓度 ,诱导目的蛋白表达时添加甲醇的速率条件控制 ,pH对酵母菌生长与蛋白表达的影响以及发酵时间对乙型干扰素表达量影响等重要发酵工艺参数。结果 :接种高密度的种菌 (OD60 0为 9)时酵母菌增殖快 ,湿细胞重量于1 8h即达到 1 5 7g L。当DO恢复至 67%时即开始补充甘油可使酵母菌在 5h内增殖达到 2 1 9g L。添加甲醇速率从 2 %(甲醇终浓度为 0 0 3%)开始 ,逐步增加 ,在 2 4h内达到 33%的添加速率 (甲醇终浓度为 0 5 %)。甲醇诱导前pH为 6时最有利于酵母菌生长 ,在蛋白表达时期 ,控制发酵罐内pH值在 3 0 ,可得最高蛋白表达量。发酵 70h乙型干扰素表达量达到高峰。结论 :接种高密度种菌可促进工程菌生长 ,当DO恢复至 67%时开始补充甘油可加快酵母菌生长 ,在诱导期中缓慢添加甲醇并维持发酵罐pH为 3 0 ,发酵 70h可获得最佳蛋白生产量。 展开更多
关键词 乙型干扰素 倍菲隆 发酵工艺 酵母菌 表达
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天花粉蛋白通过抗原加工提呈调节T细胞免疫应答 被引量：8
13
作者 李宁丽 郑泽铣 +1 位作者 沈佰华 周光炎 《实验生物学报》 CSCD 1997年第2期165-171,共7页
用三种抗原加工阻断剂预处理抗原提呈细胞(APC)1h后再用天花粉蛋白(Tk)脉冲处理,观察经由APC递呈的Tk对PMA和A23187诱发T细胞增殖的作用。结果表明,这些药物均能不同程度地阻断Tk的抑制效应,以氯喹和Leupeptin的作用更为明显。用胶体金... 用三种抗原加工阻断剂预处理抗原提呈细胞(APC)1h后再用天花粉蛋白(Tk)脉冲处理,观察经由APC递呈的Tk对PMA和A23187诱发T细胞增殖的作用。结果表明,这些药物均能不同程度地阻断Tk的抑制效应,以氯喹和Leupeptin的作用更为明显。用胶体金标记Tk(Tk-G),电镜下观察Tk在T细胞和APC内的定位,发现Tk-G仅与APC发生细胞表面粘附,继而内化,先后出现在APC的内体和溶酶体中。上述实验提示,在本实验采用的剂量范围内,Tk可通过外源性抗原的加工途径,被APC处理后,调节T细胞的免疫应答。 展开更多
关键词 天花粉蛋白 免疫抑制 抗原加工 提呈 免疫应答
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Cyr61、TNF-α、IL-6和IL-1β与颈动脉损伤后再狭窄的关系 被引量：3
14
作者 张春炳 朱健 +2 位作者 张秋玉 吴娟娟 沈佰华 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1410-1415,共6页
目的探讨富含半胱氨酸61蛋白(Cyr61)及组织炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β与颈动脉损伤后再狭窄发生的关系。方法36只Wistar大鼠随机分为模型组和对照组(n=18)。模型组大鼠经2F Fogarty球囊导管损伤左颈总动脉建立颈动脉血管成形术模型,... 目的探讨富含半胱氨酸61蛋白(Cyr61)及组织炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β与颈动脉损伤后再狭窄发生的关系。方法36只Wistar大鼠随机分为模型组和对照组(n=18)。模型组大鼠经2F Fogarty球囊导管损伤左颈总动脉建立颈动脉血管成形术模型,分别于建模后1、4、7、14、28 d和3月取材,观察血管壁组织的病理学改变;免疫组化和Rea1-time PCR技术检测血管壁组织中Cyr61、TNF-α、IL-6和IL-1β的表达变化;ELISA法测定血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平。结果球囊损伤后血管壁新生内膜在术后7 d出现,术后28 d时达到高峰;形成的新生内膜厚度不均,较对照组明显增厚(P<0.01);大鼠颈总动脉损伤后,血管壁组织Cyr61、TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);而血清炎症因子水平无明显变化。结论大鼠颈总动脉球囊损伤后血管壁Cyr61、TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显增强,提示Cyr61可能与炎症因子相互协同作用,使血管壁组织增生而最终导致再狭窄的发生。 展开更多
关键词 富含半胱氨酸61蛋白 炎症因子 颈动脉血管成形术 血管损伤 再狭窄
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自体角质形成细胞在混合皮肤移植中诱导免疫抑制 被引量：3
15
作者 周洪 沈佰华 +2 位作者 李宁丽 郑泽铣 周光炎 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期346-347,共2页
目的探索混合皮肤移植中，自体皮岛诱发移植免疫耐受的免疫机制。方法在体外建立混合表皮淋巴细胞(MELC)培养体系，以反映移植受者对皮肤移植物的免疫排斥反应。同时，将自体表皮细胞引入已建立的混合表皮淋巴细胞培养体系，以模仿混合... 目的探索混合皮肤移植中，自体皮岛诱发移植免疫耐受的免疫机制。方法在体外建立混合表皮淋巴细胞(MELC)培养体系，以反映移植受者对皮肤移植物的免疫排斥反应。同时，将自体表皮细胞引入已建立的混合表皮淋巴细胞培养体系，以模仿混合皮肤移植中的自体皮岛效应,并分析发挥抑制效应的细胞来源。结果自体角质形成细胞可抑制淋巴细胞对同种异体抗原的增殖。结论自体皮岛中的角质形成细胞参与对同种异体抗原的提呈而诱导移植物耐受。 展开更多
关键词 混合皮肤移植 自体角质形成细胞 同种异体抗原提呈 免疫抑制
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从健康人外周血中建立异种抗原特异性的T细胞系初探 被引量：3
16
作者 谢晋 李宁丽 +2 位作者 张冬青 沈佰华 周光炎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期315-317,共3页
目的 :为了探讨异种器官移植中T细胞参与的免疫排斥机理 ,从健康人外周血中试行建立识别猪淋巴细胞抗原特异性的T细胞系方法研究。方法 :通过照光致弱的猪外周血单个核细胞反复刺激人的T淋巴细胞 ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞。... 目的 :为了探讨异种器官移植中T细胞参与的免疫排斥机理 ,从健康人外周血中试行建立识别猪淋巴细胞抗原特异性的T细胞系方法研究。方法 :通过照光致弱的猪外周血单个核细胞反复刺激人的T淋巴细胞 ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞。结果 :获得 2株为TCRαβ+CD3+CD8+细胞 ,另 1株为TCRαβ+CD3+CD4+细胞。结论 :健康人外周血中有识别异种抗原特异性的T细胞系 。 展开更多
关键词 异种细胞抗原 异种移植 T细胞系
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两种人乳头瘤病毒分型检测方法的比较 被引量：3
17
作者 蒋卫 张艳 +3 位作者 王瑛 沈佰华 王利 李宁丽 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期962-966,共5页
目的通过比较PCR联合地高辛标记探针杂交法与实时荧光定量PCR法检测宫颈液标本中人乳头瘤病毒（HPV）感染的一致性,评价PCR联合地高辛标记探针杂交法的临床应用价值。方法将4型HPV（16、51、54和56）探针3′端加尾地高辛标记,检测标记... 目的通过比较PCR联合地高辛标记探针杂交法与实时荧光定量PCR法检测宫颈液标本中人乳头瘤病毒（HPV）感染的一致性,评价PCR联合地高辛标记探针杂交法的临床应用价值。方法将4型HPV（16、51、54和56）探针3′端加尾地高辛标记,检测标记探针的灵敏度和特异性。收集63例第二代杂交捕获（HC-Ⅱ）阳性和18例HC-Ⅱ阴性的宫颈液标本,采用HPV通用引物MY11/09对所有标本L1区基因序列进行PCR扩增,利用地高辛标记探针杂交法对PCR产物进行检测分型;同时利用实时荧光定量PCR对这81例标本进行检测,将两者的检测结果进行比较。结果地高辛标记探针杂交法检测出HC-Ⅱ阳性标本中HPV-16型40例,HPV-51型2例,HPV-56型2例,分别占HC-Ⅱ阳性标本的63.5%、3.2%和3.2%,HC-Ⅱ阴性标本中检测出HPV-16型1例;实时荧光定量PCR法检测出HC-Ⅱ阳性标本中HPV-16型39例,HPV-51型2例,HPV-56型2例,占HC-Ⅱ阳性标本的61.9%、3.2%和3.2%,HC-Ⅱ阴性标本中检测出HPV-16型1例;重复性检测显示两种方法检测4型HPV感染的变异系数（CV）为0-1.45%和0-1.50%,检测标本中4型感染的符合率为97.5%-100%。结论PCR联合地高辛标记探针杂交法具有较好的灵敏度和特异性,可能对于临床HPV分型检测有应用价值。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 杂交 实时荧光定量聚合酶链反应
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可溶性TRAIL重组蛋白治疗CIA实验研究 被引量：2
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作者 刘莉莉 李宁丽 +6 位作者 张继英 余奇文 王利 沈佰华 聂红 柏俊 张冬青 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期129-132,共4页
用sTRAIL重组蛋白治疗CIA模型 ,探讨sTRAIL用于自身免疫病治疗的可能性。将鸡肋骨II型胶原蛋白注射大鼠 ,建立了RA的动物模型———胶原诱导性关节炎 ,自制的可溶性TRAIL蛋白治疗CIA ,观察治疗后关节炎指数与血清中炎性细胞因子的变化... 用sTRAIL重组蛋白治疗CIA模型 ,探讨sTRAIL用于自身免疫病治疗的可能性。将鸡肋骨II型胶原蛋白注射大鼠 ,建立了RA的动物模型———胶原诱导性关节炎 ,自制的可溶性TRAIL蛋白治疗CIA ,观察治疗后关节炎指数与血清中炎性细胞因子的变化。结果是sTRAIL 30 0ng/只 (0 1ml/次 )局部应用于关节炎部位 ,皮下注射 1周以后 ,sTRAIL应用的大鼠症状较对照组指数评分稍有下降 ;患病大鼠较正常大鼠IFN γ和TNF α表达量增加 ,而经过sTRAIL治疗后两者表达量都有显著下降 (P <0 0 5 )。提示sTRAIL局部应用后可缓解关节炎的局部炎症 ,可能是通过抑制激活的淋巴细胞 。 展开更多
关键词 STRAIL 炎症 细胞因子 胶原诱导性关节炎 动物模型 自身免疫病
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多巴胺诱发PC12细胞凋亡的研究 被引量：2
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作者 周国庆 周孝达 +1 位作者 李宁丽 沈佰华 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1998年第9期514-515,共2页
目的：研究帕金森病（ＰＤ）黑质多巴胺（ＤＡ）神经元的死亡机制。方法：用脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）标记法，借助荧光显微镜观察多巴胺对ＰＣ１２细胞凋亡的影响。结果：ＤＡ可诱发ＰＣ１２细胞凋亡，适中浓度时（０．４５ｍｍｏｌ／Ｌ... 目的：研究帕金森病（ＰＤ）黑质多巴胺（ＤＡ）神经元的死亡机制。方法：用脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）标记法，借助荧光显微镜观察多巴胺对ＰＣ１２细胞凋亡的影响。结果：ＤＡ可诱发ＰＣ１２细胞凋亡，适中浓度时（０．４５ｍｍｏｌ／Ｌ）ＰＣ１２细胞凋亡数最多（凋亡率为４８．７％±６．３％）；抗氧化剂Ｎ乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）可部分阻止ＤＡ诱发的ＰＣ１２细胞凋亡（Ｐ＜０．０１）。结论：凋亡参与了ＰＤ的病变过程。 展开更多
关键词 PC12细胞 震颤性麻痹 细胞凋亡 多巴胺
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人Fas配体蛋白在大肠杆菌中的融合表达与应用 被引量：1
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作者 李宁丽 聂红 +6 位作者 余奇文 柏峻 马安伦 张继英 沈佰华 王利 张冬青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期20-22,共3页
目的:在大肠杆菌中融合表达人Fas配体蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从激活的人外周血淋巴细胞中提取总RNA,扩增Fas配体cDNA,克隆人PCR2.1载体。测序验证后,克隆人带有组氨酸盒的表达载体pQE-31,在大肠杆菌中表达,经亲和层析柱纯化后,用SDS... 目的:在大肠杆菌中融合表达人Fas配体蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从激活的人外周血淋巴细胞中提取总RNA,扩增Fas配体cDNA,克隆人PCR2.1载体。测序验证后,克隆人带有组氨酸盒的表达载体pQE-31,在大肠杆菌中表达,经亲和层析柱纯化后,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达 产物。结果:表达的融合蛋白为人Fas配体,其相对分子质量(Mr)为40 000。经透析复性后,具有诱导Jurkat细胞凋亡的作用。用该蛋白分子免疫BALB/c小鼠制备抗血清,以间接ELISA检测了部分自身免疫病与肿瘤患者血清中可溶性FasL的含量,结果与进口试剂盒的灵敏性相似。结论:获得人Fas配体蛋白,并制备出抗FasL抗血清,为进一步研制抗FasL单克隆抗体,深入研究FasL的应用提供了材料。 展开更多
关键词 细胞凋亡 人Fas配体蛋白 大肠杆菌 融合表达 应用
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