牛磺酸拮抗溶血磷脂酸诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖作用 被引量：6

1

作者 牛大地 石彦荣 +4 位作者 蒋宏峰 尚月婷 庞永政 伍期专 唐朝枢 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期272-275,共4页

目的　观察牛磺酸 (Tau)对溶血磷脂酸 (LPA)诱导的大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖作用的影响。方法　在培养的大鼠血管平滑肌细胞上 ,测定3 H 胸腺嘧啶核苷(3 H TdR)参入和丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性 ;硫代巴比妥酸盐 (TBA)法测脂... 目的　观察牛磺酸 (Tau)对溶血磷脂酸 (LPA)诱导的大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖作用的影响。方法　在培养的大鼠血管平滑肌细胞上 ,测定3 H 胸腺嘧啶核苷(3 H TdR)参入和丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性 ;硫代巴比妥酸盐 (TBA)法测脂质过氧化终产物丙二醛 (MDA)含量。结果　LPA (1× 10 -9～ 1× 10 -7mol·L-1)呈浓度依赖性增加VSMC 3 H TdR参入 ,5、10和 2 0mmol·L-1Tau及MAPK抑制剂PD0 980 59预孵育后分别使LPA (1× 10 -7mol·L-1)诱导的3 H TdR参入较单独LPA组减少 15 %、34%、4 8%和 5 4 % (P <0 0 5或P <0 0 1)。LPA增加VSMCMAPK活性 ,5、10和 2 0mmol·L-1Tau预孵育降低LPA(1× 10 -7mol·L-1)刺激的MAPK活性 ,较单纯LPA孵育低14 %、35 %和 4 4 % (P <0 0 5或P <0 0 1)。随着加入LPA的浓度增加 ,细胞MDA含量增加。与 1× 10 -7mol·L-1LPA组比较 ,5、10和 2 0mmol·L-1Tau预处理的细胞较LPA单独孵育组细胞MDA含量分别低 18%、2 7%、4 5 % (P<0 0 5或P <0 0 1) ,LPA诱导细胞MDA生成的作用不受PD0 980 59预孵育的影响 (P >0 0 5 )。结论　LPA呈浓度依赖性促进VSMC增殖和脂质过氧化 ,前者与其细胞内信号传导MAPK途径有关 ,Tau可有效拮抗LPA诱导的VSMC增殖、MAPK激活和脂质过氧化损伤 。 展开更多

关键词 TAU 溶血磷脂酸 平滑肌细胞 增殖

下载PDF 职称材料

牛磺酸抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖 被引量：8

2

作者 牛大地 张居馨 +5 位作者 迟学栋 周洪 杨青 陈晓彤 王述姮 唐朝枢 《北京医科大学学报》 CSCD 1993年第4期255-257,共3页

以~3H-胸腺嘧啶参入和细胞计数的方法,观察牛磺酸对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制效应。结果表明,培养液中加入牛磷酸(5、10和20mmol/L)能明显抑制培养的自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠(WKY)VSMC的~3H-胸腺嘧啶参入,降低其细胞... 以~3H-胸腺嘧啶参入和细胞计数的方法,观察牛磺酸对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制效应。结果表明,培养液中加入牛磷酸(5、10和20mmol/L)能明显抑制培养的自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠(WKY)VSMC的~3H-胸腺嘧啶参入,降低其细胞计数。牛磺酸对血管紧张素Ⅱ(10^(-7)mmol/L)刺激的VSMC增殖亦呈剂量依赖地抑制效应。 展开更多

关键词 牛磺酸 血管 平滑肌细胞 高血压

下载PDF 职称材料

降钙素基因相关肽对家兔主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量：4

3

作者 牛大地 吴建明 +3 位作者 杨青 程彤 陈绮云 唐朝枢 《北京医科大学学报》 CSCD 1994年第1期58-58,共1页

降钙素基因相关肽对家兔主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响北京医科大学心肺内分泌研究室牛大地，吴建明，杨青程彤，陈绮云，唐朝枢降钙素基因相关肽（ＣａｌｃｉｔｏｎｉｎＧｅｎｅ－ＲｅｌａｔｅｄＰｅｐｔｉｄｅ，ＣＧＲＰ）是一种广... 降钙素基因相关肽对家兔主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响北京医科大学心肺内分泌研究室牛大地，吴建明，杨青程彤，陈绮云，唐朝枢降钙素基因相关肽（ＣａｌｃｉｔｏｎｉｎＧｅｎｅ－ＲｅｌａｔｅｄＰｅｐｔｉｄｅ，ＣＧＲＰ）是一种广泛分布于神经系统和心血管系统的血管... 展开更多

关键词 降钙素 基因相关肽 细胞增殖

下载PDF 职称材料

肽6A抑制培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖

4

作者 牛大地 迟学栋 +7 位作者 杨青 王述 周洪 唐朝枢 赵明 彭师奇 王乘瑞 吴祥林 《北京医科大学学报》 CSCD 1994年第3期200-200,共1页

肽６Ａ抑制培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖北京医科大学心肺内分泌研究室牛大地，迟学栋，杨青，王述周洪，唐朝枢北京医科大学天然药物与仿生药物实验室赵明，彭师奇卫生部兰州生物制品研究所王乘瑞，吴祥林肽６Ａ是纤维蛋白（原）降解... 肽６Ａ抑制培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖北京医科大学心肺内分泌研究室牛大地，迟学栋，杨青，王述周洪，唐朝枢北京医科大学天然药物与仿生药物实验室赵明，彭师奇卫生部兰州生物制品研究所王乘瑞，吴祥林肽６Ａ是纤维蛋白（原）降解产生的五肽，具有扩张冠状动脉及抑制... 展开更多

关键词 肽6A 血管 平滑肌 细胞增殖

下载PDF 职称材料

降钙素基因相关肽拮抗内皮素生物效应的研究 被引量：101

5

作者 谭敦勇 张继峰 +7 位作者 牛大地 迟学栋 陈晓彤 张越 赵云涛 石湘云 汤健 唐朝枢 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期653-657,共5页

本实验在大鼠及小鼠的整体、离体器官及细胞水平上系统观察了降钙素基因相关肽(CGRP)对内皮素(ET)的拮抗作用。结果表明,CGRP显著地拮抗ET的升压、增加血管张力、促进血管平滑肌细胞增殖、损伤心肌以及致小鼠猝死等作用,并明显降低大鼠... 本实验在大鼠及小鼠的整体、离体器官及细胞水平上系统观察了降钙素基因相关肽(CGRP)对内皮素(ET)的拮抗作用。结果表明,CGRP显著地拮抗ET的升压、增加血管张力、促进血管平滑肌细胞增殖、损伤心肌以及致小鼠猝死等作用,并明显降低大鼠血浆ET含量。结果提示CGRP可能是机体内源性ET拮抗剂,给予外源CGRP可能对与ET有关的心脑血管疾病有防治意义。 展开更多

关键词 内皮 血压 心肌 降钙素 基因相关肽

下载PDF 职称材料

血管内皮生长因子基因治疗大鼠脑缺血的实验研究 被引量：22

6

作者 刘艳秋 周爱儒 +3 位作者 牛大地 朱小君 陈光慧 汤健 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期681-686,共6页

为探讨血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗大鼠脑缺血的可行性,构建了pcD2/hVEGF121真核表达质粒,建立持续性大脑中动脉堵塞(MCAO)的局灶性脑梗塞模型,大鼠脑皮质直接注射法转移pcD2/hVEGF121真核表达质粒。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)... 为探讨血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗大鼠脑缺血的可行性,构建了pcD2/hVEGF121真核表达质粒,建立持续性大脑中动脉堵塞(MCAO)的局灶性脑梗塞模型,大鼠脑皮质直接注射法转移pcD2/hVEGF121真核表达质粒。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、VEGF免疫组织化学法、脑血管计数及梗塞面积测定等方法检测转移pcD2/hVEGF121真核表达质粒后大鼠脑中VEGF基因表达及生物学效应。结果发现,与转移空载质粒的对照组相比,转移VEGF基因后7d的大鼠脑组织中有VEGFmRNA高表达,VEGF免疫组化染色可见VEGF蛋白表达水平增高,脑血管数增多,梗塞体积缩小。因此,直接注射法转移VEGF基因能够在缺血脑组织中表达,表达产物能够发挥生物学效应,进而起到保护脑组织作用。 展开更多

关键词 血管内皮 生长因子 脑缺血 基因治疗

下载PDF 职称材料

钙信号在尾加压素-Ⅱ促血管平滑肌增殖中的作用 被引量：15

7

作者 张正浩 张孙曦 +5 位作者 李菊香 何其华 牛大地 王述姮 袁杰 唐朝枢 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期261-265,共5页

目的 :探讨钙信号在尾加压素 Ⅱ (urotensin Ⅱ ,UⅡ )促血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecell,VSMC)增殖中的作用。方法 :在离体培养的VSMC上 ,用流式细胞仪和3 H TdR参入的方法探讨UⅡ的促增殖效应 ;在离体孵育的大鼠主动脉平... 目的 :探讨钙信号在尾加压素 Ⅱ (urotensin Ⅱ ,UⅡ )促血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecell,VSMC)增殖中的作用。方法 :在离体培养的VSMC上 ,用流式细胞仪和3 H TdR参入的方法探讨UⅡ的促增殖效应 ;在离体孵育的大鼠主动脉平滑肌组织上观察UⅡ对平滑肌45Ca2 + 摄入的影响 ;应用激光共聚焦显微镜检测UⅡ作用后细胞内游离钙的改变。结果 :UⅡ (10 -9～ 10 -7mol·L-1)浓度依赖地刺激VSMC的DNA合成 ,并诱导细胞由静止向增殖状态转化。与对照组相比 10 -8mol·L-1UⅡ使细胞的增殖指数 [(G2 M +S) % ]增加 192 % (P <0 .0 1)。钙通道阻断剂尼卡地平和Ca2 + 螯合剂EDTA均可阻断UⅡ对VSMC的促增殖效应 ,其中UⅡ (10 -8mol·L-1)与尼卡地平 (10 -5mol·L-1)共同孵育的VSMCDNA合成量仅为单纯UⅡ (10 -8mol·L-1)组的 5 9.0 %。UⅡ (10 -10 ～ 10 -8mol·L-1)可浓度依赖地使胸主动脉对45Ca2 + 的摄入增加 ,尼卡地平 (10 -5mol·L-1)也可显著对抗UⅡ (10 -8mol·L-1)对45Ca2 + 摄入的诱导作用 (P值均小于 0 .0 1)。用激光共聚焦显微镜观察发现UⅡ作用后细胞内Ca2 + 浓度迅速升高 ,持续约 3min ,形成钙波。结论 :UⅡ可通过促进细胞Ca2 + 摄取和增加细胞内Ca2 + 浓度 。 展开更多

关键词 钙信号 尾加压素-Ⅱ 血管平滑肌增殖 信号传递 药理学

下载PDF 职称材料

同型半胱氨酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用 被引量：19

8

作者 田学军 周爱儒 +2 位作者 汤健 牛大地 俞文华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第1期108-112,共5页

血中同型半胱氨酸（ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ＨＣＹ）浓度的升高已成为动脉粥样硬化发生的一个独立危险因子．为进一步阐明ＨＣＹ促进血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ，ＶＳＭＣｓ）增殖，从而引... 血中同型半胱氨酸（ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ＨＣＹ）浓度的升高已成为动脉粥样硬化发生的一个独立危险因子．为进一步阐明ＨＣＹ促进血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ，ＶＳＭＣｓ）增殖，从而引起动脉粥样硬化发生的机理．本实验采用细胞计数、３Ｈ－ＴｄＲ参入、细胞周期分析、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法证明，一定剂量的ＨＣＹ可促进离体培养的ＷＫＹ大鼠血管平滑肌细胞增殖，使其ＤＮＡ合成增加，细胞周期中Ｓ期细胞所占比例增加４３％，并促进ｃ－ｍｙｃ与ｃ－ｆｏｓ原癌基因ｍＲＮＡ表达增加． 展开更多

关键词 同型 半胱氨酸 血管平滑肌 动脉粥样硬化

下载PDF 职称材料

牛磺酸减轻β-甘油磷酸诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化 被引量：7

9

作者 张宝红 姜智胜 +5 位作者 王述恒 牛大地 庞永正 李菊香 唐朝枢 杜军保 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期145-149,共5页

目的 :观察牛磺酸对钙化的形成及逆转作用的影响 ,探讨牛磺酸在血管钙化发生中的作用。方法 :利用β -甘油磷酸制备钙化血管平滑肌细胞 (VSMCs) ,测定细胞钙含量、碱性磷酸酶活性、[45Ca]沉积及 [3 H] 胸腺嘧啶。结果 :与对照组相比 ,... 目的 :观察牛磺酸对钙化的形成及逆转作用的影响 ,探讨牛磺酸在血管钙化发生中的作用。方法 :利用β -甘油磷酸制备钙化血管平滑肌细胞 (VSMCs) ,测定细胞钙含量、碱性磷酸酶活性、[45Ca]沉积及 [3 H] 胸腺嘧啶。结果 :与对照组相比 ,钙化细胞的钙含量、ALP活性和 [45Ca]沉积均明显升高 (P <0 0 5 ) ,而牛磺酸与 β -甘油磷酸同时孵育呈剂量依赖性地抑制钙化发生。在牛磺酸逆转实验中 ,钙化细胞的钙含量、ALP活性和 [45Ca]沉积均较换液前明显降低 (P <0 0 1) ;且牛磺酸呈剂量依赖性地逆转已钙化细胞。与对照组相比 ,钙化细胞的细胞数量和[3 H] TdR掺入量增加 (P <0 0 1) ,牛磺酸早期干预组显著抑制钙化细胞的增殖 ,但牛磺酸对已钙化的细胞 ,增殖抑制效应不明显。结论 :牛磺酸可抑制细胞钙化形成且能逆转已形成钙化。 展开更多

关键词 牛磺酸 钙化 肌 平滑肌 血管

下载PDF 职称材料

同型半胱氨酸抑制培养的大鼠血管平滑肌细胞牛磺酸转运 被引量：12

10

作者 石彦荣 牛大地 +4 位作者 王述姮 高霖 齐永芬 庞永正 唐朝枢 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2002年第3期203-205,共3页

为了研究同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞牛磺酸转运的影响 ,采用培养的大鼠血管平滑肌细胞和3 H标记的牛磺酸 ,并测定血管平滑肌细胞牛磺酸转运。实验发现 ,同型半胱氨酸呈浓度依赖性抑制血管平滑肌细胞转运牛磺酸 ,1 0 0 μmol L和 50 0... 为了研究同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞牛磺酸转运的影响 ,采用培养的大鼠血管平滑肌细胞和3 H标记的牛磺酸 ,并测定血管平滑肌细胞牛磺酸转运。实验发现 ,同型半胱氨酸呈浓度依赖性抑制血管平滑肌细胞转运牛磺酸 ,1 0 0 μmol L和 50 0 μmol L同型半胱氨酸组血管平滑肌细胞牛磺酸转运的最大速率 (Vmax)较对照组分别降低 31 % (P <0 .0 5)和 51 % (P <0 .0 1 ) ,但组间Km值无显著差异 ;5mmol LH2 O2 亦抑制血管平滑肌细胞牛磺酸摄入 ,Vmax较对照组降低 48% (P <0 .0 1 ) ,但Km值增加 45 % (P <0 .0 1 ) ,其转运效率 (Vmax Km)较 50 0 μmol L同型半胱氨酸组更低 (3 .72± 0 .32比 5 .33± 0 .69,P <0 .0 1 )。 2 0mmol L牛磺酸和 50 0 μmol L同型半胱氨酸同时孵育 ,血管平滑肌细胞牛磺酸转运较 50 0 μmol L同型半胱氨酸组增加 ,Vmax增加 35 % (P <0 .0 5) ,两组间Km值亦无显著差异 ,转运效率增加 40 % (P <0 .0 5)。结果提示 ,同型半胱氨酸抑制血管平滑肌细胞牛磺酸转运 ,其机制不能用同型半胱氨酸产生过氧化物来解释 。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 牛磺酸 转运 同型半胱氨酸

下载PDF 职称材料

大鼠心肌缺血的血管内皮生长因子基因治疗 被引量：15

11

作者 刘艳秋 周爱儒 +3 位作者 朱小君 牛大地 陈光慧 汤健 《北京医科大学学报》 CSCD 1999年第6期489-492,共4页

目的：应用血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ， ＶＥＧＦ） 基因治疗心肌缺血。方法：雄性Ｗｉｓｔａｒ 大鼠２０ 只，结扎冠状动脉前降支造成心肌梗死模型。心脏多点注射构建的ｐ... 目的：应用血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ， ＶＥＧＦ） 基因治疗心肌缺血。方法：雄性Ｗｉｓｔａｒ 大鼠２０ 只，结扎冠状动脉前降支造成心肌梗死模型。心脏多点注射构建的ｐｃＤ２／ＶＥＧＦ真核表达质粒。应用逆转录聚合酶链反应，ＶＥＧＦ免疫组织化学染色，心肌碱性磷酸酶染色及血管计数等方法检测ＶＥＧＦ 基因在缺血心肌中的表达及生物学作用。结果：转移ＶＥＧＦ基因后在大鼠缺血心肌中有ＶＥＧＦｍＲＮＡ 高表达， ＶＥＧＦ 免疫组化染色可见ＶＥＧＦ蛋白表达水平升高。心肌碱性磷酸酶染色显示，转移ＶＥＧＦ基因能够促进缺血心肌新生血管的形成。结论：ＶＥＧＦ基因能够在大鼠缺血心肌中获得表达，并发挥其促进新血管形成的作用。为ＶＥＧＦ 基因治疗心肌缺血奠定基础。 展开更多

关键词 内皮生长因子 心肌缺血 治疗 基因治疗 VEGF

下载PDF 职称材料

自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞的精氨酸转运和脂质体对转运的影响 被引量：3

12

作者 姚兴海 吕小燕 +5 位作者 张灵芝 牛大地 高莲茹 庞永正 苏静怡 唐朝枢 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期67-72,共6页

本工作在培养的自发性高血压大鼠（SHR）和对照WKY大鼠的主动脉平滑肌细胞（SMC）上，观察细胞L-精氨酸（L－Lrg）转运特征，并观察脂质体作为L－Arg载体对L－Arg细胞转运的影响。结果发现：SHR的SMC转运L－Arg明显低于WKY大鼠。SHR的SM... 本工作在培养的自发性高血压大鼠（SHR）和对照WKY大鼠的主动脉平滑肌细胞（SMC）上，观察细胞L-精氨酸（L－Lrg）转运特征，并观察脂质体作为L－Arg载体对L－Arg细胞转运的影响。结果发现：SHR的SMC转运L－Arg明显低于WKY大鼠。SHR的SMC高和低亲合转运的最大转运速率（Vmax）分别为WKY大鼠的48％（P＜0．01）和49％（P＜0．01），而米氏常数（Km）却无明显变化（P＞0．05）。TNFα诱导SHR的SMCL－Arg转运速率增加的幅度明显低于WKY大鼠（P＜0．01）。用包裹L－Arg的脂质体孵育SMC，细胞L－Arg摄入较游离L－Arg孵育增加数倍到数十倍，其转运率在SHR与WKY大鼠间相近，差异无显著性（P＞0．05），两种大鼠的SMC对脂质体-L-Arg的转运都不受TNFα预孵育的影响。实验结果表明，SHR的SMC存在有L－Arg的细胞转运障碍；用脂质体作为载体可显著提高SMC对L－Arg的转运效率。用脂质体包裹L－Arg治疗高血压可能具有潜在临床应用价值。 展开更多

关键词 高血压 L-精氨酸 平滑肌细胞 脂质体

下载PDF 职称材料

钙化心肌细胞肾上腺髓质素和受体活性修饰蛋白2mRNA含量的变化 被引量：4

13

作者 齐永芬 牛大地 +6 位作者 王述女亘 卜定方 石彦荣 高霖 蒋宏峰 庞永正 唐朝枢 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2002年第5期375-378,共4页

为探讨离体钙化处理的新生大鼠心肌细胞肾上腺髓质素及受体活性修饰蛋白 2mRNA含量的改变及意义。采用β 磷酸甘油制备钙化的心肌细胞 ;放射免疫分析方法测定心肌细胞中肾上腺含量 ;竞争性定量逆转录—多聚酶链反应测定心肌细胞肾上腺... 为探讨离体钙化处理的新生大鼠心肌细胞肾上腺髓质素及受体活性修饰蛋白 2mRNA含量的改变及意义。采用β 磷酸甘油制备钙化的心肌细胞 ;放射免疫分析方法测定心肌细胞中肾上腺含量 ;竞争性定量逆转录—多聚酶链反应测定心肌细胞肾上腺髓质素和受体活性修饰蛋白 2mRNA水平。结果显示 ,钙化心肌细胞钙含量较非钙化心肌细胞高 3倍 (P <0 .0 1) ,肾上腺髓质素含量较非钙化心肌细胞高 136 .9% (P <0 .0 1) ,钙化心肌细胞肾上腺髓质素和受体活性修饰蛋白 2mRNA含量分别增加 2 4 % (P <0 .0 5 )和 2 5 % (P <0 .0 5 )。而且钙化心肌细胞受体活性修饰蛋白 2和肾上腺髓质素基因表达上调的程度相平行。钙化心肌细胞肾上腺髓质素生成增加 ,肾上腺髓质素和受体活性修饰蛋白 2mRNA表达亦明显上调 ,提示肾上腺髓质素 受体活性修饰蛋白 2信号途径在心肌细胞钙化发展中可能具有一定的调节作用。 展开更多

关键词 心肌细胞 钙化 肾上腺髓质素 受体活性修饰蛋白2 MRNA

下载PDF 职称材料

内皮素对血管平滑肌细胞中一氧化氮合成酶基因表达的影响 被引量：3

14

作者 周洪 张晨晖 +4 位作者 李倩虹 牛大地 张新波 温进坤 周爱儒 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1994年第S1期5-8,共4页

应用反转录－聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，测定出一氧化氮合成酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅＳｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）ｍＲＮＡ... 应用反转录－聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，测定出一氧化氮合成酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅＳｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）ｍＲＮＡ不仅在心血管系统细胞中广泛存在，并且发现内皮素可以促进血管平滑肌细胞中ＮＯＳｍＲＮＡ的表达（＋３４．８％），增高血管平滑肌细胞中ＮＯＳ酶活性（＋７４％）。结果提示，由内皮素引起的血管平滑肌细胞中ＮＯＳ基因表达和ＮＯＳ活性的增加，可能是高血压中的一个重要的负反馈因素。 展开更多

关键词 内皮素 一氧化氮合成酶 血管平滑肌细胞 高血压

下载PDF 职称材料

血管内皮生长因子基因治疗小型猪冠状动脉闭塞的实验研究 被引量：9

15

作者 蒋捷 高炜 +6 位作者 王日胜 洪涛 肖锋 王进 牛大地 朱国英 周爱儒 《中国介入心脏病学杂志》 2001年第4期220-223,共4页

目的　探讨应用血管内皮生长因子 (VEGF)基因治疗动物实验性冠状动脉闭塞的疗效。方法　中国实验用小型猪 19只 ,结扎左冠状动脉前降支中远段 ,心肌内多点注射自行构建的pcD2 hVEGF1 2 1 真核表达质粒。应用逆转录聚合酶链反应、VEGF... 目的　探讨应用血管内皮生长因子 (VEGF)基因治疗动物实验性冠状动脉闭塞的疗效。方法　中国实验用小型猪 19只 ,结扎左冠状动脉前降支中远段 ,心肌内多点注射自行构建的pcD2 hVEGF1 2 1 真核表达质粒。应用逆转录聚合酶链反应、VEGF免疫组化染色、Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色等方法检测VEGF基因在心肌中的表达及其生物学作用 ,用常规冠状动脉造影观察VEGF基因治疗对闭塞冠脉侧支循环建立的作用。结果　转移VEGF基因后 ,小型猪心肌内VEGFmRNA高表达 ,VEGF免疫组化染色提示VEGF蛋白表达水平升高 ;Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色显示心肌毛细血管增加 ;冠状动脉造影证明VEGF基因治疗能够促进闭塞冠脉侧支循环的建立。结论　心肌内注射pcD2 hVEGF1 2 1 真核表达质粒能够获得VEGFmRNA和蛋白的有效表达 ,促进心肌毛细血管增生 。 展开更多

关键词 内皮生长因子 心肌缺血/治疗 基因疗法 内皮 血管

下载PDF 职称材料

降钙素基因相关肽抑制大鼠主动脉平滑肌细胞增殖 被引量：3

16

作者 吴建明 牛大地 +4 位作者 程彤 杨青 陈绮云 王宪 唐朝枢 《基础医学与临床》 CSCD 1993年第5期65-67,共3页

本工作用培养的大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC),以细胞计数和~3H-胸腺嘧啶(~3H-TdR)掺入为指标,观察到降钙素基因相关肽(CGRP)呈剂量依赖地抑制VSMC增殖,10^(-8)和10^(-7)mol/L CGRP可使~3H-TdR掺入量较对照组减少26％(P<0.05)和36％(P&... 本工作用培养的大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC),以细胞计数和~3H-胸腺嘧啶(~3H-TdR)掺入为指标,观察到降钙素基因相关肽(CGRP)呈剂量依赖地抑制VSMC增殖,10^(-8)和10^(-7)mol/L CGRP可使~3H-TdR掺入量较对照组减少26％(P<0.05)和36％(P<0.01)并使细胞计数分别较对照组下降17％(P<0.05)和35％(P<0.01)。提示CGRP参与VSMC增殖的调节。 展开更多

关键词 降钙素基因 平滑肌细胞 增殖

下载PDF 职称材料

内皮素A型受体（ET＿A－R）基因在大鼠心血管系统细胞中的表达 被引量：2

17

作者 周洪 张晨晖 +5 位作者 李倩虹 牛大地 张新波 周爱儒 温进坤 汤健 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1994年第S1期29-32,共4页

应用改良的Ｍａｒｔｉｎ（１９９３）定量反转录－聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙ－ｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，测定了大鼠ＥＴＡ型受体（（Ｅｎｄｏｔｈｅｌ... 应用改良的Ｍａｒｔｉｎ（１９９３）定量反转录－聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙ－ｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，测定了大鼠ＥＴＡ型受体（（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－Ａｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＥＴＡ－Ｒ）ｍＲＮＡ在心血管系统细胞中的分布。结果证明，ＥＴＡ－ＲｍＲＮＡ广泛地分布在心血管系统细胞中．其中以平滑肌细胞中含量最高。内皮素及其受体的配基可以促进血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈＭｕｓｃｌｅｃｅｌｌ，ＶＳＭＣ）中ＥＴＡ－ＲｍＲＮＡ的表达。此外，还发现在自发性高血压动物的血管平滑肌细胞中ＥＴＡ－Ｒ基因的高表达可能是高血压血管高反应性的一个重要机制。 展开更多

关键词 内皮素A型受体 基因表达 高血压

下载PDF 职称材料

大鼠钙化血管平滑肌细胞血红素加氧酶-CO-cGMP通路的变化 被引量：1

18

作者 张宝红 王述姮 +2 位作者 牛大地 唐朝枢 杜军保 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2003年第2期150-153,共4页

本文旨在观察钙化细胞血红素加氧酶 (HO) -一氧化碳 (CO) -环磷酸鸟苷 (cGMP)系统的改变 ,以探讨血管钙化发生的细胞分子机理。利用 β 甘油磷酸制备钙化血管平滑肌细胞 (VSMCs) ,测定细胞钙含量、碱性磷酸酶活性及4 5Ca沉积 ;观察HO 1... 本文旨在观察钙化细胞血红素加氧酶 (HO) -一氧化碳 (CO) -环磷酸鸟苷 (cGMP)系统的改变 ,以探讨血管钙化发生的细胞分子机理。利用 β 甘油磷酸制备钙化血管平滑肌细胞 (VSMCs) ,测定细胞钙含量、碱性磷酸酶活性及4 5Ca沉积 ;观察HO 1免疫细胞化学染色 ;测定VSMCsHO 1活性、碳氧血红蛋白 (HbCO)的生成及cGMP含量。发现钙化细胞的钙含量、碱性磷酸酶活性及4 5Ca沉积均比正常组显著升高。钙化细胞HO 1的表达不均匀 ,钙化结节中HO 1表达强于正常细胞。与正常平滑肌细胞相比 ,钙化细胞的HO 1活性低 4 2 7% [36 4± 2 8pmol (mgprotein·h)vs 6 3 5± 5 3pmol (mgprotein·h) ,P <0 0 1];CO含量低 39 2 % (3 38± 0 39μmol mgproteinvs 5 5 6± 0 4 8μmol mgprotein ,P <0 0 5 ) ;cGMP含量比正常细胞低 78 1% (4 3± 0 5vs 19 6± 1 2pmol mgprotein ,P <0 0 1)。提示钙化血管血红素 HO CO 展开更多

关键词 大鼠 钙化 血管平滑肌细胞 血红素加氧酶 一氧化碳 环磷酸鸟苷 高血压 动脉粥样硬化 病理

下载PDF 职称材料

环五肽BQ 123对内皮素-1的拮抗效应 被引量：2

19

作者 汤健 杨青 +7 位作者 张继峰 张肇康 牛大地 迟学栋 赵云涛 石湘云 张钧华 唐朝枢 《北京医科大学学报》 CSCD 1992年第6期431-434,共4页

环五肽BQ 123(-D-Asp-L-Pro-D Val L-Leu-D Trp-)有效地抑制内皮素-1(ET1)引起的下述反应:大鼠血压升高、离体主动脉条收缩、离体灌流心脏挛缩、培养的血管平滑肌细胞Ca^(2+)内流增加和细胞增殖等,其效应呈剂量依性。实验结果提示BQ 12... 环五肽BQ 123(-D-Asp-L-Pro-D Val L-Leu-D Trp-)有效地抑制内皮素-1(ET1)引起的下述反应:大鼠血压升高、离体主动脉条收缩、离体灌流心脏挛缩、培养的血管平滑肌细胞Ca^(2+)内流增加和细胞增殖等,其效应呈剂量依性。实验结果提示BQ 123作为ET1拮抗剂,对于研究ET?的理与病理生理意义和对于防治Ef参与病的其有重要意义。 展开更多

关键词 内皮素 血管 心肌 平滑肌细胞

下载PDF 职称材料

降钙素基因相关肽对心钠素释放的影响 被引量：2

20

作者 徐东 牛大地 汤健 《北京医科大学学报》 CSCD 1989年第5期369-371,共3页

本工作应用大鼠离体心脏和培养的心肌细胞结合心钠素的放射免疫测定,研究了降钙素基因相关肽对心钠素释放的影响。结果发现,无论在离体心脏或培养的心肌细胞,降钙素基因相关肽均可引起心钠素的释放,并具有剂量效应关系;降钙素基因相关... 本工作应用大鼠离体心脏和培养的心肌细胞结合心钠素的放射免疫测定,研究了降钙素基因相关肽对心钠素释放的影响。结果发现,无论在离体心脏或培养的心肌细胞,降钙素基因相关肽均可引起心钠素的释放,并具有剂量效应关系;降钙素基因相关肽对心钠素的释放作用可能不完全依赖于Ca^(2+)的存在。提示心钠素的释放受降钙素基因相关肽的调节。 展开更多

关键词 降钙素 基因相关肽 心钠素 心脏

下载PDF 职称材料