纳米孔测序技术在动物疫病中应用的研究进展

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作者 李鑫 沈海潇 +6 位作者 葛菲菲 杨德全 鞠厚斌 王建 白艺兰 桂亚萍 赵洪进 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第9期119-124,共6页

第三代纳米孔测序是一种便携、方便、相对快速且经济有效的技术,具有长读长、高通量、实时提供测序数据等特点,在现场检测、临床诊断、流行病学调查和微生物鉴别等方面都有巨大的发展潜力。本文主要比较了下一代测序技术和第三代测序技... 第三代纳米孔测序是一种便携、方便、相对快速且经济有效的技术,具有长读长、高通量、实时提供测序数据等特点,在现场检测、临床诊断、流行病学调查和微生物鉴别等方面都有巨大的发展潜力。本文主要比较了下一代测序技术和第三代测序技术的优缺点,讨论了纳米孔测序数据的相关分析,以及该技术在动物疫病临床应用的例子,展望了纳米孔测序技术的发展以及在动物疫病诊断与防控领域的潜在前景。 展开更多

关键词 纳米孔测序 数据分析 动物疫病 检测

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上海市某腹泻猪群猪流行性腹泻病毒检测及全基因序列分析

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作者 康龙山 于慧茹 +6 位作者 杨德全 李鑫 沈海潇 杨显超 王建 徐丽娜 葛菲菲 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第1期175-181,共7页

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染引起的仔猪严重腹泻性疾病,传播快,发病急,死亡率高,给我国养猪业造成巨大损失。2021年10月上海某猪场产房仔猪发生腹泻,发病率为30%~50%,死亡率为20%~30%,猪群之前进行过疫苗免疫。粪... 猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染引起的仔猪严重腹泻性疾病,传播快,发病急,死亡率高,给我国养猪业造成巨大损失。2021年10月上海某猪场产房仔猪发生腹泻,发病率为30%~50%,死亡率为20%~30%,猪群之前进行过疫苗免疫。粪便样本经猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(RV)荧光RT-PCR检测,结果显示:PEDV检测为阳性,TGEV和RV检测均为阴性。经全基因测序后进行系统进化分析,结果显示:全基因序列属于GⅡ-c亚群,S基因序列属于GⅡ-b亚群,与目前的经典疫苗株CV777和变异株AJ1102相比,CV777的全基因和S基因都属于GⅠ-b群,AJ1102的全基因和S基因都属于GⅡ-b亚群,研究结果表明新基因型的PEDV已在上海地区流行,而传统疫苗株无法提供好的免疫效果,提示新的防控策略的制定和有针对性的疫苗的生产和使用,对于预防PEDV感染和流行有重要意义。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 系统进化 S基因

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狂犬病病毒LN34基因假病毒核酸国家标准物质的研制 被引量：2

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作者 鞠厚斌 李鑫 +4 位作者 葛菲菲 杨德全 沈海潇 王建 赵洪进 《中国动物检疫》 CAS 2023年第4期123-129,共7页

LN34基因作为狂犬病病毒核酸诊断的首选基因已被广泛应用,但检测活动中涉及生物安全要求以及缺少相应的核酸标准物质,导致很难对现有核酸诊断方法进行有效评价。本研究以慢病毒为表达载体,制备了含有狂犬病病毒LN34基因的假病毒核酸标... LN34基因作为狂犬病病毒核酸诊断的首选基因已被广泛应用,但检测活动中涉及生物安全要求以及缺少相应的核酸标准物质,导致很难对现有核酸诊断方法进行有效评价。本研究以慢病毒为表达载体,制备了含有狂犬病病毒LN34基因的假病毒核酸标准物质,并对该标准物质开展了均匀性、稳定性评估以及数字PCR法定值、不确定度分析和临床试用。结果显示:制备的标准物质定值为(1.33±0.23)×10^(4)拷贝/μL,样品均匀;-20℃条件下可稳定保存6个月,4℃可稳定保存9 d,25℃可稳定保存1 d。本标准物质的研制为相关实验室开展量值溯源、能力验证、质量控制、方法评价、试剂选择等工作提供了技术支撑。 展开更多

关键词 狂犬病 核酸扩增 LN34基因 标准物质

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狂犬病病毒微滴式数字PCR检测方法的建立 被引量：2

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作者 李鑫 鞠厚斌 +4 位作者 葛菲菲 杨德全 沈海潇 王建 赵洪进 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期41-45,共5页

为了建立可绝对定量狂犬病病毒(RABV)的微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,本试验根据RABV基因组起始区域设计引物和探针,继而优化引物和探针浓度以及退火温度,并对建立的ddPCR方法的灵敏度、特异性和重复性进行分析。结果显示:ddPCR方法的... 为了建立可绝对定量狂犬病病毒(RABV)的微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,本试验根据RABV基因组起始区域设计引物和探针,继而优化引物和探针浓度以及退火温度,并对建立的ddPCR方法的灵敏度、特异性和重复性进行分析。结果显示:ddPCR方法的最佳引物和探针浓度分别为900 nmol/L和250 nmol/L,最佳退火温度为55℃;ddPCR方法的标准曲线相关系数(R~2)为0.999,呈现良好的线性关系;灵敏度高,最低可检测到3.37 copies/μL;特异性良好,与常见犬病原无交叉反应;重复性好,检测结果稳定。临床样品的检测结果显示,本试验建立的狂犬病病毒ddPCR方法与实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)方法的符合率为100%。结果表明,本试验建立的狂犬病病毒微滴式数字PCR方法灵敏度高、特异性强,可用于狂犬病病毒的绝对定量检测。 展开更多

关键词 狂犬病 微滴式数字PCR 检测方法

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狂犬病口服疫苗在实际储运和环境释放中的消减规律研究 被引量：1

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作者 刘健 白艺兰 +8 位作者 桂亚萍 杨显超 夏炉明 龚国华 陶田谷晟 沈海潇 常晓静 王建 赵洪进 《中国兽药杂志》 2023年第4期18-24,共7页

为探索冻干剂、咀嚼剂和喷剂三种剂型的rAd5-ΔE1/E3-CGS狂犬病口服疫苗在运输、保存、反复冻融及不同温度下投放时疫苗效价的消减规律,将三种剂型的疫苗经过2~8℃运输48 h,重新入库的疫苗分别-20℃保存1年和反复冻融5次,再将冻融后疫... 为探索冻干剂、咀嚼剂和喷剂三种剂型的rAd5-ΔE1/E3-CGS狂犬病口服疫苗在运输、保存、反复冻融及不同温度下投放时疫苗效价的消减规律,将三种剂型的疫苗经过2~8℃运输48 h,重新入库的疫苗分别-20℃保存1年和反复冻融5次,再将冻融后疫苗分别于2~8℃保存4个月、15℃放置1个月、25℃放置1周和37℃放置3 d,于不同时间点取样检测疫苗效价(lgTCID 50/头份)。结果显示,三种口服疫苗经过2~8℃运输48 h后,效价分别下降至6.25、5.75和6.25,再经过-20℃保存1年和反复冻融5次后效价分别下降至5.67、5.33、5.33和5.33、5.00、5.67。在2~8℃保存4个月后,三种剂型口服疫苗效价均能达到5.00以上;在15℃放置1个月、25℃放置1周以及在37℃放置3 d后,疫苗效价最低分别为3.75、2.50和1.00。研究表明,三种剂型口服疫苗在冷链运输、冷冻保存、反复冻融和低温环境释放条件下具有良好的稳定性,常温环境对咀嚼剂的稳定性影响较小,高温环境会严重降低口服疫苗效价,建议在气温不高于15℃条件下进行rAd5-ΔE1/E3-CGS的环境释放。本研究为狂犬病口服疫苗的野外释放提供了数据支撑,也为流浪动物和野生动物的狂犬病疫苗口服免疫提供了技术支持。 展开更多

关键词 狂犬病口服疫苗 rAd5-ΔE1/E3-CGS 疫苗效价 消减规律

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重组酶扩增技术概述及应用研究进展

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作者 陈兴浩 李鑫 +10 位作者 沈海潇 张校培 徐丽娜 张鹤平 葛菲菲 杨显超 刘健 白艺兰 王建 杨德全 赵洪进 《中国动物检疫》 CAS 2023年第11期76-81,共6页

重组酶扩增技术是近几年快速发展起来的一类等温扩增技术,相对于传统的核酸检测方法,具有设备要求低、操作简单等优势,在现场快速检测方面有着广阔的应用前景。本文简要介绍了重组酶扩增技术的技术原理、优点和难点,重点阐述了其在病毒... 重组酶扩增技术是近几年快速发展起来的一类等温扩增技术,相对于传统的核酸检测方法,具有设备要求低、操作简单等优势,在现场快速检测方面有着广阔的应用前景。本文简要介绍了重组酶扩增技术的技术原理、优点和难点,重点阐述了其在病毒、细菌、寄生虫及其他微生物检测领域的应用研究进展,旨在为重组酶扩增技术的进一步发展与应用提供参考。 展开更多

关键词 重组酶聚合酶扩增技术 酶促重组等温扩增技术 重组酶介导等温扩增技术 多酶恒温核酸快速扩增技术

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上海市某马场马疱疹病毒1型感染的确诊 被引量：1

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作者 刘健 李鑫 +8 位作者 葛菲菲 杨德全 沈海潇 鞠厚斌 葛杰 于讳茹 邓波 王建 赵洪进 《中国动物检疫》 CAS 2019年第7期86-88,共3页

采用马疱疹病毒1型和4型二重PCR分型方法,对上海市某马场临床疑似病例的鼻拭子和血浆样品进行检测,同时对扩增产物进行测序和比对,确诊为马疱疹病毒1型阳性,表明上海市马群中存在马疱疹病毒1型感染。因此,应提高上海市马匹饲养管理水平... 采用马疱疹病毒1型和4型二重PCR分型方法,对上海市某马场临床疑似病例的鼻拭子和血浆样品进行检测,同时对扩增产物进行测序和比对,确诊为马疱疹病毒1型阳性,表明上海市马群中存在马疱疹病毒1型感染。因此,应提高上海市马匹饲养管理水平,加强马疱疹病毒1型的定期免疫和检疫,及时对阳性马匹进行隔离,对马厩进行消毒。 展开更多

关键词 马疱疹病毒1型 马疱疹病毒4型 检测 测序

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一例猫传染性腹膜炎的诊治 被引量：4

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作者 杨德全 管踦一 +7 位作者 鞠厚斌 龚国华 王建 葛菲菲 李鑫 刘健 沈海潇 周锦萍 《上海畜牧兽医通讯》 2019年第4期68-69,共2页

猫传染性腹膜炎(Feline infectious peritonitis,FIP)是由猫传染性腹膜炎病毒( Feline infectious peritonitis virus , FIPV )引起的猫科动物的一种慢性、渐进性、致死性传染病,以腹膜炎、大量腹水积聚及致死率较高为主要特征[1]。该... 猫传染性腹膜炎(Feline infectious peritonitis,FIP)是由猫传染性腹膜炎病毒( Feline infectious peritonitis virus , FIPV )引起的猫科动物的一种慢性、渐进性、致死性传染病,以腹膜炎、大量腹水积聚及致死率较高为主要特征[1]。该病不同年龄的猫均易感,多发于4 岁以下年轻成猫,纯种猫发病率高于一般家猫。本病的潜伏期长短不一,各种应激条件以及感染猫的自身疾病和猫免疫缺陷病等都是促使FIP发病的重要因素。该病呈地方流行性,发病率低,但一旦出现临床症状,致死率几乎为100%。笔者从临床症状、血常规检查、X 光影像学以及分子生物学诊断等方面对一例猫渗出性传染性腹膜炎病例报告如下,以期对该病的诊治提供参考。1 临床病例患猫品种为英国短毛猫,雌性,8月龄,体重2.1 kg 。食欲正常,体温40.6 ℃,大小便正常。腹部膨大、腹部触诊有明显的水样波动;抽取腹水,呈淡黄色黏稠样液体。 展开更多

关键词 猫科动物 腹膜炎 传染性 诊治 分子生物学诊断 临床症状 地方流行性 血常规检查

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猫冠状病毒S蛋白原核表达及鉴定 被引量：2

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作者 沈海潇 杨德全 +8 位作者 杨显超 李鑫 鞠厚斌 陶田谷晟 葛菲菲 刘健 周锦萍 王建 赵洪进 《上海畜牧兽医通讯》 2020年第2期5-7,共3页

猫传染性腹膜炎是由猫冠状病毒(Feline coronavirus,FCoV)引起的慢性致死性疾病,以腹膜炎、大量腹水积聚为主要特征,不同年龄的猫均可感染,但老龄猫和2岁以内的猫发病率较高,纯种猫发病率高于一般品种的家猫,传染率非常高。本研究将猫... 猫传染性腹膜炎是由猫冠状病毒(Feline coronavirus,FCoV)引起的慢性致死性疾病,以腹膜炎、大量腹水积聚为主要特征,不同年龄的猫均可感染,但老龄猫和2岁以内的猫发病率较高,纯种猫发病率高于一般品种的家猫,传染率非常高。本研究将猫冠状病毒S基因进行碱基序列优化并合成,亚克隆至PET30a,得到原核表达载体PET30a-NTU-2-S-RBD,进行大量诱导表达并纯化,最终得到的蛋白纯度可达90%,为后续疫苗的制备及诊断方法的建立奠定基础。 展开更多

关键词 猫传染性腹膜炎 S蛋白 RBD区 蛋白表达

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基于环介导等温扩增技术的微流控芯片在宠物疫病检测中的应用展望 被引量：1

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作者 杨德全 郁达义 +5 位作者 鞠厚斌 李鑫 沈海潇 葛菲菲 王建 赵洪进 《上海畜牧兽医通讯》 2021年第4期42-43,共2页

环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术与微流控芯片技术相结合,可实现对宠物疫病病原体的快速检测,具有高通量、特异性强、灵敏度高、操作简单、即时检测等优点。基于LAMP的微流控芯片应用于宠物疫病检测,... 环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术与微流控芯片技术相结合,可实现对宠物疫病病原体的快速检测,具有高通量、特异性强、灵敏度高、操作简单、即时检测等优点。基于LAMP的微流控芯片应用于宠物疫病检测,可显著提高宠物疫病的病原学诊断能力和效率,成为宠物疫病的快速诊断及高效防控的重要手段之一。 展开更多

关键词 环介导等温扩增 微流控芯片 宠物疫病 应用展望

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上海地区3株猫冠状病毒ORF3、ORF7和S2基因的序列测定及进化分析

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作者 杨德全 鞠厚斌 +6 位作者 管踦一 葛菲菲 李鑫 沈海潇 赵洪进 王建 周锦萍 《微生物与感染》 CAS 2020年第6期370-376,共7页

根据病毒的致病性,猫冠状病毒(feline coronavirus,FCoV)可分为猫肠道冠状病毒(feline enteric coronavirus,FECV)和猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV)两种生物型。为分析上海地区FIPV部分基因的序列特征,... 根据病毒的致病性,猫冠状病毒(feline coronavirus,FCoV)可分为猫肠道冠状病毒(feline enteric coronavirus,FECV)和猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV)两种生物型。为分析上海地区FIPV部分基因的序列特征,本研究对3株FIPV的非结构蛋白基因ORF3(3a、3b和3c)、ORF7(7a和7b)、S2基因序列进行测序及进化分析。收集上海某宠物医院于2018年7月~2018年9月接诊的3例经临床初步诊断患猫传染性腹膜炎(feline infectious peritonitis,FIP)的猫腹水样品,参照试剂盒说明书提取猫腹水中病毒RNA,采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)对3株FIPV的非结构蛋白基因ORF3、ORF7和S2基因序列进行扩增并测序,构建进化树进行分析。结果显示:3株FIPV的非结构蛋白基因ORF 3a、ORF 3b和ORF 3c的变异主要表现为点突变,ORF 7a基因在第47位发生氨基酸替换,2个具有完整的ORF 7b基因,而1个存在3个核苷酸(nucleotide,nt)的缺失;S基因的S1/S2裂解位点处有连续的R-R-S/A-R-R-S序列模体,符合FIPV裂解位点的氨基酸序列特征,且第1045位甲硫氨酸被亮氨酸替换。遗传进化树显示,3株FIPV的非结构蛋白基因ORF 3c、ORF 7b及S2基因序列与血清型Ⅰ型毒株的亲缘关系最近,表明这3株病毒属于血清型Ⅰ型毒株。推测S基因的突变可能参与了FCoV组织嗜性的改变,这为FIPV的分子流行病学调查提供了资料。 展开更多

关键词 猫传染性腹膜炎病毒 血清型 生物型 序列分析

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猫科动物冠状病毒感染情况调查及其基因的进化分析

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作者 杨德全 鞠厚斌 +6 位作者 朱九超 葛菲菲 杨显超 李鑫 沈海潇 赵洪进 王建 《野生动物学报》 北大核心 2021年第1期21-28,共8页

为了解冠状病毒在猫科动物的感染情况,对采自上海某动物园的猫科动物144份样品进行检测,并对获得的阳性样品进行扩增和测序。结果显示:SARS-CoV-2荧光RT-PCR检测全部为阴性;FCoV荧光RT-PCR检测阳性3份。测序结果显示,检测到FCoV的ORF3、... 为了解冠状病毒在猫科动物的感染情况,对采自上海某动物园的猫科动物144份样品进行检测,并对获得的阳性样品进行扩增和测序。结果显示:SARS-CoV-2荧光RT-PCR检测全部为阴性;FCoV荧光RT-PCR检测阳性3份。测序结果显示,检测到FCoV的ORF3、ORF7和S基因均呈遗传多样性,序列存在很大的个体间差异。3a、3b和3c基因主要表现为氨基酸突变。7a基因在第9位(F)、12位(V)和47位(S)均未发生氨基酸替换。它们均具有完整的7b基因。S基因的S1/S2裂解位点处有连续的R-R-S/A-R-R-S序列模体,符合FECV裂解位点的氨基酸序列特征。在第1045位(M)、1047位(S)和1108位(D)均没有发生氨基酸的完全替换。上述结果显示,这3株病毒均为致病性低的FECV。基于ORF3c和S2基因的遗传进化树显示,SH1951与SH2003和SH2004处于同一分支,与血清型Ⅰ型毒株的亲缘关系最近;而基于ORF7b基因的进化树显示,SH1951与SH2003和SH2004处于不同的遗传进化分支,表明它们之间的亲缘关系较远。因此,需要加强对野猫的管理与监测,防止野猫携带的FECV或其他病毒传染给豹猫。 展开更多

关键词 新型冠状病毒 猫冠状病毒 血清型 生物型 序列分析

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欧盟、美国及澳大利亚牛结核病防控经验与启示

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作者 杨德全 杨显超 +7 位作者 沈海潇 鞠厚斌 李鑫 吴秀娟 葛菲菲 刘健 王建 赵洪进 《中国动物检疫》 2021年第9期62-65,共4页

牛结核病的根除对养牛业和公共卫生安全具有重大积极意义。当前美国、澳大利亚、欧盟等国家和地区均成功实施了牛结核病根除计划,而我国的牛结核病防控工作起步较晚进展相对缓慢。本文认为健全的法律法规体系、充足的经费保障、统一的... 牛结核病的根除对养牛业和公共卫生安全具有重大积极意义。当前美国、澳大利亚、欧盟等国家和地区均成功实施了牛结核病根除计划,而我国的牛结核病防控工作起步较晚进展相对缓慢。本文认为健全的法律法规体系、充足的经费保障、统一的领导机构、严格的追溯体系、完善的监测系统、详尽的监测方案、科学的检测技术、精确的分类管理和良好的群防群控氛围是欧美国家牛结核病防控的优势经验,由此对我国牛结核病的防控策略提出建议,以期为国家开展牛结核病净化工作提供信息支持。 展开更多

关键词 牛结核病 根除 追溯 监测 欧美 澳大利亚

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猪δ冠状病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量：1

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作者 苑建军 杨德全 +5 位作者 鞠厚斌 庄建萍 葛菲菲 杨显超 李鑫 沈海潇 《中国动物检疫》 CAS 2022年第11期115-120,共6页

为灵敏、快速检测猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV),根据PDCoVM基因保守区域设计引物和探针,建立了一种PDCoV实时荧光RT-PCR检测方法,并评价了该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示,该方法的拷贝数对数值与Ct值在1.3&... 为灵敏、快速检测猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV),根据PDCoVM基因保守区域设计引物和探针,建立了一种PDCoV实时荧光RT-PCR检测方法,并评价了该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示,该方法的拷贝数对数值与Ct值在1.3×10^(3)-1.3×10^(7) copies/μL拷贝数浓度范围内呈现良好的线性关系,R^(2)=0.994;最低检出限为13 copies/μL,且无非特异性扩增;批内和批间重复性试验变异系数(CV)为0.24%~2.15%,均小于3%。利用该方法和普通RT-PCR对42份临床样品同时进行检测,发现本方法比普通RT-PCR灵敏性更高,二者符合率为95.2%。以上结果表明,本试验建立的实时荧光RT-PCR方法灵敏、特异、可靠,可用于PDCoV的临床检测和流行病学调查。 展开更多

关键词 猪δ冠状病毒 实时荧光RT-PCR 快速检测 应用

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上海地区犬细小病毒病流行情况调查与病毒的分离鉴定 被引量：3

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作者 沈海潇 李鑫 +4 位作者 杨德全 鞠厚斌 刘健 龚国华 赵洪进 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第12期127-131,共5页

为了解犬细小病毒病在上海地区各类犬中的流行与病毒遗传变异情况,在全市范围内对流浪犬和家养犬进行了犬细小病毒的集中监测。分别采集家养犬和流浪犬粪便样品121份与675份,通过荧光定量PCR检测病毒DNA,阳性率分别为9.10%和34.52%。将... 为了解犬细小病毒病在上海地区各类犬中的流行与病毒遗传变异情况,在全市范围内对流浪犬和家养犬进行了犬细小病毒的集中监测。分别采集家养犬和流浪犬粪便样品121份与675份,通过荧光定量PCR检测病毒DNA,阳性率分别为9.10%和34.52%。将阳性病料处理后接种至猫肾传代细胞(F81),成功分离到4株犬细小病毒,对4株犬细小病毒的VP2基因测序,并结合GenBank中的相关序列进行遗传演化分析,确定了这4株犬细小病毒分别属于2c和2b亚型。选取了2c亚型犬细小病毒对其进行持续传代,至其细胞病变与病毒增殖效率逐渐稳定,将其纯化后测定TCID50,通过电镜对病毒形态进行观察。结果表明,纯化后的病毒在电镜下观察呈现二十面体立体对称,无囊膜,直径20 nm左右,为典型细小病毒样粒子,病毒滴度为107.0 TCID50/mL。本研究结果为上海地区犬细小病毒病防控提供了依据。 展开更多

关键词 犬细小病毒 亚型 流行 遗传演化 病毒分离

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上海地区猪流感病毒的分离与鉴定 被引量：1

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作者 刘健 杨显超 +6 位作者 葛菲菲 李鑫 杨德全 沈海潇 鞠厚斌 王建 赵洪进 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第7期97-101,共5页

本研究对猪流感病毒上海分离株进行了鉴定和病毒特性的相关研究。采用血凝试验、电镜观察、血凝素和神经氨酸酶基因测序等方法对分离株进行了病毒的鉴定,采用形态学、化学和生物学方法对分离株进行了病原特性研究。结果显示分离株为A型... 本研究对猪流感病毒上海分离株进行了鉴定和病毒特性的相关研究。采用血凝试验、电镜观察、血凝素和神经氨酸酶基因测序等方法对分离株进行了病毒的鉴定,采用形态学、化学和生物学方法对分离株进行了病原特性研究。结果显示分离株为A型猪流感病毒,属于欧洲类禽H1N1亚型,病毒粒子在透射电镜下为圆形、椭圆形或多形性,病毒粒子直径大小80~120 nm,血凝素为热稳定型,病毒耐50℃,能凝集鸡、人O型和猪红细胞,对乙醚、氯仿和酸敏感,对10日龄无特定病原体(SPF)鸡胚无致死性。研究表明上海地区猪群中存在对环境具有较强耐受性,且对鸡胚低致病性的A型H1N1亚型猪流感病毒。 展开更多

关键词 H1N1 猪流感病毒 分离 鉴定

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1株猫杯状病毒的分离鉴定及其ORF2序列的遗传演化分析 被引量：1

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作者 李鑫 杨德全 +5 位作者 葛菲菲 沈海潇 刘健 鞠厚斌 王建 赵洪进 《畜牧与兽医》 北大核心 2021年第2期92-96,共5页

为了解猫杯状病毒形态特征及遗传演化情况,采用F81细胞从患病宠物猫的鼻拭子样品中分离获得1株猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV),命名为SH1。经电镜观察,病毒粒子呈球形,无囊膜,符合FCV的形态特征。采用RT-PCR方法扩增了该毒株的全... 为了解猫杯状病毒形态特征及遗传演化情况,采用F81细胞从患病宠物猫的鼻拭子样品中分离获得1株猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV),命名为SH1。经电镜观察,病毒粒子呈球形,无囊膜,符合FCV的形态特征。采用RT-PCR方法扩增了该毒株的全基因组,并进行了序列测定和衣壳蛋白基因(ORF2)序列的分析。结果显示:分离株与国内外参考株的ORF2序列的核苷酸和氨基酸同源性分别为74.1%~79.7%和84.5%~90.9%;ORF2基因的遗传演化分析显示,30株FCV毒株形成两大分支,即基因群Ⅰ和Ⅱ,分离株属于基因群Ⅰ;进一步分析发现,基因群Ⅰ和Ⅱ主要在377、539和557氨基酸位点存在差异,基因群Ⅰ和Ⅱ分别为N、A、G和K、V、S。研究结果为FCV感染的防控提供科学依据。 展开更多

关键词 猫杯状病毒 分离鉴定 衣壳蛋白基因 遗传演化

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新型冠状病毒在动物群体中感染现状及潜在传播风险研究进展 被引量：5

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作者 沈悦 赵洪进 +6 位作者 王建 杨德全 李鑫 沈海潇 吴嘉文 葛菲菲 鞠厚斌 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2506-2510,共5页

COVID-19是一种人际传播的病毒性传染病,病毒名称为SARS-CoV-2,属于冠状病毒科。在全球新型冠状病毒大流行期间,已陆续有关于动物被感染SARS-CoV-2的报道。截止目前,并没有足够的科学研究证明,何种动物会作为中间宿主或传播者的角色在... COVID-19是一种人际传播的病毒性传染病,病毒名称为SARS-CoV-2,属于冠状病毒科。在全球新型冠状病毒大流行期间,已陆续有关于动物被感染SARS-CoV-2的报道。截止目前,并没有足够的科学研究证明,何种动物会作为中间宿主或传播者的角色在自然环境中传播SARS-CoV-2。本研究系统回顾和梳理在这次新型肺炎疫情暴发中有关动物感染案例及潜在传播风险,以期从动物感染SARS-CoV-2案例中制定针对防控策略,为建立有效动物防疫管理模式提供依据。 展开更多

关键词 新冠肺炎 新型冠状病毒 动物 感染现状 防控

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