期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到171篇文章
< 1 2 … 9 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
1株犬源多重耐药粪肠球菌的分离鉴定及其致病性分析
1
作者 徐飞 温贵兰 +2 位作者 龚新勇 文明 陈薄帆 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3615-3624,共10页
[目的]明确1例犬泌尿生殖道感染的发病原因。[方法]无菌采集病犬尿液,通过细菌分离纯化、革兰染色镜检、生化试验、16S rRNA基因扩增进行鉴定,同时经药敏试验、毒力基因和耐药基因检测及细菌致病性试验测定纯化菌株的生物学特征。[结果... [目的]明确1例犬泌尿生殖道感染的发病原因。[方法]无菌采集病犬尿液,通过细菌分离纯化、革兰染色镜检、生化试验、16S rRNA基因扩增进行鉴定,同时经药敏试验、毒力基因和耐药基因检测及细菌致病性试验测定纯化菌株的生物学特征。[结果]分离得到1株兼性厌氧型革兰阳性球菌;菌落形态如针尖大小、表面光滑、半透明、圆形凸起、边缘整齐;生化鉴定结果显示,致病菌能发酵乳糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、山梨醇、甘露醇、精氨酸,不能发酵木糖、氧化酶、枸橼酸盐、棉籽糖和鸟氨酸脱羧酶;16S rRNA基因序列与已发表的粪肠球菌序列相似性高于99%,鉴定为粪肠球菌,并将其命名为EFGZ23GY01;药敏试验结果显示,分离株仅对万古霉素及氯霉素敏感,对新霉素中度敏感,对克林霉素等25种药物耐药;8种粪肠球菌毒力基因检测结果显示,分离株携带efaA、ace、asa 1及gelE毒力基因;14种耐药基因检测结果显示,分离株携带tetL、sulⅠ、tetC、bla TEM、bla OXA-23、aadA 1和sulⅢ耐药基因;致病性试验结果显示,5只小鼠注射菌液12 h后出现精神萎靡,被毛杂乱等症状,未出现死亡,48 h后死亡1只,表明分离菌对小鼠具有致病性。[结论]本研究成功从犬尿液种分离得到1株粪肠球菌,其携带多种毒力基因和耐药基因,且对小鼠有致病性,研究为病犬的后续治疗提供了参考。 展开更多
关键词 犬源粪肠球菌 分离鉴定 毒力基因 耐药基因 致病性
下载PDF
贵州林下生态养鸡场环境的野生动物及其肠道微生物群落调查
2
作者 张霞 王慧 +6 位作者 张人俊 刘显明 张中义 刘妍罕 杨颖 温贵兰 文明 《贵州畜牧兽医》 2024年第1期62-66,共5页
为查明贵州林下生态养鸡场环境的生物安全状况,采用常规动物区系调查方法对具有区域代表性的贵州省毕节市威宁自治县和黔南自治州罗甸县2个林下生态养鸡环境的野生动物种类进行调查,并应用现代分子生物学技术解析野生动物肠道微生物群... 为查明贵州林下生态养鸡场环境的生物安全状况,采用常规动物区系调查方法对具有区域代表性的贵州省毕节市威宁自治县和黔南自治州罗甸县2个林下生态养鸡环境的野生动物种类进行调查,并应用现代分子生物学技术解析野生动物肠道微生物群落结构。结果:(1)观察或捕获的林下生态养鸡场环境野生动物共计1 778只,主要是野鸟、野鼠、野兔,其中优势野生鸟类主要是灰眶雀鹛、白腰文鸟、栗耳凤鹛、红头穗鹛,野生鼠类主要是黑线姬鼠,野生兔类只有华南兔。(2)养鸡场环境野生动物肠道细菌群落丰富多样,有大肠杆菌-志贺氏菌属、梭菌属、大肠杆菌属等致病菌或条件致病菌;野生动物肠道病毒种类亦呈多样性,且存在多种可感染家禽的病毒,如细小病毒、冠状病毒、圆环病毒、疱疹病毒、痘病毒、腺病毒等。结论:贵州林下生态养鸡环境的野生动物主要是野鸟、野鼠、野兔;其肠道细菌群落主要是拟杆菌属、大肠杆菌属、梭菌属,主要病毒群落是细小病毒科、乳头瘤病毒科、二顺反子病毒科。 展开更多
关键词 贵州省 林下生态养鸡场 野生动物 肠道微生物群落 环境调查
下载PDF
禽安卡拉病生物制剂研发及药物防控的研究进展
3
作者 罗东还 曹登友 +2 位作者 温贵兰 陈佳琪 龚新勇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第5期31-35,42,共6页
禽安卡拉病又称禽心包积液-肝炎综合征(hydropericardium hepatitis syndrome, HHS),是由Ⅰ群血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)感染引起的一种严重危害家禽养殖的传染性疾病,主要表现为心包积液、肝脏组织损伤等临... 禽安卡拉病又称禽心包积液-肝炎综合征(hydropericardium hepatitis syndrome, HHS),是由Ⅰ群血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)感染引起的一种严重危害家禽养殖的传染性疾病,主要表现为心包积液、肝脏组织损伤等临床症状。该病在多个国家和地区相继暴发,给养禽业带来巨大的经济损失。目前国内尚无有效防治禽安卡拉病的商品化疫苗和特效治疗药物,因此需要进一步研究针对该病的生物性防控策略。文章综述了针对FAdV-4感染的疫苗、抗体、药物等生物性防控措施的最新研究进展,以期为禽安卡拉病的生物性防控提供参考依据。 展开更多
关键词 禽安卡拉病 生物性防控 疫苗 抗体 药物
原文传递
贵州地方品种鸡ALV流行病学调查
4
作者 张小波 陈广 +4 位作者 温贵兰 张喜懿 胡璇 刘蔓蔓 孙芸 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期132-138,共7页
为了解2019—2021年贵州地方品种鸡AL病毒(Avian leukosis virus,ALV)流行情况。采用DF-1细胞对贵州9个地方品种鸡331份血浆进行ALV的分离;利用ALV p27抗原ELISA检测法对贵州地方品种鸡708份血样、180份蛋清、61份泄殖腔棉拭子进行检测... 为了解2019—2021年贵州地方品种鸡AL病毒(Avian leukosis virus,ALV)流行情况。采用DF-1细胞对贵州9个地方品种鸡331份血浆进行ALV的分离;利用ALV p27抗原ELISA检测法对贵州地方品种鸡708份血样、180份蛋清、61份泄殖腔棉拭子进行检测。结果表明:贵州地方品种鸡331份血浆样品分离出6株ALV,总阳性率1.81%(6/331);2019—2021年采集贵州省不同品种鸡血样708份进行ALV p27抗原ELISA检测,共检测出289份阳性,总阳性率40.81%(289/708);180份蛋清中检测出39份阳性,总阳性率21.7%(39/180)。61份泄殖腔棉拭子中检测出16份阳性,总阳性率26.20%(16/61);说明贵州地方不同品种鸡存在不同程度的ALV感染,本研究为丰富贵州地区品种鸡感染ALV情况资料和贵州地方品种鸡AL的防控奠定基础。 展开更多
关键词 贵州 地方品种鸡 禽白血病病毒 流行病学调查
下载PDF
禽腺病毒4型GZ-B1毒株的Hexon基因序列分析
5
作者 罗青华 罗东还 +1 位作者 温贵兰 徐飞 《贵州畜牧兽医》 2024年第1期54-56,共3页
为了解禽腺病毒4型(FAdV-4)GZ-B1株的遗传进化情况,试验设计合成FAdV-4 Hexon基因的特异引物,对GZ-B1株Hexon基因进行PCR扩增并克隆至pMD-19T载体,基因测序和遗传进化分析。结果:扩增的Hexon基因长度为327 bp,与预期相符。GZ-B1株与国内... 为了解禽腺病毒4型(FAdV-4)GZ-B1株的遗传进化情况,试验设计合成FAdV-4 Hexon基因的特异引物,对GZ-B1株Hexon基因进行PCR扩增并克隆至pMD-19T载体,基因测序和遗传进化分析。结果:扩增的Hexon基因长度为327 bp,与预期相符。GZ-B1株与国内外13株FAdV参考毒株中的7株FAdV-C毒株同源性较高(95.8%~98.5%),其中与国内强毒株GDMZ、LC1611、SDSG、SDXL同源性最高(均为98.5%),与基因型A、B、D、E的6株参考毒株同源性较低(73.0%~77.5%)。遗传进化树显示,GZ-B1株与基因型A、B、D、E毒株处于不同进化分支,与国内外C基因型毒株处于同一进化分支,表明该毒株与C基因型毒株遗传差异较小,其中与国内C型强毒株LC1611的遗传差异最小,亲缘关系最近。结论:FAdV-4 GZ-B1株属于C基因型、血清4型,与国内流行株FAdV-4 LC1611亲缘关系最近,同源性最高。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 GZ-B1毒株 Hexon基因 序列分析
下载PDF
基于线上线下混合式教学的应用型本科《兽医免疫学》课程改革与实践
6
作者 温贵兰 陈佳琪 +5 位作者 钱林 文明 程振涛 杨颖 叶泥 龚新勇 《贵州畜牧兽医》 2023年第2期33-35,共3页
文章介绍了探索应用“慕课”“微课”等线上线下教学方式,紧密结合当前贵州山区畜禽疫病防治案例为实验教材,并在教学中渗入思政教育促进《兽医免疫学》教学改革的方法,全面提升兽医学专业本科生的综合能力素质。
关键词 兽医免疫学 教学改革 线上线下教学 思政教育
下载PDF
兽医免疫学实验教学改革与探索
7
作者 陈佳琪 嵇辛勤 +3 位作者 程振涛 杨颖 龚新勇 温贵兰 《安徽农学通报》 2023年第12期147-149,共3页
兽医免疫学是动物医学专业的重要专业课之一,由理论课和实验课2个部分组成,通过该课程学习不仅可以提高学生们的学习兴趣,而且可以为之后学生的就业打下坚实的基础。本文主要分析了当前贵州大学动物科学学院兽医免疫学实验教学中存在的... 兽医免疫学是动物医学专业的重要专业课之一,由理论课和实验课2个部分组成,通过该课程学习不仅可以提高学生们的学习兴趣,而且可以为之后学生的就业打下坚实的基础。本文主要分析了当前贵州大学动物科学学院兽医免疫学实验教学中存在的问题,并提出了线上线下混合方式、翻转课堂等现代教学创新模式及融入思政要素等实验教学和考核创新改革,旨在提高兽医免疫学实验教学课程质量,为社会培养合格的兽医专业人才,服务社会。 展开更多
关键词 动物医学专业 兽医免疫学 实验教学改革
下载PDF
发酵红薯渣对鲤鱼生长性能、消化酶活性及肠道菌群的影响 被引量：1
8
作者 王微 杨泽敏 +5 位作者 罗永荣 刘馨 温贵兰 陈江凤 姜海波 文明 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第12期56-60,共5页
试验旨在研究发酵红薯渣(FSP)对鲤鱼生长性能、消化酶活性及肠道菌群的影响。选取120尾健康无病、初始体重为(408.36±26.12)g的鲤鱼,随机分为4组,FSP0组、FSP10组、FSP20组、FSP30组分别在基础饵料中添加0、10%、20%、30%FSP,每组... 试验旨在研究发酵红薯渣(FSP)对鲤鱼生长性能、消化酶活性及肠道菌群的影响。选取120尾健康无病、初始体重为(408.36±26.12)g的鲤鱼,随机分为4组,FSP0组、FSP10组、FSP20组、FSP30组分别在基础饵料中添加0、10%、20%、30%FSP,每组3个重复,每个重复10尾鲤鱼。试验期42 d。结果显示,FSP20组鲤鱼特定生长率最高。FSP30组鲤鱼肠道淀粉酶和脂肪酶活性显著高于FSP0组(P<0.05)。随着发酵红薯渣添加量的提高,鲤鱼肠道变形菌门相对丰度从68.77%提高至98.55%(P<0.05),厚壁菌门相对丰度从20.58%降低至0.60%(P<0.05)。研究表明,发酵红薯渣可提高鲤鱼的生长性能和消化酶活性,调节肠道菌群结构,添加20%发酵红薯渣饲喂鲤鱼较为适宜。 展开更多
关键词 发酵红薯渣 鲤鱼 生长性能 消化酶 肠道菌群
原文传递
APOBEC3F的真核表达及其抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用的分析 被引量：1
9
作者 胡璇 田浪 +5 位作者 王怡然 温贵兰 陈启青 陈佳琪 叶泥 龚新勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期829-836,共8页
为研究载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3F(APOBEC3F)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)增殖的影响,本研究根据GenBank中登录的猪源APOBEC3F基因序列(EU871586)设计引物,经PCR从苏太猪外周血单个核淋巴细胞中扩增APOBEC3F基因,经测序后构... 为研究载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3F(APOBEC3F)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)增殖的影响,本研究根据GenBank中登录的猪源APOBEC3F基因序列(EU871586)设计引物,经PCR从苏太猪外周血单个核淋巴细胞中扩增APOBEC3F基因,经测序后构建系统进化树分析其遗传进化特性。结果显示,猪源APOBEC3F基因编码区(CDS)长1257 bp,编码418个氨基酸,与其他物种该基因的同源性在60%~70%。利用扩增的APOBEC3F基因构建真核表达载体pcDNA3.1(+)5'Flag-APOBEC3F经菌液PCR和测序鉴定正确后,转染Marc-145细胞,采用间接免疫荧光试验(IFA)和western blot鉴定重组APOBEC3F蛋白的表达。IFA结果显示,转染pcDNA3.1(+)5'Flag-APOBEC3F的Marc-145细胞质中出现特异性红色荧光;western blot结果显示,转染pcDNA3.1(+)5'Flag-APOBEC3F的细胞样品在44 ku处有特异性条带,表明猪源APOBEC3F在Marc-145细胞中获得了表达。在Marc-145细胞中转染不同剂量的pcDNA3.1(+)5'Flag-APOBEC3F或不同剂量的针对APOBEC3F的siRNA,过表达或抑制APOBEC3F表达后感染PRRSV,通过RT-qPCR检测PRRSV N基因mRNA的转录水平,采用western blot检测细胞中PRRSV N蛋白的表达水平,采用TCID50测定PRRSV滴度。结果显示,在Marc-145细胞中过表达的APOBEC3F可以显著抑制PRRSV N基因mRNA转录水平(P<0.01)和N蛋白的表达水平,降低PRRSV滴度(P<0.01、P<0.001),表明APOBEC3F具有抑制PRRSV增殖的作用,且抑制效率与重组质粒的转染剂量呈正相关。在Marc-145细胞中抑制APOBEC3F的表达后,PRRSV N基因的mRNA转录水平(P<0.01)、N蛋白的表达水平与PRRSV滴度(P<0.05、P<0.001)均显著升高,表明抑制APOBEC3F的表达具有促进PRRSV增殖的作用,且该促进效率与针对APOBEC3F的siRNA转染剂量呈正相关。本研究首次证明APOBEC3F对PRRSV在Marc-145细胞中的增殖有抑制作用,为研究APOBEC3F功能提供实验依据,也为研究抗PRRSV相关机制的研究提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3F MARC-145细胞
下载PDF
禽白血病病毒与多种病原协同致病机理研究进展 被引量：2
10
作者 曾熙雯 温贵兰 田兴舟 《中国家禽》 北大核心 2023年第9期74-81,共8页
禽白血病(Avian leukosis,AL)是一类由禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引起的禽类肿瘤性传染病。近年来,除ALV不同亚群的感染被报道以外,ALV也常被发现与其他病原共同感染,发病机制尚不明确,每年给家禽养殖行业造成严重的经济... 禽白血病(Avian leukosis,AL)是一类由禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引起的禽类肿瘤性传染病。近年来,除ALV不同亚群的感染被报道以外,ALV也常被发现与其他病原共同感染,发病机制尚不明确,每年给家禽养殖行业造成严重的经济损失。文章对ALV的基因组特征、复制特点、基本致病机理、与其他禽类免疫抑制性病毒、细菌和寄生虫等病原的协同致病机理等进行了综述,为AL的防控提供更具有针对性的指导意见。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 致病机制 协同致病
原文传递
砷制剂对禽白血病肿瘤细胞Warburg效应及Hedgehog信号通路的影响
11
作者 任涛 王建俊 +4 位作者 杨剑 杨鑫 徐浩 温贵兰 欧德渊 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期3349-3358,共10页
【目的】探究三氧化二砷(ATO)对禽白血病(AL)肿瘤细胞Warburg效应及Hedgehog信号通路的影响,明确ATO缓解AL鸡肝脏肿瘤病变的作用机制,为生产上以ATO治疗AL提供科学依据。【方法】开展急性毒性试验,确定ATO对绿壳蛋鸡的安全性;通过p27抗... 【目的】探究三氧化二砷(ATO)对禽白血病(AL)肿瘤细胞Warburg效应及Hedgehog信号通路的影响,明确ATO缓解AL鸡肝脏肿瘤病变的作用机制,为生产上以ATO治疗AL提供科学依据。【方法】开展急性毒性试验,确定ATO对绿壳蛋鸡的安全性;通过p27抗原检测、PCR扩增鉴定、gp85基因测序等对禽白血病病毒(ALV)进行鉴定,并采集病鸡肿瘤组织制作病理组织切片进行病理性诊断;体外培养AL鸡肿瘤细胞,分别加入0.5、1.0和2.0μmol/L ATO进行处理,培养12、24和48 h后收集细胞,分别检测葡萄糖、乳酸、己糖激酶(HK)及葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的含量;以ALV人工感染绿壳蛋鸡构建模型组,再用不同剂量(0.5、1.0和2.0 mg/kg·BW)ATO进行治疗,采用ELISA检测鸡肝脏组织中Hedgehog信号通路Gli1和Shh蛋白水平,并以实时荧光定量PCR检测Shh、Gli1、Gli2、Ptch2和Smo基因的表达情况。【结果】ATO对绿壳蛋鸡的半数致死量(LD_(50))为19.501 mg/kg·BW,LD_(50)-95%可信限为19.501±0.213 mg/kg·BW。从疑似患AL的绿壳蛋鸡中鉴定出1株ALV-J株,命名为GZCS01,其感染形成的肿瘤为肾母细胞瘤。以不同剂量(0.5、1.0和2.0μmol/L)ATO作用肾母细胞瘤细胞,培养48 h后发现细胞液中的葡萄糖、乳酸及HK含量均极显著降低(P<0.01,下同),同时能降低肾母细胞瘤细胞内的GLUT1含量,从而减弱肿瘤细胞Warburg效应;高剂量的ATO(2.0 mg/kg·BW)能极显著或显著抑制Shh和Gli1蛋白表达(P<0.05,下同),极显著或显著抑制Shh、Gli1、Gli2和Smo基因表达,同时极显著上调Ptch2基因表达。【结论】ATO能抑制肿瘤细胞对葡萄糖的摄取和乳酸生成,且降低关键酶生成,从而减弱Warburg效应,抑制肿瘤细胞增殖;ATO还可通过下调Hedgehog信号通路关键因子Shh、Gli1、Gli2和Smo的表达及促进Ptch2表达,从而减轻AL的肝脏病变。可见,使用砷制剂(如阿散酸等)治疗AL具有可行性。 展开更多
关键词 三氧化二砷(ATO) 禽白血病(AL) 肿瘤 Warburg效应 HEDGEHOG信号通路
下载PDF
鸭肠炎病毒与A型产气荚膜梭菌共感染鸭回肠代谢组学分析
12
作者 杨芸芸 张黔东 +8 位作者 袁阳 王微 田琴 蔡海情 刘馨 温贵兰 杨颖 程振涛 文明 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4759-4767,共9页
【目的】探究鸭肠炎病毒(DEV)和A型产气荚膜梭菌(CpA)共感染的致病机制。【方法】研究选取37日龄健康非免疫雏鸭,随机分为对照组与共感染组。共感染组鸭于每天早晚各进行1次灌胃,每次灌CpA菌液8 mL(1×108 CFU/mL),连续5 d,首次灌胃... 【目的】探究鸭肠炎病毒(DEV)和A型产气荚膜梭菌(CpA)共感染的致病机制。【方法】研究选取37日龄健康非免疫雏鸭,随机分为对照组与共感染组。共感染组鸭于每天早晚各进行1次灌胃,每次灌CpA菌液8 mL(1×108 CFU/mL),连续5 d,首次灌胃72 h后于腿部肌肉接种DEV-GZ株病毒液(0.2 mL/只,TCID 50=3.16×10-9 TCID 50/0.1 mL),对照组接种灭菌生理盐水0.2 mL,观察鸭临床病变及回肠剖检病变,采用细菌分离鉴定和PCR等方法检测DEV和CpA共感染模型是否成功建立。采集感染90 h对照组与共感染组回肠,采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术对对照组及共感染组感染90 h鸭回肠进行代谢组学检测,筛选并分析潜在的差异代谢物及相关信号通路。【结果】经检测确定成功构建了鸭DEV和CpA共感染模型。对照组与共感染组鸭回肠差异代谢物质共有36种,在正离子模式下共有16种差异代谢物质,主要为2′-脱氧肌苷、腐胺、8(z),11(z),14(z)-二十碳三烯酸、胞苷和1-油酰基外消旋甘油,在负离子模式下共有20种差异代谢物质,主要为油酸、花生四烯酸、11(z),14(z)-二十二碳二烯酸、二十二碳三烯酸和亚油酸;差异代谢物主要富集的代谢通路为10条,主要为色氨酸代谢、嘧啶代谢、嘌呤代谢等。【结论】11(z),14(z)-二十二碳二烯酸、二十二碳三烯酸和花生四烯酸可成为DEV和CpA共感染鸭回肠的敏感生物标记物,提示DEV与CpA共感染加剧雏鸭回肠炎症,色氨酸代谢通路提示DEV与CpA共感染鸭免疫力变化存在联系。本研究为阐明DEV与CpA感染的致病机制奠定基础。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 A型产气荚膜梭菌 共感染 代谢组学
下载PDF
从江香猪IFN-β基因的序列分析及原核表达 被引量：6
13
作者 温贵兰 张升波 +6 位作者 李昌红 徐丽 田浪 文明 王开功 程振涛 赵德刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期10-19,共10页
试验旨在探明从江香猪β-干扰素(interferon-beta,IFN-β)基因编码区分子序列及原核表达产物特征。以从江香猪为研究对象,提取肝脏总RNA并反转录为cDNA,设计特异性引物扩增IFN-β基因编码区,将目的基因片段克隆至原核表达质粒pET-28a上... 试验旨在探明从江香猪β-干扰素(interferon-beta,IFN-β)基因编码区分子序列及原核表达产物特征。以从江香猪为研究对象,提取肝脏总RNA并反转录为cDNA,设计特异性引物扩增IFN-β基因编码区,将目的基因片段克隆至原核表达质粒pET-28a上,获得重组质粒pET28a-CJpoIFN-β,并利用生物学软件对江香猪IFN-β基因编码区进行序列分析;将鉴定正确的重组质粒pET28a-CJpoIFN-β转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达、SDS-PAGE与Western blotting分析原核表达蛋白。结果表明,从江香猪IFN-β基因编码区长为561bp,编码186个氨基酸;该蛋白为分泌性蛋白,前21个氨基酸为信号肽序列;二级结构主要以α-螺旋(77.42%)和无规则卷曲(17.74%)为主。从江香猪与其他猪源IFN-β基因核苷酸序列同源性为99.5%～100.0%,与禽的同源性最低(35.2%);从江香猪与巴马猪、梅山猪IFN-β氨基酸同源性均为100.0%,但与贵州白香猪IFN-β同源性为99.5%,存在E43Q、K73R和C161R3处氨基酸的差异。Western blotting结果显示,带His标签的重组表达蛋白能被His单抗识别,条带大小约为24ku。本试验结果为进一步研究IFN-β基因生物学活性及加快从江香猪这一品种资源的有效利用提供参考依据。 展开更多
关键词 从江香猪 IFN-β基因 序列分析 原核表达
下载PDF
猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞中非结构蛋白Nsp2表达分析 被引量：4
14
作者 温贵兰 张涵淞 +5 位作者 扈鸿霞 章先 张毅 王晓杜 李肖梁 方维焕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1109-1116,共8页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)非结构蛋白Nsp2对病毒复制和致病具有重要作用,本研究旨在分析Nsp2在Marc-145细胞内的分布与表达。构建nsp2含PL2区域基因片段的原核表达载体,重组... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)非结构蛋白Nsp2对病毒复制和致病具有重要作用,本研究旨在分析Nsp2在Marc-145细胞内的分布与表达。构建nsp2含PL2区域基因片段的原核表达载体,重组蛋白纯化后作为免疫抗原,制备Nsp2特异性单克隆抗体。将携带nsp2基因的真核表达载体转染至Marc-145及HEK293细胞,或将PRRSV感染Marc-145细胞后不同时间点收集细胞样品。免疫荧光观察Nsp2在转染细胞中的亚细胞定位,免疫印迹分析Nsp2在真核细胞中的表达。筛选获得了1株稳定分泌特异性抗Nsp2的单克隆杂交瘤细胞株,能用于免疫荧光和印迹分析。重组真核表达质粒转染Marc-145与HEK293细胞后,Nsp2主要定位于细胞质中,免疫印迹检测到约为120与50ku的蛋白条带。PRRSV感染Marc-145细胞4h即可检测到Nsp2的表达,主要定位于细胞核周围,随着感染时间延长Nsp2分布范围逐渐扩大至整个细胞质。病毒感染8h,可检测到120ku左右的Nsp2蛋白条带,感染后12h可检测到70和50ku左右的Nsp2蛋白,且蛋白表达量随感染时间延长显著增多。PRRSV感染细胞中Nsp2的表达与剪切分析,为深入研究该蛋白在病毒复制和致病中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 非结构蛋白Nsp2 表达与剪切方式
下载PDF
鸡传染性喉气管炎病毒贵州株gC基因的遗传进化分析
15
作者 杨婷 孙芸 +1 位作者 温贵兰 徐飞 《贵州畜牧兽医》 2023年第5期48-52,共5页
为了解鸡传染性喉气管炎病毒贵州株(GZNY202112株)的gC基因遗传进化情况,参考GenBank鸡传染性喉气管炎gC基因设计合成1对特异引物,通过PCR扩增,克隆至pMD-19T载体,测序并以国内外12株鸡传染性喉气管炎病毒为参考株进行同源性和遗传进化... 为了解鸡传染性喉气管炎病毒贵州株(GZNY202112株)的gC基因遗传进化情况,参考GenBank鸡传染性喉气管炎gC基因设计合成1对特异引物,通过PCR扩增,克隆至pMD-19T载体,测序并以国内外12株鸡传染性喉气管炎病毒为参考株进行同源性和遗传进化分析。结果:GZNY202112株gC基因PCR扩增产物长度为1258 bp;核苷酸序列与12株参考毒株同源性为97.7%~98.9%,2处碱基突变;氨基酸序列同源性为97.6%~98.1%,1处氨基酸位点有差异;遗传进化树分析表明,该毒株与澳大利亚CSW-1疫苗株的亲缘关系最近。结论:GZNY202112株gC基因存在2处碱基突变和1处氨基酸位点差异,遗传较稳定,进化保守,没有单独形成进化分支,未发生明显变异。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 GC基因 遗传进化分析
下载PDF
瓯江彩鲤简达气单胞菌的16S rDNA分子鉴定与药敏分析 被引量：4
16
作者 温贵兰 袁子婵 +4 位作者 张毅 程振涛 周碧君 吴学祥 龚新勇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第12期78-80,共3页
为了研究分离自患病瓯江彩鲤的1株气单胞菌(HX201006-2)的分类地位与药敏特性,试验采用细菌的16S rDNA基因的分类鉴定与生化方法对该分离菌进行研究,通过NCBI的Blast搜索同源序列,应用MegAlign软件进行序列比对并构建系统发育树。结果表... 为了研究分离自患病瓯江彩鲤的1株气单胞菌(HX201006-2)的分类地位与药敏特性,试验采用细菌的16S rDNA基因的分类鉴定与生化方法对该分离菌进行研究,通过NCBI的Blast搜索同源序列,应用MegAlign软件进行序列比对并构建系统发育树。结果表明:该分离菌的16S rDNA(GenBank登录号为JF713702.1)基因,与简达气单胞菌类聚,初步确定该分离菌株的分类地位,结合分离菌的形态、生理生化特征,鉴定该分离菌为简达气单胞菌;该分离菌对头孢噻吩、丁胺卡那、庆大霉素等12种药物敏感;对新霉素、利福平、红霉素3种药物中度敏感;对头孢拉定、多黏菌素B和O/129等7种药物存在不同程度的耐药性。 展开更多
关键词 简达气单胞菌 16S RDNA基因 分类鉴定 药敏试验
原文传递
RT-PCR对新城疫病毒(NDV)分离株的鉴定及其临床应用 被引量：5
17
作者 温贵兰 瞿继红 李永明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1137-1140,共4页
采用新城疫病毒的通用引物PA+PB、强毒引物PA+PC、弱毒引物PA+PD对11株贵州新城疫分离毒株与4株新城疫参考毒株进行了RT-PCR扩增。结果15株新城疫毒株均被PA+PB引物扩增出359bp的条带,F48E8、ND98、Fw、H2、P3、BY、L2、P1、P2被PA+PC... 采用新城疫病毒的通用引物PA+PB、强毒引物PA+PC、弱毒引物PA+PD对11株贵州新城疫分离毒株与4株新城疫参考毒株进行了RT-PCR扩增。结果15株新城疫毒株均被PA+PB引物扩增出359bp的条带,F48E8、ND98、Fw、H2、P3、BY、L2、P1、P2被PA+PC引物扩增出254bp的条带,而PA+PD引物未扩增出DNA条带;ND89、Lasota被PA+PD引物扩增出254bp的条带,而PA+PC引物未扩增出DNA条带。采用3对引物对自然发病斗鸡脑、脾、咽喉试子、泄殖腔试子进行RT-PCR检测,确诊为斗鸡新城疫强毒感染,且与传统病毒分离与毒力鉴定的结果相一致。 展开更多
关键词 新城疫病毒 RT-PCR 斗鸡
下载PDF
新城疫单克隆抗体的制备与特异性分析 被引量：7
18
作者 温贵兰 李永明 +1 位作者 陈锡龙 吴彤 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第1期22-26,共5页
以蔗糖反透析浓缩及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ 200层析纯化Ｆ48Ｅ8和ＬａＳｏｔａ新城疫病毒(ＮＤＶ),取纯化的病毒液免疫接种ＢＡＬＢ ｃ小鼠,将小鼠脾细胞与ＮＳ 1骨髓瘤细胞融合,经次黄嘌呤、氨基喋呤和胸苷(ＨＡＴ)培养基选择,间接ＥＬＩ... 以蔗糖反透析浓缩及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ 200层析纯化Ｆ48Ｅ8和ＬａＳｏｔａ新城疫病毒(ＮＤＶ),取纯化的病毒液免疫接种ＢＡＬＢ ｃ小鼠,将小鼠脾细胞与ＮＳ 1骨髓瘤细胞融合,经次黄嘌呤、氨基喋呤和胸苷(ＨＡＴ)培养基选择,间接ＥＬＩＳＡ检测,有限稀释法克隆,筛选出了3株杂交瘤细胞,依次命名为1Ｄ4、1Ｄ5、16Ｇ12。3株杂交瘤细胞的染色体数为80～100,并能稳定传代,其产生的单克隆抗体重链属于ＩｇＧ1,轻链属于κ链;ＥＬＩＳＡ检测时仅与ＮＤＶ发生特异性反应,而与其他常见禽类病毒抗原不出现交叉反应,应用这些单克隆抗体对ＮＤＶ分离株进行了分群研究。 展开更多
关键词 新城疫病毒 杂交瘤细胞 单克隆抗体
下载PDF
贵州省不同地区PRRS抗体监测及分析 被引量：1
19
作者 温贵兰 周碧君 +5 位作者 刘作才 刘诗栋 陈军义 王开功 文明 施晓丽 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2009年第9期142-144,共3页
采用繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒,运用ELISA试验,分别对贵州省贵阳、安顺、六盘水、兴义等市部分种猪场、规模场和散养户饲养的猪群604份血清样本进行PRRS抗体水平检测.免疫猪群中PRRS平均抗体阳性率为42.2%;非免疫猪群中PRRS... 采用繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒,运用ELISA试验,分别对贵州省贵阳、安顺、六盘水、兴义等市部分种猪场、规模场和散养户饲养的猪群604份血清样本进行PRRS抗体水平检测.免疫猪群中PRRS平均抗体阳性率为42.2%;非免疫猪群中PRRS平均感染抗体阳性率为34.0%.结果表明:不同地区血清PRRS抗体阳性率波动较大,在19.6%～81.8%;2008年比2007年存在PRRS的隐性感染的隐患更大. 展开更多
关键词 繁殖与呼吸综合征病毒 抗体 ELISA 贵州
下载PDF
新城疫疫苗株与分离毒株的蚀斑克隆与毒力鉴定 被引量：1
20
作者 温贵兰 龚新勇 +4 位作者 瞿继红 李永明 周碧君 文明 汪德生 《中国家禽》 北大核心 2009年第1期27-29,共3页
2株NDV贵州分离株(GN、ND99)与2株疫苗毒株(Ⅰ系和Ⅱ系)经检测为生物异质性毒株。利用蚀斑克隆技术对以上4株毒株进行蚀斑纯化,结果得到11株克隆毒株。其中,10株克隆毒株在鸡胚成纤维细胞上形成圆形、透明无色蚀斑,1株形成圆形、透明、... 2株NDV贵州分离株(GN、ND99)与2株疫苗毒株(Ⅰ系和Ⅱ系)经检测为生物异质性毒株。利用蚀斑克隆技术对以上4株毒株进行蚀斑纯化,结果得到11株克隆毒株。其中,10株克隆毒株在鸡胚成纤维细胞上形成圆形、透明无色蚀斑,1株形成圆形、透明、红色蚀斑。经RT-PCR检测,11株克隆毒株中6株为弱毒,形成蚀斑的大小在0.4～0.8mm之间;5株为强毒,形成蚀斑的大小在1.0～2.0mm之间。结果表明:所形成蚀斑的大小与病毒毒力具有一定的相关性。 展开更多
关键词 新城疫病毒 蚀斑克隆 毒力 RT—PCR
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 9 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部