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全球疫苗研发现状和展望 被引量:1
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作者 马磊 杨昭庆 王佑春 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期115-126,共12页
频繁暴发的新发突发传染病已成为影响人类公共卫生及健康的重要危险因素,目前接种疫苗依然是应对传染病最关键的手段。新型冠状病毒感染(COVID-19)疫情以来,无论是创新型疫苗基础技术还是疫苗研发策略均取得了革命性进展,以m RNA技术为... 频繁暴发的新发突发传染病已成为影响人类公共卫生及健康的重要危险因素,目前接种疫苗依然是应对传染病最关键的手段。新型冠状病毒感染(COVID-19)疫情以来,无论是创新型疫苗基础技术还是疫苗研发策略均取得了革命性进展,以m RNA技术为代表的第三代疫苗技术逐渐成为一种新兴的疫苗研发方式。本文对近年来的不同疫苗技术特点进行全面梳理,综述了基于不同技术平台的重点疫苗产品的最新研究进展,并展望了未来疫苗研发策略,为疫苗研发工作提供经验和借鉴。 展开更多
关键词 疫苗研发 疫苗技术平台 研究策略 重点疫苗产品
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哺乳动物细胞表达系统研究进展
2
作者 蔡美娜 王佑春 《中国医药生物技术》 2024年第3期254-259,共6页
哺乳动物细胞表达系统具有强大的翻译后修饰功能,表达的重组蛋白更接近人源构象,因此被广泛用于治疗性重组蛋白的生产,其中应用最广泛的是中华仓鼠卵巢细胞。基因组学、转录组学、蛋白质组学以及代谢组学等研究的不断深入促进了哺乳动... 哺乳动物细胞表达系统具有强大的翻译后修饰功能,表达的重组蛋白更接近人源构象,因此被广泛用于治疗性重组蛋白的生产,其中应用最广泛的是中华仓鼠卵巢细胞。基因组学、转录组学、蛋白质组学以及代谢组学等研究的不断深入促进了哺乳动物细胞表达系统的不断完善。本文立足于哺乳动物细胞表达系统的研究现状,对表达载体的优化、宿主细胞和位点特异性重组等方面的最新进展进行综述。 展开更多
关键词 重组蛋白 哺乳动物细胞表达系统 中华仓鼠卵巢细胞 UCOE 位点特异性整合
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戊肝病毒(HEV)在猪和牛群中的流行病学研究 被引量:35
3
作者 王佑春 张华远 +7 位作者 崔鹏 蓝海云 李少伟 田克恭 王京 葛胜祥 辜文洁 林京香 《中国预防医学杂志》 CAS 2002年第3期199-201,共3页
目的 探讨戊型肝炎病毒(HEV)在猪和牛群中的感染情况。方法 用抗-HEV抗体试剂盒检测猪和牛血清中的抗体;对部分血清用逆转录聚合酶链的方法(RT-PCR)检测HEV RNA,并对PCR阳性产物进行克隆测序,然后将序列进行分析。结果 281份猪血清中有... 目的 探讨戊型肝炎病毒(HEV)在猪和牛群中的感染情况。方法 用抗-HEV抗体试剂盒检测猪和牛血清中的抗体;对部分血清用逆转录聚合酶链的方法(RT-PCR)检测HEV RNA,并对PCR阳性产物进行克隆测序,然后将序列进行分析。结果 281份猪血清中有235份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为83.6%;其中56份血清中有3份为HEV RNA阳性,序列分析显示从猪中克隆的3株序列(SB 2、SH1和SJ 14)之间在ORF 2(6007-6354bp)区域的核苷酸序列的同源性为83%~86%,该3株序列在ORF 2区与1,2,3,4型的同源性分别为74%~79%、73%~77%,73%~76%和83%~93%;190份牛血清中有12份为抗-HEV抗体阳性,阳性率为6.3%。结论 HEV在猪和牛群中均有流行,但在猪群中的流行率明显高于牛群。猪感染的HEV的基因序列与人群中散发性戊型肝炎病毒的4型同源性最高。 展开更多
关键词 流行病学 戊型肝炎病毒 基因型 聚合酶链反应 人兽共患性疾病
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乙型肝炎病毒S基因变异株的研究 被引量:5
4
作者 王佑春 林京香 +2 位作者 张华远 杨军 李河民 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期65-67,共3页
目的 对7份HBsAg诊断试剂检测结果不一致的样品进行确证并分析其原因。方法采用套式 PCR法对7份样品进行DNA扩增,并将阳性产物克隆到pGEM-Teasy载体上,然后进行测序并对其序列进行分析。 结果 7份样品中6... 目的 对7份HBsAg诊断试剂检测结果不一致的样品进行确证并分析其原因。方法采用套式 PCR法对7份样品进行DNA扩增,并将阳性产物克隆到pGEM-Teasy载体上,然后进行测序并对其序列进行分析。 结果 7份样品中6份为HBV DNA阳性,其中5份与Aboott和Orthro HBsAg试剂无反应或反应较弱,而且其a决定 簇的氨基酸均在134位发生改变,由F变为 A;1份与 Abbott和Orthro HBsAg试剂反应较强,其a决定簇的氨基酸也 在134位发生改变,但由F变为S。结论 国内外首次报道HBsAg a决定簇134位由 F变为 A后,其抗原性明显降 低,不易被HBsAg试剂检出;而134位由对变为 S后,其抗原性无明显改变。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 S基因 变异株 抗原性 α决定簇
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我国部分地区庚型肝炎病毒(HGV)5'端部分基因序列的比较 被引量:10
5
作者 王佑春 庄辉 +3 位作者 孙彬裕 吴晓音 祁自柏 李河民 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 1997年第10期586-587,共2页
采用套式逆转录聚合酶链反应(RTnPCR)法,用5′端引物对我国部分不同地区HGVRNA阳性的血清进行扩增,扩增产物为391bp,将其纯化后连接到pGEMTEasy质粒上,然后进行测序。测序结果表明,5′非编码区... 采用套式逆转录聚合酶链反应(RTnPCR)法,用5′端引物对我国部分不同地区HGVRNA阳性的血清进行扩增,扩增产物为391bp,将其纯化后连接到pGEMTEasy质粒上,然后进行测序。测序结果表明,5′非编码区可分为两部分,靠近5′端为保守区,靠近核心区50bp为高度变异区,而靠近5′非编码区的部分核心区的序列也较为保守。5株中国南方HGV的5′端基因序列与美国报道的GBVC和HGV的同源性分别在83.4%~89.1%和85.7%~90.3%,而5株之间的同源性超过91.4%,显示中国的HGV不同于美国报道的GBVC和HGV,而且在中国流行的HGV之间的基因序列较为保守。 展开更多
关键词 反转录 聚合酶链反应 庚型肝炎病毒
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乙型肝炎病毒s基因变异株抗原表位的研究 被引量:3
6
作者 王佑春 倪建 +3 位作者 孙彬裕 李河民 R.Ling TJ.Harrison 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1997年第2期68-71,共4页
对HepG2细胞表达的HBsAg的点突变体129Ha、142Lf、145Rb、143Sg和148及野生型HBsAgb3进行了初步纯化及抗原表位的研究,发现这些突变体的颗粒密度与野生型HBsAg差异无显著意义,约为1.2;用5种HBsAga决定簇的单克隆抗体对其表位进行分... 对HepG2细胞表达的HBsAg的点突变体129Ha、142Lf、145Rb、143Sg和148及野生型HBsAgb3进行了初步纯化及抗原表位的研究,发现这些突变体的颗粒密度与野生型HBsAg差异无显著意义,约为1.2;用5种HBsAga决定簇的单克隆抗体对其表位进行分析,发现129Ha、142Lf、145Rb和142Sg与这5种单抗的结合力与野生型HBsAg差异大显著意义,但148突变体的表位与野生型HBsAg明显不同,其原因还有待进一步研究。 展开更多
关键词 乙型肝炎 表面抗原 突变体 抗原表位 研制
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我国部分地区献血员庚型肝炎病毒感染情况调查 被引量:4
7
作者 王佑春 庄辉 +8 位作者 吴晓音 陈正英 郝杰 潘和平 汪兴太 薛德务 祈自柏 TJ.Harrison 李河民 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 1997年第11期657-658,共2页
用蛋白工程的方法,合成了庚型肝炎病毒(GBVC/HGV)NS3区一段多肽,并用该条多肽初步建立了抗GBVC/HGV酶联免疫试验方法(EIA)。用该法检测我国部分地区2870份HBsAg和抗HCV均阴性的健康献血... 用蛋白工程的方法,合成了庚型肝炎病毒(GBVC/HGV)NS3区一段多肽,并用该条多肽初步建立了抗GBVC/HGV酶联免疫试验方法(EIA)。用该法检测我国部分地区2870份HBsAg和抗HCV均阴性的健康献血员血清。结果:抗GBVC/HGV的流行率为3.48%(100/2870)。其中100份抗GBVC/HGV阳性血清用逆转录套式聚合酶链反应法(RTPCR)检测,GBVC/HGVRNA的阳性率为62.0%(62/100)。 展开更多
关键词 庚型肝炎病毒 多肽 聚合酶链反应
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国产艾滋病病毒检测试剂的发展状况 被引量:6
8
作者 王佑春 尹红章 《中国药事》 CAS 2006年第3期179-182,185,共5页
自1985年我国报道第一例人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者以来,国内即开始了HIV病毒诊断试剂的研究,到目前已有几种HIV诊断试剂获得国家批准,其中包括检测HIV抗体、抗原和核酸的试剂。同时对用于评价相应试剂质量的参考品也进行了研究,并建... 自1985年我国报道第一例人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者以来,国内即开始了HIV病毒诊断试剂的研究,到目前已有几种HIV诊断试剂获得国家批准,其中包括检测HIV抗体、抗原和核酸的试剂。同时对用于评价相应试剂质量的参考品也进行了研究,并建立了相应的质量标准。本文对国产HIV诊断试剂的研发、生产以及质量和相应参考品的研究情况进行综述。 展开更多
关键词 获得性免疫缺陷综合症 人类免疫缺陷病毒 诊断试剂 抗体 抗原 核酸
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用单克隆抗体分析HBsAg的多肽及a决定簇的表位 被引量:4
9
作者 王佑春 李河民 胡宗汉 《中国病毒学》 CSCD 1992年第1期48-53,共6页
通过Western-Blot发现,多克隆抗-HBs抗体及单克隆抗体B_(13),A_1均识别24kd及27kd两条多肽带,而单克隆抗体B_6,B_9及B_(12)只识别24kd,不识别27kd的多肽带。用这几株单克隆抗体对不同来源HBsAg a决定簇的表位密度进行了研究,结果表明血... 通过Western-Blot发现,多克隆抗-HBs抗体及单克隆抗体B_(13),A_1均识别24kd及27kd两条多肽带,而单克隆抗体B_6,B_9及B_(12)只识别24kd,不识别27kd的多肽带。用这几株单克隆抗体对不同来源HBsAg a决定簇的表位密度进行了研究,结果表明血源、重组CHO细胞表达及重组痘苗病毒表达的HBsAg与重组酵母表达的HBsAg在结合单克隆抗体A_1、B_6及B_9的密度上有数量的差别,并且有统计学意义。 展开更多
关键词 A决定簇 单克隆抗体 乙型肝炎 表面抗原
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我国献浆血员中庚型肝炎病毒HGV RNA的检测及部分序列分析 被引量:4
10
作者 王佑春 范金水 +8 位作者 庄辉 孙彬裕 李奎 吴晓音 郝杰 程雅琴 汪兴太 祁自柏 李河民 《中国公共卫生学报》 1997年第5期257-259,共3页
采用5′非编码区的引物,用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测100名献浆血员中庚型肝炎病毒HGVRNA,其中19名(19%)HGVRNA阳性;对其中4份PCR产物进行了直接测序,结果表明4株病毒在此区的核苷酸序列... 采用5′非编码区的引物,用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测100名献浆血员中庚型肝炎病毒HGVRNA,其中19名(19%)HGVRNA阳性;对其中4份PCR产物进行了直接测序,结果表明4株病毒在此区的核苷酸序列相对保守,其同源性在95%以上,与美国报道的HGV和GBVC的同源性分别为88%和85%不同。提示该4株HGV与美国报道的HGV和GBVC不属于同一基因型。 展开更多
关键词 反转录 聚合酶链反应 庚型肝炎病毒 检测
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新型戊肝病毒ORF3和部分ORF1基因的序列分析 被引量:2
11
作者 王佑春 张华远 +3 位作者 辜文杰 RogerLing 李河民 TimJHarrison 《中国病毒学》 CSCD 2001年第1期28-33,共6页
用RT PCR方法对 2例感染新型HEV的样品进行了检测 ,并对PCR产物进行了克隆及测序。检测结果显示用常规PCR检测易造成ORF3中GC丰富区的缺失 ,但在常规PCR反应液中加入GCmelt溶液可成功地扩增GC丰富区。序列分析显示T1和T11属于同一基因... 用RT PCR方法对 2例感染新型HEV的样品进行了检测 ,并对PCR产物进行了克隆及测序。检测结果显示用常规PCR检测易造成ORF3中GC丰富区的缺失 ,但在常规PCR反应液中加入GCmelt溶液可成功地扩增GC丰富区。序列分析显示T1和T11属于同一基因型 ,但不同于已报道的HEVI型、II型和III型 ,为一新的基因型。T1和T11与I型在该区的核苷酸同源性为 79%~ 82 % ;与II型的同源性为 80 %~ 81% ;和III型的同源性为 83%~ 85 % 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 基因型 同源性 开放读码框架 序列分析
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体外生物诊断试剂的质量评价 被引量:10
12
作者 王佑春 《临床输血与检验》 CAS 2006年第4期309-314,共6页
体外生物诊断试剂的种类很多,影响试剂质量的因素也很多,为保证试剂质量,进行系统的实验室以及临床评价非常必要。本文对试剂的技术指标如灵敏度、特异性、精确性、准确性、线性以及定量范围等的作用及评价方法进行分析,并对临床评价的... 体外生物诊断试剂的种类很多,影响试剂质量的因素也很多,为保证试剂质量,进行系统的实验室以及临床评价非常必要。本文对试剂的技术指标如灵敏度、特异性、精确性、准确性、线性以及定量范围等的作用及评价方法进行分析,并对临床评价的技术指标、方法及注意事项进行探讨。 展开更多
关键词 生物试剂 灵敏度 特异性 准确性 精确性 线性 阳性预期值 阴性预期值
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疫苗效价检测方法的研究 被引量:3
13
作者 王佑春 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期150-152,共3页
本文对现行疫苗效价的检测方法及其要求进行了分析,并对新的检测方法,如假病毒中和试验、转基因动物实验和实时定量PCR在效价检测中的应用进行了介绍。
关键词 疫苗 效价 中和试验 转基因小鼠 实时定量PCR
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应用高压液相层析(HPLC)评价乙肝疫苗纯度方法的建立和应用 被引量:1
14
作者 王佑春 吴小音 +1 位作者 倪健 李河民 《微生物学免疫学进展》 1995年第4期203-205,共3页
应用高压液相层析(HPLC)方法,对血源乙肝疫苗、CHO基因工程乙肝疫苗及酵母基因工程乙肝疫苗进行了检测,其纯度分别为88~94%,87~96%和98~100%。
关键词 乙型肝炎疫苗 纯度 评价 高压液相层析
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检测CHO基因工程乙肝疫苗残余DNA方法的建立和应用 被引量:1
15
作者 王佑春 吴小音 李河民 《微生物学免疫学进展》 1995年第3期133-135,共3页
对样品的处理方法进行了探索,最后选用一个疫苗剂量的蛋白酶K同时消化样品和标准DNA,并将消化处理后的样品和标准DNA用地高辛标记的探针进行检测,灵敏度达10pg。共检测21批检品,除一批DNA残余量超过100pg/d... 对样品的处理方法进行了探索,最后选用一个疫苗剂量的蛋白酶K同时消化样品和标准DNA,并将消化处理后的样品和标准DNA用地高辛标记的探针进行检测,灵敏度达10pg。共检测21批检品,除一批DNA残余量超过100pg/dose以外,其它20批样品的DNA残余量均低于100pg/dose。 展开更多
关键词 乙型肝炎疫苗 CHO基因工程 DNA探针
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第十五届国际艾滋病会议介绍 被引量:1
16
作者 王佑春 《中国药事》 CAS 2004年第11期697-699,共3页
关键词 诊断 治疗 艾滋病预防 HIV/AIDS 预防 HIV病毒 机会感染 会议介绍 政策 经济
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国际艾滋病大会情况介绍 被引量:1
17
作者 王佑春 《中国药事》 CAS 2002年第9期572-573,共2页
关键词 国际艾滋病大会 2002年 艾滋病病毒 流行病学 预防科学 医学干预 社会科学 政策 临床科学
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戊型肝炎病毒(HEV)在猪和牛群中的流行情况 被引量:1
18
作者 王佑春 崔鹏 《胃肠病学》 2001年第C00期196-197,共2页
关键词 戊型肝炎病毒 猪群 牛群 感染率 基因病例
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临床肝病患者中庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)的感染
19
作者 王佑春 庄辉 +6 位作者 张华远 吴晓音 陈正英 潘和平 毛群颍 TJ Harrison 李河民 《胃肠病学》 1998年第2期70-71,共2页
本文应用抗-HGV酶联免疫法(EIA)和逆转录套式聚合酶链反应法(RT-PCR)检测150份乙型、120份丙型、15份戊型和49份非甲-戊型肝炎患者血清。结果显示:乙肝、丙肝、戊肝和非甲-戊型肝炎患者中抗-HGV抗体的阳性率分别为22.0%(33/150)、25.0... 本文应用抗-HGV酶联免疫法(EIA)和逆转录套式聚合酶链反应法(RT-PCR)检测150份乙型、120份丙型、15份戊型和49份非甲-戊型肝炎患者血清。结果显示:乙肝、丙肝、戊肝和非甲-戊型肝炎患者中抗-HGV抗体的阳性率分别为22.0%(33/150)、25.0%(30/120)、33.3%(5/15)和40.1%(20/49)。其中乙型、丙型、戊型和非甲-戊型肝炎的抗-HGV抗体阳性者中,HGV RNA的阳性率分别为58.3%(7/12)、60.0%(6/10)、40.0%(2/5)和45.5%(9/12)。说明GBV-C/HGV可与HBV、HCV或HEV合并感染,该病毒可能引起临床型肝炎。 展开更多
关键词 庚型肝炎病毒 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 戊型肝炎病毒 非甲-戊型肝炎病毒
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不同地区及人群中庚型肝炎病毒(HGV)5'端部分基因序列的比较
20
作者 王佑春 庄辉 +4 位作者 R.Ling 吴晓音 张华远 TJ Harrison 李河民 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 1998年第8期449-451,共3页
采用套式逆转录聚合酶链反应(RT-nPCR)法,用HGV5′端引物对我国不同地区和不同人群中共21株HGV进行扩增并测序。结果显示除SC以外,不同地区和不同人群中(非甲-戊型肝炎病人、健康献血员和HBsAg健康携带者... 采用套式逆转录聚合酶链反应(RT-nPCR)法,用HGV5′端引物对我国不同地区和不同人群中共21株HGV进行扩增并测序。结果显示除SC以外,不同地区和不同人群中(非甲-戊型肝炎病人、健康献血员和HBsAg健康携带者)5′非编码区的序列同源性均超过94%,高度保守;与美国报道的HGV的基因序列比较表明:5′非编码区可分为两部分,靠近5′端为高度保守区,靠近核心区的50bp则高度变异。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 庚型肝炎病毒 基因序列
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