通过形成类胚体诱导人羊水多能干细胞向心肌细胞分化 被引量：9

1

作者 王晗 陈帅 +2 位作者 程祥 窦忠英 王华岩 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1582-1587,共6页

由人羊水中分离羊水多能性干细胞，通过形成类胚体诱导其向心肌细胞分化。取人羊水标本进行体外培养，分离得到人羊水干细胞，已连续传代培养至42代，采用免疫细胞化学、RT-PCR和流式细胞仪技术对羊水干细胞的生物学特性进行检测。取10... 由人羊水中分离羊水多能性干细胞，通过形成类胚体诱导其向心肌细胞分化。取人羊水标本进行体外培养，分离得到人羊水干细胞，已连续传代培养至42代，采用免疫细胞化学、RT-PCR和流式细胞仪技术对羊水干细胞的生物学特性进行检测。取10-15代羊水干细胞，悬浮培养使其形成类胚体，进而向心肌细胞诱导分化。培养的羊水干细胞呈成纤维样，表达部分胚胎干细胞特异标志基因，悬浮培养可形成类胚体。类胚体碱性磷酸酶（AP）检测呈阳性，表达三胚层特异标志基因fgf5、ζ-globin和α-fetoprotein。羊水干细胞形成类胚体后进行诱导，得到α-actin阳性细胞，表达心肌细胞特异标志基因Tbx5、Nkx2．5、GATA4和α—MHC。试验结果表明，从人羊水标本中可分离得到具有胚胎干细胞特性的细胞，经初步检测确定为羊水干细胞，并能通过形成类胚体诱导其向心肌细胞分化。 展开更多

关键词 人 羊水干细胞 类胚体 心肌细胞 诱导分化

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牛Nanog基因克隆及其在皮肤成纤维细胞中的表达 被引量：4

2

作者 郑喜邦 云彦 +3 位作者 胡勇策 李勇 王华岩 窦忠英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期547-554,共8页

本研究克隆了牛Nanog基因,构建其真核表达载体,并转染皮肤成纤维细胞,获得能够用作核移植供核细胞的稳定转染细胞株。从6周龄的胎牛原始生殖嵴中提取总RNA,通过RT-PCR扩增Nanog基因,将其克隆到pMD-18T载体,再从酶切鉴定和测序正确的质... 本研究克隆了牛Nanog基因,构建其真核表达载体,并转染皮肤成纤维细胞,获得能够用作核移植供核细胞的稳定转染细胞株。从6周龄的胎牛原始生殖嵴中提取总RNA,通过RT-PCR扩增Nanog基因,将其克隆到pMD-18T载体,再从酶切鉴定和测序正确的质粒上切下目的片段,定向克隆到pCDNA3-FLAG表达载体上,挑选序列正确的真核表达质粒pCDNA3-Nanog转染牛皮肤成纤维细胞,获得了稳定转染的细胞株。用RT-PCR和Western Blotting分别检测NanogmRNA和FLAG-Nanog融合蛋白的表达,用免疫染色法验证该细胞株是否具有干细胞特征。结果表明:(1)从胎牛原始生殖嵴中克隆了序列正确的Nanog全长编码序列;(2)所构建的pFLAG-Nanog重组质粒能够在皮肤成纤维细胞中高效表达;(3)所获稳定转染的细胞株能表达ES细胞表面抗原SSEA-4和多能性维持因子Nanog、Oct-4,表明其具有一定的多能性。为进一步研究Nanog基因功能,尤其是探讨它在家畜早期胚胎发育、生产转基因动物,以及胚胎干细胞建系中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 牛 NANOG 分子克隆 真核表达

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Oct-4和人端粒酶逆转录酶在不同胎龄人胚原始生殖细胞的表达变化 被引量：2

3

作者 王晗 于海生 +2 位作者 华进联 窦忠英 王华岩 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期50-54,共5页

目的检测不同胎龄人胚原始生殖细胞中Oct-4、人端粒酶逆转录酶（hTERT）的表达变化。方法取人胚胎生殖嵴,通过RT-PCR检测5-13周龄人胚生殖嵴中Oct-4、hTERT的表达变化;同时,取人胚胎生殖嵴,经石蜡切片,HE染色、免疫组织化学染色等技术,... 目的检测不同胎龄人胚原始生殖细胞中Oct-4、人端粒酶逆转录酶（hTERT）的表达变化。方法取人胚胎生殖嵴,通过RT-PCR检测5-13周龄人胚生殖嵴中Oct-4、hTERT的表达变化;同时,取人胚胎生殖嵴,经石蜡切片,HE染色、免疫组织化学染色等技术,观察不同胎龄人胚原始生殖细胞的形态,检测Oct-4、hTERT的表达情况。结果胎龄6-7周时,生殖嵴中可见少量原始生殖细胞,且表达Oct-4及hTERT;胎龄8~12周时,生殖嵴中原始生殖细胞数量增多,Oct-4及hTERT表达增强（P〈0.05）;胎龄13周以后,生殖嵴中Oct-4阳性的原始生殖细胞数量逐渐减少,Oct-4表达减弱,但hTERT仍然高表达。结论不同胎龄人胚原始生殖细胞中Oct-4的表达呈动态变化,胎龄8-12周时表达较强,但hTERT的表达量始终维持在较高水平,没有明显变化。 展开更多

关键词 原始生殖细胞 OCT-4 人端粒酶逆转录酶 逆转录-聚合酶链反应 免疫组织化学 人

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转基因技术在动物遗传改良上的应用进展 被引量：5

4

作者 刘中华 王华岩 +1 位作者 乔宪凤 郑新民 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第2期481-486,共6页

简要介绍了几种比较常用的转基因方法,包括显微注射法、脂质体介导法、电转染法、胚胎干细胞法、病毒载体法、精子载体法、卵巢直接注射法。传统的转基因方法与基因打靶、体细胞核移植、RNA干扰以及线粒体转移技术相结合,在基因功能研... 简要介绍了几种比较常用的转基因方法,包括显微注射法、脂质体介导法、电转染法、胚胎干细胞法、病毒载体法、精子载体法、卵巢直接注射法。传统的转基因方法与基因打靶、体细胞核移植、RNA干扰以及线粒体转移技术相结合,在基因功能研究和疾病治疗中发挥越来越重要的作用。特别是近年来在植物上出现的外源基因清除技术,为我们在动物上彻底去除外源基因的影响提供了新思路。 展开更多

关键词 转基因技术 动物 外源基因 遗传改良

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抑制NHE1活性对干细胞向心肌分化的影响

5

作者 雷蕾 窦琳 +2 位作者 闫龙 窦忠英 王华岩 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1790-1795,共6页

Na+/H+交换蛋白1(NHE1)在心肌细胞发育过程中发挥重要的调节功能。为深入探索NHE1活性对干细胞向心肌分化过程中产生的影响,采用二甲基亚砜(DMSO)诱导P19干细胞向心肌细胞分化,同时在培养液中添加NHE1抑制剂EMD87580,对诱导后形成的类... Na+/H+交换蛋白1(NHE1)在心肌细胞发育过程中发挥重要的调节功能。为深入探索NHE1活性对干细胞向心肌分化过程中产生的影响,采用二甲基亚砜(DMSO)诱导P19干细胞向心肌细胞分化,同时在培养液中添加NHE1抑制剂EMD87580,对诱导后形成的类胚体进行检测。通过细胞形态观察、免疫组织化学染色及检测心肌特异表达基因等方法证明,经诱导形成的类胚体贴壁生长后,会向心肌细胞分化并出现跳动细胞团。而经过抑制剂处理的P19干细胞尽管能够形成类胚体且贴壁培养后细胞仍具有增殖活力,细胞团周边也较整齐,但未出现向心肌细胞分化的现象。这一结果表明,抑制NHE1的活性,能够影响P19干细胞向心肌细胞的分化作用。 展开更多

关键词 P19干细胞 心肌细胞 EMD87580 NHE1 二甲基亚砜

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胎猪胰腺干细胞扩增及诱导

6

作者 王赟 楚元奎 +2 位作者 杨春荣 王华岩 窦忠英 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期83-86,共4页

目的寻找胰腺干细胞扩增方法，为研究糖尿病的细胞治疗提供种子细胞。方法无菌采集胎猪胰腺，经胰酶消化，以含10％血清的RPM11640培养基培养。细胞长满皿底85％时，用胰酶消化传代，传代5～6次后细胞活力下降，细胞大量死亡漂浮，留下... 目的寻找胰腺干细胞扩增方法，为研究糖尿病的细胞治疗提供种子细胞。方法无菌采集胎猪胰腺，经胰酶消化，以含10％血清的RPM11640培养基培养。细胞长满皿底85％时，用胰酶消化传代，传代5～6次后细胞活力下降，细胞大量死亡漂浮，留下少数贴壁的小圆细胞。将培养基中的血清浓度提高到15％，贴壁的小圆细胞能快速增殖并形成细胞克隆，4～6d便可融汇成单层。采用免疫组织化学方法对所获得的的细胞进行胰腺干细胞特征检测。结果经上述方法处理的细胞具有旺盛的增殖能力，可以连续传代，目前已传至64代。采用免疫组织化学检测细胞表达胰腺干细胞特征性标志物，胰肠同源域因子1（PDX-1）、葡萄糖转运子2（GLUT-2）、巢蛋白、波形蛋白；经诱导后细胞表达胰腺内分泌细胞的标志为胰高血糖素、胰岛素、生长抑素、胰多肽。结论通过该方法可以获得大规模扩增的胰腺干细胞，该细胞在体外诱导可分化形成胰腺内分泌部4种主要细胞。 展开更多

关键词 胰岛 胰腺干细胞 糖尿病 免疫组织化学 胎猪

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论微博在高校思想政治教育工作中的作用 被引量：3

7

作者 王华岩 《科教导刊》 2013年第13期91-92,共2页

微博作为一种新兴的网络媒体,对高校大学生思想政治教育工作具有重要意义。微博内容新鲜丰富、操作方便灵活、互动性强等特点与青年学生受众的特点相吻合,使其成为青年学生普遍喜爱的媒体,这对高校思想政治教育工作带来了新机遇。科学... 微博作为一种新兴的网络媒体,对高校大学生思想政治教育工作具有重要意义。微博内容新鲜丰富、操作方便灵活、互动性强等特点与青年学生受众的特点相吻合,使其成为青年学生普遍喜爱的媒体,这对高校思想政治教育工作带来了新机遇。科学地认识并运用微博的传媒功能,使其为高校思想政治教育工作服务,是我们当前应予以重视的课题。 展开更多

关键词 微博 大学生 思想政治教育

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Stra 8基因的激活与精原干细胞的特异性分化研究 被引量：6

8

作者 李巍 窦忠英 +1 位作者 华进联 王华岩 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期639-644,共6页

视黄酸对维持正常的雄性睾丸结构和功能起着重要的作用。近来的研究发现,在雄性生殖腺发育过程中有一组基因,它们可以被视黄酸特异性的诱导活化,称为Stra(Stimulated by Retinoic Acid)基因。从鼠源分离得到的Stra8基因编码一种细胞质蛋... 视黄酸对维持正常的雄性睾丸结构和功能起着重要的作用。近来的研究发现,在雄性生殖腺发育过程中有一组基因,它们可以被视黄酸特异性的诱导活化,称为Stra(Stimulated by Retinoic Acid)基因。从鼠源分离得到的Stra8基因编码一种细胞质蛋白,该基因只特异性的在成熟雄性生殖细胞中表达,其功能被认为与精子形成有关。为研究Stra8基因的表达特性,我们从小鼠的基因组中克隆了Stra8基因的启动子序列(1.4kb)。将Stra8基因的1.4kb启动子序列克隆到pEGFP-1载体的EGFP基因之前,构建成由Stra8基因1.4kb启动子序列调控表达绿色荧光蛋白的pStra8-EGFP载体。将其分别转化到不同类型的细胞中,如小鼠ES-129细胞、人胎儿胰腺干细胞、小鼠骨髓间充质干细胞和小鼠精原干细胞等,通过荧光显微镜观察发现,绿色荧光蛋白只在小鼠精原干细胞中表达,表明Stra8基因是组织特异性表达的基因。将pStra8-EGFP转化小鼠骨髓间充质干细胞,经G418筛选2周后,用视黄酸诱导,12h培养后,有一部分转化pStra8-EGFP载体的细胞表达绿色荧光蛋白。RT-PCR证明这些细胞中有精原干细胞特异表达基因Stra8的转录,还有生殖细胞特异表达基因CyclinA8和Oct4的转录,这些结果说明小鼠骨髓间充质细胞经视黄酸的诱导可以向生殖细胞方向分化。 展开更多

关键词 视黄酸 pStraS—EGFP 骨髓间充质干细胞 精原干细胞

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猪L-Myc基因的分子克隆及在细胞重编程中的应用 被引量：1

9

作者 李珍珍 崔怡 +3 位作者 高祎 成德 刘亚军 王华岩 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期3566-3575,共10页

【目的】克隆猪L-Myc基因,并在蛋白水平表达的情况下探索其在细胞重编程中的作用,为深入研究猪L-Myc基因替代c-Myc诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)奠定基础。【方法】先通过NCBI序列比对,采用RT-PCR克隆猪L-Myc基因... 【目的】克隆猪L-Myc基因,并在蛋白水平表达的情况下探索其在细胞重编程中的作用,为深入研究猪L-Myc基因替代c-Myc诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)奠定基础。【方法】先通过NCBI序列比对,采用RT-PCR克隆猪L-Myc基因cDNA,生物信息学分析猪L-Myc基因与人和小鼠的同源性,构建融合表达载体pEGFP/L-Myc-C1,通过载体转染和免疫印记检测猪L-Myc基因cDNA的蛋白水平表达;再将L-Myc基因装入逆转录病毒载体中,分别使用不同的转录因子诱导猪胎儿成纤维细胞(porcine embryo fibroblast,PEF),通过形态变化和碱性磷酸酶(AP)染色验证猪L-Myc基因在细胞重编程中的作用。【结果】①获得了1 113 bp的猪L-Myc基因cDNA,编码364个氨基酸,理论分子质量为40 kD;②生物信息学分析显示猪L-Myc基因与人和小鼠高度同源;③免疫印记检测结果说明猪L-Myc基因cDNA能够在蛋白水平表达;④细胞诱导试验和AP染色结果显示转录因子Oct4、Sox2、Klf4和L-Myc(OSKL)组合诱导的细胞阳性克隆率明显高于Oct4、Sox2和Klf4(OSK)组合的阳性克隆率。【结论】获得了猪L-Myc基因,并且该基因在蛋白水平表达且在细胞重编程过程中起到了重要的作用。 展开更多

关键词 猪L-Myc基因 诱导多能干细胞(iPSC) 原癌基因 致瘤性 融合蛋白

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共表达外源OCT4/SOX2可激活人胚肾细胞中内源NANOG的表达 被引量：1

10

作者 李珍珍 成德 +1 位作者 高祎 王华岩 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期833-840,共8页

自2006年诱导多能干细胞(iPS)技术诞生以来,采用病毒等载体进行的诱导方法已取得了成功.但是,其致瘤性的影响限制了病毒载体的推广与应用,而采用非病毒载体诱导iPS细胞成为研究的热点.本研究通过2个启动子的独立启动,构建了带有绿色荧... 自2006年诱导多能干细胞(iPS)技术诞生以来,采用病毒等载体进行的诱导方法已取得了成功.但是,其致瘤性的影响限制了病毒载体的推广与应用,而采用非病毒载体诱导iPS细胞成为研究的热点.本研究通过2个启动子的独立启动,构建了带有绿色荧光标记的OCT 4/SOX 2共表达诱导载体(pOct4/Sox2-EGFP).将该载体转染HEK 293FT细胞后,阳性克隆明显表达绿色荧光.并通过RT-PCR、免疫荧光等方法证明其中的转录因子OCT 4和SOX 2能在转染细胞中高效表达,同时诱导受体细胞中内源NANOG的转录表达.本研究说明,OCT 4/SOX 2共表达载体能激活NANOG基因的内源表达,暗示着非病毒不整合载体pOct4/Sox2-EGFP本身或与其它转录因子和小分子结合可用于诱导成体细胞的重编程.因此,本研究为下一步应用质粒载体诱导体细胞重编程为iPS细胞的研究奠定了工作基础. 展开更多

关键词 诱导多能干细胞(iPS) NANOG基因 pOct4/Sox2-EGFP

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Sall4表达调控及其启动子核心调控区的筛选

11

作者 王亚娴 杨藩 王华岩 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期176-185,共10页

【目的】Sall4是一种锌指结构转录因子,对建立和维持动物多能干细胞具有重要意义。为探索猪Sall4的表达和转录调控机制,克隆了猪Sall4启动子,对其进行了功能验证和核心调控区的筛选。【方法】从猪基因组中克隆获得2.1 kb Sall4启动子片... 【目的】Sall4是一种锌指结构转录因子,对建立和维持动物多能干细胞具有重要意义。为探索猪Sall4的表达和转录调控机制,克隆了猪Sall4启动子,对其进行了功能验证和核心调控区的筛选。【方法】从猪基因组中克隆获得2.1 kb Sall4启动子片段,并构建相应的报告载体;将报告载体p E2.1转染不同种类的细胞,进行细胞特异性表达检测;采用实时荧光定量PCR方法,检测Sall4在猪不同组织和细胞中的表达变化;通过生物信息学方法,分析Sall4启动子上各种关键顺式作用元件和潜在的转录结合位点;将多能转录因子Oct4、Sox2、Klf4、Myc、Esrra/b和Smad与Sall4启动子共转染293T细胞,利用双萤光素酶报告系统检测Sall4启动子活性;采用DNA片段缺失的方法,构建一系列Sall4启动子片段缺失报告载体,将缺失片段载体分别转入293T细胞中,并利用双萤光素酶报告系统检测启动子的活性。【结果】Sall4在多能干细胞、生殖细胞和癌化肿瘤细胞中:包括P19、293T、CHO和Hela等细胞中特异性高表达。另外,通过实时荧光定量PCR检测结果显示,Sall4的表达具有明显的组织特异性,其在猪i PS细胞和生殖相关组织,如睾丸和卵巢组织中表达最高,而在脑、心、肝和肌肉等组织中的表达较低,表明该基因与细胞多能性维持具有互作关系。应用JASPAR和GPMiner软件分析发现,Sall4启动子上有TATA box、GC box、CAAT box等顺式作用元件,以及Oct4、Sox2、Klf4、Myc、Esrra/b、Stat3和Smad等多能转录因子的预测结合位点。其中,Oct4、Sox2和TGF-beta信号通路因子对Sall4启动子活性有较显著的激活作用,与对照组比较Sall4启动子活性提高了3倍;而Klf4因子对Sall4启动子活性有一定的抑制作用。采用分段PCR的方法,对2.1 kb启动子进行了片段缺失,分别构建了p L2.1、p L1.0和p L0.5等3个报告载体,检测结果发现,在p L2.1与p L1.0之间相差1 kb左右,但是启动子的活性没有显著差异。载体p L1.0与p L0.5之间多了486 bp片段,启动子活性提高了1倍多。另外,p L0.5的启动子活性与对照组比较提高了8倍。这些结果表明,猪Sall4启动子在-367至-852 bp和-1至-366 bp两个区域内存在核心调控区。【结论】克隆了猪Sall4启动子,证明Sall4的表达具有明显的组织特异性;Sall4启动子序列上存在众多潜在的转录因子结合位点和启动子核心调控域,是参与调控Sall4表达的重要序列,这些转录因子与Sall4相互作用对Sall4在多能细胞中的表达调控发挥重要作用。 展开更多

关键词 猪 SALL4 启动子 多能性 转录调控

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关于在军队工程建设领域开展项目管理培训的思考 被引量：1

12

作者 张庆雷 王华岩 《继续教育》 2013年第4期54-55,共2页

详细论述了在军队工程建设领域推行项目管理的重要性,从完善知识结构的需要、提高管理技能的需要以及加强沟通协调的需要等方面分析了在军队工程建设领域开展项目管理培训的必要性,科学地提出了在军队工程建设领域开展项目管理培训的组... 详细论述了在军队工程建设领域推行项目管理的重要性,从完善知识结构的需要、提高管理技能的需要以及加强沟通协调的需要等方面分析了在军队工程建设领域开展项目管理培训的必要性,科学地提出了在军队工程建设领域开展项目管理培训的组训方式和培训类型。 展开更多

关键词 工程建设 项目管理 培训

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肌肉生长抑制因子对肌细胞发育的调控研究

13

作者 于珊 王华岩 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第6期475-479,I0008,共6页

肌肉生长抑制因子(MSTN)是动物肌肉生长发育的一个重要的负调控主效基因。它的表达受其他肌肉发育的调控因子如MyoD,FoxO等的调控。MSTN原蛋白经蛋白酶修饰变成的活性蛋白存在于血液循环系统中,它可以结合到细胞膜表面受体,激活细胞内... 肌肉生长抑制因子(MSTN)是动物肌肉生长发育的一个重要的负调控主效基因。它的表达受其他肌肉发育的调控因子如MyoD,FoxO等的调控。MSTN原蛋白经蛋白酶修饰变成的活性蛋白存在于血液循环系统中,它可以结合到细胞膜表面受体,激活细胞内信号通路,与其他因子的协同作用对肌肉发育和脂肪生成产生不同生理效应。本文将对MSTN基因及其蛋白的结构特点,表达调控因子,细胞内信号传导,及其对组织发育的影响进行探讨。 展开更多

关键词 肌肉生长抑制因子 MSTN 功能蛋白 调控蛋白

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信号通路抑制剂和饲养层对猪胚胎生殖细胞建系的影响

14

作者 郭燕杰 吴卫妮 +3 位作者 于童 马洋洋 杨学义 王华岩 《世界复合医学》 2015年第4期356-361,共6页

胚胎生殖细胞(EGCs)是原始生殖细胞(PGCs)在体外特定条件下,经重编程而形成的、具有和胚胎干细胞(ESCs)相似特性的多能性干细胞。猪EGCs的研究在利用EGCs进行核移植、生产转基因动物以及建立生物反应器方面具有广阔的应用前景。然而到... 胚胎生殖细胞(EGCs)是原始生殖细胞(PGCs)在体外特定条件下,经重编程而形成的、具有和胚胎干细胞(ESCs)相似特性的多能性干细胞。猪EGCs的研究在利用EGCs进行核移植、生产转基因动物以及建立生物反应器方面具有广阔的应用前景。然而到目前为止真正意义上的猪EG细胞系还没有建立,体外培养条件不确定是影响猪EGCs建系的重要因素之一。本研究探讨了猪PGCs体外培养过程中不同信号通路抑制剂以及不同饲养层对其重编程形成EGCs的影响,确定了CHIR99021、SB431542和小鼠成纤维细胞制作的饲养层组合,能够较大程度维持PGCs的增殖及存活能力,实现向EGCs的重编程。 展开更多

关键词 原始生殖细胞 猪 胚胎生殖细胞 培养条件 饲养层

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国防生暑期基地化集中训练的探索与实践

15

作者 刘玉桥 王华岩 《继续教育》 2014年第10期53-54,共2页

国防生暑期基地化集中训练是国防生培养的重要组成部分和关键环节,各承训单位要将其列入年度教学训练的主要工作。在组织过程中,要科学谋划,做好顶层设计;要突出思想政治教育的核心地位,确保训练方向;要结合国防生的实际开展军事基本技... 国防生暑期基地化集中训练是国防生培养的重要组成部分和关键环节,各承训单位要将其列入年度教学训练的主要工作。在组织过程中,要科学谋划,做好顶层设计;要突出思想政治教育的核心地位,确保训练方向;要结合国防生的实际开展军事基本技能和体能训练,确保训练质量;要建立健全组织机构和管理机制,确保训练效果。 展开更多

关键词 国防生 基地化训练 探索与实践

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猪生长激素cDNA的全序列分析 被引量：9

16

作者 齐顺章 王辛中 +4 位作者 周顺伍 贾锋 王华岩 夏立 李娟 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期35-39,共5页

本文报道了两个猪生长激素cDNA的全序列分析的结果。猪生长激素cDNA是我们由猪垂体mRNA经过反向转录、克隆和筛选后获得的。文中还将这两个序列与Seeburg等(1983)报道的序列以及Vize等(1987)报道的猪基因组生长激素基因的序列进行了比... 本文报道了两个猪生长激素cDNA的全序列分析的结果。猪生长激素cDNA是我们由猪垂体mRNA经过反向转录、克隆和筛选后获得的。文中还将这两个序列与Seeburg等(1983)报道的序列以及Vize等(1987)报道的猪基因组生长激素基因的序列进行了比较和讨论。 展开更多

关键词 猪生长激素 CDNA序列

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畅想未来

17

作者 王华岩 《现代特殊教育》 2017年第3期73-73,共1页

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植物

18

作者 王华岩 方丽文 《现代特殊教育》 2017年第7期8-8,共1页

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诱导多能干细胞(iPS)的诱导培养与鉴定 被引量：7

19

作者 成德 雷蕾 +2 位作者 卢智娟 李珍 王华岩 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期421-430,共10页

通过外源转录调控因子的诱导,使成体细胞重编程为胚胎干细胞(ES细胞)样的多能细胞,这种细胞称为诱导多能干细胞(iPS细胞),这一方法被称为iPS技术。目前,iPS技术已先后在小鼠、人、猕猴、大鼠和猪中成功应用,建立了相应的iPS细胞系,并获... 通过外源转录调控因子的诱导,使成体细胞重编程为胚胎干细胞(ES细胞)样的多能细胞,这种细胞称为诱导多能干细胞(iPS细胞),这一方法被称为iPS技术。目前,iPS技术已先后在小鼠、人、猕猴、大鼠和猪中成功应用,建立了相应的iPS细胞系,并获得了iPS细胞嵌合小鼠和四倍体克隆小鼠。尽管iPS与ES细胞在形态和生长特性上有许多相同之处,但iPS细胞的建立需要较独特的诱导培养体系和鉴定方法。以下结合近年来iPS技术的发展和本实验室的相关研究,对iPS细胞的建立和培养体系的优化进行了深入探讨。 展开更多

关键词 诱导多能干细胞 转录因子 细胞重编程 诱导 胚胎干细胞

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过表达磷脂酶D3影响成肌细胞中Akt磷酸化水平 被引量：1

20

作者 张军林 陈帅 +3 位作者 张淑金 卢智娟 杨和平 王华岩 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1524-1531,共8页

磷脂酶D(PLD)催化卵磷脂(Phosphatidylc holine,PC)水解产生胆碱(Choline)和磷脂酸(Phosphatidic acid,PA),其代谢产物参与调控细胞内许多生理和生化过程。在过表达磷脂酶D3(PLD3)的成肌细胞(C2C12细胞)中,研究了PLD3对胰岛素刺激后Akt... 磷脂酶D(PLD)催化卵磷脂(Phosphatidylc holine,PC)水解产生胆碱(Choline)和磷脂酸(Phosphatidic acid,PA),其代谢产物参与调控细胞内许多生理和生化过程。在过表达磷脂酶D3(PLD3)的成肌细胞(C2C12细胞)中,研究了PLD3对胰岛素刺激后Akt通路激活的影响。研究结果表明,PLD3过表达细胞的Akt磷酸化水平比对照组低,并且不受胰岛素浓度变化的调控。虽然PLD3过表达细胞中Akt磷酸化水平随胰岛素刺激时间的延长而有所增加,但磷酸化总水平比对照组低。磷脂酶D抑制剂丁-1醇能够抑制对照组胰岛素刺激下Akt磷酸化,却不能抑制PLD3过表达细胞的Akt磷酸化,并且PLD3过表达细胞Akt磷酸化水平比对照组高6倍。用磷脂酸(PA)做刺激时,对照组的Akt磷酸化明显增加,而PLD3过表达细胞株的Akt磷酸化没有显著变化;用PA和胰岛素同时刺激时,PLD3过表达株和对照组的Akt磷酸化均比PA单独刺激时降低。这说明PLD3的过表达抑制成肌细胞内胰岛素信号的传导。 展开更多

关键词 磷脂酶D3 AKT 胰岛素 C2C12细胞

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