目的观察慢病毒介导的sh RNA沉默肝再生磷酸酶-3(PRL-3)基因对结肠癌SW480细胞增殖、侵袭、凋亡的影响。方法实验分组为空白对照组、阴性对照组、转染组。将携带PRL-3 sh RNA的慢病毒载体转染结肠癌SW480细胞,建立稳定沉默PRL-3的细胞株...目的观察慢病毒介导的sh RNA沉默肝再生磷酸酶-3(PRL-3)基因对结肠癌SW480细胞增殖、侵袭、凋亡的影响。方法实验分组为空白对照组、阴性对照组、转染组。将携带PRL-3 sh RNA的慢病毒载体转染结肠癌SW480细胞,建立稳定沉默PRL-3的细胞株,real-time PCR检测转染后PRL-3 m RNA的相对表达水平。采用MTT法、平板克隆形成实验检测转染后细胞增殖能力;采用Transwell侵袭实验、侵袭小室法检测转染后细胞迁移及侵袭能力;采用流式细胞术检测转染后细胞凋亡率变化。结果稳定沉默PRL-3的细胞株构建成功,转染组PRL-3m RNA的相对表达水平低于空白对照组、阴性对照组(P<0.05),空白对照组、阴性对照组比较差异无统计学意义。PRL-3 sh RNA转染SW480细胞72 h后,转染组与空白对照组、阴性对照组比较,细胞增殖能力受到抑制,转染120 h时最明显(P<0.05)。转染组克隆形成能力较空白对照组、阴性对照组下降(P<0.05)。转染组与空白对照组、阴性对照组比较,细胞迁移、侵袭能力下降,凋亡率增加(P<0.05)。结论结肠癌SW480细胞转染PRL-3 sh RNA可减少PRL-3的表达,有效抑制SW480细胞增殖,促进其凋亡,PRL-3可能成为治疗结肠癌的靶基因。展开更多
文摘目的观察慢病毒介导的sh RNA沉默肝再生磷酸酶-3(PRL-3)基因对结肠癌SW480细胞增殖、侵袭、凋亡的影响。方法实验分组为空白对照组、阴性对照组、转染组。将携带PRL-3 sh RNA的慢病毒载体转染结肠癌SW480细胞,建立稳定沉默PRL-3的细胞株,real-time PCR检测转染后PRL-3 m RNA的相对表达水平。采用MTT法、平板克隆形成实验检测转染后细胞增殖能力;采用Transwell侵袭实验、侵袭小室法检测转染后细胞迁移及侵袭能力;采用流式细胞术检测转染后细胞凋亡率变化。结果稳定沉默PRL-3的细胞株构建成功,转染组PRL-3m RNA的相对表达水平低于空白对照组、阴性对照组(P<0.05),空白对照组、阴性对照组比较差异无统计学意义。PRL-3 sh RNA转染SW480细胞72 h后,转染组与空白对照组、阴性对照组比较,细胞增殖能力受到抑制,转染120 h时最明显(P<0.05)。转染组克隆形成能力较空白对照组、阴性对照组下降(P<0.05)。转染组与空白对照组、阴性对照组比较,细胞迁移、侵袭能力下降,凋亡率增加(P<0.05)。结论结肠癌SW480细胞转染PRL-3 sh RNA可减少PRL-3的表达,有效抑制SW480细胞增殖,促进其凋亡,PRL-3可能成为治疗结肠癌的靶基因。
