Bcl-2基因加强表达对SK细胞编程死亡的效应 被引量：6

1

作者 温龙平 陈亚兵 +3 位作者 蔡毓 曾桂生 俞春东 曾定 《细胞生物学杂志》 CSCD 1996年第2期73-78,共6页

TNF和OA诱发人神经母细胞瘤SK细胞编程死亡(PCD)。将编码Bcl-2完整蛋白质的cDNA植入pXJ 41neo载体中,由HCMV病毒启动子控制其表达。形成的正向(pBcl-2-S)及反向(pBcl-2-AS)表达质粒经转染导入SK细胞中获得稳定转染子。Western印迹表明... TNF和OA诱发人神经母细胞瘤SK细胞编程死亡(PCD)。将编码Bcl-2完整蛋白质的cDNA植入pXJ 41neo载体中,由HCMV病毒启动子控制其表达。形成的正向(pBcl-2-S)及反向(pBcl-2-AS)表达质粒经转染导入SK细胞中获得稳定转染子。Western印迹表明正向转染子表达较大量的26kd Bcl-2蛋白,而反向转染子则不表达。增强表达的Bcl-2基因产物能抑制由TNF引发的PCD,但不影响由OA引发的PCD,从而证明Bcl-2基因产物抗细胞死亡效应的特异性。 展开更多

关键词 神经母细胞瘤 SK细胞 细胞编程死亡 基因表达

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Bc1-2 基因加强表达对 OA 诱发的细胞编程死亡的效应

2

作者 温龙平 蔡毓 +2 位作者 陈亚兵 俞春东 曾桂生 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期110-114,共5页

ＯＡ能诱发人神经母细胞瘤ＳＫ细胞进行编程死亡．死亡细胞缩小变圆，细胞质凝聚，ＤＮＡ有控降解成约２００ｂｐ左右的片段，且这一过程可由蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮（ＣＨＸ）抑制．将编码Ｂｃ１－２全长蛋白质的ｃＤＮＡ植入ｐＸ... ＯＡ能诱发人神经母细胞瘤ＳＫ细胞进行编程死亡．死亡细胞缩小变圆，细胞质凝聚，ＤＮＡ有控降解成约２００ｂｐ左右的片段，且这一过程可由蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮（ＣＨＸ）抑制．将编码Ｂｃ１－２全长蛋白质的ｃＤＮＡ植入ｐＸＪ４１ｎｅｏ载体中，使其表达由ＨＣＭＶ病毒启动子控制．形成的顺义（ｐＢｃｌ－２－Ｓ）及反义（ｐＢｃｌ－２－ＡＳ）表达质粒经转染导入ＳＫ细胞中获得稳定转染子，Ｗｅｓｔ－ｅｒｎ印迹表明顺义转染子表达较大量的２６ｋｄＢｃ１－２蛋白，而反义转染子则不表达．增强表达的Ｂｃ１－２基因产物对ＯＡ引ＳＫ细胞编程死亡无抑制效应． 展开更多

关键词 BCL-2基因 细胞编程死亡 蛋白磷酸酶 OA 癌细胞

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Bak基因的克隆、测序及表达

3

作者 温龙平 陈亚兵 +3 位作者 俞春东 蔡毓 曾桂生 曾定 《高技术通讯》 CAS CSCD 1995年第11期53-54,共2页

Ｂｃｌ－２蛋白家族在细胞编程死亡的调控中起重要的作用。本文报导了Ｂｃｌ－２家族新成员Ｂａｋ的克隆、测序及其在大肠杆菌中的表达过程，为研究细胞编程死亡以及Ｂａｋ在其中的作用机制提供了重要的依据。

关键词 BAK基因 克隆 基因表达 基因克隆

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bax基因促进细胞编程死亡的机理研究 被引量：7

4

作者 曾桂生 陈亚兵 +2 位作者 温龙平 俞春东 蔡毓 《生命科学》 CSCD 1996年第1期46-47,共2页

ｂａｘ基因促进细胞编程死亡的机理研究曾桂生，陈亚兵，温龙平，俞春东，蔡毓（厦门大学肿瘤细胞工程国家专业实验室厦门３６１００５）１９８０年ＷｙｌｌｉｅＡ．Ｈ．等通过糖皮激素诱导胸腺细胞死亡的实验，提出了细胞编程死亡（Ｐ... ｂａｘ基因促进细胞编程死亡的机理研究曾桂生，陈亚兵，温龙平，俞春东，蔡毓（厦门大学肿瘤细胞工程国家专业实验室厦门３６１００５）１９８０年ＷｙｌｌｉｅＡ．Ｈ．等通过糖皮激素诱导胸腺细胞死亡的实验，提出了细胞编程死亡（ＰｒｏｇａｍｍｅｄＣｅｌｌＤｅａｔｈ... 展开更多

关键词 细胞生物学 细胞编程死亡 BAX基因

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纳米材料诱导细胞自噬的效应及生物学功能 被引量：4

5

作者 汪昌丽 满娜 温龙平 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2011年第1期200-208,共9页

细胞自噬是细胞自身调节维持稳态的重要过程,也是细胞的一种防御和应激调控机制。细胞自噬对于机体具有重要的生理病理学作用,与肿瘤的发生、神经系统疾病的发生、病原体感染及免疫系统应答以及细胞的分化和衰老等多个生命活动过程相关... 细胞自噬是细胞自身调节维持稳态的重要过程,也是细胞的一种防御和应激调控机制。细胞自噬对于机体具有重要的生理病理学作用,与肿瘤的发生、神经系统疾病的发生、病原体感染及免疫系统应答以及细胞的分化和衰老等多个生命活动过程相关。病毒作为一种具有生物活性的纳米材料,与细胞自噬间的关系比较复杂。一方面自噬清除病毒粒子,对细胞起到保护作用;另一方面有些病毒又能利用自噬过程实现自身在细胞中的寄生逃逸细胞的防御机制。多种无机或有机纳米材料也被报道能引起不同程度的细胞自噬,比如纳米稀土金属氧化物、量子点、纳米材料富勒烯及衍生物、树状大分子、阳离子脂质体等都能诱导细胞产生自噬。目前能够引起细胞自噬的纳米材料也被尝试用于药物增敏、清除蛋白聚集体、阻断及清除病原体和调节免疫等。纳米材料引发的自噬发生过程和原理以及参与其中的分子、信号转导过程、病理生理学意义也还有待进一步深入研究。 展开更多

关键词 纳米材料 细胞自噬 生物学功能 文献综述

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CPP32 cDNA的克隆及其表达和活性检测 被引量：1

6

作者 陈亚兵 俞春东 +4 位作者 郭本昌 丁梅 郭淑贞 曾定 温龙平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第2期151-154,共4页

ＣＰＰ３２在细胞编程死亡调控中起重要的作用．利用ＣＰＰ３２专一性引物，用ＲＴＰＣＲ方法从人鼻咽癌ＣＮＥ细胞中扩增出约８３０ｂｐ的片段，经序列分析证明与已发表的ＣＰＰ３２序列完全一致．将扩增出的编码人全长ＣＰＰ３２的... ＣＰＰ３２在细胞编程死亡调控中起重要的作用．利用ＣＰＰ３２专一性引物，用ＲＴＰＣＲ方法从人鼻咽癌ＣＮＥ细胞中扩增出约８３０ｂｐ的片段，经序列分析证明与已发表的ＣＰＰ３２序列完全一致．将扩增出的编码人全长ＣＰＰ３２的ｃＤＮＡ片段克隆入ｐＧＥＸ２Ｔ中，转化大肠杆菌ＤＨ５α．转化菌经诱导表达出较高含量的ＧＳＴＣＰＰ３２融合蛋白．进一步研究显示，细菌中表达的ＣＰＰ３２蛋白能自我切割，而且能裂解体外翻译的ＰＡＲＰ，从而证明其具有生物活性． 展开更多

关键词 CPP32 表达 蛋白裂解活性 克隆

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重组人骨形成蛋白-3的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：1

7

作者 陈亚兵 俞春东 +1 位作者 温龙平 曾定 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期210-213,共4页

重组人骨形成蛋白３的克隆及其在大肠杆菌中的表达陈亚兵俞春东温龙平曾定（厦门大学肿瘤细胞工程国家专业实验室厦门３６１００５）骨形成蛋白（ＢｏｎｅＭｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃＰｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）是一类能诱导异位骨及软... 重组人骨形成蛋白３的克隆及其在大肠杆菌中的表达陈亚兵俞春东温龙平曾定（厦门大学肿瘤细胞工程国家专业实验室厦门３６１００５）骨形成蛋白（ＢｏｎｅＭｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃＰｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）是一类能诱导异位骨及软骨形成，并在动物的发育和分化中起作... 展开更多

关键词 骨形成蛋白-3 重组 克隆 大肠杆菌 表达

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Bcl—2基因表达对TNF及OA诱发的细胞编程死亡的不同效应 被引量：2

8

作者 陈亚兵 蔡毓 温龙平 《生命科学》 CSCD 1996年第2期17-18,共2页

用ＴＮＦ和ＯＡ（Ｏｋａｄａｉｃａｃｉｄ）诱发人神经母细胞瘤ＳＫ细胞死亡，并证明细胞死亡为编程死亡（ＰｒｏｇｒｍｍｅｄＣｅｌｌＤｅａｔｈ，简称ＰＣＤ）。将编码Ｂｃｌ－２全长蛋白的ｃＤＮＡ植入ＰＪＸ４１ｎｅｏ载体中，使其... 用ＴＮＦ和ＯＡ（Ｏｋａｄａｉｃａｃｉｄ）诱发人神经母细胞瘤ＳＫ细胞死亡，并证明细胞死亡为编程死亡（ＰｒｏｇｒｍｍｅｄＣｅｌｌＤｅａｔｈ，简称ＰＣＤ）。将编码Ｂｃｌ－２全长蛋白的ｃＤＮＡ植入ＰＪＸ４１ｎｅｏ载体中，使其表达由ＨＣＭＶ病毒起动子控制。形成的顺义（ｐＢｃｌ－２－Ｓ）及反义（ｐＢｃｌ－２－ＡＳ）表达质粒经转染导入ＳＫ细胞中获得稳定转染子。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹表明顺义转染子表达大量的２６ｋｄＢｃｌ－２蛋白，而反义转染子则不表达。增强表达的Ｂｃｌ－２蛋白能抑制由ＴＮＦ引发的ＰＣＤ，但不影响ＯＡ引发的ＰＣＤ，从而证明了Ｂｃｌ－２基因产物抗细胞死亡效应的特异性。 展开更多

关键词 细胞生物学 Bcl--2基因 细胞编程死亡

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Tat碱性结构域-Bcl-Xs融合蛋白与细胞短暂共培养可诱导细胞程序性死亡 被引量：1

9

作者 郭淑贞 陈亚兵 +4 位作者 张军 谢小燕 杨海杰 温龙平 夏宁邵 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第5期674-679,共6页

艾滋病毒的 Tat蛋白碱性结构域的 1 3个氨基酸的多肽能自主穿越细胞膜并将与之融合表达的其他蛋白带入细胞 .为探讨融合表达的蛋白是否可保持原有的主要生物学功能 ,将 Bcl- Xs蛋白与 Tat碱性结构域在大肠杆菌中融合表达 ,重组蛋白 Tat-... 艾滋病毒的 Tat蛋白碱性结构域的 1 3个氨基酸的多肽能自主穿越细胞膜并将与之融合表达的其他蛋白带入细胞 .为探讨融合表达的蛋白是否可保持原有的主要生物学功能 ,将 Bcl- Xs蛋白与 Tat碱性结构域在大肠杆菌中融合表达 ,重组蛋白 Tat- Bcl- Xs与 CHO、CNE、Hela和 772 1细胞共温育一段时间后 ,细胞均可见明显生长抑制 ,同时细胞变圆、变小、细胞核收缩 ,并有染色体凝聚、边缘化 ,或细胞核分裂为小核的现象 ,同时出现梯状 DNA,为较典型的细胞程序性死亡 ( PCD)表现 .同时发现放线菌素 D、雷公藤内脂醇与 Tat- Bcl- Xs在诱导细胞 PCD时存在交互作用 .提示Tat- Bcl- Xs蛋白可自主进入细胞内 ,并保持了 Bcl- Xs蛋白的 PCD诱导作用 ,初步证实了利用 Tat碱性结构域进行药物设计的可行性 ,同时也提示 Tat- Bcl- 展开更多

关键词 BCL-XS Tat碱性结构域 药物跨膜运送 细胞凋亡

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人的Bcl－X_L和Bcl－X_ScDNA的克隆及表达研究

10

作者 陈亚兵 温龙平 +3 位作者 俞春东 郭本昌 蔡毓 曾定 《高技术通讯》 CAS CSCD 1996年第4期1-3,共3页

利用一对带有Ｔａｔ在序列的Ｂｃｌ－ｘ专一性引物从ＢＥＡＳ－２Ｂ细胞中扩增出比ｂｃｌ－ＸＬ和ｂｃｌ－ＸｓｃＤＮＡ，并将它们克隆入ｐＧＥＸ－５Ｘ－３载体进行表达。用ＩＰＴＧ诱导表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的３０％，经谷胱... 利用一对带有Ｔａｔ在序列的Ｂｃｌ－ｘ专一性引物从ＢＥＡＳ－２Ｂ细胞中扩增出比ｂｃｌ－ＸＬ和ｂｃｌ－ＸｓｃＤＮＡ，并将它们克隆入ｐＧＥＸ－５Ｘ－３载体进行表达。用ＩＰＴＧ诱导表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的３０％，经谷胱甘肽－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析，蛋白纯度达９０％。这些结果为进一步研究Ｂｃｌ－ｘ在编程性细胞死亡中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 BCL-XL Bcl-Xx 融合蛋白 细胞克隆

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Bax基因cDNA的分子克隆研究

11

作者 曾桂生 陈亚兵 +3 位作者 陈华 俞春东 蔡毓 温龙平 《生物技术》 CAS CSCD 1996年第6期7-10,共4页

细胞编程死亡（ｐｒｏｇｒａｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ）是细胞生理性死亡的一种主要形式。Ｂａｘ具有抑制细胞编程死亡的作用。本研究采用ＰＣＲ方法，从人肿瘤细胞ＨＬ—６０ｃＤＮＡ文库中扩增出若干个ｂａｘｃＤＮＡ片段，然后将它... 细胞编程死亡（ｐｒｏｇｒａｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ）是细胞生理性死亡的一种主要形式。Ｂａｘ具有抑制细胞编程死亡的作用。本研究采用ＰＣＲ方法，从人肿瘤细胞ＨＬ—６０ｃＤＮＡ文库中扩增出若干个ｂａｘｃＤＮＡ片段，然后将它们分别与ＰＧＥＭ—Ｔ测序质粒载体连接，并转化到大肠杆菌ＪＭ１０９中去。用蓝／白法筛选重组菌落，经酶切分析及ＰＣＲ鉴定，获得了插入片段大小约为０．４ｋｂ及１．１ｋｂ的ＢａｘｃＤＮＡ重组质粒ＰＢａｘｌ和ｐＢａｘ２。这些片段的测序及表达工作正在进行之中。 展开更多

关键词 克隆 分子克隆 BAX基因 BAX CDNA

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BMP－3和5在不同组织、细胞中的检测及其在大肠杆菌中的表达

12

作者 俞春东 陈亚兵 温龙平 《高技术通讯》 CAS CSCD 1996年第10期53-54,共2页

利用ＲＴ－ＰＣＲ技术，检测了ＢＭＰ－３及ＢＭＰ－５在不同组织中的表达，并将ＰＣＲ扩增出的ｂｍｐ－３和ｂｍｐ－５ｃＤＮＡ克隆入ｐＧＥＸ表达载体．在大肠杆菌中得到高效表达。

关键词 检测 BMP-3 大肠杆菌 细胞

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Tat介导外源蛋白引入活细胞

13

作者 陈亚兵 温龙平 《国外医学（免疫学分册）》 北大核心 1996年第5期243-247,共5页

本文在介绍外源大分子引入细胞的方法及ＨＩＶ－１反式激活因子Ｔａｔ蛋白的结构基础上概述了Ｔａｔ蛋白介导的外源蛋白进入活细胞的方法，并进一步地对其作用机制进行了探讨，认为Ｔａｔ介导的外源大分子引入细胞系统在研究细胞生命活... 本文在介绍外源大分子引入细胞的方法及ＨＩＶ－１反式激活因子Ｔａｔ蛋白的结构基础上概述了Ｔａｔ蛋白介导的外源蛋白进入活细胞的方法，并进一步地对其作用机制进行了探讨，认为Ｔａｔ介导的外源大分子引入细胞系统在研究细胞生命活动及临床医学上有重要的意义。 展开更多

关键词 TAT蛋白 介导 Tat嵌合体 运送

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噬菌体在血液中的失活及其机理的初步研究 被引量：7

14

作者 马晓丽 吴庆庆 温龙平 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期90-94,共5页

为了研究噬菌体在体内的失活现象,探讨血液中影响噬菌体活性的因素及其作用机理,为噬菌体在体内作为治疗或诊断的可能应用以及动物体内噬菌体展示技术的进一步完善提供理论基础,检测了M13噬菌体在血清和全血中的残余活性时间梯度,进行... 为了研究噬菌体在体内的失活现象,探讨血液中影响噬菌体活性的因素及其作用机理,为噬菌体在体内作为治疗或诊断的可能应用以及动物体内噬菌体展示技术的进一步完善提供理论基础,检测了M13噬菌体在血清和全血中的残余活性时间梯度,进行了体内实验,然后比较了几种情况下噬菌体在血液中的失活现象(KSCN洗脱与否、体温或补体失活的高温、注射免疫抑制剂与否、免疫缺陷型小鼠),并初步探讨了噬菌体失活问题的解决办法.结果表明,血清造成噬菌体快速失活,KSCN及环磷酰胺处理可部分逆转该效应,60℃处理基本上完全消除该失活现象.T细胞缺陷型裸鼠和普通小鼠的失活效应相似.胰蛋白胨和牛血清白蛋白可部分解除血清对噬菌体的失活作用.我们认为,血清中存在的因子是导致噬菌体失活的主要因素,且很可能是由IgM介导的补体引发. 展开更多

关键词 噬菌体 失活 免疫球蛋白M 补体 抗原抗体反应

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科安乳膏抗癌作用机理的初步研究 被引量：3

15

作者 赵奇红 张颖 +2 位作者 刘赟 周绪天 温龙平 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期351-356,共6页

为了寻求高效低毒副作用的抗癌药物,对传统中药的剂型加以改进,并且探寻其抗癌机理,以安庆消瘤散传统剂型为基础,运用透皮给药技术,发展成新的剂型——科安乳膏.体外实验结果显示纳米化的药物悬液可以有效地抑制肿瘤细胞生长,诱导凋亡;... 为了寻求高效低毒副作用的抗癌药物,对传统中药的剂型加以改进,并且探寻其抗癌机理,以安庆消瘤散传统剂型为基础,运用透皮给药技术,发展成新的剂型——科安乳膏.体外实验结果显示纳米化的药物悬液可以有效地抑制肿瘤细胞生长,诱导凋亡;体内试验显示科安乳膏通过透皮给药可以达到适宜的血药浓度和组织分布,具有很好的阻止肿瘤内血管生成、抑制肿瘤生长的效果.结果表明科安乳膏是一种具有良好抗癌活性的透皮药物. 展开更多

关键词 科安乳膏 抗癌活性 皮肤黑色素瘤 血管生成 透皮给药

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TD1修饰绿色荧光蛋白透皮功能的研究(英文) 被引量：3

16

作者 孙铮 温龙平 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期344-350,共7页

TD1作为一种含有11个氨基酸的短肽,具有良好的促进蛋白类大分子透皮的功能.过去的研究显示TD1可以有效协助胰岛素通过皮肤进入循环并最终降低血糖.在本研究中我们构建了一种TD1 N端修饰的GFP融合蛋白(TGFP).我们的实验表明,与TD1与GFP... TD1作为一种含有11个氨基酸的短肽,具有良好的促进蛋白类大分子透皮的功能.过去的研究显示TD1可以有效协助胰岛素通过皮肤进入循环并最终降低血糖.在本研究中我们构建了一种TD1 N端修饰的GFP融合蛋白(TGFP).我们的实验表明,与TD1与GFP蛋白的混合物相比,TGFP具有更加良好的透皮功能.这一发现为透皮给药研究提供了一条新的途径,并对解释TD1透皮功能具有指导意义. 展开更多

关键词 TD1 透皮 绿色荧光蛋白(GFP) 融合蛋白(TGFP)

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小分子细胞自噬诱导剂用于治疗神经退行性疾病 被引量：5

17

作者 杨雯隽 温龙平 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第12期2012-2016,共5页

大量突变和错误折叠的蛋白质在细胞内聚集是神经退行性疾病产生的基础,研究发现一些小分子可以通过引起细胞自噬而降解细胞内聚集的突变蛋白,为治疗神经退行性疾病提供了新的方法。本文对神经退行性疾病的发病机理,细胞自噬的机理以及... 大量突变和错误折叠的蛋白质在细胞内聚集是神经退行性疾病产生的基础,研究发现一些小分子可以通过引起细胞自噬而降解细胞内聚集的突变蛋白,为治疗神经退行性疾病提供了新的方法。本文对神经退行性疾病的发病机理,细胞自噬的机理以及对神经退行性疾病的作用进行了综述。 展开更多

关键词 细胞自噬 神经退行性疾病

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三种纳米材料C_(70),C_(60)Cl_6和C_(60)Ph_6引起细胞自噬的现象 被引量：1

18

作者 孙轲婧 郑芳 温龙平 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期339-345,共7页

为了进一步研究富勒烯家族及其衍生物引起细胞自噬的现象,运用荧光显微镜、透射电子显微镜、蛋白免疫印迹等技术,对水溶性的纳米C70,C60Cl6和C60Ph6诱导的细胞自噬现象进行了初步探讨.实验结果显示,C70,C60Cl6和C60Ph6稳定分散于水中形... 为了进一步研究富勒烯家族及其衍生物引起细胞自噬的现象,运用荧光显微镜、透射电子显微镜、蛋白免疫印迹等技术,对水溶性的纳米C70,C60Cl6和C60Ph6诱导的细胞自噬现象进行了初步探讨.实验结果显示,C70,C60Cl6和C60Ph6稳定分散于水中形成的纳米颗粒,均能诱导HeLa细胞产生自噬现象,揭示了富勒烯家族及其衍生物在生物医药领域更广泛的研究和应用价值. 展开更多

关键词 富勒烯 纳米颗粒 C70 C60Cl6 C60Ph6 细胞自噬

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BMP－3及BMP－5在不同组织和细胞中的表达

19

作者 温龙平 陈亚兵 +1 位作者 林旭 俞春东 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期244-247,共4页

报道ＢＭＰ－３及ＢＭＰ－５在不同组织细胞中的表达．将人的神经母细胞瘤ＳＫ细胞的总ＲＮＡ及人的脑、肝、胸腺、脾、胎盘及睾丸的总ＲＮＡ反转录成ｃＤＮＡ作为模板，利用设计的编码ＢＭＰ－３和ＢＭＰ－５成熟蛋白的专一性引物分别... 报道ＢＭＰ－３及ＢＭＰ－５在不同组织细胞中的表达．将人的神经母细胞瘤ＳＫ细胞的总ＲＮＡ及人的脑、肝、胸腺、脾、胎盘及睾丸的总ＲＮＡ反转录成ｃＤＮＡ作为模板，利用设计的编码ＢＭＰ－３和ＢＭＰ－５成熟蛋白的专一性引物分别扩增出相应的片段．ＰＣＲ产物的琼脂糖凝胶电泳结果表明，ＢＭＰ－３及ＢＭＰ－５在不同组织细胞中表达类型不同． 展开更多

关键词 骨形成蛋白 反转录 组织 细胞 基因表达 PCR

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人肿瘤坏死因子cDNA衍生物在大肠杆菌中的表达及活性测定

20

作者 黄健强 曾桂生 +4 位作者 陈亚兵 郭本昌 俞春东 蔡毓 温龙平 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期787-789,共3页

应用基因工程方法构建了含人肿瘤坏死因子ＣＤＮＡ衍生物的重组体．转化大肠杆菌后酶切鉴定．转化菌经摇瓶培养及温度调控，获得高效表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，表达的ＴＮＦ分子量约为１７ｋＤ，蛋白量约为菌体可溶性蛋白的２０... 应用基因工程方法构建了含人肿瘤坏死因子ＣＤＮＡ衍生物的重组体．转化大肠杆菌后酶切鉴定．转化菌经摇瓶培养及温度调控，获得高效表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，表达的ＴＮＦ分子量约为１７ｋＤ，蛋白量约为菌体可溶性蛋白的２０％．用Ｌ９２９细胞毒性测定法测得菌液ＴＮＦ的表达为２×１０８ｕ／ｍＬ．抗ＴＮＦ的单克隆抗体可以中和大肠杆菌表达的ＴＮＦ对Ｌ９２９细胞的细胞毒性． 展开更多

关键词 人肿瘤坏死因子 CDNA 基因表达 大肠杆菌

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