目的:检测中空纤维丝、热可逆凝胶和低吸附培养板3种三维培养体系中丙型肝炎病毒(HCV)增殖水平,寻找效率较高的HCV体外培养系统。方法:利用中空纤维丝、热可逆凝胶及低吸附培养板培养永生化人肝细胞HuS-E/2,通过XTT法检测细胞增殖情况...目的:检测中空纤维丝、热可逆凝胶和低吸附培养板3种三维培养体系中丙型肝炎病毒(HCV)增殖水平,寻找效率较高的HCV体外培养系统。方法:利用中空纤维丝、热可逆凝胶及低吸附培养板培养永生化人肝细胞HuS-E/2,通过XTT法检测细胞增殖情况。以基因型为2a型的HCV病毒株JFH1进行感染,在感染后不同时间点收集细胞标本,利用实时PCR法检测细胞中HCV的滴度。结果:在中空纤维丝和热可逆凝胶中培养的HuS-E/2细胞增殖曲线为持续递增,至培养结束时细胞数为初始培养数的2～3倍,JFH1感染后中空纤维丝方法培养的细胞中HCV滴度为2.00×103 copies/1μg total RNA,热可逆凝胶培养的细胞中HCV滴度为2.95×103 copies/1μg total RNA,低吸附培养板方法培养的细胞中HCV滴度为1.18×103 copies/1μg totalRNA。结论:与中空纤维丝及低吸附培养板比较,热可逆凝胶法为基础的JFH1体外培养系统细胞生长稳定,HCV复制效率较高。展开更多
文摘目的:检测中空纤维丝、热可逆凝胶和低吸附培养板3种三维培养体系中丙型肝炎病毒(HCV)增殖水平,寻找效率较高的HCV体外培养系统。方法:利用中空纤维丝、热可逆凝胶及低吸附培养板培养永生化人肝细胞HuS-E/2,通过XTT法检测细胞增殖情况。以基因型为2a型的HCV病毒株JFH1进行感染,在感染后不同时间点收集细胞标本,利用实时PCR法检测细胞中HCV的滴度。结果:在中空纤维丝和热可逆凝胶中培养的HuS-E/2细胞增殖曲线为持续递增,至培养结束时细胞数为初始培养数的2～3倍,JFH1感染后中空纤维丝方法培养的细胞中HCV滴度为2.00×103 copies/1μg total RNA,热可逆凝胶培养的细胞中HCV滴度为2.95×103 copies/1μg total RNA,低吸附培养板方法培养的细胞中HCV滴度为1.18×103 copies/1μg totalRNA。结论:与中空纤维丝及低吸附培养板比较,热可逆凝胶法为基础的JFH1体外培养系统细胞生长稳定,HCV复制效率较高。
