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冷冻保存技术在蜜蜂精液保存中的研究与应用
1
作者 庄明亮 李剑飞 +4 位作者 迟永娟 李志勇 王志 牛庆生 葛蓬 《家畜生态学报》 北大核心 2024年第4期86-91,共6页
蜜蜂精液冷冻保存对蜜蜂种质资源保护和品种改良具有重要意义,有利于蜜蜂育种中的后裔测定和基因组选择,加快育种进程。蜜蜂精子结构特殊,冷冻保存对其活力和受精率有较大影响,目前该技术尚未广泛应用。该文综述了蜜蜂精液冷冻保存的研... 蜜蜂精液冷冻保存对蜜蜂种质资源保护和品种改良具有重要意义,有利于蜜蜂育种中的后裔测定和基因组选择,加快育种进程。蜜蜂精子结构特殊,冷冻保存对其活力和受精率有较大影响,目前该技术尚未广泛应用。该文综述了蜜蜂精液冷冻保存的研究简况、蜜蜂精子的结构、冷冻损伤机理和精液冷冻技术的研究进展,以期为今后进一步优化改进蜜蜂精液冷冻保存技术提供参考。 展开更多
关键词 蜜蜂 精液 冷冻保存 精子结构 精子活力 保种
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飞行医生——传粉蜜蜂的新功能介绍
2
作者 刘玉玲 徐凯 +3 位作者 何金明 牛庆生 郝京玉 杜亚丽(编译) 《中国蜂业》 2024年第8期42-43,共2页
人类从20世纪90年代起就开始全力研发授粉机器人,但截至目前,我们所拥有的最好的传粉者仍是大自然的产物——蜜蜂。蜜蜂精巧灵活,体态娇小,密被的绒毛能恰到好处地黏附花药,还有能在花丛间飞行的独特天赋。值得注意的是,花粉并不是蜜蜂... 人类从20世纪90年代起就开始全力研发授粉机器人,但截至目前,我们所拥有的最好的传粉者仍是大自然的产物——蜜蜂。蜜蜂精巧灵活,体态娇小,密被的绒毛能恰到好处地黏附花药,还有能在花丛间飞行的独特天赋。值得注意的是,花粉并不是蜜蜂在花朵间传播的唯一有益物质,利用蜜蜂为花卉提供针对性的生物防治剂是精准农业的又一大改革。在一种被称为“蜜蜂传粉技术”,或者更通俗地说,“昆虫媒介技术”的方法中,科学家们正在开发一种利用蜜蜂、熊蜂和壁蜂向作物传播生物防治剂的新方法[1]。 展开更多
关键词 精准农业 生物防治剂 蜜蜂传粉 熊蜂 壁蜂 传粉者 昆虫媒介 授粉
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椴树首次扎根新疆,黑蜂迎来优质蜜源——记养蜂人庄虔爱的蜜蜂情缘
3
作者 王志 牛庆生 《蜜蜂杂志》 2024年第11期I0015-I0018,共4页
2023年8月8日,正是新疆维吾尔自治区伊犁哈萨克自治州尼勒克最美的季节。这里被誉为“百里画廊”,是唐布拉草原的核心地带,远处山峦起伏,近处碧草广,随处牛羊成群,喀什河婉蜓而过。
关键词 核心地带 养蜂人 黑蜂 山峦起伏 伊犁哈萨克自治州 椴树 蜜蜂 尼勒克
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蜜蜂线粒体基因组多态性应用研究进展 被引量：1
4
作者 何金明 徐凯 +4 位作者 杜亚丽 蒋海宾 牛庆生 王志 刘玉玲 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期341-353,共13页
线粒体基因组(Mitochondrial genome)能够自我复制且遵循严格的母系遗传,是哺乳动物、昆虫等物种进化生物学、保护遗传学研究的重要分子标记之一。利用线粒体DNA作为遗传标记有助于探究蜜蜂群体遗传多样性、母系起源及不同种群间的系统... 线粒体基因组(Mitochondrial genome)能够自我复制且遵循严格的母系遗传,是哺乳动物、昆虫等物种进化生物学、保护遗传学研究的重要分子标记之一。利用线粒体DNA作为遗传标记有助于探究蜜蜂群体遗传多样性、母系起源及不同种群间的系统发育关系,相关研究主要集中于COI、COII、tRNA^(Leu)-COII、Cytb等单个线粒体基因序列片段,线粒体基因组全序列的应用较少。蜜蜂属现有9个种的线粒体基因组全序列测序工作均已完成,为蜜蜂遗传学研究提供了基础数据。本文综述了线粒体基因组在蜜蜂中的研究进展,阐述蜜蜂线粒体基因组结构特征及其在蜜蜂遗传多样性、起源进化、分类鉴定等研究的应用进展,同时分析蜜蜂线粒体基因组的应用意义并展望其未来发展方向,以期为我国蜜蜂遗传资源保护与利用提供信息参考。 展开更多
关键词 蜜蜂 线粒体基因组 遗传多样性 起源进化 分类
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东方蜜蜂微孢子虫nce-miR-11248及其靶基因SGT1的生物信息学和表达谱研究 被引量：1
5
作者 张凯遥 赵浩东 +7 位作者 张艺琼 赵萧 高旭泽 邹培缘 张奎昊 陈大福 郭睿 牛庆生 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2024年第2期32-39,共8页
【目的】对前期鉴定所获得的东方蜜蜂微孢子虫的nce-miR-11248进行表达和序列验证,预测、分析其靶基因,并检测nce-miR-11248及其靶基因在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中的表达谱,为进一步开展nce-miR-11248调控东方蜜蜂微孢... 【目的】对前期鉴定所获得的东方蜜蜂微孢子虫的nce-miR-11248进行表达和序列验证,预测、分析其靶基因,并检测nce-miR-11248及其靶基因在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中的表达谱,为进一步开展nce-miR-11248调控东方蜜蜂微孢子虫侵染的功能及作用机制研究提供参考。【方法】利用Stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证nce-miR-11248的真实性;利用相关生物信息学软件预测nce-miR-11248的靶基因,并分析其编码蛋白的分子特性;使用MEME和TBtools软件预测SGT1蛋白的保守基序和结构域,通过Mega 11.0软件进行氨基酸序列多重比对,采用邻接法构建系统进化树。采集东方蜜蜂微孢子虫孢子侵染1,2,4,6和8 d的意蜂工蜂中肠组织,采用RT-qPCR检测nce-miR-11248及其靶基因SGT1的表达谱。【结果】nce-miR-11248在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实存在,其序列长度为25 bp。nce-miR-11248的靶基因为SGT1。SGT1蛋白分子式为C_(765)H_(1213)N_(195)O_(241)S_(4),分子质量约为17.10 ku,脂溶系数为82.67,等电点为5.50,亲水系数为-0.709,不含典型的信号肽和跨膜结构域,可同时定位于细胞核、线粒体和过氧化物酶体。东方蜜蜂微孢子虫、家蚕微孢子虫、泛胞虫、肠脑炎微孢子虫和蚱蜢脑炎微孢子虫的SGT1中均含有4个保守基序(Motif 1、Motif 2、Motif 3和Motif 4)和1个结构域(SGT1超家族结构域)。东方蜜蜂微孢子虫、家蚕微孢子虫、肠脑炎微孢子虫和蚱蜢脑炎微孢子虫的SGT1聚为一支,且东方蜜蜂微孢子虫与家蚕微孢子虫的SGT1进化距离最近。相较于侵染东方蜜蜂微孢子虫后1 d,侵染后2,4,6和8 d nce-miR-11248的表达量均显著下调(P<0.05);侵染后2,4,6和8 d SGT1的表达量均下调,其中侵染后4,6和8 d的表达量与2 d的差异达显著水平(P<0.05)。【结论】nce-miR-11248在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实存在;东方蜜蜂微孢子虫与家蚕微孢子虫的SGT1亲缘关系最近;随着侵染时间的延长,nce-miR-11248及其靶基因SGT1在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中的表达量均呈持续下降;nce-miR-11248和SGT1是潜在的参与调控微孢子虫侵染过程的因子。 展开更多
关键词 东方蜜蜂微孢子虫 意大利蜜蜂 nce-miR-11248 SGT1基因 表达谱
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越冬初期和中期西方蜜蜂四个亚种的miRNA及其靶mRNA的比较分析
6
作者 蒋海宾 杜亚丽 +8 位作者 冀全枝 何金明 孙智禹 吴鹰 王志 兰凤明 牛庆生 刘玉玲 徐凯 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期622-633,共12页
【目的】明确西方蜜蜂Apis mellifera微小RNA(microRNA,miRNA)在越冬期间的表达量变化,揭示miRNA及其靶mRNA与抗寒性的潜在关系,在miRNA组学层面进一步揭示西方蜜蜂抗寒性的分子机理。【方法】利用sRNA-seq技术鉴定西方蜜蜂4个亚种意大... 【目的】明确西方蜜蜂Apis mellifera微小RNA(microRNA,miRNA)在越冬期间的表达量变化,揭示miRNA及其靶mRNA与抗寒性的潜在关系,在miRNA组学层面进一步揭示西方蜜蜂抗寒性的分子机理。【方法】利用sRNA-seq技术鉴定西方蜜蜂4个亚种意大利蜜蜂A.m.ligustica、欧洲黑蜂A.m.mellifera、高加索蜂A.m.caucasica和卡尼鄂拉蜂A.m.carnica在越冬期初期和越冬中期的miRNA;根据P≤0.05且|log 2fold change|≥1标准筛选4个亚种在越冬不同时期的差异表达miRNA(differentially expressed miRNAs,DEmiRNAs)。利用相关生物信息学软件对筛选出的miRNA的靶mRNA进行预测,并对靶mRNA进行GO及KEGG数据库注释。根据靶向结合关系构建DEmiRNA和靶mRNA的调控网络,并利用Cytoscape进行可视化。随机选取ame-miR-263a-5p,ame-miR-184-3p,ame-miR-263b-5p,ame-miR-190-5p,ame-miR-6052-5p,ame-miR-9a-5p,ame-miR-100-5p和ame-miR-306-5p等8个DEmiRNA进行RT-qPCR验证。【结果】鉴定获得越冬期西方蜜蜂4个亚种210个miRNA,包括178个保守的miRNA和32个新的miRNA,长度介于18~30 nt,分布数量最多的长度为22和23 nt,首位碱基为U的miRNA数量最多。西方蜜蜂4个亚种在越冬初期和越冬中期表达量最高的DEmiRNAs为ame-miR-1-3p,ame-miR-276-3p和ame-miR-184-3p。意大利蜜蜂越冬初期vs越冬中期共筛选出22个DEmiRNA,可靶向调控394条mRNA,这些mRNA分别注释到161个GO功能条目和16条KEGG通路上;欧洲黑蜂越冬初期vs越冬中期共筛选出28个DEmiRNA,可靶向调控415条mRNA,这些mRNA分别注释到147个GO功能条目和15条KEGG通路上;高加索蜂越冬初期vs越冬中期共筛选67个DEmiRNA,可靶向调控1021条mRNA,这些mRNA分别注释到171个GO功能条目和21条KEGG通路上;卡尼鄂拉蜂越冬初期vs越冬中期共筛选18个DEmiRNA,可靶向调控330条mRNA,这些mRNA分别注释到147个GO功能条目和13条KEGG通路上。西方蜜蜂4个亚种DEmiRNA与靶mRNA之间形成较为复杂的调控网络。RT-qPCR结果显示8个DEmiRNA的表达趋势与测序数据一致,证实了本研究中测序数据的可靠性。【结论】本研究明确西方蜜蜂4个亚种越冬不同时期的miRNA表达量变化,筛选出多个潜在调控西方蜜蜂越冬期抗寒性的分子候选靶标miRNA,其中ame-miR-14-3p和ame-miR-3786-5p在欧洲黑蜂、高加索蜂和卡尼鄂拉蜂中负调控多个mRNA的表达,在意大利蜜蜂中并没有参与;miRNA通过调控靶基因的表达参与甘油磷酸脂代谢、MAPK信号通路和mTOR等关键信号通路参与西方蜜蜂的抗寒性。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 微小RNA 靶基因 越冬 抗寒 调控网络
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蜜蜂越冬期卵黄原蛋白和保幼激素的表达特性研究
7
作者 冀全枝 徐凯 +6 位作者 杜亚丽 何金明 孙智禹 蒋海宾 牛庆生 刘玉玲 苏松坤 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期941-947,共7页
为了探究蜜蜂越冬期体内卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vg)和保幼激素(Juvenile hormone,JH)的表达特性。本试验分别采集夏繁期(7月)和不同越冬时期(11月、12月、1月、2月)的珲春黑蜂工蜂,通过酶联免疫吸附试验方法检测Vg、JHⅢ及超氧化物歧... 为了探究蜜蜂越冬期体内卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vg)和保幼激素(Juvenile hormone,JH)的表达特性。本试验分别采集夏繁期(7月)和不同越冬时期(11月、12月、1月、2月)的珲春黑蜂工蜂,通过酶联免疫吸附试验方法检测Vg、JHⅢ及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的浓度变化,采用qRT-PCR方法检测Vg、JH代谢相关基因的表达量。结果表明:珲春黑蜂越冬期Vg浓度高于夏繁期,在不同越冬期Vg浓度总体呈现先上升后下降的趋势;Vg基因的变化趋势与Vg浓度相一致,而VgR基因表达量与SOD浓度变化趋势相一致,在越冬期水平高于夏繁期,且在整个越冬期呈现下降的趋势。珲春黑蜂越冬期JHⅢ浓度低于夏繁期,且随着越冬持续进行总体呈现持续上升的变化趋势;MFE基因的变化趋势与JHⅢ浓度相近;JHAMT基因表达量越冬期显著高于夏繁期,在整个越冬期呈现先上升后下降的趋势。本研究结果表明,蜜蜂越冬期体内存在Vg和JHⅢ间负相关的调节模型,其通过Vg、JHⅢ代谢相关基因的表达来提高越冬蜂抗氧化能力和抗寒性,为西方蜜蜂抗寒分子机制的深入研究提供了新的研究思路。 展开更多
关键词 珲春黑蜂 卵黄原蛋白 保幼激素 越冬期
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危害蜜蜂的农药来源
8
作者 高启臣 刘玉玲 +3 位作者 徐凯 杜亚丽 王志 牛庆生(编译) 《中国蜂业》 2024年第10期54-55,共2页
在美国北部纽约州授粉期,养蜂人将大量蜜蜂运到农场,授粉每年为该州的果农和菜农带来4亿美元的收入。这意味着为了保证最大利益,必须确保蜜蜂在进行传粉时不会接触农药。蜜蜂在授粉过程中几乎总能接触到杀虫剂。最近一项对密歇根蓝莓花... 在美国北部纽约州授粉期,养蜂人将大量蜜蜂运到农场,授粉每年为该州的果农和菜农带来4亿美元的收入。这意味着为了保证最大利益,必须确保蜜蜂在进行传粉时不会接触农药。蜜蜂在授粉过程中几乎总能接触到杀虫剂。最近一项对密歇根蓝莓花期蜜蜂采集的花粉分析发现,蜂群平均同时暴露于35种杀虫剂中,而熊蜂平均接触到19种杀虫剂。 展开更多
关键词 花粉分析 授粉期 蜜蜂 杀虫剂 熊蜂 养蜂人 纽约州 农药
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熊蜂的性别比例
9
作者 刘玉玲 高启臣 +3 位作者 徐凯 何金明 杜亚丽 牛庆生(编译) 《中国蜂业》 2024年第6期51-52,共2页
熊蜂的种群性别比例变化很大,被认为表现出强烈的“雄性偏差male bias”。在群居性膜翅目昆虫中,雄性的偏差程度是不可预料的。亲缘选择理论预测,由一雌一雄制蜂王建立的蜂群中,工蜂倾向于雌性:雄性=3∶1的比例,因为工蜂与子代蜂王的亲... 熊蜂的种群性别比例变化很大,被认为表现出强烈的“雄性偏差male bias”。在群居性膜翅目昆虫中,雄性的偏差程度是不可预料的。亲缘选择理论预测,由一雌一雄制蜂王建立的蜂群中,工蜂倾向于雌性:雄性=3∶1的比例,因为工蜂与子代蜂王的亲缘系数是与子代雄蜂个体的3倍。但蜂王在两性个体上倾向于等比例分配,因为子代蜂王、子代雄蜂与蜂王的亲缘关系相同。所以,蜂王和工蜂在雄性偏差的性别比例中都不获益。 展开更多
关键词 亲缘系数 熊蜂 蜂王 亲缘关系 膜翅目昆虫 性别比例 亲缘选择理论 雄蜂
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熊蜂的社会性分工
10
作者 刘玉玲(编译) 徐凯(编译) +4 位作者 何金明(编译) 孙智禹(编译) 杜亚丽(编译) 蒋海宾(编译) 牛庆生(编译) 《中国蜂业》 2024年第1期44-46,共3页
熊蜂具有浑身鲜亮的绒毛,体型粗壮、行动缓慢、性情温顺,在花丛中悠闲的飞行,人们很容易被它“可爱”和“美丽”的外表所吸引。但在巢内,熊蜂群组织松散,蜂蛹、蜂巢和幼虫随意排列。而且内勤蜂经常在巢内和靠近蜂巢的地方排泄,所以蜂群... 熊蜂具有浑身鲜亮的绒毛,体型粗壮、行动缓慢、性情温顺,在花丛中悠闲的飞行,人们很容易被它“可爱”和“美丽”的外表所吸引。但在巢内,熊蜂群组织松散,蜂蛹、蜂巢和幼虫随意排列。而且内勤蜂经常在巢内和靠近蜂巢的地方排泄,所以蜂群容易被寄生虫和共栖动物所侵害。由于寻找熊蜂野生巢穴比较困难,所以熊蜂社会性行为方面的研究进展缓慢。 展开更多
关键词 熊蜂 蜂巢 蜂蛹 社会性行为 寄生虫 花丛中 内勤蜂 蜂群
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布谷熊蜂
11
作者 刘玉玲 徐凯 +3 位作者 何金明 杜亚丽 蒋海滨 牛庆生(编译) 《中国蜂业》 2024年第9期54-55,共2页
布谷熊蜂属于拟熊蜂亚属,曾一直被归为“真” 熊蜂外一个单独的亚属。由于拟熊蜂亚属个体没有花 粉筐,所以它们不得不依赖社会性熊蜂。布谷熊蜂通 过侵占社会性熊蜂的巢穴来繁育子一代。近期研究却 认为,布谷熊蜂和“真”熊蜂在起源上... 布谷熊蜂属于拟熊蜂亚属,曾一直被归为“真” 熊蜂外一个单独的亚属。由于拟熊蜂亚属个体没有花 粉筐,所以它们不得不依赖社会性熊蜂。布谷熊蜂通 过侵占社会性熊蜂的巢穴来繁育子一代。近期研究却 认为,布谷熊蜂和“真”熊蜂在起源上拥有共同的祖先。 展开更多
关键词 熊蜂 子一代 亚属 繁育 社会性
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浅谈我国蜜蜂育种现状及发展建议 被引量：3
12
作者 王志 徐凯 +2 位作者 刘玉玲 王进州 牛庆生 《中国蜂业》 2023年第8期32-35,共4页
蜜蜂育种是蜜蜂产业发展的基础和保障。根据我国蜜蜂育种现状,剖析育种工作存在的问题,提出我国蜜蜂育种实现高质量发展,必须加强顶层设计,合理产业布局,强化育种技术,健全育种体系,重视基础研究,侧重融合发展,持续改良品种,加强市场监... 蜜蜂育种是蜜蜂产业发展的基础和保障。根据我国蜜蜂育种现状,剖析育种工作存在的问题,提出我国蜜蜂育种实现高质量发展,必须加强顶层设计,合理产业布局,强化育种技术,健全育种体系,重视基础研究,侧重融合发展,持续改良品种,加强市场监督,培养种业人才,实现种源自主可控,服务现代蜜蜂产业发展。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 蜜蜂育种 种源自主可控 产业 现状 发展建议
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东北虎豹国家公园蜂业发展调查及优化策略——以汪清县为例 被引量：1
13
作者 王志 王琦 +3 位作者 庄明亮 柏建民 杜亚丽 牛庆生 《特产研究》 2023年第6期178-183,共6页
东北虎豹国家公园建设以来,野生动物逐步回归,生物多样性保护取得重要成果。养蜂业作为山区农民脱贫致富的重要产业,在公园建设中具有重要的生态意义。对汪清县养蜂产业调查发现,野生动物的侵袭对蜂业产生了较大的影响。侵袭蜜蜂的野生... 东北虎豹国家公园建设以来,野生动物逐步回归,生物多样性保护取得重要成果。养蜂业作为山区农民脱贫致富的重要产业,在公园建设中具有重要的生态意义。对汪清县养蜂产业调查发现,野生动物的侵袭对蜂业产生了较大的影响。侵袭蜜蜂的野生动物有5纲14目22科24属26种,且种类、数量及危害频率有所增加,养蜂户遭到不同程度的损失。大型野生动物危害较重,蜂农损失金额0.1万元~6.7万元,其中熊和野猪的危害最为严重,遭受熊侵袭的蜂场数量占调查总数的31.9%。公园建设促进植物繁茂,助推蜂业发展,但野生动物对养蜂者心理、放蜂场地选择、养蜂经济效益等有一定影响。因此,建议在建设公园的同时,采取有效管理措施,助推养蜂产业健康发展,减少人兽冲突,对保护公园物种多样性、构建野生动物完整食物链、促进人、蜂与自然和谐共生大有裨益。 展开更多
关键词 蜜蜂 东北虎豹国家公园 野生动物 调查 有效对策
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蜜蜂育种工作中控制交尾的主要方式 被引量：1
14
作者 刘玉玲 杜亚丽 +1 位作者 牛庆生 徐凯 《中国蜂业》 2023年第5期32-33,31,共3页
一、控制交尾的主要方式1.地理隔离地理隔离是指通过一些地理或者空间的阻隔将普通群的雄蜂隔离在育种群蜂王交尾区域之外的方法。例如,根据蜜蜂的最远飞行距离,可以划定一个半径6~10km内无普通蜂群的区域来进行育种群雄蜂与蜂王的交尾... 一、控制交尾的主要方式1.地理隔离地理隔离是指通过一些地理或者空间的阻隔将普通群的雄蜂隔离在育种群蜂王交尾区域之外的方法。例如,根据蜜蜂的最远飞行距离,可以划定一个半径6~10km内无普通蜂群的区域来进行育种群雄蜂与蜂王的交尾。然而现实中地理隔离的地形(如深谷)的半径太小,根本无法实现完全阻隔育种群蜂王与非育种群雄蜂的交尾。因此,本文建议在地理隔离时尽量选择高山山脊、广阔水域隔离的岛屿或半岛、无蜜蜂分布或者不适合养蜂的地区(沙漠或者高度工业化地区)来实现地理隔离。也可以通过政府制定相关的法律法规来建立一些普通蜂群无法进入的地理隔离的交尾区域,但想找到适合建立蜜蜂交尾场区域的难度较大。在评定该地区是否适合可以建立蜜蜂交尾场时,建议通过观察是否有普通蜂群雄蜂存在或者育种群雄蜂和蜂王是否可以交尾这些常规性方法进行综合评定。 展开更多
关键词 地理隔离 高度工业化 飞行距离 雄蜂 蜂王 综合评定 交尾 蜜蜂
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长白山中华蜜蜂遗传多样性分析
15
作者 庄明亮 李剑飞 +5 位作者 葛蓬 王琦 王志 戚竞文 牛庆生 李志勇 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期4992-4999,共8页
【目的】探究长白山中华蜜蜂种群遗传多样性,为其资源保护和利用提供理论依据。【方法】采集国家级中蜂(长白山中华蜜蜂)保护区内7个采样点的195群长白山中华蜜蜂,利用11个微卫星标记对其进行基因分型,并对各群体的多态信息含量(PIC)、... 【目的】探究长白山中华蜜蜂种群遗传多样性,为其资源保护和利用提供理论依据。【方法】采集国家级中蜂(长白山中华蜜蜂)保护区内7个采样点的195群长白山中华蜜蜂,利用11个微卫星标记对其进行基因分型,并对各群体的多态信息含量(PIC)、期望杂合度(He)、观测杂合度(Ho)、近交系数(Fis)、分化系数(Fst)和群体间基因流(Nm)等遗传参数进行评估,研究其遗传多样性,并构建系统进化树。【结果】195个长白山中华蜜蜂蜂群共检测到103个等位基因;除AC306、AG005C、A028、AP049和AP313位点外,其余6个微卫星位点均表现出高度多态;长白山中华蜜蜂7个群体的平均多态信息含量为0.5080,平均期望杂合度为0.5467,平均观测杂合度为0.4662;长白山中华蜜蜂的平均近交系数为―0.0107;7个群体的分化系数为0.0217(长白与抚松)~0.3389(安图与辉南);群体间基因流为0.7126~0.9785。系统进化树结果显示,长白山中华蜜蜂具有3个不同的进化分支。【结论】长白山中华蜜蜂群体整体遗传多态性较高,不同采样点遗传多样性存在差异。研究结果对下一步长白山中华蜜蜂的保护与利用具有重要指导意义。 展开更多
关键词 长白山中华蜜蜂 微卫星 遗传分化 遗传多样性
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意大利蜜蜂丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因和全长转录本鉴定及验证 被引量：5
16
作者 范小雪 张凯遥 +7 位作者 朱乐冉 王紫馨 张奎昊 牛庆生 徐细建 骆群 陈大福 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期478-485,共8页
【目的】利用前期获得的高质量纳米孔长读段测序数据对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因和全长转录本进行鉴定和分析,为深入开展功能研究提供参考信息和基础。【方法】基于前期获得的高质量意大利蜜蜂纳... 【目的】利用前期获得的高质量纳米孔长读段测序数据对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因和全长转录本进行鉴定和分析,为深入开展功能研究提供参考信息和基础。【方法】基于前期获得的高质量意大利蜜蜂纳米孔长读段测序数据,通过Blast工具将意大利蜜蜂全长转录本比对Nr数据库筛选出丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因和全长转录本;利用gffcompare软件将筛选出的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶全长转录本与西方蜜蜂A.mellifera参考基因组(Amel_HAv3.1)上注释的转录本进行比较,以鉴定未注释的新基因和新转录本;使用Astalavista软件鉴定丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因的可变剪接(alternative splicing,AS)事件类型,采用IGV浏览器对剪接体的结构进行可视化,通过RT-PCR验证随机选取的6次AS事件的真实性。【结果】共鉴定到意大利蜜蜂丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶71个基因和335条全长转录本,发掘出未注释的1个新基因和97条新转录本;共对14个已注释基因进行了结构优化,分别延伸了6个基因的5′端和8个基因的3′端。共鉴定到意大利蜜蜂丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶7个基因的57次AS事件,包括40次外显子跳跃(exon skipping,ES)事件、15次可变5′端剪接位点(alternative 5′splicing site,A5SS)事件和2次可变3′端剪接位点(alternative 3′splicing site,A3SS)事件。对随机选取的6次AS事件的RT-PCR结果表明,所有目的片段均符合预期大小,证实了AS事件的真实性。【结论】本研究系统鉴定了意大利蜜蜂丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因和全长转录本,优化了西方蜜蜂参考基因组注释的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的基因结构。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 全长转录本 第三代测序技术 纳米孔测序
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东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中nce-miR-10660及其靶基因表达谱 被引量：4
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作者 张凯遥 张文德 +9 位作者 王紫馨 胡颖 钱加珺 王思懿 赵浩东 顾小雨 牛庆生 付中民 陈大福 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期181-189,共9页
【目的】本研究旨在为探究nce-miR-10660调控东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae侵染的作用机制提供理论和实验依据。【方法】采用Stem-loop RT-PCR对前期鉴定到的东方蜜蜂微孢子虫nce-miR-10660进行表达验证,再通过Sanger测序验证nce-miR-... 【目的】本研究旨在为探究nce-miR-10660调控东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae侵染的作用机制提供理论和实验依据。【方法】采用Stem-loop RT-PCR对前期鉴定到的东方蜜蜂微孢子虫nce-miR-10660进行表达验证,再通过Sanger测序验证nce-miR-10660的序列。利用相关生物信息学软件预测和分析nce-miR-10660的靶基因。通过RT-qPCR检测nce-miR-10660及其靶基因在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂过程中中肠中的表达谱。【结果】Stem-loop RT-PCR和Sanger测序结果分别证实了nce-miR-10660在东方蜜蜂微孢子虫孢子中的表达和真实存在。靶向预测结果显示nce-miR-10660共靶向RRDRP和RCDP 42等9个基因;分别有2和6个靶基因可被分别注释到KEGG数据库中的4条通路和GO数据库中的23个条目。RT-qPCR结果显示,相较于东方蜜蜂微孢子虫侵染后1 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中nce-miR-10660的表达量,东方蜜蜂微孢子虫侵染后2 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中nce-miR-10660的表达量显著上调,在东方蜜蜂微孢子虫侵染后4,6和8 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中nce-miR-10660的表达量均显著下调;东方蜜蜂微孢子虫侵染后4,6和8 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中靶基因RRDRP的表达量均显著下调表达;东方蜜蜂微孢子虫侵染后2,4,6和8 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中靶基因RCDP 42的表达量显著下调。【结论】nce-miR-10660在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实存在和表达;nce-miR-10660及其靶向的RRDRP和RCDP 42在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中差异表达;nce-miR-10660通过正调控RRDRP和RCDP 42表达潜在参与调节东方蜜蜂微孢子虫侵染。 展开更多
关键词 东方蜜蜂微孢子虫 意大利蜜蜂 nce-miR-10660 靶基因 表达谱
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ame-miR-14在意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道发育过程的调控作用 被引量：1
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作者 王紫馨 许雅静 +8 位作者 张文德 张凯遥 吴鹰 刘佳美 朱乐冉 牛庆生 赵红霞 陈大福 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期1-10,共10页
【目的】本研究旨在揭示ame-miR-14在意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂幼虫肠道发育过程的调控作用。【方法】通过Stem-loop RT-PCR和Sanger测序分别验证ame-miR-14在意大利蜜蜂工蜂6日龄幼虫肠道中的表达和序列真实性。饲喂ame-... 【目的】本研究旨在揭示ame-miR-14在意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂幼虫肠道发育过程的调控作用。【方法】通过Stem-loop RT-PCR和Sanger测序分别验证ame-miR-14在意大利蜜蜂工蜂6日龄幼虫肠道中的表达和序列真实性。饲喂ame-miR-14的模拟物(mimic-ame-miR-14)和抑制物(inhibitor-ame-miR-14)及其相应的阴性对照mimic-NC和inhibitor-NC对ame-miR-14分别进行过表达和敲降,利用RT-qPCR检测意大利蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道中ame-miR-14的表达量。利用生物信息学软件预测ame-miR-14的靶基因并进行相关分析。利用RT-qPCR检测ame-miR-14的过表达和敲降后其靶基因FoxO和Hedgehog在4-6日龄幼虫肠道中的相对表达量。【结果】ame-miR-14在意大利蜜蜂工蜂6日龄幼虫肠道中真实存在和表达。相较于饲喂mimic-NC,饲喂mimic-ame-miR-14后ame-miR-14表达量在意大利蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道中均为显著上调;相较于饲喂inhibitor-NC,饲喂inhibitor-ame-miR-14后ame-miR-14表达量在意大利蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道中皆为显著下调。ame-miR-14共靶向309个基因,可注释到45条KEGG通路和36个GO条目;进一步分析发现ame-miR-14可靶向14个生长发育相关基因,并与FoxO和Hedgehog之间存在潜在的靶向关系。过表达ame-miR-14后,相较于mimic-NC组,mimic-ame-miR-14组的4日龄幼虫肠道内FoxO表达量下调,5和6日龄幼虫肠道内FoxO表达量均为显著下调;敲降ame-miR-14后,相较于inhibitor-NC组,inhibitor-ame-miR-14组4日龄幼虫肠道内FoxO表达量下调,5日龄幼虫肠道内FoxO表达量显著上调,6日龄幼虫肠道内FoxO表达量上调。与mimic-NC组相比,过表达ame-miR-14后mimic-ame-miR-14组的Hedgehog表达量在4-6日龄幼虫肠道内皆显著下调;与inhibitor-NC组相比,敲降ame-miR-14后inhibitor-ame-miR-14组的Hedgehog表达量在4-6日龄幼虫肠道内均为上调。【结论】ame-miR-14在意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道内真实存在和表达;通过饲喂模拟物和抑制物能够分别实现意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道内ame-miR-14的有效过表达和敲降;ame-miR-14通过负调控FoxO和Hedgehog的表达潜在参与调节幼虫肠道发育。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 幼虫 肠道 ame-miR-14 靶基因 调控 发育
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熊蜂成群与未成群蜂王体内氨基酸和脂肪酸含量的比较研究
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作者 何金明 孙智禹 +2 位作者 牛庆生 刘玉玲 徐凯 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2023年第2期520-527,共8页
为探究熊蜂Bombus spp.蜂王体内氨基酸和脂肪酸对其不同繁殖状态的影响,本研究分别利用高效液相色谱方法和气质联用方法测定成群蜂王和未成群蜂王体内氨基酸和脂肪酸的含量并进行比较分析。研究结果表明:熊蜂蜂王体内分别包含16种氨基酸... 为探究熊蜂Bombus spp.蜂王体内氨基酸和脂肪酸对其不同繁殖状态的影响,本研究分别利用高效液相色谱方法和气质联用方法测定成群蜂王和未成群蜂王体内氨基酸和脂肪酸的含量并进行比较分析。研究结果表明:熊蜂蜂王体内分别包含16种氨基酸和17种脂肪酸。熊蜂蜂王体内含量最多6种的水解氨基酸为谷氨酸、丙氨酸、亮氨酸、丝氨酸、天冬氨酸和苏氨酸,含量最多的3种脂肪酸为油酸、亚油酸和α-亚油酸。成群与未成群阶段熊蜂蜂王体内13种氨基酸含量存在显著差异(P<0.05),且除丙氨酸外,成群蜂王体内其余12种氨基酸含量均显著低于未成群蜂王。成群与未成群阶段熊蜂蜂王体内有6种脂肪酸含量存在显著差异(P<0.05),其中未成群蜂王体内辛酸、癸酸、月桂酸的含量较高,而成群蜂王体内亚油酸、顺-11-二十烯酸、二十三酸的含量较高。本研究结果表明,熊蜂成群和未成群蜂王体内氨基酸和脂肪酸含量存在显著差异(P<0.05),蛋白质和脂类代谢异常可能是导致熊蜂蜂王成群率低的一个主要原因。 展开更多
关键词 熊蜂 成群 氨基酸 脂肪酸 繁殖
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蜜蜂为设施西瓜授粉的优势
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作者 孙智禹 何金明 +5 位作者 丁洪伟 常志光 杨春红 徐凯 闫德斌 牛庆生 《中国蜂业》 2023年第3期38-39,共2页
一、引言蜜蜂是全球农作物的主要传粉昆虫,在大多数陆地生态系统中发挥着重要的功能作用。据统计目前全球共有16万种显花作物需要依靠昆虫完成授粉,其中依赖蜜蜂授粉的植物占85%。蜜蜂在为作物授粉时,可有效减少人工授粉化学激素和生长... 一、引言蜜蜂是全球农作物的主要传粉昆虫,在大多数陆地生态系统中发挥着重要的功能作用。据统计目前全球共有16万种显花作物需要依靠昆虫完成授粉,其中依赖蜜蜂授粉的植物占85%。蜜蜂在为作物授粉时,可有效减少人工授粉化学激素和生长调节剂的施用,相比于人工授粉,还可提升作物的产量和质量,许多商业种植的果蔬从蜜蜂授粉中获益。西瓜原产于非洲,是世界上最常见的葫芦科植物,在我国栽培历史悠久。本文试着将蜜蜂为设施西瓜授粉的状况进行简要概述,以期对蜜蜂为设施西瓜授粉这一绿色技术的发展推广蓄势赋能。 展开更多
关键词 蜜蜂授粉 人工授粉 葫芦科植物 设施西瓜 生长调节剂 传粉昆虫 陆地生态系统 作物授粉
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