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植物中药材总DNA提取方法的比较 被引量:65
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作者 王培训 黄丰 +2 位作者 周联 曹柳英 梁瑞燕 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 1999年第1期18-20,共3页
随机扩增多态性DNA(RAPD)技术已经应用于中药材的鉴别,如何从多种中药材提取到总DNA来进行相关性研究是一个关键的课题。从植物中提取基因组DNA的方案众多,其中较为流行的方案有三类:(1)用苯酚-氯仿(变性蛋白)... 随机扩增多态性DNA(RAPD)技术已经应用于中药材的鉴别,如何从多种中药材提取到总DNA来进行相关性研究是一个关键的课题。从植物中提取基因组DNA的方案众多,其中较为流行的方案有三类:(1)用苯酚-氯仿(变性蛋白)作为提取介质。(2)用CTAB(既能裂解细胞壁,又能去除多糖)作为提取介质。(3)用高盐低pH介质作为提取介质(有效的蛋白沉淀剂)。经过比较,我们认为第(3)套方案快捷、经济,比较适于基层单位应用。 展开更多
关键词 DNA 分离 提纯 随机扩增多态性 中药鉴定
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阳春砂与几种常见姜科伪充品的RAPD分析 被引量:35
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作者 王培训 黄丰 +4 位作者 周联 曹柳英 梁瑞燕 徐鸿华 刘军民 《中药材》 CAS CSCD 2000年第2期71-74,共4页
本文采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术研究了姜科植物几种常见的中药材。结果显示,扩增结果具有良好的分辨性。阳春砂与海南砂、绿壳砂、缩砂、草果、益智仁、白豆蔻、草豆蔻等常见的姜科近缘伪充品之间呈现明显指纹差异,呈现多态性的引... 本文采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术研究了姜科植物几种常见的中药材。结果显示,扩增结果具有良好的分辨性。阳春砂与海南砂、绿壳砂、缩砂、草果、益智仁、白豆蔻、草豆蔻等常见的姜科近缘伪充品之间呈现明显指纹差异,呈现多态性的引物占所选的12.17%,根据这些多态性可进行鉴别。不同产地的阳春砂RAPD指纹基本一致。用NJ方法构建了分子系统树,揭示阳春砂与绿壳砂、海南砂亲缘关系较近,而与草豆蔻、草果等关系较远,此结果与传统的分类方法基本一致。 展开更多
关键词 阳春砂 RAPD 姜科伪充品 鉴别
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补肾健脾方药免疫药理作用比较 被引量:29
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作者 王培训 周联 +2 位作者 潘华新 梁瑞燕 曹柳英 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 1998年第2期84-86,共3页
采用目前常用的醋酸氢化可的松致肾虚模型和大黄致脾虚模型,比较了传统经典方剂肾气汤(丸)和四君子汤对模型动物的淋巴细胞转化率、NK细胞活性、白介素1(IL-1)和溶血抗体产生能力的作用。结果表明,肾虚和脾虚模型动物免疫... 采用目前常用的醋酸氢化可的松致肾虚模型和大黄致脾虚模型,比较了传统经典方剂肾气汤(丸)和四君子汤对模型动物的淋巴细胞转化率、NK细胞活性、白介素1(IL-1)和溶血抗体产生能力的作用。结果表明,肾虚和脾虚模型动物免疫功能皆有显著下降(P<0.01,P<0.05),肾虚尤为明显。肾气汤对肾虚和脾虚模型均有明显的治疗作用(P<0.05),而四君子汤仅对脾虚模型有治疗作用。推测两种模型的成因和两种方剂的作用机理有所不同,同时提示如果在脾虚健脾治疗无效时。 展开更多
关键词 肾虚 免疫学 脾虚 肾气丸 药理学 四君子汤
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商品西洋参DNA指纹图谱鉴别 被引量:23
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作者 王培训 黄丰 +2 位作者 周联 曹柳英 梁瑞燕 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 1999年第6期367-369,共3页
运用RAPD 技术对来自不同产地的西洋参样品进行多态性分析。结果显示, 大部分引物能扩增出清晰的DNA 指纹图, 西洋参真伪品之间的指纹图谱差别较大, 而各地产西洋参DNA 指纹图基本一致。同时,发现个别产地样品的指纹图有... 运用RAPD 技术对来自不同产地的西洋参样品进行多态性分析。结果显示, 大部分引物能扩增出清晰的DNA 指纹图, 西洋参真伪品之间的指纹图谱差别较大, 而各地产西洋参DNA 指纹图基本一致。同时,发现个别产地样品的指纹图有不同程度的改变, 考虑有变异可能。 展开更多
关键词 西洋参 DNA技术 中药材鉴别
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RAPD在商品中药鉴别中若干问题的探讨 被引量:10
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作者 王培训 黄丰 +2 位作者 周联 曹柳英 梁瑞燕 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 1999年第2期112-115,共4页
以各地产西洋参为研究对象,对影响中药材随机扩增多态性DNA(RAPD)的若干问题进行探讨。研究发现,中药材DNA模板的降解程度、纯度、浓度,Tap酶的浓度,Mg2+浓度以及循环参数等诸多因素皆会不同程度的影响扩增结果... 以各地产西洋参为研究对象,对影响中药材随机扩增多态性DNA(RAPD)的若干问题进行探讨。研究发现,中药材DNA模板的降解程度、纯度、浓度,Tap酶的浓度,Mg2+浓度以及循环参数等诸多因素皆会不同程度的影响扩增结果,同时推荐一个较为适用的循环参数。 展开更多
关键词 随机扩增多态性 DNA技术 利用 中药鉴别
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南、北五味子的RAPD鉴别研究 被引量:21
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作者 王培训 李劲平 周联 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 2002年第2期98-99,共2页
目的 为准确区分南五味子和北五味子寻找一种新的鉴别手段。方法 采用随机扩增引物DNA (RAPD)法 ,筛选适于鉴别南、北五味子的随机引物。结果 总共筛选了 80条随机引物 ,只得到一条引物S4 2 9能准确区分南、北五味子 ,并且其重复性... 目的 为准确区分南五味子和北五味子寻找一种新的鉴别手段。方法 采用随机扩增引物DNA (RAPD)法 ,筛选适于鉴别南、北五味子的随机引物。结果 总共筛选了 80条随机引物 ,只得到一条引物S4 2 9能准确区分南、北五味子 ,并且其重复性非常高。结论 可利用随机引物S4 2 9通过RAPD准确区分南。 展开更多
关键词 五味子 南五味子 北五味子 随机扩增引物DNA 中药鉴定
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DNA指纹图技术在中药鉴别的应用 被引量:7
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作者 王培训 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 1995年第3期45-47,共3页
DNA指纹图技术在中药鉴别的应用王培训(广州中医药大学免疫研究室,广州510407)由于植物化学研究的迅速发展,以及最新的物理、化学分析技术推广应用,使中药及中成药的研究研究取得了很大进步。近年来随着国内外医疗保健事... DNA指纹图技术在中药鉴别的应用王培训(广州中医药大学免疫研究室,广州510407)由于植物化学研究的迅速发展,以及最新的物理、化学分析技术推广应用,使中药及中成药的研究研究取得了很大进步。近年来随着国内外医疗保健事业的发展,中药的需求量急剧上升,新... 展开更多
关键词 中药 鉴定 DNA指纹图
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免疫与中医肾的研究进展 被引量:8
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作者 王培训 李道中 赖世隆 《广州中医学院学报》 1991年第1期55-56,62,共3页
中医“肾”在人体中具有重要地位,涉及面广,似乎是人体内各脏器的调节中心,因此,“肾”奥秘的研究为历代医家所重视。从国内的临床、实验、病理等研究已初步揭示祖国医学的“肾”与现代的内分泌、免疫学的密切关系,并看到补肾治疗有调... 中医“肾”在人体中具有重要地位,涉及面广,似乎是人体内各脏器的调节中心,因此,“肾”奥秘的研究为历代医家所重视。从国内的临床、实验、病理等研究已初步揭示祖国医学的“肾”与现代的内分泌、免疫学的密切关系,并看到补肾治疗有调节内分泌与免疫的功能,从而提高机体的抗病能力。对肾虚及脾虚证的研究表明二者均有免疫功能低下的表现,但引起免疫功能低下的机理可能是不同的。 展开更多
关键词 肾虚 免疫学
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RAPD技术在干品中药材鉴别研究中的应用 被引量:2
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作者 王培训 李劲平 +2 位作者 黄丰 周联 赖小平 《世界科学技术-中药现代化》 2001年第3期46-49,共4页
本文对可用于中药材鉴别研究的分子遗传标记技术进行了简要介绍,系统介绍了RAPD技术用于干品中药材鉴别的研究结果,同时对基因芯片用于中药材鉴别研究的应用前景作了展望。
关键词 分子遗传标记技术 RAPD 基因芯片 DNA 中药材 鉴别 多态性
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癫痫患者免疫功能和血浆皮质醇的观察 被引量:2
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作者 王培训 张横柳 +4 位作者 黄佳 胡卡 郑秀英 曹柳英 梁瑞燕 《广州中医学院学报》 1993年第2期76-79,共4页
本文观察62例癫痫惠者的外周血T淋巴细胞亚群的分布、血清免疫球蛋白含量及20倒癫痫患者血浆皮质醇的水平,发现:癫痫患者外周血CD_3^+细胞、CD_4^+细胞、CD_8^+细胞数量均显著降低及血清IgA含量显著降低,与正常对照比较有显著性差异(P&l... 本文观察62例癫痫惠者的外周血T淋巴细胞亚群的分布、血清免疫球蛋白含量及20倒癫痫患者血浆皮质醇的水平,发现:癫痫患者外周血CD_3^+细胞、CD_4^+细胞、CD_8^+细胞数量均显著降低及血清IgA含量显著降低,与正常对照比较有显著性差异(P<0.01),这些异常改变与服用抗癫痫药物(中药或西药)、病程、病因分类及脑电图的异常亦无关。癫痫患者血浆皮质醇平均含量显著低于正常对照组(P<0.05)。提示癫痫患者的某些免疫功能异常可能与内分泌的改变有关。 展开更多
关键词 癫痫 免疫学 免疫球蛋白 血液 T淋巴细胞
原文传递
中药新药免疫药效学的研究 被引量:1
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作者 王培训 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 1993年第3期30-32,共3页
作者以自身工作经验和审评新药的体会,从免疫药效学的实验设计(包括实验指标的筛选和确立,动物模型的复制)、实验结果的评价等方面提出了自己的看法。目前,中药新药免疫药效学的研究刚刚起步,需要广大医药工作者不断努力,总结经验。因此... 作者以自身工作经验和审评新药的体会,从免疫药效学的实验设计(包括实验指标的筛选和确立,动物模型的复制)、实验结果的评价等方面提出了自己的看法。目前,中药新药免疫药效学的研究刚刚起步,需要广大医药工作者不断努力,总结经验。因此,刊登本文,供大家讨论研究和补充完善,以促进中药免疫药效学研究的发展。 展开更多
关键词 免疫药理学 中成药 中草药 药理学
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温补肾阳方药的药效学研究
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作者 王培训 纳惠玲 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 1991年第2期16-19,共4页
中药的药效学研究是实现中医现代化的有力措施。本文复习了近30年来对肾本质的临床实验研究文献,研究结果表明:肾阳虚证是以下丘脑-垂体-多个靶腺器官功能紊乱,交感神经兴奋性降低、副交感神经兴奋性增高(或下降)、免疫功能降低及紊乱... 中药的药效学研究是实现中医现代化的有力措施。本文复习了近30年来对肾本质的临床实验研究文献,研究结果表明:肾阳虚证是以下丘脑-垂体-多个靶腺器官功能紊乱,交感神经兴奋性降低、副交感神经兴奋性增高(或下降)、免疫功能降低及紊乱、营养不良、能量生成减少等全身生理功能减退为特征的一种机体反应状态。这些临床实验研究的结果为补肾阳方药的药效学研究提供了理论依据。根据这些研究结果本文提出了补肾阳方药的药效实验和临床观察规范和中药药效研究中存在的若干问题,供临床和实验室研究参考和讨论。 展开更多
关键词 肾阳虚 方药 药效学
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青藤碱抗炎抗风湿作用机理研究 被引量:86
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作者 李晓娟 王培训 +4 位作者 刘良 文君 周联 梁瑞燕 曹柳英 《广州中医药大学学报》 CAS 2004年第1期34-36,共3页
【目的】研究青藤碱抗炎、抗风湿作用机理。【方法】采用小鼠巨噬细胞林J774体外培养,观察药物对该细胞株增殖、一氧化氮(NO)合成以及肿瘤坏死因子-α信使核糖核酸(TNF-αmRNA)表达及生物合成的影响。[结果]青藤碱能够抑制该细胞株增殖... 【目的】研究青藤碱抗炎、抗风湿作用机理。【方法】采用小鼠巨噬细胞林J774体外培养,观察药物对该细胞株增殖、一氧化氮(NO)合成以及肿瘤坏死因子-α信使核糖核酸(TNF-αmRNA)表达及生物合成的影响。[结果]青藤碱能够抑制该细胞株增殖,抑制脂多糖(LPS)刺激状态下的NO合成;对TNF-α蛋白合成具有抑制作用,但仅在高浓度时才对TNF-a mRNA表达具有轻微的抑制作用。[结论]青藤碱可能通过下调单核/巨噬细胞系统炎症介质和细胞因子合成发挥抗炎、抗风湿作用。 展开更多
关键词 青藤碱 抗炎 抗风湿 作用机理 细胞增殖 一氧化氮 肿瘤坏死因子-α信使核糖核酸
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茯苓多糖对免疫抑制小鼠粘膜淋巴组织及脾脏中CD3^+和CD19^+细胞变化的影响 被引量:74
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作者 胡明华 +3 位作者 董燕 潘华新 周联 王培训 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期228-231,共4页
目的:通过研究口服茯苓多糖对环磷酰胺诱导的小鼠淋巴细胞亚群变化的作用,探讨茯苓多糖对肠道粘膜免疫与外周免疫系统作用的差异。方法:连续两周灌胃给予小鼠200 mg/(kg.d)茯苓多糖,在第14天腹腔注射100 mg/kg的环磷酰胺诱导免疫抑制模... 目的:通过研究口服茯苓多糖对环磷酰胺诱导的小鼠淋巴细胞亚群变化的作用,探讨茯苓多糖对肠道粘膜免疫与外周免疫系统作用的差异。方法:连续两周灌胃给予小鼠200 mg/(kg.d)茯苓多糖,在第14天腹腔注射100 mg/kg的环磷酰胺诱导免疫抑制模型,24小时后处死小鼠分别取派氏结(PPs)、肠系膜淋巴结(MLNs)和脾脏(SP)细胞,进行CD3+、CD19+双色免疫荧光标记,上流式细胞仪检测。结果:腹腔注射100 mg/kg的环磷酰胺后,小鼠PPs、MLNs和SP中的CD3+细胞比例上升,CD19+细胞比例下降,口服茯苓多糖可以明显的对抗PPs、MLNs中的CD3+、CD19+细胞比例的变化,但对SP中的CD3+、CD19+细胞比例的变化的作用不显著。结论:口服茯苓多糖能有效对抗环磷酰胺诱导的淋巴细胞亚群的变化,尤其是对PPs作用明显,提示茯苓多糖对肠道粘膜免疫系统的作用强于对外周免疫系统的作用。 展开更多
关键词 茯苓多糖 环磷酰胺 淋巴细胞 小鼠
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四君子汤复方总多糖对小鼠肠道粘膜相关淋巴组织的影响 被引量:57
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作者 刘良 周华 +1 位作者 王培训 胡英杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期204-206,F003,共4页
目的 :通过环磷酰胺所致小鼠肠道粘膜相关淋巴组织损伤模型研究四君子汤复方总多糖对肠道粘膜免疫的影响。方法 :观察口服 1g kg四君子汤复方总多糖对 10 0mg kg的环磷酰胺处理 2 4h后小鼠Peyer’s结的数目、Peyer’s结内细胞总数、CD3+... 目的 :通过环磷酰胺所致小鼠肠道粘膜相关淋巴组织损伤模型研究四君子汤复方总多糖对肠道粘膜免疫的影响。方法 :观察口服 1g kg四君子汤复方总多糖对 10 0mg kg的环磷酰胺处理 2 4h后小鼠Peyer’s结的数目、Peyer’s结内细胞总数、CD3+ 、IgA+ 细胞数量和细胞凋亡的情况。结果 :四君子汤复方总多糖可对抗环磷酰胺诱导的小鼠肠道粘膜相关淋巴组织中Peyer’s结数目、Peyer’s结细胞总数、肠粘膜内CD3+ 、IgA+ 细胞量的减少 ,细胞凋亡程度也明显减轻。结论 :四君子汤复方总多糖可对抗环磷酰胺诱导的小鼠肠粘膜相关淋巴组织损伤 ,提示多糖可能对肠道粘膜免疫具有改善作用。 展开更多
关键词 四君子汤 肠道粘膜免疫 环磷酰胺 复方总多糖 中药 小鼠
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青藤碱抗炎机理——青藤碱对人外周血单个核细胞环氧化酶活性及其基因表达的影响 被引量:69
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作者 文君 王培训 李晓娟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期352-355,共4页
目的 :研究青藤碱对人环氧化酶 (COX)活性及其基因表达的影响 ,深入探讨青藤碱的抗炎药理机制。方法 :应用细胞培养 ,放射免疫测定 ,RT PCR等方法 ,观察青藤碱等药物对LPS刺激和非LPS刺激的体外培养的人外周血单个核细胞 (PBMC)产生前... 目的 :研究青藤碱对人环氧化酶 (COX)活性及其基因表达的影响 ,深入探讨青藤碱的抗炎药理机制。方法 :应用细胞培养 ,放射免疫测定 ,RT PCR等方法 ,观察青藤碱等药物对LPS刺激和非LPS刺激的体外培养的人外周血单个核细胞 (PBMC)产生前列腺素E2 CPGE2 C的影响 ,并深入研究其对COX 1和COX 2基因表达的作用。结果 :青藤碱对LPS刺激状态下正常人外周血单个核细胞PGE2 合成的抑制作用明显高于不加LPS的状态 ,间接反映青藤碱对COX 2的抑制作用较强。RT PCR结果表明青藤碱对人COX 1及COX 2的基因表达无明显影响。结论 :青藤碱对COX 2活性具有一定的选择性抑制作用 ,并可能主要是通过对COX酶活性的直接作用来实现。 展开更多
关键词 青藤碱 抗炎机理 环氧化酶 基因表达 外周血单个核细胞 前列腺素E2 药理实验
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四君子汤总多糖对免疫抑制小鼠肠道sIgA的影响及其机制研究 被引量:26
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作者 张大鹏 周联 +2 位作者 张志敏 王培训 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期11-14,共4页
目的初步探讨四君子汤总多糖对小鼠肠道黏膜体液免疫功能的影响。方法取NIH小鼠随机分为正常对照组、模型组、四君子汤总多糖(SJZPS)组和四君子汤去蛋白多糖(SJZFP)组,采用ELISA法检测小鼠小肠sIgA浓度,流式细胞(FCM)技术检测Peyer'... 目的初步探讨四君子汤总多糖对小鼠肠道黏膜体液免疫功能的影响。方法取NIH小鼠随机分为正常对照组、模型组、四君子汤总多糖(SJZPS)组和四君子汤去蛋白多糖(SJZFP)组,采用ELISA法检测小鼠小肠sIgA浓度,流式细胞(FCM)技术检测Peyer's结细胞表型,免疫组化法检测小鼠肠道TLR4的表达。结果模型组sIgA浓度小于正常对照组、SJZPS和SJZFP组,差异具有显著性(P<0.01);模型组CD19+细胞比例下降,与正常对照组比较,具有非常显著性差异(P<0.01),SJZPS和SJZFP组CD19+细胞比例上升,与模型组比较,具有非常显著性差异(P<0.01);模型组肠黏膜TLR4蛋白表达明显低于正常对照组,SJZPS和SJZFP组,具有非常显著性差异(P<0.01)。结论SJZPS和SJZFP可提高环磷酰胺抑制的体液免疫功能,具有肠道黏膜免疫调节作用。 展开更多
关键词 四君子汤总多糖 肠道黏膜 SIGA CD3+ CD19+ TLR4 小鼠
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青藤碱对人外周血单个核细胞IL-1β和IL-8细胞因子基因表达的影响 被引量:61
18
作者 刘良 李晓娟 +4 位作者 王培训 文君 周联 梁瑞燕 曹柳英 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期241-244,共4页
目的:从细胞因子基因调控研究青藤碱抗炎抗风湿的作用机理。方法:分离正常人外周血单个核细胞体外加药培养,提取各组细胞总RNA,采用一步法、二步法RT-PCR技术,检测药物对LPS刺激状态下该细胞IL-1β、IL-8mR... 目的:从细胞因子基因调控研究青藤碱抗炎抗风湿的作用机理。方法:分离正常人外周血单个核细胞体外加药培养,提取各组细胞总RNA,采用一步法、二步法RT-PCR技术,检测药物对LPS刺激状态下该细胞IL-1β、IL-8mRNA表达的影响。结果:一步法RT-RCR结果表明 1 mmol/L青藤碱作用6h,对IL-1βmRNA表达抑制率分别约为(15.70±5.52)%。二步法RT-RCR结果表明,1mmol/L、100umol/L的青藤碱对IL-1βmRNA表达抑制率分别约为(17.0±7.69)%、(25.99±12.84)%,对IL-8mRNA表达的抑制作用分别为(2.01±7.79)%、(16.04±7.55)%。结论;青藤碱能通过下调人外周血单个核细胞 IL-1β、IL-8m-RNA表达发挥对类风湿性关节炎的治疗作用。 展开更多
关键词 青藤碱 细胞因子 基因表达
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中药的免疫毒理
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作者 王培训 周联 《中国药理学会通讯》 2001年第3期25-26,共2页
关键词 中药 免疫毒理 毒副作用 分类
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阳春砂的ITS序列分析 被引量:25
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作者 周联 王培训 +2 位作者 黄丰 曹柳英 梁瑞燕 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期72-75,共4页
目的 用 ITS全序列鉴别各地产阳春砂及常见伪品。方法 从各地产阳春砂及常见伪品绿壳砂和海南砂中提取总 DNA,以核基因组通用引物 ITS为引物进行扩增 ,扩增产物经纯化后 ,用 PCR产物直接法进行测序。结果 各样品的 ITS序列总长度均为... 目的 用 ITS全序列鉴别各地产阳春砂及常见伪品。方法 从各地产阳春砂及常见伪品绿壳砂和海南砂中提取总 DNA,以核基因组通用引物 ITS为引物进行扩增 ,扩增产物经纯化后 ,用 PCR产物直接法进行测序。结果 各样品的 ITS序列总长度均为 6 2 6 bp,其中 ITS- 1序列长度为 2 48bp,5 .8S序列长度为 15 5 bp,ITS- 2序列长度为 2 2 3bp;6个阳春砂和绿壳砂的 ITS- 2序列完全一致 ,各样品的 5 .8S序列完全一致 ,在 ITS- 1中各样品却有不同的碱基位点。结论  ITS- 1序列可对阳春砂的道地性作出鉴别 ,明显区分其伪品。 展开更多
关键词 ITS序列 阳春砂 中药鉴别 序列分析
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