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基于流式量子点微球技术的甲乙型流感病毒抗原检测方法的建立和初步应用分析
1
作者 夏成静 李宝花 +3 位作者 郭燕妳 周小合 张润玲 牛英波 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第1期126-130,共5页
目的建立基于流式量子点微球技术的甲型流感病毒(FluA)和乙型流感病毒(FluB)抗原联检方法,为常见呼吸道病毒抗原多重检测打下基础。方法分别使用自制的不同量子点编码微球和小鼠抗FluA/FluB核蛋白(NP)单克隆抗体进行偶联,在流式细胞仪... 目的建立基于流式量子点微球技术的甲型流感病毒(FluA)和乙型流感病毒(FluB)抗原联检方法,为常见呼吸道病毒抗原多重检测打下基础。方法分别使用自制的不同量子点编码微球和小鼠抗FluA/FluB核蛋白(NP)单克隆抗体进行偶联,在流式细胞仪上对已知浓度的甲乙型流感病毒抗原分别和同时进行检测,对检测条件进行优化,建立甲乙型流感病毒抗原联检方法,利用此方法对临床样本进行检测,与实时荧光定量PCR法(quantitative real-time PCR,qPCR)进行比对,验证此方法的临床性能。结果建立了甲乙型流感病毒抗原联检方法,该方法的甲乙型流感病毒抗原的检出限分别为26.1 pg/ml和10.7 pg/ml,测量范围均为15.3~250000 pg/ml。对临床样本检测,与qPCR比对一致性良好,阳性符合率为57.4%,阴性符合率为100%,总符合率71.6%,并优于临床常用胶体金试剂(阳性符合率为56.49%,阴性符合率为99.75%)。结论此流式量子点微球多重检测方法可以用于甲乙型流感病毒抗原的联检,其灵敏度较高、特异度好、检测范围广,可以为呼吸道常见病毒多重检测打下良好基础,在临床上具有应用前景。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 乙型流感病毒 量子点编码微球 液相蛋白芯片
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量子点标记技术在脂蛋白相关磷脂酶A2中的应用
2
作者 蔡甜 陈振华 +1 位作者 牛英波 唐波 《中国医药科学》 2019年第14期201-203,共3页
目的对脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)量子点荧光检测试剂进行性能评价,判断其性能是否满足临床需求,并评价该试剂是否能够准确检测动脉粥样硬化患者的斑块稳定性。方法评估该检测试剂的日间和日内精密度、定量限和线性范围。结果该试剂盒日... 目的对脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)量子点荧光检测试剂进行性能评价,判断其性能是否满足临床需求,并评价该试剂是否能够准确检测动脉粥样硬化患者的斑块稳定性。方法评估该检测试剂的日间和日内精密度、定量限和线性范围。结果该试剂盒日间和日内精密度均<10%,满足快速检测要求;定量限为35.1ng/mL,线性范围为35.1~784.3ng/mL。通过检测健康人群和存在不稳定斑块的动脉粥样硬化患者血清Lp-PLA2浓度,证明该方法能够对患者的动脉粥样斑块稳定性进行准确判断。结论Lp-PLA2量子点荧光检测试剂具有良好的性能,且能够准确评估患者动脉粥样斑块稳定性,对于具有动脉粥样硬化危险因素患者的风险评估具有重要价值。 展开更多
关键词 量子点 LP-PLA2 动脉粥样硬化 荧光检测
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SAA、CRP和PCT联合检测对小儿急性期感染的诊断价值 被引量：4
3
作者 蔡甜 陈振华 +1 位作者 牛英波 唐波 《深圳中西医结合杂志》 2019年第4期85-86,共2页
目的:研究血清淀粉样蛋白(SAA)、血清降钙素原(PCT)和C反应蛋白(CRP)联合检测对于诊断小儿急性期感染的应用价值。方法:对2017年6月至2018年5月于佛山市南海区人民医院就诊的患儿98例进行血清学检测,将符合标准的急性期感染患儿80例作... 目的:研究血清淀粉样蛋白(SAA)、血清降钙素原(PCT)和C反应蛋白(CRP)联合检测对于诊断小儿急性期感染的应用价值。方法:对2017年6月至2018年5月于佛山市南海区人民医院就诊的患儿98例进行血清学检测,将符合标准的急性期感染患儿80例作为观察组,根据感染因素分为细菌感染组42例、病毒感染组38例,对照组为同期的40例健康体检儿童。将各组受检对象的检测结果进行比较。结果:细菌感染组患儿的SAA、CRP、PCT、SAA/CRP均高于对照组,差异具有统计学意义(P <0.001),且与病毒感染组相比,差异具有统计学意义(P <0.001),病毒感染组各项数据均高于对照组,差异具有统计学意义(P <0.001);细菌感染组单一检测、联合检测的阳性率均比对照组、病毒感染组高,差异均具有统计学意义(P <0.05),病毒感染组的阳性率虽然稍稍高于对照组,但两组数据比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论:SAA、CRP和PCT联合检测可较好地鉴别诊断小儿急性期感染的影响因素,临床阳性率高,可为临床合理用药,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 小儿急性期感染 血清淀粉样蛋白 血清降钙素原 C反应蛋白
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量子点标记技术在降钙素原检测中的应用 被引量：1
4
作者 蔡甜 陈振华 +1 位作者 牛英波 唐波 《齐齐哈尔医学院学报》 2019年第8期1006-1008,共3页
目的对降钙素原(procalcitonin,PCT)量子点荧光检测试剂进行性能评价,判断其性能是否满足临床需求,并评价该试剂是否能够准确检测全血样本中的PCT含量。方法评估该检测试剂的日间和日内精密度、定量限、线性范围和与Roche化学发光PCT检... 目的对降钙素原(procalcitonin,PCT)量子点荧光检测试剂进行性能评价,判断其性能是否满足临床需求,并评价该试剂是否能够准确检测全血样本中的PCT含量。方法评估该检测试剂的日间和日内精密度、定量限、线性范围和与Roche化学发光PCT检测试剂的量值一致性,同时收集同一患者的肝素全血和肝素血浆样本。评价该试剂盒检测全血样本的准确度。结果该试剂盒日间和日内精密度均小于10%,定量限为0.02 ng/ml,线性范围为(0.04～97.23) ng/ml,能够对患者的感染严重程度进行准确判断。该试剂与Roche化学发光PCT试剂具有良好的一致性,检测全血样本与血浆样本之间的一致性同样良好,说明该试剂检测血浆和全血样本的准确性能够满足临床需求。结论 PCT量子点荧光检测试剂具有良好的性能,且能够准确检测全血样本中的PCT含量,对于细菌感染及脓毒症患者的快速诊断具有重要价值。 展开更多
关键词 量子点 降钙素原 全血
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恒温扩增芯片法对下呼吸道标本细菌检测中的临床应用价值 被引量：1
5
作者 蔡甜 陈振华 +1 位作者 牛英波 唐波 《心电图杂志（电子版）》 2019年第2期100-101,共2页
目的对恒温扩增芯片法在下呼吸道感染病原体检测中的检测效果进行分析。方法收集94例的合格痰标本,分别通过恒温扩增芯片法以及细菌培养法进行病原体检测,结核分枝杆菌通过静脉血的γ干扰素释放实验、痰涂片抗酸染色以及RNA恒温扩增法... 目的对恒温扩增芯片法在下呼吸道感染病原体检测中的检测效果进行分析。方法收集94例的合格痰标本,分别通过恒温扩增芯片法以及细菌培养法进行病原体检测,结核分枝杆菌通过静脉血的γ干扰素释放实验、痰涂片抗酸染色以及RNA恒温扩增法来进行检测。结果有42例标本被检测出病原体,检测出来的病原体主要有流感嗜血杆菌以及肺炎链球菌,并未检测出肺炎支原体以及嗜肺军团菌。结论恒温扩增芯法不仅操作便利,同时也能快速得出结果。该方法能够同时筛选出很多种病原体,并且能够将耐甲氧西林葡萄球菌中的mecA基因筛选出来。相对于传统的细菌培养检测法,恒温扩增芯片法能够检测出更多的流感嗜血杆菌以及肺炎链球菌等等。另外在结核分枝杆菌的检测中,恒温扩增芯片法的效果明显强于γ干扰素释放试验以及涂片抗酸染色法。该技术为呼吸道感染疾病的快速发现以及及时进行针对性治疗提供了更多的可能。 展开更多
关键词 恒温扩增 下呼吸道感染 标本细菌检测
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一种基于量子点标记检测抗肺炎支原体IgM的免疫荧光层析法 被引量：7
6
作者 蔡甜 贾岩 +1 位作者 牛英波 时亚斌 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期3742-3747,共6页
目的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae, MP)感染早期诊断的重要生物标志物是抗肺炎支原体IgM抗体。本研究建立了基于量子点标记技术的免疫荧光层析法检测抗MP-IgM抗体的方法,旨在提高对MP的早期诊断。方法将制备好的肺炎支原体抗原和... 目的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae, MP)感染早期诊断的重要生物标志物是抗肺炎支原体IgM抗体。本研究建立了基于量子点标记技术的免疫荧光层析法检测抗MP-IgM抗体的方法,旨在提高对MP的早期诊断。方法将制备好的肺炎支原体抗原和内控抗体分别作为检测线(T)和质控线(C),固定至硝酸纤维素(Nitrocellulose,NC)膜,然后将量子点标记的兔抗人IgM均匀喷洒在玻璃纤维上,干燥后组装、切割、包装成试纸条。用该试纸分别检测200例MP感染患者和健康人的临床血清,以PCR初筛结果作为对照,计算量子点荧光免疫层析法的检测特异性和灵敏度。结果本研究制备的试纸条的特异性为93.5%,灵敏度为89.0%,总体符合率为91.25%。结论本文采用量子点标记技术检测血清中的抗MP-IgM抗体,操作简单、快速,可实现肺炎支原体感染的早期诊断。 展开更多
关键词 量子点 免疫层析法 肺炎支原体 IGM抗体 床旁检测
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血清淀粉样蛋白A量子点免疫层析全血定量检测试剂的制备及性能评价 被引量：5
7
作者 陈振华 蔡甜 +1 位作者 唐波 牛英波 《药物生物技术》 CAS 2018年第4期299-302,共4页
基于量子点荧光免疫层析技术制备SAA全血检测试剂盒,建立SAA全血检测体系,评价SAA量子点荧光免疫检测试剂的性能及临床诊断效果。采用夹心法原理,利用水溶性量子点和体外重组表达的SAA鼠单克隆抗体作为核心原料制备SAA全血检测试剂。以... 基于量子点荧光免疫层析技术制备SAA全血检测试剂盒,建立SAA全血检测体系,评价SAA量子点荧光免疫检测试剂的性能及临床诊断效果。采用夹心法原理,利用水溶性量子点和体外重组表达的SAA鼠单克隆抗体作为核心原料制备SAA全血检测试剂。以SAA国际标准物质作为校准品,并利用表面健康人和感染患者的全血样本验证试剂的灵敏度、精密度、正常值范围和诊断阳性率。结果表明SAA量子点荧光免疫检测试剂的反应时间为5 min,线性范围为2.5~150 mg/L,功能灵敏度为2.3 mg/L,精密度≤10%,具备良好的全血检测性能。以10 mg/L作为SAA正常值上限,诊断细菌感染和病毒感染的灵敏度在90%以上。以水溶性量子点技术制备的SAA免疫层析检测试剂能够方便、快速、准确地检测全血样本中的SAA含量,适合作为疑似感染患者的辅助诊断方法,指导医生制订治疗方案。 展开更多
关键词 量子点 荧光检测 血清淀粉样蛋白A 定量检测 免疫层析 全血
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人血清淀粉样蛋白A的重组表达及免疫学检测标准品的初步研究 被引量：2
8
作者 周齐洋 张小燕 +1 位作者 朱婷婷 牛英波 《药物生物技术》 CAS 2018年第1期21-25,共5页
构建人SAA1原核表达载体,建立SAA1蛋白大肠杆菌表达条件和纯化工艺,评价重组SAA1蛋白在制备免疫学检测标准物质中的应用前景。采用同源重组的方法构建表达载体,在N端加入6×His和SUMO标签帮助SAA1蛋白的可溶性表达和纯化;在小量体... 构建人SAA1原核表达载体,建立SAA1蛋白大肠杆菌表达条件和纯化工艺,评价重组SAA1蛋白在制备免疫学检测标准物质中的应用前景。采用同源重组的方法构建表达载体,在N端加入6×His和SUMO标签帮助SAA1蛋白的可溶性表达和纯化;在小量体系中评价SUMO-SAA1蛋白的可溶性表达后,用镍亲和柱和阴离子交换层析方法纯化蛋白,用蛋白酶切除SUMO标签后再通过镍亲和柱层析方法获得高纯度人SAA1重组蛋白;用西门子N-Latex SAA试剂评价重组蛋白的免疫反应性和稳定性,并与SAA国际标准物质进行比较研究。结果表明SUMO-SAA1在大肠杆菌中大部分为可溶性表达且表达量高,产物纯度可达90%以上,稳定性良好并与SAA国际标准物质具有类似的免疫反应性。利用SUMO标签的助溶作用,成功在大肠杆菌中表达了人SAA1重组蛋白,该蛋白适合作为制备SAA1免疫检测的参考标准物质的原材料。 展开更多
关键词 血清淀粉样蛋白A 融合表达 可溶性 蛋白纯化 标准物质 稳定性 免疫反应性
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